CC BY
218
Медицинская иммунология 1999, Т. 1, № 1 - 2. С. Т/ - 46 © 1Ш СПб РО РААКИ
КОНТАКТНЫЕ МЕЖКЛЕТОЧНЫЕ
ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
ПРИ ИММУННОМ ОТВЕТЕ
Ярилин А. А.
Государственный Научный Центр — Институт иммунологии М3 РФ, Москва
Межклеточные контактные взаимодействия шра-юг ключевую ро.'и> на разных этапах становления и фуикциоиирования иммунной системы — они определяют развитие пммунощгпго. направление их миграции осуществление многих эффекторных функций. Однако наибольшим своеобразием и специфичностью иййдают межклеточные взаимодействия, реализуешь в процессе развития иммунного ответа. В ехема-Т1Ш380П форме они представлены ка рис. 1, на котором отражена двоякая роль этих взаимодействий. Они проншшются в форме прямых контактов клеток и гу-«оралышх влияний.
Можно выделить два основных тыла таких взаимо-дейппнЁс
» взаимодействия. связанные с презентацией антигена; в нем участвуют антигенпредставлягоише клетки (АПК—дендритные клетки, макрофаги, В-лим-фоцйїв) п 'Г-хелперы;
• иашмодействие Т-хелперов с В-лймфоиитами и прсдщйяпенникіми Т-киллеров (кооперация лим -
Іфмкшіш в узком смысле).
Р^еих случаях основой для контакта клеток служит рпелизтвапие антигенного эпитопа рецепторами пимфошітш. В случае взаимодействия АПК и Т-хел-лпрст по • распознавание комплекса антигенного пі ІП ида с молекулой главного комплекса гистосовме-
>Ыр<’с для переписки:
ЯрилшАчбкеанЬр Александрович -йшіиом ГЛЕН,!). м. п., профессор, уутньатель лаборатории механизмов гіпффкітіщрвжі Т-лимфоцитов,
ПЩ-Иншшут иммунологии М3 РФ.
1047/1, Мискт, Каширское шоссе, д. 24, корп. 2
ПЩ Институт иммунологии М3 РФ.
моратория мглатамоч дифференцировки
Т-тыфдцшпаи
7>і №5) 117-79-19
Фи^-.М'Л) 117-10-27
стимости (МНС) II класса Т-клеточным рецептором (TCR-CD3) при участии молекулы С ГМ П ри взаимодействии Т-хелперов с В-клеткой указанный тип распознавания также имеет место, поскольку В-димфо-цит выполняег функцию АПК; однако специфичность ответа В-лимфоцитов определяется связыванием свободного антигена с Иммуноглобулиновым компонентом BCR. В-ЛНМфоЦИТЫ ВЫСТуПИЮТ ЗДеСЬ ОДНОВремеН-по как доноры и акцепторы активационных сигналов, т. е. как ЛИК и предшествегашки антителообразующих клс-гок. Двуиаправленность сигналов вообще характерна для межклеточных взаимодействий; при этом всегда достигается активация обеих взаимодействуйицих клеток, что может инициировать самостоятельные цепи событий.
Взаимодействие антша июго эпитопа со специфичес ким рецептором не обеспечивает прочной адгезии клеток и генерации полноценного сигнала, достаточного для активации лимфоцитов. Усиление адгезии и формирование полного сигнала достигается с помощью
Рис. I Общая схема взаимодействия в иммунной системе.
Кружки символизирую! клетки разных типов, прямоугольники между ними - контактные взаимодействия, стрелки - гуморальные влияния.
Сокращения:
АПК - антигенпрезентирующая клетка;
Тх - Т-хелпер; Мф - макрофаг;
ЦТЛ - цитотоксический Т-лимфоцит; В - В-лимфоциг.
Таблица I. ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ МОЛЕКУЛЫ, СВЯЗАННЫЕ С АКТИВАЦИЕЙ ЛИМФОЦИТОВ
Название Моя. масса, кД Локализация Супер- семейство Лиганды Функциональные эффекты
Корецепторы
С04 59 Тх, сМ |д МНС-11 Участие в рецепции антигена, передаче сигнала (связь с ТК р56|,:к)
С08ар или аа 32/34 Тк |д МНС-1 Участие в рецепции антигена, передаче ш нала (связь с ТК р561'74)
Костимуляторы
СЭ28 44 Тх.сТк |д С080, С086 Корецептор, предохраняет клетки от анергии и апотгюза
С0152 (СПА4) 33-37 (х2) аТ |д С080, С086 Корецептор, осуществляет разнонаправленные эффекты
С080 (В7-1) 60 В, сМ. ДК |д С028 Источник костимулирующего сигнала для Т-клеток
СР86 (87-2) 00 В, сМ, ДК |д С028 Тоже
С040 50 В, М,ДК С0154 Рецептор Т-В-кооперации, защита от алогттоза
СЭ154 (СВДОІ.) 39 аТ Ж СР40 Источник контактного сигнала отТ- к В-хлеткам и АПК
Молекулы адгезии, участвующие в межклеточных взаимодействиях при индукции иммунного ответа
С02 (Ц-А-2) 45-50 Т, сИК |д С058 Адгезия, альтернативная активация
С05Й (15А-3) 55-70 Разные |д С02 Адгезия
СО! 1а/ Є018 (1ЯА-1) 180/95 Т, В, М, Ш С054, С050 Адгезия
С054 (ІСАМ-1) 85 Разные активированные клетки |д |}2-интегрины Адгезия, костимуляция
Сокращения:
Т-Т-клетки, Тх- Т-хелперы, Тк - Т-киллеры, В - В-лимфоциты, М - моноциты/макрофаги, Г - гранулоциты, Э - эритроциты, МК - естественные киллеры, ДК - дендритные клетки, с - субпопуляции, др - гликопротеии; с)'персеметва: 1д - иммуноглобулинов, вс - мусорщиков (зсзуапдег), МСР-Н - рецептора фактора роста нервов, ТИР - фактора некроза опухоли, 6Р1 - гликозил-фосфоинозитиды.
Рис. 2. Схема взаимодействий мембранных молекул Т-челперов и АПК.
Жирными линиями обозначены мембраны клеток.
В прямоугольники заключены взаимодействующие молекулы. Прямыми стрелками помечены преобладающие направления сигналов, возникающих при взаимодействии пар молекул, 'вддными линиями со стрелками - индукция экспрессии текул вследствие межмолекулярных взаимодействий.
юл'Мгодансгвия ряда вспомогательных адгезивных (гояскуд, некоторые характеристики последних пред сшиты в таблице и рис. 2. Прп взаимодействии Ail К и 1 ■ хелиеров ключевую роль играет взаимное связываниями.!) скул СD28Т-лимфоцита и вариантов моле-9л В7 (CD80 или CD86) АПК [38,39]. при Т-В-юю-: гадйции - реакция молекул CD40 В-клетки и CD40L - lCL>i я-) Т-хелпера [34]. Однако оба названные типа va'if м ляршая взаимодействии имеют значение при т «Пгтнашш как Т-хеллеров, так и В-клеток.
Костимуляция через взаимодействие CD28/CTLA4 с В7.1 /В7.2
Ukujehy.ia CD28 присутствует на поверхности всех Шяшщгспя СЕМ" клеток и 50% СП81 клеток [38]. Мосле лйтигсщив ua CD28' Т-клетках экспрессируется другая Ыичгву.'О с аналогичной структу|юй СГ1.А4 (CD 152) Вэго время экгп|)ессия С 028 мож< т временно lilniim вся и результате связывания <• молекулами В7. Р‘С028—трансмембранным гликогтрогеип — гомо-ОЯ'МСр С мол. массой 44 кД, субъединицы которого со-ШИПЫ тосупьфидной связью ц образуют 1 внекле-ЧПННиЙЦЦМРЦ,гомологичный \ -домену ИММ'. НОГ I, |бу-ткт, ислеИгсрнми участок (<■ rpw; у па, свойственная nur«ШЗГИ6СШ) 139] Orpt-сипе СП154 (ГЛ1-А4) ицтлтпъп; лишь сродство между м< номерами в этой Ийтгю'иеспабее, чем в CD28 [26.27].
Лиганды С028 и. 00154 - молекулы СОМ) и С086 — также сходны между собой. Они относятся к суперсемейггву иммуноглобулинов и по своей структуре похожи на молекулу С02: имеют Ы-концевой домен, подобный V-домену иммуноглобулинов и ариле жащий к мембране С-подобный домен. Эти молекулы экспрессируются на активированных АПК (дендритных клетках, макрофагах, В-лимфоцитах). а СГ)86 — кроме того — на покоящихся моноцитах [27. 29].
Во взаимодействие вовлекаются V-домены реагирующих пар молекул. С 'родстно СТ1.А4 к В7-реиепто-рам выше, чем у С028. С080 обладает несколько более высоким сродством к СТ!_А-4; чем С086 [38]. Формирующаяся связь является очень кратковременной (время полужизни — около К) сек.). В результате взаимодействия С028 с С080/С086 фосфоріишруется цитоплазматический мотив молекулы С028 - УМПЧМ (указана последователыюсть аминокислот в одиобук-венном коде) и устанавливается связь между ним и липидной Р13-КИШЗОЙ, через которую осуществляется регуляция метаболизма фосфотшозитидов, важных для передачи активационных сиг налов, и которая участвует во включении (через формирование комплекса адаптррного белка СгЬ-2 и белка 5ок, обусловливающего переход СТР/СОР) гая-эависимого сигнального пути 148]. Кооперация сигналов, порождаемых при связывании ТС И и С028, осуществляется в результа* те их совместного действия на протетшкиназу_[ЬГК [59|. Эта киназа фосфорилируег фактор с-цт, что является необходимым этапом его гомо- и гетеродимеризации с образованием транскріищиониого фактора АР-1, который служит ключевым фактором активации гена 11,-2. Сигнал от С028 вносит вклад в активацию еще одного транскрипционного фактора - К Р-кВ. В регуляторном участке гена Ю-2 локализован элемент, отвечающий на С028 — С02йКЕ/МА с которым свя -
зывается №7кВ [22 [. Таким образом, связывание С028 порождает сигналы, без которых оказываются недоста-і очно действенными каскады реакций, которые завершаются активацией цитокиновых генов, в первую оче -редь І1.-2. Показано также, что под влиянием сита-лов от С028 стабилизируется мРНК цтпокинов. В результате под влиянием связывания С028 усиливается выработка ІЬ-1, П.-2, 11.-4, П.-5. фактора некроза опухоли а (ТК'Ра) и интерферона у [38].
Для моделирования С028-.зависимых сигналов ис-нолъзу ют моноклональные антитела, перекрестно связывающие С028. Недостаточность стимуляции через С028 моделируется е помощью растворимой формы молекулы СТ1.А4 - СТ1А4-І£ (продукта слитых генов) [43]. К аналогичным результатам приводит мутация или направленное отключение («нокаут») генов С028, С080, С086. Отсутствие взаимодействия С028 с С080/С086, моделированное любым способом, ие только ослабляет активацию Т- клеток (вследствие недостаточной выработки 102) и осуществление различных типов иммунного ответа, но и обусловливает
анергию Т-лимфоцитов,т. е отсутствие ответа на последующую стимуляцию Поскольку установлено, что косгимуляция через С. 028 усиливает экспрессию фактора Вс1-Х| [8], подавляющего развитие апоптоза, предполагается, что в отсутствие этой костимуляции активированные Т-клетки быстро погибают, что также способствует ослаблении) иммунных процессов, зависящих от Т-клетак.
Особенно чувствительны к костимуляции череа С 1)2.Я Т-клетки хелперной (С 04') субпопуляггии. Эта форма активации в большей степени способствует их диффереицировке вТЬ2-хелперы гуморального ответа и выработке І1.-4. При этом принципиальным является индукция С028-зависимого сигнала через молекулу СЭ80. При дефекте экспрессии С028, а также в присутствии СТЬА-^ при дифференцировке С04' клеток формируются исключительно хелперы ТЬ1 • типа [32].
Функциональная роль СТЬАЛ выявлена не столь четка П ри всем сходстве структуры и специфичности молекул С028 и СТЬА4 результаты исследований заставляют полагать, что их роль в развитии Т-зависи-мого иммунного ответа различна, причем молекула СТЬА4 служит проводником сигналов, подавляющих пролиферативную экспансию Т-хелперов и способствующую развитию их апоп тоза 125].
Эффективность связывания молекул С080 и С 086 сопоставима, хотя и отличается в деталях. Связывание С.080 более важно для индукции цитотоксического ответа, отторжения аллотрансплантата и противоопухолевой защиты, тогда как С1Э86-зависимый сигнал важнее для развития первичного гуморального иммунного ответа и индукции пролиферации в смешанной культуре лимфоцитов (38).
Взаимодействие Сй40 - СР401_ (С0154)
Вскоре посіє открытия межклеточной кооперации при развитии гуморального иммунного ответа стало ясно, что хелперная функция Т-лимфоцитов {реализуется двояко — через выделение гуморальных факторов (пми оказалисьотіфьггьіе позже цитокины) и через пря • .мыс контакты между Т- и В-клетками. Природа коптак тного взаимодействия расшифрована совсем недавно Как и при взаимодействии АЛ К с Т-хелперами, при Т В-кооперацми имеет место двусторонняя направленность сигналов, однако преобладающее направление их в этом случае — от Т- к В-іслетке, поскольку в данном случае именно В-лимфоцит вовлекается в иммунную реакцию, а Т-хелпер способствует этому. В осуществлении этого типа кооперации основная роль принадлежит взаимодействию пары молекул: С040 В-клеток и С040Ь (СО 154)'Г-клеток [6 34]. Рассмотренное выше взаимодействие молекул С080/С086 В-клеток и С028 Т-клеток при этом также имеет место, но возникающий при этом сигнал имеет противоположную направлен-
ность, которая обусловливает функционирование В' лимфоцитов в качестве АПК. С другой стороны, хотя первоначально считалось, что взаимодействие С040 — С 0401, является ключевым событием только для индукции Т-зависимого ответа В-лимфоцитов вскоре выяснилась ею роль в активации Т- лимфоцитами любых типов АПК и клеток ответственных в развитии воспаления (как уже говорилось, все они экспрессируют С040) 158]. Наконец, установлена важнейшая |юль этого типа взаимодействия в активащ-ги Т^хелперов 127].
В каждой из рассмотренных пар одна молекула (С080 и С040Ь) не экспрессируется на покоящихся клетках и индуцируется в процессе активации клетки Установлено, тто сигналом к экспрессии С0401. служит распознавание рецептором ТС И комплекса МНС 11 с антигенным пептидом, а экспрессия С 080 индуцируется вследствие взаимодействия С040 С04ОЬ [341.
Молекула С040 представляет собой фосфопроте-ин с мол. массой 48 кД [44] Она экспрессируется не только на В-лимфоцитах, но и на клетках эндотелия, макрофагах, дендритных, в особенности фоллику пяр-ных, клетках, атакже на некоторыхтипач эпителиальных клеток и ряде других вспомогательных клеток иммунной системы, особенно акттшировшшых, и на крове творных предшественниках [58]. Описана секреция растворимой формы молекулы С040 активированными В-лимфоцитами [311. Лиганд молекулы С040 — С0154 экспрессируется на активированных Т-клетках, тучных клетках, базофилах [35].
По своей структуре молекула С-040 гомологична рецепторам для Т№, СОЗО, Раз-ренептору (рецептору сигналов к индукции апоптоза) и ряду других пред-ставителейсемейства рецепторов фактора роста нервов [56[. Молекула С040 особенно похожа на рецептор ТОР 1 типа (р55); она имеет 4 внеклеточных домена, содержащих 6 остатков цыстеина, и короткий шарнирный участок, но в отличие от ТЫ Р-рецептора типа 1, в цитоплазматическом участке С040 отсутствует «домен гибели», определяющий передачу сигнала к алоп-тозу.
С040Ь, ил и СО 154 — транс,мембранный белок
11 липа (направленный наружу споим С-коішом)смол. массой 33 кД [36]. Он входит в семейство родственных молекул, служащих лигандами молекулам предыдущей группы 120]. Его образуют Т»\Ра. лимфотокси-ны, фактор роста нервов, Раі-лиганд (индуктор апоп-тоза) и т. д. Все они имеют один внеклеточный домеа, предс тавляющий собой комплекс из 8 антииараллель-1ШХ [3-структур. С040Ьэкспрессируется на активйрп ванных Т-лимфоцитах (сильнее на С04+, чем на С08+). эозинофилах. базофилах и тучных клетках. СВ154+ Т-клетки появляются в светлых зонах зародышевых центров и межфолликуляриом пространстве на 3 -- 4 сутки иммунного ответа. Как и С040, С0401, может секретироваться в растворимой форме [34].
Ранняя реакция па взаимодействие С040 - С040Р состоит в формировании тримера С040, осуществляемом
с участием цитоплазматического белка CRAF-1 (от «ГU40 receptor associated factor») [14]. Он перекрестие сшивает цитопл аз мати • щекие участки CD40 (апа-лэгннпо ои действует в отношении рецепторов TNF и Fas). Благодаря наличию в его составе «цинковых паль-ш-ву он может вступать во взаимодействие с ДНК, а благодаря наличию участка, богатого остатками изо-лейцина (изолейциновая застежка-молния) — с другими белками. Таким образом этот белок опосредуя! передачу сигнала. В передаче сигнала участвуют также т»(розинкинаэы lyu н iyn. липидная PI3-киназа, про-тпткииазаА, но пеучаствуютяротинкиназа С и Са н -явпеимые механизмы [34].
Первоначально роль 0040 п индукции ответа В-■тмфОщгтон была установлена путем обнаружения комитогенного эффекта моноклональных антител к С 0-40 н затем ъ опытах с совмсетиымдействием на покоящиеся лимфоциты антител к GD40 и 11.-4, индуцировавшим длительную пролиферацию В-клеток. которая бйпровождалась пере ключе! тем изотипов иммуноглобулина )5]. Кроме 1L-4 CD40-зависимую пролиферацию усиливают IL-13 и LL-10. Показано, что существует □терпим стимулирующих сигналов, поступающих метку через С040 и рецептор для антигена (BCR). Билл установлено, это сигнал, возникающий при пере-qjemioM сшнвании мембранного С040. индуцирует вфабеггку В-яшетками IL-lp, IL-6, IL-10, TNFa и |3, Ш-С5Р1р4]. Он предотвращает развитие апоптоза В-к ii'iTiK пугем повышения экспрессии защитных фак торой, в ОД1ШХ случаях - Вс1-2, в других - ВсГХ, [15]. Сштяжв; мембранных молекул С040 обеспечивает |»рвипь*|сние изотипов иммуноглобулинов как п стимулированных «наивных» В-клетках, так в особепйо-au и в В-клетках памяти, причем набор изотипов может бьггь модифицирован различными цитокинами Г*0[ Наконец, через CD40 подается сигнал кдиффе-рищирояке В клеток, причем кратковременный сиг-над обеспечивает созревание плазматических клеток, и более длительный - В-клеток памя ти ] 4]. Таким об-рта IM, ешкалшация через CD40 обеспечивает осуще-. епшети-всех основных событий, определяющих уча-бке В-лпмфоцитОв в гуморальном иммунном ответе. Они реализуются преимущественно в зародышевых L напрад [34].
Анадопитый сигнал, генерируемый и макрофагах Ж'И'гп-ЛВапьных клетках, фибробластах. включает ак-1 «отлитые события, важные для осуществления fOmrnmiioii реакции и развития ТЫ -ответа 158J.
D монациты и макрофаги че[>ез CD40 передается ,"И1тт;.'1 к выработ ке II.-1.TNFa, IL-6.11-10,1L-12, хемо-шм, смятеау оксида азо га, обест iе1 п шастс>; заии п а от JUDirrim На дендритных клетках под влиянием сигнале молекулы CD40 увеличивается число отрос i fcm, fovitmnai экспрессия молекул М Н С11 корецеи пцмш CD80/ С D8H, секретирустея ряд цитокииов (все im реализуется in vivo при контакте дендритных кле-тМ.сшит|роваШ1Ы.\т Т-лимфоцитами). Вэндотели-
альных клетках связывание CD4U приводит к усилению экспрессии молекул адгезии — Е-селектнна. ICAM-1, VCAM-1, в фибробластах генерируется сш-иал к пролиферации.
В то же время взаимодействие C-D10- C040L я и ляется важнымфактором активации Т-клеток, происходящей при их взаимодействии с АГ1К [24] поскольку молекула С0154 сама может служить акцептором активационного сигнала. С другой стороны, в Т- В-вза имодействие вовлекаются пары молекул С028/ CTLA4 и CD80/CD86. При этом в Т-клетки поступает сигнал, одним из результатов кот орого является усиление выработки интерлейкинов и дифференцировки Т-хелперовв клетки ТЬ2-Типа. То и другое способствует реализации гуморальной составлю ющей Т-В-коопе-рании, т. е также способствует пролиферации п диф-ференцировке В-лимфонитов и, в конечном счете, -развит ию гуморального иммунного ответа. Полагают также, что при связывании cGD28 через молекулы В7 в АП К и В-лимфоциты поступает сиг нал, способствующий их активации
Таким образом, функциональные ш(следствия Г В-кооперации обусловлены взаимодействием не только CD40 и CD40L, но и С028 и В7, причем в обоих случаях сигналы поступают в обе контактирующие клетки, хотя последствия передачи этих сигналов не вполне симметричны: сигнализация через CD28 важнее для активации Т-хелперов, а сигнализации через CD40 — В-лимфоцитов и других АПК.
Молекулы адгезии
Межклеточные взаимодействия, в основе которых лежит распознавание рецептором TCR комплекса МН С-анппенный пептид, нуждается в стабилизации, которая достигается благодаря установлению связей между адгезивными молекулами поверхности взаимодействующих клеток. Эта стабилизация особенно существенна на начальном этапе взаимодействия Т-хел-пера и АПК. когда осуществляется распознавание антигенного пептида. Рассмотренные выше костимулируютцие молекулы, а также кореиелтиры €04 и CD8 также служат факторами адгезии, по в их функций преобладающим является вклад, вносимый в генерацию внутриклеточного сигнала. Молекулы адгезии, как таковые также могут служить источником сигнализации, но эта их функция является вело могзкгельной. Это разграничение является весьма условным и используется ради терминологического удобства.
Из многочисленных молекул адгезии, присутствующих на клетках иммунной системы, лишь две пары молекул способны осуществить указанные типы взаимодействия. За первый тип взаимодействия (осуществление первичного контакта клеток) вероятнее всего ответственны молекулы С D2 и С058, исходно идентифицированные как молекулы, связанные с функцией
лимфоцитов (L.FA). Обе зли молекулы относятся к подсемейству ракоэмбриоиалъиого антигена суперсе мейства иммуноглобулинов, для которых характерно присутствие в молекуле доменов типов V и С2118.521. Молекулы CD2 и CD58 содержат гю одному домену каждого ш этих гидов. Принцип пальмо, что CD2 экспрессируется на щжоящихся Т-лимфоцитах, a CD58 присутствует на клетках самых различных типов (включая эритрошгш). Несмотря на очень низкую аффинность взаимодействия этих молекул, в связи с высокой плотностью их экспрессии это взаимодействие оказы вается достаточным дня временного удержания клеток на близком расстоянии [8, 18].
Помимо механической функции сближения и контакта клеток данный тип взаимодействий может вносить вклад в зарождение сигнала от TCR. Известно, что определешлые комбинации монокоональных антител к различным эпитопам CD2 может служить самостоятельным источником активации и даже митогеие-за Т-клетик (так называемой алътеранп гвной активации). которая, однако, реализуется через сигнальный путь, связанный с TCR. Однако этот путь активации ае является самостоятельным: он реализуется при обязательном участии С-цепи комплекса TCR-CD3 (421, с которым молекула CD2 способна вступать в мсжмо-лекулярные контакты. Показано, что стимуляция CD4' клеток через C-D2 вызывает экспрессию на их поверхности молекулы CTL, обусловливающую избирательную миграцию лимфоцитов в кожу [40].
Вторая пара молекул адгезии р.,-интегріш LFA-1 и ■ишн суперсемейства иммуноглобулинов ІСАМ-1 ответственны за стабилизацию взаимодействия TCR с комп-лексом МЇ!С-шгшгашьгіі пептид. Дело в лом, молекула ІСАМ-! является активационной молекулой и появляется (прпвоздейсшш П..-1 .фактора некроза опухали а, ин-терферола у) на АЛК.'иішь после их начальной актива-цим под алнях-шем предшествующего контакта между молекулами CD40 и CD40L [54|. Молекула LFA-1. хотя и экспрессируется на покоящихся лімфоцитах, приобретает достаточное сродство к своим лигандам после «акгива-ции», которая достигается после связывания TCR. Суть ее состоит в повышении аффинности интегрина в отнс-шенмн дигапдов вследствие шмеиегаїя конформации и взаимосвязей с мембранным окружением, реализуемого с вдвлечеі тем шггоаселега приучастиишрозинкиназ. про-теншщназы С и прошвочоїсапевгов Са4^ и Mg1"1' [28|. Вза имное связывание молекул LFA-1 и 1CAM-I также служит источником сигнализации; особенно существенны сигналы, подаваемые в АПК через молекулу 1 САМ-1; они важны также для сигнализации через В7.
Пол влиянием связывания CD28 усиливается экспрессия на '[’-клетках р, -интегринов VLA-4 is VLA-5 (63 [ которые выполняют определенную роль ни поздних этапах ак'шваиии Т-лимфоцитов и при форми-рованіш Т-клеток памяти 1611.
Роль других молекул адгезии — возможных участников межклеточного взаимодействия Т-хелперов и
АПК. а также в Т-В-коонерации (Ь-селегаинов. 0,-ин-тетрштов, молекул CD5, CL)7, CD43. CD45) пока неясна tie исключено, что взаимодействие р1-интегрина VLA-4 и его рецептора VCAM-1 имеет значение при активации Т-клеток памяччь Важно подчеркнуть, что участие молекул адгезии в установлении и стабидиза ции взаимодействий Т-клеток и AIIK взаимоэамепяе-мо (т. е. «оснащение» этого процесса избыточно).
Молекулярные основы межклеточных взаимодействий при селекции клонов лимфоцитов и индукции анергии
Рассмотренные выше межммлекудярные и межклеточные взаимодействия реализуются при нормальном иммунном ответе, в основе которого лежит активация лимфоидных клеток. Несколько иные формы активации и ее альтернатива — ппдукция анергии имеют место при селекции клонов лимфоцитов, которая происходит при их созревании, а в случае В-клеток — в процессе иммунного ответа. Анергия может быть индуцирована и у зрелых лимфоцитов как в ходе нормальных иммунных процессов, так и при патологии или искусственных манипуляциях, например терапевтических воздействиях.
Незрелые тимоцлтты экспрессируют CD28, а по крайней мере часть эпителиальных и дендритных клеток тимуса — его рецепторы CD80 и CD86 [42]. Уже это является основанием для предположения об участии С028-опог:редштаалых взаимодействий в селекции тимоцитов, Однако мутации гена CD28 и его целенаправленное разрушение иесказьшаются на эффективности процессов селекции, что свидетельствует по меньшей мере о возможности компенсации э того дефекта неким запасным механизмом [53]. Топко так жене 1ьчеют последствий для селекции тимоцитов генетические дефекты, за грагивя roim ie CD2 (ко горы Гi также экспрессируется на незрелых тимоцитах) |3l | Мо лвкулярные основы неполноценности си'нализацни. осуществляемой при взаимодействии тимоцитов с эли -телиадьньтмй клетками тимуса, о которой сообщалось в литературе [60]. пока не ясны. Причины индукции аноптоза при перекрестном сшивании ТС R л имонитов в частности при распоанаванни аутологичных лнгап-дов, связаны, rio-видимиму, пе с дефектностью дополнительной сигнализации от дендритных клеток тимуса а с особенностямн реакции незре.лых тимоцитов и отсутствием у них защиты от апотоза (слабой экспрессией Bci-2. Bel -XL).
Напротив, результаты селекции В-лимфошп ов. которая осуществляется в зародышевых центрах при иммунном ответе и имеет результатом повышение аффинности BCR и продуцируемых антител, тесно связана с участием костимулирумщих молекул. В светлой зоне зародышевых центров В-цен троцигы, несущие
высоки,|ффннные рецепторы (они формируются в результате резко повьппенпош мокальяогомугагенеза V-ггаюн) взаимодействуют с антигеном, фикс»гроваиным на поверхности фолликулярных дендритных клеток и прсдста&пяют его Т-хелперам, пидуцируя экспрессию па UHxCD-lOL. Последующее взаимодействие 31 ом мо-тскулы с С040-рецептором В-клетки обеспечивает ее выживание, переключение изотипов и дальнейшую дйфференцировку в плазмошгты и В-клетки памяти. В случае низкого аффинитета рецепторов В-клеток он 11 ни способны эффективно активироваться дендритными клетами и йНдуцироват ь экспрессию Т-хелперов. ['г- (у.П1.ТаТ0М является гибель В-лймфоцптов соответствующего клона [5. 35]. Аналогично, па гибель обречены аутоспецифические В-лимфоциты, г. к. в их ок-ружьтш отсутствуют ауТ0СПеЦиф|Р-1еС1<НРТ-ЛПМф0ЦИ-гы (элиминируемые вследствие отрицательной алешш) и следовательно отсутствует защитный эф-феп г связывания CD40.
П основе индукции анергии Т-хелнерсш мотут лежать особегшостн как стимуляции через TC.R (дей-п и не "частичных аналогов» пептида, к которому специфичен рецептор), так и косгнмуляции через CD28 |">| | Дефект костимуляшш имеет место в случае отсутствия его экспрессии или экспрессии его рецепторов. Ести отсутствие CD28 имеет место r основном при Глиптических дефектах (г. е. очень редко), го нарушение- экспрессии CD80 и CD86 наблюдает ся чаще, но сйальяу ато пндуцнбельные молекулы (особенно CD8U). Нарушение их экспрессий может бытьдостнг-яутощнг прогревании клеток, действии ряда химические адеятов, а также цитокинов, например JL-10. От | утствие сигнализации через CD28 ггри связывании ТС К нрешшнгт к анергии клетки, т. е. к устойчивому м.фушеншоэкспрессии гена IJL-2 и отсутствию ауток-рппкойпролиферацииТ-хелперов соответствующего «лона Полагают, что этом механизм лежит в основе отршатаиыюй селекции аутоспецнфическгис клонов Г-tarm втетимуса [57]. Однако чре.змерно штгенсив-1ш№сггсйуляштя через CD28 может привести к ос-ШЗшпо иммунного ответа (отчасти через усиление .й елргепги CTLA4 и лаже индукции иммупологичес-.гойтадерялтцоетп) (рис. 3).
Нарушения межклеточных взаимодействий и патология иммунной системы
|. ОбТтГ'ШГН1 причиной нарушений рассмотренных |Ыше мЩвкуЛйрных взаимодействий, лежащих у ос-h\w югат рации кпеток иммунной системы, являют |»tjiUtnwcKue аефею ы. Их последствия моделиру-IkVci mi мышах, у которых направленно инактивиро з*ш>[ шответствующие гены с помошыо технологии ИВшш*у Сводка данных <>последсгвк шх такой инак-имиш представлена в таблице 2.
х молекулы алгриш _____
___' -----------^Т-хелпер
( АПК ( МВГ. и,-ф ^ГС'К — фиепция
V. ' ’■ ч )
| „ /со 8п/в« таД} __1 '
Рис. 3. Принцип, положенный в основу использования растворимого СИМ с целью индукции специфической анергии
Данные, содержащиеся в таблице 2, свидетельству -ют об исключительно важной роли взаимодействий С040-С040Ь и С028-В7 в реализации иммунных процессов и в то же время указывают на достаточно высокую избыточность адгезивцых взаимодействий. Опа проявляется в отсутствии фатальных последствий удаления гена Сс128, практически полной «безнаказанности» инактивации генов 002. С080. От видно, что дефицит функции С 1)80 может быт ь вое полнен молекулой С 086. Аналогичные заместители есть у С028 (например. 4-1ВВ1- отчасти СТ1-А4). С058 (С059, С048) Наименее защшиенной явля-ется система С040 — СГМОЬ. Из того следует более высокая вероятност ь существования наследственной патологии иммунитета, обусловленной дефектами генов С/140 п С(140[.. что и подтверждается практикой клинической иммунологии.
Недавно была расшифровала молекулярная основа одного из первичных иммунодефпцитпых заболеваний, сцепленных с X - хромосомой - гипер-^М-синдрома [121. Оказалось, что его основой служат му тйции гена €(1401. локализованного в районе Х(^2й-.3-Х1]27 1. Как следствие, на активированныхТ-клеткахотсутствуетзкспрессия полноценной молекулы С0154 и, следовательно, при иммунном ответе н< происходит взаимодействия С040 - С040Ь. Результатом являетсяогсутстВ11е переключен! I я изоп шов иммуноглобулинов 1501и усиленного мутагенеза V-тепав 116], в норме происходящего в зародышевых центрах при иммунном ответе и служащего основой повыше ния аффинности антител; при ответе на антигенную стимуляцию в лимфоидных фолликулах не происходит формирования зародышевых центров [19]
Главным клинико-лабораторным признаком аабо тевания,определившим его название, является отсу: -ствие в циркуляции иммуноглобулинов всех классов, кроме 1уМ и ^0. содержание которых повышено, при нормальном уровне циркулирующих В-лимфоцитов Клинически заболевание проявляется в частом поражении верхних дыхательных путей, а также развитии оппортунистических инфекций - диареи, вызываемой криптоспоридиями, и пневмонии вызываемой Рпеипшсувш сашш [44]. Очевидно, что это является результатом несостоятельности механизмов, обеспечивающих защиту от ряда патогенов и связанных с блокадой указанных выше 1фоцессов; вследствие
таблица 2. последствия НОКАУТА ГЕНОВ, ДЕТЕРМИНИРУЮЩИХ МОЛЕКУЛЫ МЕЖКЛЕТОЧНОГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
Нокаутиро> ванные гены (ссылка) Нарушения в иммунной системе
0128 [53] Развитие Т-клеюк происходит нормально. Их численность не изменена. Ослаблен ответ на митогены, суперантигены, выработка цитокинов, хелперная функция С04+клеток (в основном ТЬ2). Нарушена защита от некоторых (не всех) вирусов. Функция цитотоксических клеток не изменена. Отсутствуют зародышевые центры
СШ4 [611 Усиленная пролиферация Т-лимфоцитов, спленомегалия, лимфаденопатия, лимфоидная инфильтрация нелимфоидных органов (причина смерти в 3-4-недельном возрасте)
В 7.1 (Сс180) [23] Практически нормальный иммунный ответ
В7.2 (Сд86) [58] Подавлен гуморальный и клеточный иммунный ответ
Сс140 [30] Подавлен Т-зависимый ответ на белковые антигены. Не формируются зародышевые центры. Подавлено развитие Пт 1-ответа, защита от пейшманий, выработка интерферона у, 1Ы2
01401 [49] Нарушен Т-клеточный ответ на белковые антигены. Подавлена пролиферация Т-клеток при их активации. Снижена функция АПК. Подавлена выработка 11-12, развитие ТЬ1 -ответа, защита от лейшманий. Отсутствует индукция аутоиммунного энцефаломиелита
0*2 [31] Последствия практически отсутствуют. Численность и функция Т-клеток нормальны
Сд54 [55] Ослаблена воспалительная реакция. Функции Т-лимфоцитов не изменены. В смешанной культуре лимфоцитов ослаблена активность стимулирующих, но не реагирующих клеток
отсутствия сигнала, поступающего в В-лимфоциты через молекулу С040, парушается процесс образования полноценных антител к патогенам. При этом сохраняется (и яаже повышается) способность к образованию ^М-аутоаятятел. поскольку В1-клетки не нуждаются в стимуляции через С040 [44).
При этом синдроме страдают и другие типы клеток, экспрессирующих СГ)40, прежде всего макрофаги и дендритные клетки. Следствием указанного нарушения сигнализации является недостаточная выработка ими цятокииов (включая 1Ь-1, ТИРа, 1Ь-12), оксида азота, слабая экспрессия костимулиру-ющих молекул 0080 и С 086. Результатом отсутствия сигнализации через СЮ 154 и связанной с этим гипофункции макрофагов п дендритных клеток является недостаточная степвяь активации Т-лимфо-питов.
Среди первичных мммунодефіщитов «рассмотренным выше молекулярным взаимодействиям имеет косвенное отношение синдром нарушенной адгезии лейкоцитов (ІАП-синдром), точнее, его I тип, генетически обусловленный дефектом экспрессии СІ’) 18 (дефект локализуется в хромосоме 21 с]22.3) [3]. Поскольку СП18 является общей (32-иепью ряда интегринов, включая 1_РАТ, СКЗ и СК4 при данном заболевании отсутствует или ослаблена экспрессия всех названных молекул на нейтрофилах, моноцитах и лимфоцитах. Однако клинически проявляются лишь следствия отсутствия р.,-интегрииов на неГгт рофилах и моноцитах (ослабление подвижности, хемотаксиса, адгезии, эпдо-
цитоза с клиническими проявлениями в виде подверженности инфекциям, периодонтоза,замедления заживания рап, хронических язв кожи, перианальиых свищей, сопровождающихся лейкоцитозом |3 |). Дефицит молеку.аы ЬРА-1 на поверхности Т-лимфоцитов и, следовательно, отсутствие ее взаимодействия с молекулой ГС.АМ-1 на поверхности активированных АПК практически никак не проявляется. Очевидно, это может служить свидетельством отсутствии фупкц) кмюдь-ной уникальности молекулы 1.РА-1 лимфоцитов м примером «избыточности» в иммунной системе. Совершенно аналогично генетически обусловленный дефект молекулы 1САМ-1 у мышей (следствие нокаута гена) проявляемся лишь нарушением развития воспалительной реакции, но не специфических иммунных процессов (см. табл. 2) [55].
Четко выраженные цмму нодефииитные состояния. обусловленные генетическими дефектами, которые затрагивали бы другие молекулы, участвующие в межклеточных взаимодействиях, не описаны. Однако имеются сведения об ослаблен 1 га их экспрессии при ряде заболеваний, Так. экспрессия С028 ослаблена прнтромбоцйтопеплях |3]. Установлено, ч го степень нарушений активации 'Г-лимфоцитов при связывании мембранных молекул С03 и С02 при ряде заболеваний не коррелирует.Так, более- выраженное подавление стимуляции через С02 зарегис грировано при атопии, системной красной волчанке, синдроме Шегрена. лимфогранулематозе [3|. хронических воспалительных процессах в бронхолегочном
и
аппарате [2], в отдаленные сроки после облучения tt|.
В качестве эндогенного фактора ихшуносупрессии рассматриваются растворимые формы молекул адге-.т - CD2, CD58 и особенно CD54 (1САМ-1). Локальное накопление раство] л гмой формъ! I САМ -1 оп -ределяется в пораженных суставах при ревматоидном артрите. В то же время у дни. страдающих частымп пропудпыми заболеваниями, уровень растворимых молекул СП2, CD58 и CD54 в циркуляции снижен, что коррелирует с повышенным пролиферативным ответом их Т-клеток на действие митогепов |9|.
Клинически значимым аспектом процессов, рассмотренных в обзоре, является возможность вмешательства в иммунные процессы, основанные на описан -пых выше межклеточных взаимодейст виях. Так, доклинические нспытагтя проходит растворимая форма молекулы CTLA4 - продует слитого гена CTLA4-lg. Ьшмодействуя с мембранными молекулами СD80 и CU86. пн блокирует поступлслне костимудиругошего Сйгиача вТ-клетки через молекулу C.D28, предотвращал- их активацию и способствует развитию анергии, [(ведением CTI.Al-lg удалось добиться длительного Приживления остров ково ii гкани при сахдриом диабете у мышей [37 [. аллотрапсплантатов сердца у крыс 46J, оога&ггъ развитие РТПХ при различиях no Ml 1C у лиаией 1101. Особенно эффективным было сочетанное использование CTLA4Tg с циклоспорином А [47]. Ппско.йку CTLA4-Ig особенно эффективно подавляет развитие гуморального иммунного ответа, его нри-иеиили для подавление экспериментального аутоиммунного сахарного Диабета, экспериментального ал-wpni'iecKoro энцефаломиелита [17], люнус-сиидрома новозеландских мышей [21 ]. Во всех этих случаях при цгиадьзованпи препарата до начала аутоиммунных проявлений заболеваний он предотвргицал их развитие а при сто введении на высоте аутоиммунной патологии существенно ослаблял ее.
Другая возможность клинического приложения лйний и природе межклеточных взаимодействий при ttluiynuoM ответе связана с гемотерапией. Трансфек-шя генов штимуляторов CD80 и CD86 в оггухоле-; шсклетки, трансплантируемые мышам, существенно удттша иммунную реакцию отторжения и ипду-| ijnptma/ia формирование иммунитета, обусловливаю-; шл о отторжение нетрапсфецированных к теток [ 13. 1й|, Пол1вштел1.иые результаты были i получены в не-жиш]); моделях, однако иммупогеппость неко горых , цдухолеп ие повышалась под влиянием трансфекции 'оутугмулируюшн.ч молекул (очевидно, в связи с от -штстевёи экспрессии опухолеассоцинрованиых ан-; rurcj(on) Трансфекция гена CdSO быта несколько бога эффективной. чем перенос гена Cd%6 [34].
I Таким образом, анализ молекулярной природы IWOMCWBbtx взаимодействий, лежащих в основе яушюых мдашпзмов иммунного ответа, i подо гворен КШыкк' точки зрения вскрытия природы эттос ме-
ханизмов: он важен гакже для понимания патогенеза некоторых форм иммунологических нарушении, и определяет пути поиска средств их коррекции.
Список литературы
1. Литвина М. М.. Никонова М.Ф., Ярили и А А.// Радиац. биология. Радиоэкология. 1994 - Т. 34. — С. 598 - 602.
2. Яковлева Н.Н., Никонова М.Ф. Литвина М.М. и др.// Иммунология. 1994. — № I. — С. 22 - 26.
3. Arnaiz-Villena A., Ttmon М., Rodriguez-GaJlego С. El al.// Immunol,Today. 1992. -V. 13. - P. 259 - 265.
4. Arpin С., DechanetJ., van Kooteri C. Etal.//Science 1995,-V. 268. - P. 720 - 722.
5. Banehcreau J.. de Paoli P., Valle A Et al,// Science.
1991,-V. 251.— P. 70-72.
6. BanchereauJ., RoussetF.//Nature 1991.— V.353 P. 678 - 679.
7. Bearer B.E.. Burakoff S.J.// Immunol.Rev. 1989.
V. 111.-P. 267 - 294. ’
8. Bearer B.E., Halm W.C.// Sern.lnununol. 1993 V.5.-P. 249 - 261.
9. Becker N.. Krau.se G. Rensch 1C, Meuer S.С // Immunobiology. — 1996. — V. 195. — P. 47 - 60,
10. Blazar B.N.. Taylor P.A.. Unslev P.C, Vallera D.A.// Blood. 1994. - V.83. - P. 3815 - 3825.
11. Boise LH„ Minu A.J., Noel P.J. et al. // Immunity. 1995.-V. 3.-P. 87-98.
12 Callard R.E., Armitage R.J., Fans low W.C., Spriggs M.K.// Immunol. Today. 1993. — V. 14. — P 559 -564.
13. Clien L.. Ashe S.. Brady VV’.A. et al.// Cell. 1992. -V. 71. -‘P, 1093 - 1102.
14. Cheng G„ Cleary A.M., Ye Z.S. ei al.// Science.
1995. - V. 267. — P. 1494 - 1498.
15. Choi M.S.K.. Boise L.H., Gottschalk A.R. et al,//
Eur.J.Immunol. 1995. - V. 25. — P. 1352 1357.
16. Chu Y.W., Martin E., Fuleihan R. Et al // J.Clin.Invest. 1995. - 95. - P. 1389 - 1393.
17. Cross A.H., Gererd T.J., Giacoletto K.S. et al.
J.din.Invest. 1995. - V. 95. - P. 2783 - 2789.
18. Davis S.J., van der Merwe P.A.// JmmunoI.Todav
1996.— V. 17.-P. 177 - 187.
19. Facchelti F„ Appiani С Salvi L. et al// |.lminunui
1995. - V. 154. - P. 6624 - 6630.
20. Farrah Т., Smith C.A.// Nature. 1992. - V. 358. -P. 26.
21. Fink B.K., Linsley P.S., Wofcy D.// Science. 1994 -V. 265.-P. 1225 - 1227.
22 Eraser J .D., Li ving B.A. Crabtree G K.. Weiss A// Science. 1991. V. 251 - P. 313 - 316.
23. Freeman G.J., Boriello F., Modes R.J.// Science. t993 - V. 262. - P. 907 - 909.
24. Grewal I.S., Fla veil R.A.// Immunol. Today 1996 — V. 17.-P. 410-414.
25. Gribben J.G., Freeman G.J., Boussiotis V.A. et al.// Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1995. - V. 92. - P. 811 -81.5.
26 Hatchcock K.S., Laszlo G.. Didder 11. B. el ah// Science. 1993. - V. 262. - P. 905 - 907.
27. Hatchcock K.S., Laszlo G., Pucillu C. et al.// J. Exp.Med. 1994. - V. 180. - P. 631 - 640.
28. Hynes R.O.// Cell. 1992. - V. 69. - P. 11 - 25.
29. JuneC.H.,BluestoneJ.A.,NadlerL.M.,Thompson C.B. // Lmmunol.Today. 1994. - V. 15. - P. 321 - 331
30. Kawabe T., Naka T., Yoshida K. et al.// Immunity.
1994. - V. 1.- P. 167 - 178.
31. Killien N., Stuart S.G., Littman D.R.// EMBOJ.
1992. —V. 11. —p. 4329 - 4336
32. King CL.. Stupi R.G., Craighead N. et al.// Eur. J. Immunol. 1995. -V. 25. - P. 287 - 295.
33. Kisielow P/. Von Boehmer H.// Adv.Immunol.
1995. - V. 58. - P. 87 - 209
34. Kooten C. van, Baftchereau J.// Adv.Immunol.
1996. -V. 61.- P. 1 -77.
35. Lane P., Traunecker A., Hubele S. E.et al.// EurJ.Immunol. 1992. - V. 22. - P. 2573 - 2578.
36. Lederman S., Yellin M., Inghirami G. et al.// J.Immunol. 1992. -V. 149. - P. 3817 - 3826.
37. Lenshow D.L., Zeng Y., Thistlethwaite J.R. et al.// Science. 1992. - V. 257. - P. 789 792.’
38. Lenshow D.L.. Walunas T.L., Bluestone J.A. // Annu.Rev. Immunol. 1996. — V. 14. — P. 233 - 258.
39. Linsley P.S., Ledbetter J.A.// Axuiu.Rev.Lmmunol.
1993,-V. 11.-P. 191 - 212.
40. Liu L., Foer A.. Sisterhenn J., Reinhold U.// Immunology. 1996. - V. 88. - P. 207 - 213.
41. Meuer S.C., Hussey RE., Fabbi M. et. al. // Cell. 1984. -V. 36,- P. 897 -906.
42. Moingeon P.. Alcover A.. Clayton L.C//J. Exp.Med. 1988. - V. 168. - P. 2077 - 2090.
43. Nishikawa K., Linslev P.S.. Collius AB. etaL// Eui.J. Immunol 1994. - V. 24. - P. 1249 - 1254.
44. NotarangeloLD.,Duse M.,Ugazio A.G.//Imrnunodel. Rev 1992. - V.3.- P. 101-122.
45. Paulie S., Rosen A., Ehlin-Henrlksson B et al.// J.Immunol. 1989. - V. 142. - P. 590 - 595.
46. Pearson T.C.. Alexander D.Z.. Winn K.J. et al.// Transplantation. 1994.-V. 57. - P. 1701 - 1706.'
47. Perico N., Imberti O.. Bonternpelli M.. Remuzzi G.// Kidney int. 1995. — V. 47. — P. 241 - 246.
48. Prasad K.V.S.. Cai Y.C.. Raab M. et al.// Proc.NatLAcad.Sci.USA. 1994. - V. 91. - P. 2834 -2838.
49. Renshaw B.R., Faslow W.C.. Arnutagc R.J. et al.// J.Exp.Med. 1994. -V. 180,- P. 1889 - 1900.
50. -SaLlci Q„ Tanaka T„ Wad a Y.// J.CelLlnvest. 1995.
V. 95.-P. 510 -514.
51. Schwartz R.U.//J. Exp. Med. — 1996 — V. 184. — P. 1-8.
52. Sewell W.A., Brown M.H., Dunne J // Proc.Natl.Acad.Scj.USA. 1986. - V. 83. - P. 8718 8722.
53. Shahinian A.. Pfeifer K., Lee K.P. et al.// Science.
1993.-V. 261.-P.609- 612.
54. Shinde S., Wu Y.. Guo Y. etal.//J.lmmunol. 1996,— V. 157.- P. 2764 - 2768.
55. Sligh J.E., Ballantyne C.M., Rich S. et al.// Proc. Natl.Acad.Sci.USA 1993.- V. 90. - P. 8529 - 8533.
56. Smith C.A., FarrahT., Goodwin R.G.// Cxi I. 1994.
V. 76. — P. 959 - 962.
57. Sprent J.. Webb S.R.// Curt. Opin. Biology. 1995.
V. 7. - P. 196 - 205.
58. Stout R.D.. SuEtlesJ.// Immunol.Todav. 1996. -V. 17. - P. 487 - 492.
59. Su B., Jacinto E.. Ilibi M. et al.// Cell. 1994. - V. 77. -P. 727 - 736.
60. Vukmanovic S., Stella G.. King P.D. et al.// J.lmmunol. 1994. - V. 152. - P. 3814 - 3823.
61. Waterhouse P., Penninger J.M., Timms E. et al.// Science. 1995. - V. 270 - P. 985 - 988.
62. Yang G., Hellsr.rom K.E., llellstrom I., Chen L.// JImmunol. 1995. - V. 154. - P. 2794 - 2800.
63. Zell T„ Hunt S.W., Mobley J.L et al.// J.lmmunol.
1996,- V. 156.-P. 883 -886
