CC BY
11DOI: 10.24412/2226-079Х-2022-12460
Комплексный подход к диагностике болезни Паркинсона с использованием генетического анализа, позитронно-эмиссионной томографии и исследования обонятельной функции (на примере популяции пациентов Красноярского края)
Д.В. Похабов1' 2, В.Г. Абрамов2, Д.Д. Похабов1' 2
1 ФГБОУВО "Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого" Минздрава России 2 ФГБУ "Федеральный Сибирский научно-клинический центр" ФМБА России, центр инновационной неврологии, экстрапирамидных заболеваний и ботулинотерапии (Красноярск)
Введение
К числу наиболее современных и перспективных подходов к диагностике болезни Паркинсона (БП) и ряда других нейродегенеративных заболеваний относятся генетические методы (в первую очередь в семейных случаях) и позитронно-эмис-сионная томография (ПЭТ). Возможности ДНК-скрининга определяются удельным весом наследственности в генезе изучаемых форм патологии, а достоинством ПЭТ является высокая чувствительность к изменениям метаболизма визуализируемых структур до развития их выраженной атрофии. Так, при БП ПЭТ-исследование позволяет определить недостаток нигростриатно-го дофамина, что дает возможность обнаружить болезнь даже на ранних стадиях ее развития.
Оптимальный радиофармпрепарат (РФП) для исследования дофаминергической системы - ле-водопа, меченная фтором-18 ('^^ОРА) [1]. Клиническое использование '^^ОРА до настоящего времени является ограниченным, так как, согласно общераспространенной практике, оценка активности этого РФП у пациентов с БП проводится с использованием сложных кинетических моделей. Такой подход требует длительного (не менее 90 мин) динамического сканирования, что, как правило, приводит к снижению качества получаемых изображений из-за двигательных артефактов. Однако в работе IX. АЪга et а1. показано, что протоколы статического сканирования с исследованием дофамина в подкорковых структурах не уступают динамическим
протоколам в точности количественной оценки пресинаптической дофаминовой функции [2].
Являясь важным методом исследования, ПЭТ сама по себе не ведет к постановке окончательного диагноза либо выработке рекомендаций по лечению. Конкретная характеристика того или иного процесса при применении этого метода определяется выбором РФП. Результатом обследования является набор числовых значений различных показателей, в частности характеризующих метаболизм дофамина в головном мозге, которые помогают врачу сделать вывод о состоянии больного и определить тактику лечения. Для интерпретации данных, полученных с помощью ПЭТ, необходимы представления о том, в каких пределах лежат нормальные значения показателей. При этом значения нормы зависят как от точности используемого прибора, так и от попу-ляционной изменчивости показателей.
Наиболее часто используемым РФП является '^-фтордезоксиглюкоза ('^-ФДГ), однако применение этого лиганда не позволяет решить ряд задач, связанных с ранней диагностикой БП, поскольку дает неспецифические результаты [3]. Разрабатываются также другие РФП, одним из наиболее перспективных считается ['^^ВТ-999 - производное кокаина [4].
Снижение метаболизма дофамина начинается в дорсокаудальном отделе скорлупы на контрала-теральной клиническому поражению стороне. Изменения метаболизма видны уже на ранних этапах развития БП, когда клинические проявле-
^ № 2 * 2022
167
ния еще отсутствуют. Накопление 18F-DOPA в полосатом теле коррелирует с числом клеток черной субстанции и активностью тирозингид-роксилазы в полосатом теле. Кроме того, поглощение 18F-DOPA коррелирует с возрастанием суммы баллов при оценке брадикинезии и ригидности. При этом не наблюдается сколько-нибудь значимой корреляции с показателями тремора, что указывает на его самостоятельный патогенез, связанный не только с дофаминергиче-ской системой [5].
Большинство случаев БП являются спорадическими, а около 10-15% больных имеют семейный анамнез [6]. Причинами развития БП могут быть мутации около 20 генетических локусов [7, 8]. Широко обсуждается роль в патогенезе БП митохондриальной дисфункции и ассоциированных с ней мутаций в генах PARK2, PINK1, DJ-1, LRRK2. Мутации в них чаще обнаруживаются при раннем дебюте заболевания.
Дисфункция обоняния может выявляться за 2-7 лет до двигательных проявлений БП [9]. Среди неврологически здоровых лиц с обонятельным дефицитом у 10-13% в будущем развивается БП. При БП обонятельные нарушения выявляются в 70-90% случаев [10], причем эти нарушения могут не ощущаться самим пациентом, поэтому для их выявления важным является проведение специального тестирования.
Материал и методы
Сформированная группа исследования по ПЭТ состояла из 33 человек - 21 женщины и 12 мужчин, не имевших выраженных соматических заболеваний, в возрасте от 21 до 80 лет (51,9 ± 14,9 года). Всем пациентам первоначально была выполнена магнитно-резонансная томография (МРТ) головного мозга для исключения структурных изменений и сопоставления МРТ-и ПЭТ-изображений. ПЭТ/КТ-исследование (КТ - рентгеновская компьютерная томография) с 18F-DOPA выполнялось как минимум через 4 ч после последнего приема пищи. Через 50 мин после введения 18F-DOPA проводилось статическое 3D-сканирование в течение 20 мин на ПЭТ/КТ-сканере Discovery 600 (GE Healthcare, США). Для коррекции аттенуации осуществлялось низкодозовое КТ-сканирование (120 кВ, 80 мА) с толщиной томографического слоя 3 мм. Полученные изображения анализировали на рабочей станции AW Volum Share 5 (GE Healthcare,
США) с помощью программного пакета РЕТ/СТ Review (GE Healthcare, США). Для более четкого сопоставления сцинтиграфического изображения со структурами головного мозга ПЭТ-серии совмещали с Т1-аксиальными тонкосрезовыми МРТ-изображениями с помощью программы Integrated Registration (GE Healthcare, США). Уровень аккумуляции РФП измеряли путем размещения области интереса в бледном шаре и головке хвостатого ядра. Кроме того, был измерен уровень поглощения 18F-DOPA в затылочной коре в качестве референсной зоны (считается, что этот регион отличается неспецифическим накоплением РФП). Анализировали как абсолютные значения активности в килобеккерелях на миллилитр (кБк/мл), так и нормализованные показатели - отношения активности стриа-тум/затылочная кора (SOR) и хвостатое ядро/затылочная кора (COR). Кроме того, учитывали отношение активности в стриатуме к активности в хвостатом ядре (SCR).
Полученные данные были занесены в базу Microsoft Excel и обработаны в программе IBM SPSS Statistics 23 классическими методами статистического анализа: определяли величины среднего значения, медианы и стандартного отклонения показателей; проверяли нормальность распределения с помощью критерия Шапиро-Уилка; устанавливали собственные значения матрицы ковариаций и коэффициенты корреляции Спирмена и Пирсона. Для оценки сочетанного разброса (объясненной дисперсии) проводили анализ главных компонент. Кроме того, были использованы мера выборочной адекватности Кайзера-Мейера-Олкина и критерий сферичности Бартлетта, а также критерий "каменистой осыпи" Кеттела для определения количества факторов в модели.
В анализ генетических нарушений были включены 60 пациентов с БП (18 мужчин и 42 женщины в возрасте от 20 до 83 лет), из которых 27 пациентов имели семейную форму заболевания, 33 пациента - спорадическую. Молекулярно-ге-нетическая часть работы выполнялась на базе научно-практической лаборатории молекуляр-но-генетических методов исследований Сибирского федерального университета (Красноярск). Поиск мутаций, вовлеченных в патогенез БП, проводили с помощью MLPA-анализа и секвени-рования по Сэнгеру; использовались коммерческие наборы SALSA MLPA P051 Parkinson mix 1 и
Таблица 1. Среднее значение медиана (М) и стандартное отклонение (о) показателей ПЭТ у здоровых добровольцев
Показатель ^Р^ С^ С^ ХЯЯ ХЯL ЗKR ЗKL SORR SORL CORR CORL SCRR SCRL годы
N 50,1 2,34 2,33 2,07 2,03 0,86 0,84 2,66 2,68 2,36 2,34 1,09 1,11
М 52,0 2,20 2,30 2,10 2,00 0,80 0,80 2,80 2,80 2,40 2,40 1,10 1,20
о 16,60 0,57 0,56 0,50 0,49 0,22 0,20 0,52 0,53 0,48 0,47 0,21 0,21
Обозначения. Здесь и в табл. 2, 4: ЗК — затылочная кора, Ск — скорлупа, ХЯ — хвостатое ядро. Здесь и в табл. 2-5: Ь — слева, R — справа.
SALSA MLPA P052 Parkinson mix 2 (MRC-Hol-land).
Для проверки обонятельной функции нами был выбран Sniffin's sticks test (Burghart Messtechnik, Германия). Основным преимуществом этой методики является возможность неоднократного использования теста для исследования обоняния у неограниченного числа лиц в течение срока годности набора. Обоняние было протестировано у 45 пациентов с БП (15 мужчин и 30 женщин в возрасте от 35 до 78 лет, из них 7 курильщиков, 23 человека назвали свое обоняние сниженным, а 22 считали его нормальным), у 40 человек с эссенциальным тремором (ЭТ) (12 мужчин и 28 женщин в возрасте от 22 до 82 лет, из них 7 курильщиков, 7 человек назвали свое обоняние сниженным, 3 - усиленным, 30 -нормальным) и у 64 здоровых добровольцев из группы контроля (33 мужчины и 31 женщина в возрасте от 20 до 79 лет, в том числе 17 курильщиков). Из контроля исключались лица, у которых в анамнезе имелись воспалительные заболевания слизистой оболочки носа и пазух.
Результаты и обсуждение
Результаты ПЭТ-обследования включают в себя данные по активности РФП в различных зонах головного мозга: скорлупе, хвостатом ядре и затылочной коре справа и слева. В исследовательских и диагностических целях используются как абсолютные значения активности, так и относительные показатели. Последние представляют собой соотношения абсолютных показателей, определяемых для каждого полушария головного мозга отдельно. Чтобы избежать ошибок в восприятии результатов ПЭТ-обследования, аббревиатурами, написанными кириллицей, обозначались абсолютные значения измеряемых показателей, латиницей - относительные значения, полученные из абсолютных. Для оценки характе-
ра распределения показателей и его статистической устойчивости была проведена серия измерений во всё возраставшей выборке. При этом величина выборки оценивалась с использованием обеих возможных стратегий: по каждой отдельной переменной и по совокупности данных для многомерного случая, т.е. с учетом связей, наблюдавшихся в данных. На первом этапе был проведен элементарный статистический анализ базы здоровых добровольцев (п = 33). Для этого по каждому из 12 показателей были определены величины среднего значения, медианы и стандартного отклонения (табл. 1). Затем каждый из этих показателей был проверен на нормальность распределения с помощью критерия Шапи-ро—Уилка; оказалось, что все абсолютные показатели не являются нормально распределенными, а все относительные — являются.
Для выявления линейных связей между показателями был проведен корреляционный анализ: подсчитывались коэффициенты ковариации и корреляции отдельно для абсолютных и относительных показателей. Собственные значения матрицы ковариаций позволяют точно оценить линейную размерность пространства исследуемых данных (табл. 2, 3).
Для относительных показателей, подчинявшихся нормальному закону распределения, были
Таблица 2. Собственные значения матрицы ковариа-ций абсолютных показателей (ПЭТ у здоровых добровольцев)
Показатель С^ ХЯR ХЯL З^ З^
СкЯ 0,80 0,86 0,68 0,66 0,27 0,26
СкЬ 0,92 0,72 0,71 0,28 0,28
ХЯЯ 0,58 0,56 0,22 0,22
ХЯЬ 0,55 0,22 0,22
3KR 0,10 0,09
3KL 0,09
vj) № 2 • 2022
169
Таблица 3. Собственные значения матрицы ковариа-ций относительных показателей (ПЭТ у здоровых добровольцев)
Показатель SORR SORL CORR CORL SCRR SCRL
SORR 0,07 0,06 0,06 0,05 0 0
SORL 0,07 0,05 0,05 0 0
CORR 0,07 0,05 -0,01 -0,01
CORL 0,06 0 -0,01
SCRR 0 0
SCRL 0
Таблица 4. Коэффициенты корреляции Пирсона между относительными показателями (ПЭТ у здоровых добровольцев)
Показатель SORR SORL CORR CORL SCRR SCRL
SORR 1,000 0,779** 0,884** 0,767** 0,100 -0,057
SORL 1,000 0,720** 0,820** 0,010 0,200
CORR 1,000 0,864** -0,373* -0,326
CORL 1,000 -0,317 -0,394*
SCRR 1,000 0,586**
SCRL 1,000
Примечание. Здесь и в табл. 5 коэффициент корреляции значим: * — на уровне 0,05; ** — на уровне 0,001.
Таблица 5. Коэффициенты корреляции Спирмена между абсолютными показателями (ПЭТ у здоровых добровольцев)
Показатель С^ СкЬ ХЯR ХЯЬ ЗЕИ З^
Q^R 1,000 0,973** 0,979** 0,979** 0,895** 0,915**
O^L 1,000 0,967** 0,963** 0,888** 0,892**
ХЯR 1,000 0,983** 0,883** 0,873**
ХЯL 1,000 0,882** 0,885**
3KR 1,000 0,964**
3KL 1,000
определены коэффициенты корреляции Пирсона (табл. 4), а для абсолютных показателей, распределение которых статистически значимо отличалось от нормального, - коэффициенты корреляции Спирмена (табл. 5).
Таким образом, для абсолютных показателей нормальными значениями активности РФП следует считать (медиана [1-й квартиль; 3-й квартиль]): активность в скорлупе справа - 2,24 [2,02; 2,80] кБк/мл, слева - 2,26 [2,02; 2,75] кБк/мл; в хвостатом ядре справа - 2,11 [1,78; 2,55] кБк/мл, слева - 2,01 [1,74; 2,49] кБк/мл; в затылочной
коре справа и слева - 0,Si [0,71; 1,00] и 0,Si [0,74; 1,02] кБк/мл соответственно. Для относительных показателей, имеющих нормальное распределение, получены следующие значения нормы (средняя величина ± стандартное отклонение): SOR справа - 2,бб ± 0,52, слева - 2,6s ± 0,53; COR справа - 2,36 ± 0,48, слева - 2,34 ± 0,47; SCR справа - i,09 ± ± 0,21, слева - 1,11 ± 0,21.
Генетический анализ. При проведении MLPA-анализа с использованием наборов SALSA MLPA P051 и P052 ни у одного из 60 пациентов не выявлено делеций и дупликаций в генах PARK2, PINK1, SNCA, ATP13A2, PARK7, LRRK2, UCHL и GCH1, а также точковых мутаций A30P в гене SNCA и G2019S в гене LRRK2. Анализ гена GBA путем секвенирования выявил б различных вариантов изменений структуры ДНК у 9 из б0 обследованных пациентов (табл. б).
Нужно отметить, что мутации по типу крупных делеций и дупликаций не могут быть определены методом секвенирования, но выявляются методом MLPA-анализа. Так, например, иранские исследователи при проведении аналогичной работы с использованием наборов SALSA MLPA P051 и P052 показали, что какие-либо геномные перестройки были обнаружены у 14 (13,7%) из 102 неродственных спорадических пациентов с ранним началом и у 18 (35,3%) из 51 семьи с БП [11]. В работе нидерландских ученых при использовании тех же наборов перестройки в гене пар-кин были выявлены у 13 (11%) из 116 пациентов с ранним началом БП [12], а в Китае при проведении MLPA-анализа гена PARK2 геномные перестройки обнаружены у 25 (3,3%) из 755 пациентов со спорадическими случаями БП, при этом для пациентов с ранним началом заболевания такое значение составило 11,4% [13]. При обследовании российских пациентов с использованием набора SALSA MLPA P051 частота встречаемости соответствующих мутаций составила 6,5%, однако в группе обследованных больных была несколько большая доля случаев с ранним началом и с отягощенным семейным анамнезом по БП, поэтому полученные значения могут рассматриваться как ориентировочные [14].
Для гена GBA наиболее распространенными точковыми мутациями, ассоциированными с БП, являются L444P ("тяжелая" мутация, в значительной мере снижающая активность ß-глю-коцереброзидазы) и N370S ("мягкая" мутация, которая приводит к незначительному уменьше-
Таблица 6. Выявленные варианты мутаций и полиморфизмов в гене GBA
№ Возраст, годы Пол Возраст дебюта (длительность), годы Мутация или полиморфизм Характер заболевания Количество пациентов, абс. (%)
1 49 Ж 44 (5) Ь444Р (ге421016, экзон 10, гетерозиготный вариант) — "тяжелая" мутация, ассоциированная с БП; Т369М (ге75548401, экзон 8, гетерозиготный вариант) — полиморфизм, возможно ассоциированный с БП Спорадический 1 (1,66)
2 33 М 30 (3) Ь444Р (ге421016, экзон 10, гетерозиготный вариант) — "тяжелая" мутация, ассоциированная с БП; Е326К (ге2230288, экзон 8, гетерозиготный вариант) — полиморфизм, возможно ассоциированный с БП Семейный 1 (1,66)
3 47 М 44 (3) Б409Н (ге1064651, экзон 9, гетерозиготный вариант) — "тяжелая" мутация, ассоциированная с БП Семейный 1 (1,66)
4 53 М 51 (2) Т369М (ге75548401, экзон 8, гетерозиготный вариант) — полиморфизм, возможно ассоциированный с БП Семейный 3 (5,00)
5 79 Ж 65 (14) Семейный
6 50 Ж 45 (5) Спорадический
7 61 Ж 55 (6) V460V (с.14970>С, ге1135675, экзон 10, гетерозиготный вариант) — часть комплексной мутации Яес^П (р.Ь444Р; р.А456Р; p.V460V), ассоциированной с БП Семейный 2(3,33)
8 37 Ж 36 (1) V460V (с.14970>С, ге1135675, экзон 10, гомозиготный вариант) — часть комплексной мутации Яес№П (р.Ь444Р; р.А456Р; р^460У), ассоциированной с БП Спорадический
9 66 Ж 56(10) с.*920>А (ге708606, экзон 11, гетерозиготный вариант) — 3'-ЦГК полиморфизм, возможно ассоциированный с БП Спорадический 1 (1,66)
нию активности кодируемого фермента) [15]. Среди обследованных нами пациентов какие-либо изменения первичной структуры ДНК в гене ОБА выявлены у 9 пациентов. Интересно, что у 1 пациентки выявлена замена c.*92G>A, о связи которой с БП информация появилась лишь недавно: согласно исследованию М.УМ.В. 'Шке et а1., подобные мутации на границе экзон—ин-трон могут быть причиной развития недвигательных симптомов БП [16]. Считается, что ОБА-ассоциированная БП не отличается фено-типически от идиопатической БП. Мы сравнили клиническое течение заболевания между группами пациентов с БП, имеющими и не имеющими какие-либо изменения в структуре гена ОБА; каких-либо особенностей в клинической картине заболевания обнаружено не было, что согласуется с данными других исследований [15]. В литературе отмечается ассоциация "тяжелых" мута-
ций с ранним дебютом БП (до 50 лет), что подтверждается полученными нами данными, в частности для пациентов с мутациями Ь444Р и D409H. В целом можно отметить, что частота встречаемости патогенетически значимых вариантов гена ОБА (Ь444Р и D409H) в представленной когорте пациентов составила 5%, что соответствует данным литературы.
Обонятельная функция. В 1-м субтесте был определен порог обоняния. В группе людей с БП среднее значение составило 2,44 балла, минимальное количество баллов, полученных испытуемым, — 0, максимальное — 7. Среднее значение баллов, набранных людьми с диагнозом ЭТ в данном субтесте, — 3,85, минимальное — 0, максимальное — 9. Минимально набранное количество баллов среди здоровых людей — 0, максимальное — 11, среднее значение данной группы по 1-му субтесту — 5,1.
^ № 2 * 2022
171
Во 2-м субтесте определялась дискриминация - способность выбрать 2 одинаковых запаха из 3 предлагаемых. Среднее значение в группе людей с БП - 8,76 балла, минимально был набран 1 балл, максимально - 13 баллов. Пациенты с ЭТ набрали в среднем 10 баллов, минимально в ходе 2-го субтеста было получено 4 балла, максимально - 15 баллов. Средний балл, набранный здоровыми людьми в данном субтесте, - 11,53, минимальный и максимальный баллы - 4 и 15 соответственно.
Для определения идентификации, т.е. способности определять запах по предложенным 4 наименованиям, был проведен 3-й субтест. В ходе эксперимента пациенты с БП лучше узнавали запах рыбы, хуже всего - запах лимона и яблока, минимальное значение суммы баллов в этой группе - 0, максимальное - 13, среднее значение - 6,87. Люди с ЭТ лучше всего узнавали запах чеснока, хуже всего - запах лимона, минимальное значение суммы баллов в этой группе - 5, максимальное - 14, среднее значение - 10,08. Здоровые люди лучше узнавали запах чеснока, хуже всего - запах лимона и лакрицы (что объясняется этническими и культурными особенностями населения Красноярского края), минимальное значение суммы баллов в данной группе - 6, максимальное - 16, среднее значение - 11,28.
В группе пациентов с БП аносмия наблюдалась у 14 человек (31,1%), гипосмия - у 30 (66,7%) и лишь 1 человек (2,2%) набрал 30 баллов, что является минимальным порогом нормы. Из пациентов с ЭТ только у 2 человек (5%) выявлена аносмия, у 31 человека (77,5%) - гипосмия и нормальное обоняние - у 7 (17,5%). В группе здоровых добровольцев у 3 (4,7%) была аносмия, у 32 человек (50%) гипосмия и 29 человек (45,3%) набрали сумму баллов, соответствующую норме.
Заключение
Значения показателей ПЭТ с применением ^^ОРА для различных участков головного мозга, полученные в представленном исследовании, можно считать стандартными для условно здоровых людей и использовать в качестве базовых значений, относительно которых следует определять отклонения от нормы у пациентов с БП и другими патологиями.
В процессе генетического исследования у пациентов с БП из Красноярского региона методом
MLPA проведен анализ генных перестроек и ряда точковых мутаций в основных генах БП. Мутации в анализируемых генах у обследованных пациентов не выявлены. Нужно учесть, что использованные нами коммерческие наборы позволяют анализировать не все возможные варианты в вышеперечисленных генах, что может несколько занижать частоту мутаций. Анализ мутаций гена GBA в выборке пациентов Красноярского региона показал их сопоставимую с европейскими популяциями частоту встречаемости. При этом из 2 мажорных мутаций гена GBA в нашей выборке пациентов не была выявлена мутация N370S. У 1 пациента был выявлен редкий вариант rs708606 на границе экзон-интрон в некоди-рующей области гена, возможно вносящий вклад в развитие БП.
Разработанная батарея обонятельных тестов позволяет эффективно и без высоких экономических затрат проводить исследования у пациентов с БП, ЭТ и здоровых лиц, дифференцируя данные группы. Определены соответствующие рефе-ренсные значения. Данные о характеристиках тремора в совокупности с результатами исследования обоняния могут служить целям повышения точности дифференциальной диагностики.
Список литературы
1. Станжевский А.А. и др. Применение позитронной эмиссионной томографии для диагностики паркинсонизма. Луч. диагн. тер. 2010;3(1):12-9.
2. Alves IL et al. Dual time point method for the quantification of irreversible tracer kinetics: a reference tissue approach applied to [18F]-FDOPA brain PET. J. Cereb. Blood Flow Metab. 2017;37(9):3124-34.
3. Веселова И.А. и др. Методы определения маркеров нейромедиаторного обмена в целях клинической диагностики. Журн. аналит. химии. 2016;71(12):1235-49.
4. Chalon S et al. The story of the dopamine transporter PET tracer LBT-999: from conception to clinical use. Front. Med. 2019;6:90-6.
5. Otsuka M et al. Differences in the reduced 18F-Dopa uptakes of the caudate and the putamen in Parkinson's disease: correlations with the three main symptoms. J. Neurol. Sci. 1996;136(1-2):169-73.
6. Gasser T. Update on the genetics of Parkinson's disease. Mov. Disord. 2007;22(Suppl 17):S343-50.
7. Klein C et al. Deciphering the role of heterozygous mutations in genes associated with parkinsonism. Lancet. Neurol. 2007;6(7):652-62.
8. Singleton AB et al. The genetics of Parkinson's disease: progress and therapeutic implications. Mov. Disord. 2013;28(1):14-23.
9. Ponsen MM et al. Idiopathic hyposmia as a preclinical sign of Parkinson's disease. Ann. Neurol. 2004;56(2):173-81.
10. Doty RL et al. Olfactory dysfunction in parkinsonism: a general deficit unrelated to neurologic signs, disease stage, or disease duration. Neurology. 1988;38(8):1237-44.
11. Darvish H et al. Detection of copy number changes in genes associated with Parkinson's disease in Iranian patients. Neurosci. Lett. 2013;551:75-8.
12. Elfferich P et al. Breakpoint mapping of 13 large parkin deletions/duplications reveals an exon 4 deletion and an exon 7 duplication as founder mutations. Neurogenetics. 2011;12(4):263-71.
13. Guo JF et al. Exon dosage analysis of parkin gene in Chinese sporadic Parkinson's disease. Neurosci. Lett. 2015;604:47-51.
14. Абрамычева Н.Ю. и др. Новый подход к молекуляр-но-генетическому скринингу у пациентов с болезнью Паркинсона. Неврол. журн. 2016;21(1):13-6.
15. Болезнь Паркинсона и расстройства движений. Руководство для врачей по материалам III Национального конгресса по болезни Паркинсона и рас-тройствам движений. Под ред. Иллариошкина С.Н., Левина О.С. М.: Соверо пресс; 2014. 405 с.
16. Wilke MVMB et al. Evaluation of the frequency of non-motor symptoms of Parkinson's disease in adult patients with Gaucher disease type 1. Orphanet J. Rare Dis. 2019;14(1):103.
yj) № 2 • 2022
173
