CC BY
27
16 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
Г.И. Буравченко12, Ю.А. Блинова3, Н.Э.Вавилов3, ровать проявления биологической активности противо- A.М. Щербаков3, А.Е. Щекотихин12 опухолевых препаратов. ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ Заключение. Многие проявления токсичности ЛФ раз-7-АМИНОПРОИЗВОДНЫХ 1,4-ДИОКСИДА личных препаратов, включая противоопухолевые, могут 3-ФЕНИЛ-2-ХИНОКСАЛИНКАРБОНИТРИЛА быть связаны с присутствием ДМСО. Основными путями ФГБНУНИИНА им. Г.Ф. Гаузе РАМН, Москва, Россия; ослабления или предотвращения ДМСО-индуцированной 2ФГБОУВПО РХТУим. Д.И. Менделеева, Москва, Россия; токсичности являются подходы, с помощью которых со-3ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, держание ДМСО уменьшается или полностью аннулиру-Москва, Россия ется (снижение концентрации разными способами, замена Введение. Производные 1,4-диоксида хиноксалина растворителя, синтез новых растворителей, не уступающих селективно ингибируют рост опухолевых клеток в услови- ДМСО). В то же время следует учитывать, что ДМСО спо-ях гипоксии (WO 2015167350). собен проявлять специфическую терапевтическую актив-Цель исследования — поиск водорастворимых произ- ность, в частности усиливать противоопухолевую актив-водных 1,4-диоксида хиноксалина, селективно ингибиру- ность некоторых препаратов. ющих рост клеток солидных опухолей в условии гипоксии, и исследование влияния структуры аминогрупп на актив- И.М. Бушмакина, М.А. Мартынова, Н.А. Шуканова, ность соединений. А.И. Карпович, М.М. Молчан Материалы и методы. Серия 7-аминопроизводных КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1,4-диоксида 3-фенил-2-хиноксалинкарбонитрила полу- ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ ПАКЛИТАКСЕЛА чена замещением галогена в 1,4-диоксиде 3-фенил-7-фтор- Институт биофизики и клеточной инженерии НАН 2-хиноксалин-карбонитрила при действии различных Беларуси, Минск, Республика Беларусь аминов. Цитотоксическую активность веществ определяли Введение. Паклитаксел используют для лечения ряда в тесте МТТ на клетках солидных опухолей молочной же- злокачественных новообразований. Поскольку паклитак-лезы человека MCF-7 и MDA-MB-231 в условиях нормок- сел гидрофобен, инъекционную форму получают в сочета-сии (21 % O2) и гипоксии (1 % O2). нии с комплексным растворителем, вызывающим гиперРезультаты. Ряд новых аминопроизводных 1,4-диок- аллергическую реакцию помимо токсичности субстанции. сида 3-фенил-2-хиноксалинкарбонитрила обладает хоро- В то же время известно, что липосомальные лекарственные шей растворимостью в водных средах. Практически все формы характеризуются сходной терапевтической эффек-полученные соединения селективно подавляют рост клеток тивностью, однако при этом менее токсичны. аденокарциномы молочной железы в условиях гипоксии. Цель исследования — определить оптимальные условия Активность большинства новых производных в гипоксии формирования липосомального паклитаксела (ЛП) была значительно выше, чем у препарата сравнения — с учетом особенностей лекарственной субстанции. тирапазамина. Материалы и методы. Униламеллярные липосомы Заключение. Получена серия новых водорастворимых (УЛЛ), содержащие паклитаксел, получали методом уль-производных 1,4-диоксида 3-фенил-2-хиноксалинкарбо- тразвукового диспергирования в забуференном физраство-нитрила с высокой активностью в отношении клеток рака ре, рН 7,4, в атмосфере азота. Концентрацию продуктов молочной железы в гипоксических условиях. пероксидного окисления липидов (ПОЛ) определяли по содержанию образовавшегося малонового диальдегида B.М. Бухман, А.А. Николина (МДА) с помощью теста с тиобарбитуровой кислотой ТОКСИЧНОСТЬ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА (ТБК). ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Результаты. ЛП получали из яичного фосфатидилхо-Москва, Россия лина (ЯФХ) и холестерина (ХС) — основные компоненты, Введение. Диметилсульфоксид (ДМСО) широко ис- активного вещества и минорных составляющих. Опти-пользуется в качестве растворителя в готовых лекарствен- мальное соотношение ЯФХ и ХС в ЛП составляет ных формах (ЛФ). Некоторые проявления биологической 2:1 моль/моль при суммарной концентрации липидов активности ЛФ, в частности токсичность, могут в значи- 50 мг/мл суспензии. Паклитаксел вносили в концентрации тельной степени определяться присутствием ДМСО. 2 мг/мл суспензии. Для предотвращения развития ПОЛ Цель исследования. Для более адекватного понимания вводили DL-a-токоферол из расчета 0,04 мг/мг суммарных и правильной оценки получаемых результатов изучения липидов. При этом инкорпорирование паклитаксела в УЛЛ необходим анализ опубликованных литературных данных. составляет 41,0 % от исходного. При исследовании влия-Материалы и методы. Проведен аналитический поиск ния зарядформирующих минорных компонентов исполь-в базе данных pubmed (1963 — январь 2017), используя сле- зовали в качестве отрицательно заряженного — стеарино-дующие поисковые слова: DMSO toxicity. вую кислоту (СтК), а для формирования положительного Результаты. Обнаружено 2697 ссылок. Из них отобрано заряда применяли цетилтриметиламмоний бромид (ЦТАБ) для углубленного анализа — 364. Можно считать экспери- и стеарилэтаноламид (СЭА). Их вносили в концентрации ментально доказанным наличие ДМСО-индуцированной 0,3 моля. Наиболее эффективно инкорпорируют активное токсичности. Основные проявления: нейротоксичность, вещество липосомы, содержащие СтК (97,1 % от внесен-кардиореспираторная токсичность, аллергенность, эмбри- ного в инкубационную смесь). УЛЛ, содержащие ЦТАБ, отоксичность. Доказана способность ДМСО модифици- инкорпорируют паклитаксел до 79,3 %, а СЭА — 48,1 %.
Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
17
По накоплению ТБК-активных продуктов установлено, что УЛЛ с инкорпорированным паклитакселом, содержащие СтК, наиболее стабильны: концентрация МДА в таких наносомах составляет 4,62—4,83 мкМ. Несколько более высокий уровень накопления МДА наблюдается в липосо-мах, содержащих ЦТАБ, — 5,43—5,56 мкМ. При этом в УЛЛ, содержащих в качестве минорного зарядформиру-ющего компонента СЭА, процессы ПОЛ развиваются очень стремительно: уже в исходном ЛП уровень ТБК-ак-тивных продуктов составляет 6,52—7,16 мкМ.
Заключение. Таким образом, наиболее оптимальными условиями получения ЛП является использование ЯФХ и ХС, минорного зарядового компонента — СтК, суммарной концентрации липидов 50 мг/мл суспензии и DL-a-токоферола из расчета 0,04 мг/мг суммарных липидов при внесении паклитаксела в концентрации 2 мг/мл суспензии.
П.М. Бычковский1, Т.Л. Юркштович2, Д.А. Адамчик2, Е.Г. Дрепаков1, И.И. Тагиль1
ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИМЕРНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВЕЩЕСТВ НА ОСНОВЕ ОКИСЛЕННОЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ
1УП«Унитехпром БГУ», Минск, Республика Беларусь; 2Учреждение БГУ «НИИ физико-химических проблем», Минск, Республика Беларусь
Цель исследования — получить и оценить in vitro противоопухолевую активность полимерных лекарственных форм окисленной бактериальной целлюлозы с включенными цитостатиками (цисплатин, проспидин).
Материалы и методы. В эксперименте использовали салфетки на основе окисленной бактериальной целлюлозы с содержанием карбоксильных групп 9,9 и 23,4 %, обладающих высокой впитывающей способностью (200—400 %). В качестве противоопухолевых веществ использовали ци-сплатин и проспидин. Количественное определение ци-сплатина в составе салфеток проводили методом ВЭЖХ (хроматограф Agilent 1200), проспидина — методом элементного анализа. Цитотоксичность макромолекулярных терапевтических систем оценивали в условиях in vitro на монослойной культуре опухолевых клеток HeLa. Для контроля были использованы: питательная среда; растворы цисплатина с концентрацией 0,6 и 0,9 мкг/мл, проспидина — 1,0 и 4,8 мг/мл; салфетки с такими же дозами цитостатиков. Продолжительность наблюдения — 48 ч.
Результаты. Проведено комплексное изучение окисления бактериальной целлюлозы в системе оксид азота (IV) — тетрахлорметан, направленное на оптимизацию процесса получения полисахарида с разным содержанием карбоксильных групп (от 1,5 до 24 %) и высокой степенью водопоглощения (100—500 %). Исследованы процессы иммобилизации на окисленной целлюлозе цисплатина и проспидина в зависимости от их концентрации во внешнем растворе, а также времени сорбции. Установлено, что предельное количество цисплатина в фазе окисленной бактериальной целлюлозы в зависимости от степени окисления варьирует в интервале 159—192 мг/г, в то время как для исходной бактериальной целлюлозы это значение составля-
ет 2,4 мг/г. Полученные данные о влиянии образцов с ци-сплатином и проспидином на рост культуры опухолевых клеток HeLa показывают, что противоопухолевая активность цитостатиков при их иммобилизации на окисленной бактериальной целлюлозе сохраняется на достаточно высоком уровне. По критерию торможения пролиферации опухолевых клеток HeLa образцы модифицированной полимерной матрицы с цисплатином и проспидином близки по активности к нативному цисплатину и проспидину в растворе, что может быть связано с определенной цито-токсичностью самого полимерного носителя вследствие наличия «подкисляющих среду» карбоксильных групп, а также достаточно быстрой скоростью высвобождения ударной дозы цитостатиков в раствор.
Заключение. Получены и экспериментально изучены образцы окисленной бактериальной целлюлозы, содержащие цисплатин и проспидин, обеспечивающие пролонгированный противоопухолевый эффект.
А.А. Вайнсон, В.В. Мещерикова, С.И. Ткачев РАДИО-ТЕРМОМОДИФИЦИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ ПРЕПАРАТОВ ПЛАТИНЫ, ГЕМЗАРА И ТАКСАНОВ ДЛЯ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК IN VITRO
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Цель исследования — изучить величину модификации лучевого и гипертермического поражения опухолевых клеток под воздействием трех препаратов: цисплатины, гем-зара и паклитаксела, используемых при термолучевой терапии в клинике ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина».
Материалы и методы. Суспензии клеток линий SCC7 и V-79 подвергали гамма-облучению или/и гипертермическому воздействию (при температуре 42 оС, в течение 30 мин) на фоне введения одного из этих препаратов, после чего определяли величину усиления эффекта по дополнительному снижению клоногенной способности клеток или степени угнетения их роста.
Результаты. Цисплатин (1 мкг/мл, снижает выживаемость клеток на 20 %) усилил поражение клеток гамма-излучением с фактором изменения дозы (ФИД) « 1,4, в отношении гипертермического воздействия проявил только аддитивность. Гемзар (3 мкг/мл) снизил выживаемость клеток SCC-7 на 15 % и в 1,7 раза (по соотношению рав-ноэффективных доз излучения) усилил их лучевое поражение. Усиление гемзаром поражения клеток после облучения с последующей гипертермией по ФИД достигает 1,8. Паклитаксел (0,068 мкМ, скорость роста клеток SCC7 уменьшается на 20 %) увеличивает эффект облучения в 1,3 раза, а эффект гипертермии — в 1,1 раза.
Заключение. Полученные данные показывают величину превышения аддитивного эффекта для опухолей при совместном применении лучевой/термолучевой терапии на фоне каждого из указанных препаратов. В настоящее время проводится оценка модификации этими препаратами лучевого и термопоражения нормальных клеток человека, в частности фибробластов и мезенхимальных стволовых клеток.
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
