CC BY
44
DOI: 10.17650/1726-9784-2021-22-3-56-69
c«d:
Комплексный анализ эякулята мужчин из бесплодных пар в возрастном аспекте
BY 4.0
Е.А. Епанчинцева1-3, В.Г. Селятицкая1, С.В. Янковская1
ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины»; Россия, 630117Новосибирск, ул. Тимакова, 2;
2ООО «Новосибирский центр репродуктивной медицины» ГК «Мать и дитя»; Россия, 630037Новосибирск, ул. Героев Революции, 3;
3ФГАОУ ВО «Новосибирский национальный исследовательский государственный университет»; Россия, 630090 Новосибирск, ул. Пирогова, 1
Е га Е
Контакты: Елена Александровна Епанчинцева EpanE@yandex.ru
Введение. По данным Российской ассоциации урологов, частота бесплодных браков, одной из причин которых является мужской фактор, колеблется от 8 до 17,2 % в различных регионах России. Повышение возраста отца снижает вероятность зачатия ребенка, увеличивает риск невынашивания беременности и вероятность некоторых заболеваний ребенка. В связи с этим необходимо расширять имеющиеся знания о возрастных изменениях параметров эякулята, особенно у мужчин из бесплодных пар.
Цель исследования - изучить закономерности возрастных изменений спермиологического статуса мужчин из бесплодных пар и выявить наиболее вариабельные в возрастном аспекте показатели. Материалы и методы. Дизайн исследования - обсервационное, ретроспективное, одномоментное. Проведен анализ историй болезни 517 мужчин из пар с бесплодием в браке, проживающих в г. Новосибирске. Выборка разделена на 5 возрастных групп: 1-я группа (п = 108) - мужчины в возрасте <29,9 года; 2-я группа (п = 171) -30,0-34,9 года; 3-я группа (п = 130) - 35,0-39,9 года; 4-я группа (п = 68) - 40,0-44,9 года; 5-я группа (п = 40) ->45,0 года.
Результаты. Медиана возраста мужчин в общей выборке - 34 года, частота лиц старше 40 лет - 21 %. В общей выборке выявлено снижение относительно референсных значений доли морфологически нормальных форм сперматозоидов - 3,0 (1,5-5,0) % и увеличение индекса фрагментации ДНК сперматозоидов (ИФДС) - 16,0 (11,0-22,2) %. В группах от 1-й к 5-й отмечено возрастное снижение объема эякулята (3,5 (2,5-4,8) мл; 3,3 (2,4-4,2) мл; 3,2 (2,4-4,5) мл; 3,0 (1,7-4,9) мл; 2,7 (1,9-3,5) мл соответственно, р15 <0,005) и количества сперматозоидов (127,1 (58,8-264,0) млн; 122,5 (62,4-214,0) млн; 118,5 (52,8-217,5) млн; 998,0 (58,5-199,5) млн; 81,0 (36,5-137,9) млн соответственно, р1 5 2 5 <0,005). Для ИФДС характерен возраст-ассоциированный рост величины показателя (соответственно 14,4 (10,8-19,5) %; 15,0 (10,0-21,0) %; 17,2 (11,0-22,0) %; 18,5 (14,0-24,2) %; 19,2 (13,2-29,6) %, Р-4 <0,005).
Заключение. Для мужчин г. Новосибирска Сибирского федерального округа впервые показано, что снижение относительно референсных значений доли морфологически нормальных сперматозоидов, отмеченное в общей выборке, не зависит от возраста обследованных мужчин. Только 3 из изученных показателей спермиологического статуса мужчин из бесплодных пар имеют значимую возрастную зависимость: снижение объема эякулята, уменьшение общего количества сперматозоидов, повышение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов. Впервые продемонстрировано отсутствие достоверного влияния возраста на показатели НВА-теста, однако выявленные тенденции требуют дальнейшего изучения. Полученные результаты свидетельствуют, что возраст-ассо-циированное нарастание фрагментации ДНК сперматозоидов начинается уже у молодых мужчин - до 30 лет, что подчеркивает необходимость определения ИФДС в реальной клинической практике, а негативные процессы, связанные с влиянием возраста на количественные, морфологические и ультраструктурные характеристики сперматозоидов, проявляются с наибольшей частотой у мужчин после 40 лет.
Ключевые слова: мужское бесплодие, возраст отца, эякулят, спермограмма, морфология по строгим критериям Крюгера, МДК-тест, НВА-тест, фрагментация ДНК сперматозоидов
Для цитирования: Епанчинцева Е.А., Селятицкая В.Г., Янковская С.В. Комплексный анализ эякулята мужчин из бесплодных пар в возрастном аспекте. Андрология и генитальная хирургия 2021;22(3)56-69. РО!: 10.17650/ 1726-9784-2021 -22-3-56-69.
Comprehensive analysis of male ejaculate from infertile couples in the age aspect
E.A. Epanchintseva1'3, V.G. Selyatitskaya1, S.V. Yankovskaia1
'Federal Research Center for Fundamental and Translational Medicine; 2 Timakova St., Novosibirsk 630117, Russia;
2Novosibirsk Center for Reproductive Medicine, Mother and Child Group of Companies; 3 Geroyev Revolutsii St., Novosibirsk 630037, Russia;
3Novosibirsk State University; 1 Pirogova St., Novosibirsk 630090, Russia
Contacts: Elena Aleksandrovna Epanchintseva EpanE@yandex.ru
Introduction. According to Russian Association of Urology a number of infertile couples ranges from 8 to 17.2 % in various regions of Russia. One of the causes of which is the male factor. Raising the age of the father reduces the chance of conception, increases the risk of early termination of pregnancy and the risk of certain diseases of the child. In this regard the existing knowledge of age-related changes in ejaculate parameters needs to be developed. This is particularly true for men of infertile couples.
The study objective - to investigate the age patterns of change in the spermological status of infertile men and identify the most age-related variations.
Materials and methods. Research design - observation, retrospective, crossection. Analysis of the medical records of 517 Novosibirsk male residents from couples with infertility in marriage was made. The sampling is divided into 5 age groups: 1st group (n = 108) - men of <29.9 years old; 2nd group (n = 171) - 30.0-34.9 years old; 3rd group (n = 130) - 35.0-39.9 years old; 4th group (n = 68) - 40.0-44.9 years old; 5th group (n = 40) - >45.0 years old. Results. Median of male age in total sample - 34 years, frequency of persons over 40 years - 21 %. Overall sample shows a decline in reference values of proportion of morphologically normal forms - 3.0 (1.5-5.0) % and increase in sperm DNA fragmentation index (SDFI) - 16.0 (11.0-22.2) %. In groups from 1st to 5th there is an age-specific decrease in ejaculate volume (3.5 (2.5-4.8) ml; 3.3 (2.4-4.2) ml; 3.2 (2.4-4.5) ml; 3.0 (1.7-4.9) ml; 2.7 (1.9-3.5) ml, p15 <0.005) and sperm count (127.1 (58.8-264.0) million; 122.5 (62.4-214.0) million; 118.5 (52.8-217.5) million; 98.0 (58.5-199.5) million; 81.0 (36.5-137.9) million, p15 21 <0.005). SDFI has an age-associated increase in the value of the indicator (14.4 (10.8-19.5) %; 15.0 (10.0-21.0) %;17.2 (11.0-22.0) %; 18.5 (14.0-24.2) %; 19.2 (13.2-29.6) %, p,4 <0.005).
Conclusion. It was first time shown for the male population of Novosibirsk of Siberian Federal District that a reduction in the proportion of morphologically normal sperm below the reference values observed in the total sample and it did not depend on the age of the men examined. Only three of the examined indicators of sperm status studied infertile males had a significant age dependency: ejaculate volume decrease, reduction of total sperm, increased DNA fragmentation of sperm.
The lack of a reliable influence of age on HBA-test indicators was first shown. However the trends identified require further study. The results show that age-associated increase in DNA fragmentation of sperm starts with young men under 30, and underscores the need to define SDFI in actual clinical practice. And negative processes of age influence on the quantitative, morphological and ultrastructural characteristics of sperm occur most frequently in men after 40 years.
Keywords: male infertility, paternal age, sperm, spermogram, morphology according to strict Kruger criteria, MAR test, HBA test, sperm DNA fragmentation
For citation: Epanchintseva E.A., Selyatitskaya V.G., Yankovskaia S.V. Comprehensive analysis of male ejaculate from infertile couples in the age aspect. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2021;22(3):56-69. (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2021 -22-3-56-69.
Введение
По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), снижение показателей рождаемости и увеличение продолжительности жизни изменяют демографическую ситуацию во многих странах мира [1]. В связи с этим возникает проблема изучения степени влияния отцовского возраста на качество спермы и репродуктивную функцию. В медицинской литературе представлены исследования часто с противоречивыми результатами, особенно по наиболее распространенным тестируемым параметрам, таким как объем эякулята, концентрация, подвижность, доля морфологически нормальных форм и фрагментация ДНК сперматозоидов [2]. Доказано, что с возрастом у мужчин умень-
шается объем яичек [3] и происходят изменения толщины белочной оболочки, диаметра семенных канальцев, удельного объема семенных канальцев, долевого вклада семенных канальцев и стромы в архитектонику органов [4], изменяются уровни репродуктивных гормонов [5, 6], увеличивается количество диплоидий сперматозоидов [7].
Обобщенные сведения показывают, что старший возраст отца негативно влияет на вероятность зачатия ребенка, течение достигнутой беременности (повышается риск невынашивания беременности) и повышает вероятность развития некоторых заболеваний ребенка [8], включая шизофрению, аутизм, биполярные расстройства, склонность к суициду и употреблению
Е га Е
Е га Е
психоактивных веществ [9]. Однако по вопросам возрастных изменений параметров эякулята сведения крайне противоречивы. Так, по данным исследования [7], с возрастом достоверно уменьшается объем эякулята и увеличивается концентрация сперматозоидов, но не изменяется их подвижность, доля морфологически нормальных форм и индекс фрагментации ДНК сперматозоидов (ИФДС). По данным других авторов [10], объем эякулята, концентрация, подвижность, жизнеспособность и доля морфологически нормальных форм сперматозоидов не зависят от возраста, тогда как фрагментация ДНК, количество анеуплоидий и исходы вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), а именно отмененные переносы эмбрионов, клинические беременности и выкидыши, достоверно хуже у мужчин старше 40 лет. Есть интересные сведения о том, что у мужчин старше 40 лет даже при использовании донорских ооцитов ниже эффективность лечения бесплодия в паре в программах ВРТ [11]. В попу-ляционном исследовании, проведенном в Самарской области РФ [12], показано, что возраст не оказывает значимого влияния на концентрацию, прогрессивную подвижность, долю морфологически нормальных форм и жизнеспособность сперматозоидов. По данным московских исследователей [13], у бесплодных мужчин старше 45 лет достоверно ниже количество сперматозоидов в эякуляте и выше уровень фрагментации ДНК, тогда как по прогрессивной подвижности и доле морфологически нормальных форм сперматозоидов различий с более молодыми мужчинами не выявлено. По данным других московских исследователей, с увеличением возраста все параметры эякулята (объем эякулята, концентрация, подвижность и доля морфологически нормальных форм сперматозоидов) имеют тенденцию к снижению, что особенно выражено в группе пациентов 41—50 лет [14].
Вопросы влияния отцовского возраста на качественные и количественные характеристики спермы приобретают еще большее значение в случаях бесплодных браков и мужского бесплодия. По данным Российской ассоциации урологов, в Российской Федерации частота бесплодных браков высока и колеблется от 8 до 17,2 % в различных регионах [15]. Согласно статистическим данным за 2000—2018 гг., заболеваемость мужским бесплодием на 100 тыс. мужского населения также высока, при этом ее уровень значительно различается в разных регионах РФ. Наиболее высокие показатели отмечены в Северо-Кавказском и Уральском федеральных округах (ФО), где они в 3 раза превосходят общероссийский уровень, а в Дальневосточном ФО заболеваемость бесплодием у мужчин почти в 3 раза ниже среднероссийских показателей [16]. В Сибирском ФО показатель первичной заболеваемости на 100 тыс. мужского населения составил 39,1 случая, превысив среднероссийский уровень, равный 28,5 случая [16].
Цель исследования — изучить закономерности возрастных изменений спермиологического статуса мужчин из бесплодных пар и выявить наиболее вариабельные в возрастном аспекте показатели.
Материалы и методы
Дизайн исследования — обсервационное, ретроспективное, одномоментное. Проведен анализ историй болезни 517 мужчин — амбулаторных пациентов, обратившихся в период с 2014 по 2020 г. в ООО «Новосибирский центр репродуктивной медицины» ГК «Мать и дитя» с проблемой отсутствия наступления беременности в браке более 12 мес. Все пациенты, проходившие обследование, дали информированное согласие на обработку персональных данных, в том числе в статистических и научных целях, при условии обязательной анонимности персональных данных. Все обследованные мужчины проживали в г. Новосибирске Сибирского ФО. Критериями исключения были криптозооспермия; азооспермия; лейкоспермия; отсутствие прогрессивно подвижных сперматозоидов в эякуляте и вязкость эякулята более 10 см, в связи с возможным искажением результатов MAR- и НВА-тестов; онкологические заболевания мочеполовой и эндокринной систем; прием препаратов, содержащих половые стероиды или влияющих на их уровень.
Все обследованные мужчины были разделены на возрастные группы, кратно 5 годам: в 1-ю группу (n = 108) включены пациенты в возрасте 20,0—24,9 года (n = 4) и 25,0—29,9 года (n = 104); во 2-ю группу (n = 171) - 30,0-34,9 года; в 3-ю группу (n = 130) - 35,0— 39,9 года; в 4-ю группу (n = 68) — 40,0—44,9 года; в 5-ю группу (n = 40) объединены пациенты в возрасте 45,0-49,9 года (n = 27), 50,0-54,9 года (n = 11) и 55,059,9 года (n = 2). Объединение пациентов в 1-й и 5-й группах проводили ввиду малочисленности мужчин моложе 25 и старше 50 лет. При этом ставилась задача проведения анализа всей выборки бесплодных пациентов.
У всех пациентов проанализированы жалобы, анамнез жизни, анамнез заболевания; осуществлен осмотр пациентов. Сбор и анализ эякулята проводили в соответствии с критериями ВОЗ 2010 г. [17]. Комплексный анализ эякулята включал спермограмму; оценку морфологии сперматозоидов по строгим критериям Крюгера; MAR-тест (отношение нормальных активно-подвижных сперматозоидов, покрытых ан-тиспермальными антителами, к общему количеству нормальных активно-подвижных сперматозоидов); НВА-тест (индекс зрелости сперматозоидов); анализ фрагментации ДНК сперматозоидов. Анализ проводили с помощью флуоресцентного микроскопа Nikon Eclipse 80i (Япония). Для подсчета лейкоцитов использовали набор для определения гранулоцитов в сперме цитохимическим методом LeucoScreen (FertiPro N. V., Бельгия). Подсчет живых сперматозоидов производили
с помощью набора Vital Screen (FertiPro N.Y, Бельгия). Окраску морфологических мазков проводили с использованием набора DiffScreen (FertiPro N.V., Бельгия). Для проведения MAR-теста использовали набор для определения антиспермальных антител класса IgG SpermMarIgGTest (FertiPro N.V., Бельгия), референс-ный диапазон <10 %. Для проведения НВА-теста использовали набор для определения степени связывания сперматозоидов с гиалуроновой кислотой (hyaluron binding assay) (Origio, Великобритания), референсный диапазон >65 %. Для анализа фрагментации ДНК сперматозоидов использовали метод SCD (sperm chromatin dispersion) (HaloSperm, Halotech, Испания; GoldCyto, Goldcyto-Biotechcorp, Китай), референсный диапазон <15 %.
Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с помощью пакета прикладных программ Statistica v. 10.0 (StatSoft, США). Абсолютные значения показателей представлены в виде медианы, 25-го и 75-го процентилей. Оценку нормальности распределения проводили по критерию Шапиро—Уилкса. Для оценки статистической значимости различий между группами использовали критерии Краскела—Уоллиса — для множественного и Манна—Уитни с поправкой Бонферро-ни — для парного сравнения. Корреляционный анализ проводили методом ранговых корреляций Спирмена. Минимальную вероятность справедливости нулевой гипотезы принимали приp <0,05.
Результаты
Процентное соотношение числа пациентов разных возрастных групп представлено на рис. 1. Медиана возраста мужчин обследуемой выборки составила 34 (30—38) года; пациенты старше 40 лет составили 21 % от общего числа пациентов.
Результаты комплексного анализа эякулята мужчин всей обследуемой выборки представлены в табл. 1. Выявлено снижение доли морфологически нормальных форм сперматозоидов и увеличение ИФДС относительно референсного диапазона. По всем остальным изученным показателям отклонений от референсных значений выявлено не было (см. табл. 1).
В табл. 2 представлены результаты корреляционного анализа изучаемых показателей эякулята с возрастом пациентов. Определены статистически значимые обратные корреляционные связи с возрастом объема эякулята и количества сперматозоидов в эякуляте, а также прямая связь с возрастом ИФДС (см. табл. 2).
Результаты комплексного анализа эякулята пациентов в возрастных группах представлены в табл. 3. В отношении объема эякулята прослеживается динамика снижения величины показателя с возрастом, различия статистически значимы между 1-й и 5-й группами. Концентрация сперматозоидов в 1 мл эякулята достаточно стабильна и снижается только у мужчин старше 45 лет, но различия недостоверны; по количеству сперматозоидов в эякуляте выявлено снижение с возрастом и достоверные различия 1-й и 2-й групп по сравнению с 5-й группой. Для показателя прогрессивной подвижности сперматозоидов характерны стабильные уровни у мужчин до 40 лет и более низкие на уровне тенденции у мужчин старше 40 лет. В отношении ИФДС выявлен статистически значимый воз-раст-ассоциированный рост показателя. По количеству дней воздержания перед сдачей эякулята, вязкости, доле слабоподвижных сперматозоидов, доле морфологически нормальных форм сперматозоидов, результатам MAR- и НВА-тестов группы между собой достоверно не различались (см. табл. 3).
На рис. 2 представлена вариабельность результатов MAR-теста в зависимости от возраста. От 1-й к 5-й группе прослеживаются тенденции к снижению частоты пациентов с минимальной выработкой антител к сперматозоидам и росту пограничных (средних) и высоких значений MAR-теста, однако общий характер распределения минимальных, пограничных и высоких уровней MAR-теста слабо зависит от возраста (см. рис. 2).
На рис. 3 представлена вариабельность результатов НВА-теста в зависимости от возраста. Группы 4-я и 5-я объединены в 1 группу ввиду малочисленности. В 1-й группе доля пациентов с низкими и пограничными (средними) показателями НВА-теста минимальна. Во всех группах с увеличением возраста пациентов
| 1-я группа (20,0-29,9 года) / 1stgroup (20.0-29.9years old)
■ 2-я группа (30,0-34,9 года) / 2ndgroup (30.0-34.9years old)
■ 3-я группа (35,0-39,9 года) / 3rdgroup (35.0-39.9years old) S 4-я группа (40,0-44,9 года) / 4thgroup (40.0-44.9years old) V 5-я группа (45,0-59,9 года) / 5thgroup (45.0-59.9years old)
E
W
E
Рис. 1. Распределение пациентов разных возрастных групп по частоте встречаемости в общей выборке пациентов (n = 517). Подробнее о распределении пациентов по группам см. в разделе «Материалы и методы»
Fig. 1. Distribution of patients of different age groups by frequency of occurrence among the general sample of patients (n = 517). For more information about the distribution of patients into groups see the section "Materials and methods"
3
Таблица 1. Результаты комплексного анализа эякулята пациентов всей выборки (n = 517) Table 1. Results of a complex analysis of the ejaculate of general sample ofpatients (n = 517)
E
W
E
Показатель
Parameter
Медиана (25-75-й процентили)
Median (25-75 percentiles)
Критерий Шапиро—Уилкса, W ShaPiro~Wi|kes criterion, W
Половое воздержание, дни Sexual abstinence, days 3,0 (3,0- -5,0) W = P = = 0,79 0,000
Объем эякулята, мл N: от 1,5 мл Ejaculate volume, ml N: from 1.5 ml 3,2 (2,3- -4,5) W P = = 0,95 0,000
Вязкость N: менее 2 см Viscosity N: less than 2 cm 1,0 (1,0- -3,0) W P = = 0,62 0,000
Концентрация сперматозоидов, млн/мл N: более 15 млн/мл The concentration of spermatozoa, million/ml N: more than 15 million/ml 39,0 (19,0 -62,0) W P = = 0,89 0,000
Общее количество сперматозоидов, млн N: более 39 млн Total number of spermatozoa, million N: more than 39 million 115,6 (54,0- -210,0) W P = = 0,80 0,000
Доля прогрессивно подвижных сперматозоидов, % N: более 32 % Percentage of progressively motile spermatozoa, % N: more than 32 % 37,0 (23,6 -50,7) W P = = 0,99 0,001
Доля слабоподвижных сперматозоидов, % N: более 8 % Percentage of weakly motile spermatozoa, % N: more than 8 % 19,5 (9,0- 49,0) W P = = 0,89 0,000
Круглые клетки, млн/мл N: менее 5 млн/мл Round cells, million/ml N: less than 5 million/ml 0,3 (0,1- -0,7) W P = = 0,09 0,000
Доля морфологически нормальных сперматозоидов, % N: >4 % Percentage of morphologically normal spermatozoa, % N: >4 % 3,0 (1,5- 5,0) W P = = 0,84 0,000
MAR-тест, % N: менее 50 % MAR test, % N: less than 50 % 1,0 (0,0- 6,0) W P = = 0,45 0,000
НВА-тест, % N: более 65 % HBA test, % N: more than 65 % 83,0 (72,0- -89,0) W P = = 0,84 0,000
Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, % N: менее 15 % Sperm DNA fragmentation index, % N: less than 15 % 16,0 (11,0 -22,0) W P = = 0,92 0,000
Примечание. Здесь и в таблице 2—4: MAR-тест — смешанный антиглобулиновый тест; НВА-тест сперматозоидов с гиалуроновой кислотой; N — референсные значения. Note. Here and in table 2—4: MAR test — mixed antiglobulin reaction test; HBA test — hyaluronan binding assay test; N - — тест на связывание reference values.
Таблица 2. Корреляционный анализ возраста и параметров эякулята мужчин из бесплодных пар Table 2. Correlation analysis of age and parameters of male ejaculate from infertile couples
Показатель Коэффициент ранговой корреляции
Parameter Spearman's rank correlation coefficient
Половое воздержание, дни Sexual abstinence, days -0,064
Объем эякулята, мл N: от 1,5 мл Ejaculate volume, ml N: from 1.5 ml -0,128**
Вязкость N: менее 2 см Viscosity N: less than 2 cm 0,087
Концентрация сперматозоидов, млн/мл N: более 15 млн/мл The concentration of spermatozoa, million/ml N: more than 15 million/ml -0,025
Общее количество сперматозоидов, млн N: более 39 млн Total number of spermatozoa, million N: more than 39 million -0,109*
Доля прогрессивно подвижных сперматозоидов, % N:более 32 % Percentage of progressively motile spermatozoa, % N: more than 32 % -0,085
Доля слабоподвижных сперматозоидов, % N:более 8 % Percentage of weakly motile spermatozoa, % N: more than 8 % -0,004
Круглые клетки, млн/мл N: менее 5 млн/мл Round cells, million/ml N: less than 5 million/ml -0,026
Доля морфологически нормальных сперматозоидов, % N: >4 % Percentage of morphologically normal spermatozoa, % N: >4 % -0,038
MAR-тест, % N: менее 50 % MAR test, % N: less than 50 % 0,073
НВА-тест, % N:более 65 % HBA test, % N: more than 65 % -0,064
Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, % N: менее 15 % Sperm DNA fragmentation index, % N: less than 15 % 0,170**
*Различия статистически значимы (р <0,05); **различия статистически значимы (р <0,01), метод ранговых корреляций Спирмена. *Statistically significant differences (р <0.05); **statistically significant differences (р <0.01), Spearman's rank correlation method.
Таблица 3. Результаты комплексного анализа эякулята пациентов в зависимости от возраста Table 3. The results of a complex analysis ofpatients ejaculate depending on their age
Значение показателя, медиана (25-75-й процентили) Тест Краскела-
Показатель Parameter value, median (25- 75 percentiles) Тест Манна—
1-я группа (n = 108) 1st group (n = 108) 2-я группа (n = 171) 2nd group (n = 171) 3-я группа (n = 130) 3rd group (n = 130) 4-я группа (n = 68) 4th group (n = 68) 5-я группа (n = 40) 5th group (n = 40) Уитни,р
Mann-Whitney test,р
Половое воздержание, дни Sexual abstinence, days 3,0 (3,0-5,0) 3,0 (3,0-4,0) 4,0 (3,0-5,0) 3,0 (2,0-5,0) 3,0 (3,0-3,0) 0,4572 -
Объем эякулята, мл N: от 1,5 мл Ejaculate volume, ml N: from 1.5 ml 3,5 (2,5-4,8) 3 3 (2,4-4,2) 3,2 (2,4-4,5) 3,0 (1,7-4,9) 2,7 (1,9-3,5) 0,0280* p15 = 0,0012
Вязкость N: менее 2 см Viscosity N: less than 2 cm 1,0 (1,0-1,0) 1,0 (1,0-4,3) 1,0 (1,0-3,5) 1,0 (1,0-2,0) 1,0 (1,0-3,0) 0,1423 -
Концентрация сперматозоидов, млн/мл N: более 15 млн/мл The concentration of spermatozoa, million/ml N: more than 15 million/ml 39,5 (19,5-58,5) 43,0 (18,0-63,0) 38,0 (18,0-63,0) 38,0 (20,5-74,0) 28,5 (12,0-48,0) 0,2569 -
Общее количество сперматозоидов, млн N: более 39 млн Total number of spermatozoa, million N: more than 39 million 127,4 (58,8-264,0) 122,5 (62,4-214,0) 118,0 (51,8-217,5) 98,0 (58,5-199,5) 81,0 (36,5-137,9) 0,0399* p. , = 0,0032 p25 = 0,0043
Доля прогрессивно подвижных сперматозоидов, % N: более 32 % Percentage of progressively motile spermatozoa, % N: more than 32 % 37,0 (28,0-53,0) 38,0 (25,0-52,0) 38,0 (23,0-50,0) 35,1 (20,0-45,2) 35,0 (20,0-50,0) 0,2154 -
к •a Доля слабоподвижных сперматозоидов, % N:более 8 % Percentage of weakly motile spermatozoa, % N: more than 8 % 18,8 (9,0-50,0) 18,4 (7,8-49,5) 20,7 (9,3-50,0) 25,0 (11,1-49,0) 15,0 (7,0-47,0) 0,7984 -
E И E u Круглые клетки, млн/мл N: менее 5 млн/мл Round cells, million/ml N: less than 5 million/ml 0,3 (0,1-0,8) 0,2 (0,0-0,6) 0,3 (0,1-0,7) 0,3 (0,1-0,6) 0,2 (0,1-0,4) 0,426 -
к га •a га Доля морфологически нормальных сперматозоидов, % N: >4 % Percentage of morphologically normal spermatozoa, % N: >4 % 3,0 (2,0-5,0) 3,0 (2,0-5,0) 3,0 (1,5-4,0) 3,0 (1,7-5,0) 3,0 (1,5-5,0) 0,8983 -
^ s MAR-тест, % N: менее 50 % MAR test, % N: less than 50 % 1,0 (0,0-3,5) 1,0 (0,0-5,0) 1,8 (0,0-6,8) 1,0 (0,0-6,0) 1,0 (0,0-8,0) 0,6655 -
Окончание табл. 3 End of table 3
Значение пок
, медиана (25-75-й процентили)
Parameter value, median (25-75 percentiles)
1-я группа (n = 108)
2-я группа (n = 171)
3-я группа (n = 130)
(n - 108) (n - 1/1) (n - 130) (n - OS) (n - 40)
1st group 2nd group I 3rd group I 4th group 5th group
(n - 108) I (n - 171) J (n - 130) I (n - 68) J (n - 40)
4-я группа (n = 68)
5-я группа (n = 40)
Тест Краскела-Уоллиса, р
Тест Манна-Уитни,р
НВА-тест, % N:более 65 % HBA test, % N: more than 65 % 84,0 (79,3-90,5) 82,0 (70,0-88,0) 80,1 (70,0-89,0) 86,0 (79,0-90,0) 79,0 (62,0-90,0) 0,2912
Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, % N: менее 15 % Sperm DNA fragmentation index, % N: less than 15 % 14,4 (10,8-19,5) 15,0 (10,0-21,0) 17,2 (11,0-22,0) 18,5 (14,0-24,2) 19,4 (13,2-29,6) 0,0224* p1 4 = 0,0036
*Различия статистически значимы. *Statistically significant differences.
MAR-тест / MAR test
1-я группа /
1st group
2-я группа /
2nd group
3-я группа /
3rdgroup
4-я группа /
4th group
5-я группа / 5th group
I Высокие уровни ACAT (50,0-100 %) / High level of ASA (50.0-100 %) Средние уровни ACAT (10,0-49,9 %) / Middle level of ASA (10.0-49.9 %) Минимальные уровни ACAT (0-9,9 %) / Minimum level of ASA (0-9.9 %)
Рис. 2. Распределение пациентов в разных возрастных группах по уровню выработки антиспермальных антител (АСАТ) по данным смешанного антиглобулинового теста (MAR-теста)
Fig. 2. Distribution of patients by the level of production of antisperm antibodies (ASA) according to the mixed antiglobulin reaction (MAR) test in different age groups
E
W
E
прослеживается снижение доли пациентов с высоким уровнем НВА-теста и увеличение — с низкими и пограничными значениями (см. рис. 3).
На рис. 4 представлена вариабельность ИФДС в зависимости от возраста. От 1-й к 5-й группе происходит снижение доли пациентов с нормальными (низкими) значениями ИФДС. От 1-й к 4-й группе прослеживается увеличение
частоты случаев с высоким ИФДС, отмечен резкий рост показателя в 5-й группе. Частота случаев с пограничным значением показателя увеличивается от 1-й к 4-й группе, незначимо снижаясь в 5-й группе (см. рис. 4).
Результаты корреляционного анализа изучаемых показателей эякулята в разных возрастных группах мужчин представлены в табл. 4. В 1-й группе выявлена
HBA-тест / HBA test
100 90 80
1 70
0
is 60
1
5 50
ca
1 40
QJ
S
Ü 30
¡5
" 20 10 0
20,8 57,3 24,7 54,3 25,7 63,0
18,5 18,5
20,0
Высокий уровень HBA-теста (80,0-100 %) / High levelofHBA (80.0-100 %) Средний уровень HBA-теста (65,0-79,9 %) / Middle level of HBA (65.0-79.9 %) l Низкий уровень HBA-теста (0-64,9 %) / Low level of HBA (0-64.9 %)
1-я группа /
V group
2-я группа/
2ndgroup
3-я группа / 4-я и 5-я группы /
3rd group 4th and 5th groups
Рис. 3. Распределение пациентов в разных возрастных группах по результатам теста на связывание сперматозоидов с гиалуроновой кислотой (НВА-теста)
Fig. 3. Distribution of patients by the level of the hyaluronan binding assay (НВА) test score in different age groups
ИФДС / SDFI
E
W
E
1-я группа /
V group
2-я группа /
2nd group
3-я группа /
3rdgroup
4-я группа /
4th group
5-я группа /
5th group
l Высокие значения ИФДС (30,0-100 %) / High level of SDFI (30.0-100 %) Средние значения ИФДС (15,0-29,9 %) / Middle level of SDFI (15.0-29.9 %) Низкие значения ИФДС (0-14,9 %) / Low level ofSDFI (0-14.9 %)
Рис. 4. Распределение пациентов в разных возрастных группах по значению индекса фрагментации ДНК сперматозоидов (ИФДС) Fig. 4. Distribution ofpatients by the level of the sperm DNA fragmentation index (SDFI) in different age groups
1 статистически значимая прямая корреляционная связь — ИФДС с возрастом обследованных мужчин и 1 обратная связь — с днями воздержания; во 2-й группе — прямая корреляционная связь показателя MAR-теста с возрастом; в 3-й группе — обратная корреляционная связь показателя НВА-теста с возрастом; в 4-й группе — 4 обратные
корреляционные связи: объема эякулята, общего количества сперматозоидов, количества круглых клеток и показателя НВА-теста с возрастом. В 5-й группе выявлена 1 статистически значимая отрицательная корреляционная связь — доли слабоподвижных сперматозоидов с возрастом (см. табл. 4).
Таблица 4. Корреляционный анализ параметров эякулята мужчин из бесплодных пар в зависимости от возрастного периода Table 4. Correlation analysis of the age and parameters of the ejaculate of men from infertile couples depending on the age period
Коэффициент корреляции
Показатель 1-я группа (n = 108) 1st group (n = 108) 2-я группа (n = 171) 2nd group (n = 171) 3-я группа (n = 130) 3rd group (n = 130) 4-я группа (n = 68) 4th group 5-я группа (n = 40) 5th group (n = 40)
Половое воздержание, дни Sexual abstinence, days -0,392* -0,210 -0,352 -0,161 0,593
Объем эякулята, мл N: от 1,5 мл Ejaculate volume, ml N: from 1.5 ml 0,012 0,014 -0,072 -0,443*** -0,058
Вязкость N: менее 2 см Viscosity N: less than 2 cm -0,182 0,090 0,263 0,355 0,249
Концентрация сперматозоидов, млн/мл N: более 15 млн/мл The concentration of spermatozoa, million/ml N: more than 15 million/ml -0,052 -0,094 0,051 -0,082 0,135
Общее количество сперматозоидов, млн N: более 39 млн Total number of spermatozoa, million N: more than 39 million 0,016 -0,088 -0,018 -0,375** 0,046
Доля прогрессивно подвижных сперматозоидов, % N:более 32 % Percentage of progressively motile spermatozoa, % N: more than 32 % 0,025 0,140 -0,084 0,069 -0,308
Доля слабо-подвижных сперматозоидов, % N:более 8 % Percentage of weakly motile spermatozoa, % N: more than 8 % 0,034 -0,146 0,032 0,021 -0,435**
Круглые клетки, млн/мл N: менее 5 млн/мл Round cells, million/ml N: less than 5 million/ml -0,075 -0,075 -0,138 -0,253* 0,104
Доля морфологически нормальных сперматозоидов, % N: >4 % " Percentage of morphologically normal spermatozoa, % N: > 4 % -0,116 -0,033 0,046 -0,086 -0,061
MAR-тест, % N: менее 50 % MAR test, % N: less than 50 % -0,107 0,209* -0,058 -0,203 -0,178
НВА-тест, % N:более 65 % HBA test, % N: more than 65 % 0,120 -0,002 -0,267* -0,408** -0,106
Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, % N: менее 15 % Sperm DNA fragmentation index, % N: less than 15 % 0,244* 0,059 0,017 -0,137 0,273
*Различия статистически значимы (р <0,05); **различия статистически значимы (р <0,01); ***различия статистически значимы (р <0,001), метод ранговых корреляций Спирмена.
*Statistically significant differences (р <0.05); **statistically significant differences (р <0.01); ***statistically significant differences (р <0.001),
Spearman's rank correlation method.
Е га Е
Обсуждение
По нашим данным, более 1/5 всех пациентов из бесплодных пар составляют мужчины в возрасте старше 40 лет, что свидетельствует о тенденции к увеличению возраста отцовства у российских мужчин. Полученные результаты согласуются с данными литературы [2, 8, 18]. В связи с этим возникает необходимость крупномасштабных исследований проблемы возраста отцовства в Российской Федерации.
Полученные нами результаты, свидетельствующие о том, что для всей когорты обследованных мужчин из бесплодных пар, проживающих в г. Новосибирске, характерно снижение доли морфологически нормальных форм сперматозоидов и увеличение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов относительно референс-ных значений, согласуются с ранее опубликованными нами сведениями [19].
Снижение доли морфологически нормальных форм сперматозоидов у мужчин вне зависимости от возраста может быть связано с действием на организм различных экзогенных факторов: химических, физических и бытовых [20], а также эндогенных, среди которых важную роль играет окислительный стресс сперматозоидов [21].
Снижение доли морфологически нормальных форм сперматозоидов является крайне негативным признаком, указывающим на ассоциацию с хромосомной патологией сперматозоидов. Так, в работе [22] показано, что у мужчин с низким содержанием нормальных сперматозоидов значительно снижена частота эмбрионов с нормальным набором хромосом, повышена встречаемость трисомий по половым хромосомам, моносомий и трисомий по аутосомам, а также обнаружена тенденция к снижению частоты появления эмбрионов мужского пола.
Полученные нами данные об увеличении уровня фрагментации ДНК сперматозоидов согласуются с данными зарубежных авторов (п = 1010, ИФДС — 18,61 ± ± 12,46 %, Китай [23]; п = 4345, ИФДС - 20,7 ± 12,4 %, Канада [24]), демонстрирующими повышенный средний уровень фрагментации ДНК сперматозоидов у мужчин из бесплодных пар. Известно, что повышенный уровень фрагментации ДНК сперматозоидов ассоциирован с потерями беременности и может быть следствием негативного влияния курения, алкоголя, эмоциональных стрессов, нарушений сна, редкой частоты половых актов, вредных условий работы, а также наличия хронических заболеваний и инфекций репродуктивного тракта [25].
Одним из патогенетических механизмов, лежащих в основе повышения ИФДС, является окислительный стресс, как одно из проявлений системного воспаления [25]. Избыточное накопление жировой ткани, которое характерно для многих современных мужчин, способствует активации и поддержанию процессов системного
воспаления [26] и может быть одним из факторов, способствующих нарушению процессов сперматогенеза. Ранее нами было показано, что ожирение является одним из ведущих факторов риска формирования ин-фертильности у мужчин из бесплодных пар в г. Новосибирске [27].
Выявленное у обследованных нами мужчин воз-раст-ассоциированное снижение объема эякулята согласуется с данными литературы [7, 28] и может быть связано с возрастным изменением работы предстательной железы. Количество сперматозоидов в эякуляте также статистически значимо снижается с возрастом. Указанные изменения в наибольшей степени проявляются у мужчин в возрастных группах после 40-45 лет и указывают на снижение фертильного потенциала с возрастом. При этом сочетание снижения объема эякулята и количества сперматозоидов позволяет сохранять стабильную концентрацию сперматозоидов, тенденция к снижению которой проявляется только в возрасте старше 45 лет. Возможными механизмами реализации выявленных нарушений могут быть изменение гормонального статуса и работы гипоталамо-гипофизарно-яичниковой оси у мужчин с возрастом [5, 6]. Возможно также негативное влияние на сперматогенез заболеваний различных органов и систем [29], количество и тяжесть которых существенно повышаются с возрастом человека. Имеющиеся в литературе сведения противоречивы: в исследовании [28] показано, что с возрастом происходит увеличение концентрации сперматозоидов и не изменяется их общее количество в эякуляте; согласно другим работам [10, 30] — концентрация и количество сперматозоидов стабильны и эти показатели не связаны с возрастом. По данным российских авторов [13], у бесплодных мужчин старше 45 лет также выявлено снижение количества сперматозоидов в эякуляте.
Методом корреляционного анализа были определены характерные для каждой возрастной группы ассоциированные с возрастом процессы формирования нарушений параметров эякулята у мужчин из бесплодных пар. Для молодых мужчин в возрасте до 30 лет это фрагментация ДНК сперматозоидов; затем выявляются прямая корреляционная связь между возрастом и уровнем антиспермальных антител (30,0—34,9 года), обратная связь между возрастом и зрелостью сперматозоидов (35,0—39,9 года); негативные процессы, связанные с влиянием возраста на количественные, морфологические и ультраструктурные характеристики сперматозоидов, проявляются с наибольшей частотой у мужчин преимущественно после 40 лет.
По нашим данным, результаты МАК-теста не превышали критичные значения и не различались между возрастными группами, что совпадает с данными литературы [31], а выявленная положительная корреляционная связь результатов МАК-теста в определенной
возрастной группе мужчин требует проведения дополнительных исследований и, возможно, ассоциирована с увеличением эпизодов нарушений гематотестикуляр-ного барьера вследствие травм или оперативных вмешательств, дебюта аутоиммунных заболеваний и т. д.
Известно, что дополнительный отбор сперматозоидов по способности связывания с гиалуроновой кислотой в программах ВРТ снижает частоту выкидышей [32], также снижение показателя НВА-теста связано с выраженностью нарушений сперматогенеза [19]. В доступной нам литературе не опубликовано сведений о взаимосвязи результатов НВА-теста с возрастом мужчин. Значимых изменений результатов НВА-теста при обследовании нами мужчин разных возрастных групп выявлено не было, однако важной представляется тенденция к снижению доли пациентов с высокими значениями и увеличению доли пациентов с пограничными и низкими значениями НВА-теста с возрастом, что требует проведения дополнительных исследований.
Из руководства Европейского общества репродукции человека и эмбриологии по привычному невынашиванию беременности (ESHRE guideline: recurrent pregnancy loss, 2018) известно, что повышенный ИФДС связан с прерываниями беременности [33]. Результаты нашего исследования, показывающие увеличение ИФДС от 1-й к 5-й группе пациентов, соответствуют мировым данным о положительной корреляции ИФДС с возрастом мужчин [23, 34]. Аналогичные результаты получены также при обследовании бесплодных мужчин с нормозооспермией [24]. Важно отметить, что согласно отечественным клиническим рекомендациям «Мужское
бесплодие» определение ИФДС не является обязательным тестом для всех мужчин с бесплодием в браке [15], однако все указанное выше свидетельствует о необходимости определения ИФДС у мужчин из бесплодных пар, особенно в возрасте старше 35 лет, и информирования пациентов о повышении риска прерывания беременности.
Заключение
Для мужчин г. Новосибирска Сибирского ФО впервые показано, что снижение относительно референс-ных значений доли морфологически нормальных сперматозоидов, отмеченное в общей выборке, не зависит от возраста обследованных мужчин. Только 3 из изученных показателей спермиологического статуса мужчин из бесплодных пар имеют значимую возрастную зависимость: снижение объема эякулята, уменьшение общего количества сперматозоидов, повышение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов. Впервые продемонстрировано отсутствие достоверного влияния возраста на показатели НВА-теста, однако выявленные тенденции требуют дальнейшего изучения. Полученные результаты свидетельствуют, что возраст-ассоци-ированное нарастание фрагментации ДНК сперматозоидов начинается уже у молодых мужчин — до 30 лет, что подчеркивает необходимость определения ИФДС в реальной клинической практике, а негативные процессы, связанные с влиянием возраста на количественные, морфологические и ультраструктурные характеристики сперматозоидов, проявляются с наибольшей частотой у мужчин после 40 лет.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Humphreys G. The health-care challenges posed by population ageing. Bull World Health Organ 2012;90(2):82-3. D01:10.2471/BLT.12.020212.
2. Sharma R., Agarwal A., Rohra V.K. et al. Effects of increased paternal age on sperm quality, reproductive outcome and associated epigenetic risks to offspring. Reprod Biol Endocrinol 2015;13:35. D0I:10.1186/s12958-015-0028-x.
3. Handelsman D.J., Staraj S. Testicular size: the effects of aging, malnutrition, and illness. J Androl 1985;6(3):144-51. D0I:10.1002/j.1939-4640.1985. tb00830.x.
4. Алексеев Ю.Д., Ефимов А.А., Савенкова Е.Н. и др. Возрастные изменения яичек человека. Бюллетень медицинских Интернет-конференций 2016;6(12):1617-20. Доступно по: https://cyberleninka.ru/article/n/ vozrastnye-izmeneniya-yaichek-cheloveka. [Alekseev Yu.D., Efimov A.A.,
Savenkova E.N. et al. Age-related changes in human testicles. Bulleten meditsinskih Internet-konferentsiy = Bulletin of medical Internet conferences 2016;6(12):1617-20. Available at: https://cyberleninka.ru/article/n/ vozrastnye-izmeneniya-yaichek-cheloveka. (In Russ.)].
5. Feldman H.A., Longcope C., Derby C.A. et al. Age trends in the level of serum testosterone and other hormones
in middle-aged men: longitudinal results from the Massachusetts male aging study. J Clin Endocrinol Metab 2002;87(2):589-98. D0I:10.1210/jcem.87.2.8201.
6. Селятицкая В.Г., Епанчинцева Е.А., Новикова Е.Г. и др. Гормональная характеристика андрогенного статуса
у мужчин разных возрастных групп. Успехи геронтологии 2019;32(5):737—42. [Selyatitskaya V.G., Epanchintseva E.A., Novikova E.G. et al. Hormonal feature
of the androgen status in different-aged males. Uspekhy gerontologii = Adv Gerontol 2019;32(5):737-42. (In Russ.)]. PMID: 32145164.
7. Brahem S., Mehdi M., Elghezal H., Saad A. The effects of male aging on semen quality, sperm DNA fragmentation and chromosomal abnormalities in an infertile population.
J Assist Reprod Genet 2011;28(5):425-32. D0I:10.1007/s10815-011-9537-5.
8. Рогозин Д.С., Миронов В.Н., Сергий-ко С.В. и др. Клиническое значение «старшего отцовского возраста» в контексте мужского бесплодия и вспомогательных репродуктивных технологий. Экспериментальная и клиническая урология 2019;4:60-6. [Rogozin D.S., Mironov V.N., Sergiyko S.V. et al. Value of the "advanced paternal age" in the management of male infertility and assisted reproductive technologies. Experimental'naya
E
W
E
Е га Е
i klinicheskaya urologiya = Experimental & clinical urology 2019;4:60-6. (In Russ.)]. DOI: 10.29188/2222-85432019-11-4-60-66.
9. D'Onofrio B.M., Rickert M.E., Frans E. et al. Paternal age at childbearing and offspring psychiatric and academic morbidity. JAMA Psychiatry 2014;71(4):432-8. DOI: 10.1001/jamapsychiatry.2013.4525.
10. Kaarouch I., Bouamoud N., Madkour A. et al. Paternal age: Negative impact on sperm genome decays and IVF outcomes after 40 years. Mol Reprod Dev 2018;85(3):271-80. D0I:10.1002/ mrd.22963.
11. Girsh E., Katz N., Genkin L. et al. Male age influences oocyte-donor program results. J Assist Reprod Genet 2008;25(4):137-43. D0I:10.1007/s10815-008-9215-4.
12. Щелочков А.М., Нефедова И.Ф., Чернова С.Н. и др. Региональные показатели фертильности у мужчин Самарской области, а также факторы, являющиеся причинами их изменения. Клиническая и лабораторная диагностика 2012;8:25-9. [Shchelochkov A.M., Nefedova I.F., Chernova S.N. et al.
The regional indicators of male fertility in the Samara region and causative factors of their alterations. Klinicheskaya i laboratornaya diagnostika = Clinical and laboratory diagnostics 2012;(8):25-9. (In Russ.)]. PMID: 23097988.
13. Хаят С.Ш., Брагина Е.Е., Арифулин ЕА. и др. Фрагментация ДНК сперматозоидов у мужчин разного возраста. Андрология и генитальная хирургия 2019;20(4):39-44. [Khayat S.Sh., Bragina E.E., Arifulin E.A. et al. Sperm DNA fragmentation in men of different age. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery. 2019;20(4):39-44. (In Russ.)].
DOI: 10.17650/2070-9781-2019-20-4-39-44.
14. Евдокимов В.В., Жуков О.Б., Бабушкина Е.В. Анализ параметров эякулята у мужчин в различных возрастных группах. Андрология и генитальная хирургия 2016;17(2):65-7. [Evdoki-mov V.V., Zhukov O.B., Babushkina E.V. Analysis of ejaculate parameters in different age groups. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology
and Genital Surgery. 2016;17(2):65-7. (In Russ.)]. DOI: 10.17650/2070-97812016-17-2-65-67.
15. Клинические рекомендации «Мужское бесплодие». Российское общество урологов. 2019. Доступно по: https://avur. international/wp-content/uploads/2019/07/ Muzhskoe-besplodie-klinicheskie-rekomen-datsii.pdf. [Clinical recommendations "Male infertility". Russian Society of Urologists. 2019. Available at: https://avur.international/ wp-content/uploads/2019/07/Muzhskoe-besplodie-klinicheskie-rekomendatsii.pdf. (In Russ.)]
16. Лебедев Г.С., Голубев Н.А., Шадеркин И.А. и др. Мужское бесплодие в Российской Федерации: статистические данные за 2000-2018 годы. Экспериментальная и клиническая урология 2019;4:4-12. [Lebedev G.S., Golubev N.A., Shaderkin I.A. et al. Male infertility: epidemiology and causes. Statistics in the Russian Federation
in 2000-2018 years. Experimental'naya i klinicheskaya urologiya = Experimental & clinical urology 2019;4:4-12. (In Russ.)].
DOI: 10.29188/2222-8543-2019-11-4-4-12.
17. Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека.
5-е издание. Пер. с англ. Н.П. Макарова, науч. ред. Л.Ф. Курило. 5-е изд. М.: Капитал Принт, 2012. 291 с. [WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, 5 th edn. Transl. from English by N.P. Makarov, scientific ed. by L.F. Kurilo. 5th ed. Moscow: Kapital Print, 2012. 291 p. (In Russ.)].
18. Simard M., Laprise C., Girard S.L. Impact of paternal age at conception on human health. Clin Chem 2019;65(1):146-52.
DOI: 10.1373/clinchem.2018.294421.
19. Епанчинцева Е.А., Селятицкая В.Г., Митрофанов И.М. и др. Количественные и качественные нарушения
в спермограмме и дополнительных анализах эякулята у мужчин из бесплодных пар. Проблемы репродукции 2017;23:90-6. [Epanchintseva E.A., Selyatitskaya V.G., Mitrofanov I.M. et al. Quantitative and qualitative abnormalities in spermogram and other semen tests in men from infertile couples. Problemy reproduktsii = Reproduction problems 2017;23:90-6. (In Russ.)]. DOI: 10.17116/repro201723690-96.
20. Чалый М. Репродуктивная функция мужчин в XXI веке. Врач 2009;6:6-7. [Chaly M. The reproductive function of men in the XXI century. Vrach = The Doctor 2009;6:6-7. (In Russ.)].
21. Калинченко С.Ю., Тюзиков И.А. Окислительный стресс и мужское бесплодие - взаимосвязанные пандемии XXI в. Современные фармакоте-рапевтические возможности патогенетической коррекции нарушений сперматогенеза препаратами L-карни-тина/ацетил^-карнитина. Эффективная фармакотерапия 2017;22:6-19. [Kalinchenko S.Yu., Tyuzikov I.A. Oxidative stress and male infertility -XXI-century inter-related pandemics. Current pharmacotherapeutic opportunities of pathogenetic correction of spermatogenesis disorders with L-carnitine/ acetyl-L-carnitine. Effektivnaya farmakoterapiya = Effective pharmacotherapy 2017;22:6-19. (In Russ.)].
22. Киселева Ю.Ю., Азова М.М., Кодыле-ва Т.А. и др. Увеличение анеуплоидий
эмбрионов ассоциировано с пониженной долей морфологически нормальных сперматозоидов. Генетика 2017;3(12):1458-62. [Kiseleva Yu.Yu., Azova M.M., Kostyleva T.A. et al. An increase in embryo aneuploidy is associated with a reduced proportion of morphologically normal spermatozoa. Genetica = Genetics 2017;3(12): 1458-62. (In Russ.)]. DOI: 10.7868/S0016675817120050.
23. Lu J.C., Jing J., Chen L. et al. Analysis of human sperm DNA fragmentation index (DFI) related factors: A report of 1010 subfertile men in China. Reprod Biol Endocrinol 2018;16(1):23. DOI: 10.1186/s12958-018-0345-y.
24. Belloc S., Benkhalifa M., Cohen-Bacrie M. et al. Sperm deoxyribonucleic acid damage in normozoospermic men
is related to age and sperm progressive motility. Fertil Steril 2014;101(6):1588-93. DOI:10.1016/j.fertnstert.2014.02.006.
25. Епанчинцева Е.А., Селятицкая В.Г., Божедомов В.А. Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов - необходимость для современной клинической практики. Андрология и генитальная хирургия 2020;21(1):14-21. [Epanchintseva E.A., Selyatitskaya V.G., Bozhedomov V.A. Sperm DNA fragmentation is a necessity for modern clinical practice. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2020;21(1):14-21.
(In Russ.)]. DOI: 10.17650/2070-97812020-21-1-14-21.
26. Клинические рекомендации «Ожирение». Российская ассоциация эндокринологов, Общество бариатриче-ских хирургов, 2020. Доступно по: https://www.endocrincentr.ru/sites/ default/files/specialists/science/ clinic-recomendations/ozhirenie_ vzroslye.pdf. [Clinical recommendations "Obesity". Russian Association
of Endocrinologists, Society of Bariatric Surgeons, 2020. Available at: https://www.endocrincentr.ru/sites/ default/files/specialists/science/clinic-recomendations/ozhirenie_vzroslye.pdf. (In Russ.)].
27. Епанчинцева Е.А., Селятицкая В.Г., Свиридова М.А., Лутов Ю.В. Медико-социальные факторы риска бесплодия у мужчин. Андрология и генитальная хирургия 2016;17(3):47-53. [Epanchintseva E.A., Selyatitskaya V.G., Sviridova M.A., Lutov Yu.V. Sociomedical risk factors for male infecundity. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2016;17(3):47-53. (In Russ.)]. DOI: 10.17650/2070-9781-2016-17-3-47-53.
28. Lai S.F., Li R.H.W., Yeung W.S.B.,
Ng E.H.Y Effect of paternal age on semen parameters and live birth rate of in-vitro fertilisation treatment: a retrospective analysis. Hong Kong
Med J 2018;24(5):444-50. DOI: 10.12809/hkmj177111.
29. Shiraishi K., Matsuyama H. Effects of medical comorbidity on male infertility and comorbidity treatment on spermatogenesis. Fertil Steril 2018;110(6):1006-1011.e2. D01:10.1016/j.fertnstert.2018.07.002.
30. García-Ferreyra J., Hilario R., Dueñas J. High percentages
of embryos with 21, 18 or 13 trisomy are related to advanced paternal age in donor egg cycles. JBRA Assist Reprod
2018;22(1):26-34.
DOI: 10.5935/1518-0557.20180004.
31. Lotti F., Baldi E., Corona G. et al. Epididymal more than testicular abnormalities are associated with the occurrence of antisperm antibodies
as evaluated by the MAR test. Hum Reprod 2018;33(8):1417-29. DOI: 10.1093/humrep/dey235.
32. Kirkman-Brown J., Pavitt S., Khalaf Y. et al. Sperm selection for assisted reproduction by prior hyaluronan binding: the HABSelect RCT. Effic
Mech Eval 2019;6(1):1-80. DOI: 10.3310/eme06010.
33. Bender Atik R., Christiansen OB., Elson J. et al. ESHRE guideline: recurrent pregnancy loss. Hum Reprod Open 2018;2018(2):hoy004.
DOI: 10.1093/hropen/hoy004.
34. Antonouli S., Papatheodorou A., Panagiotidis Y. et al. The impact of sperm DNA fragmentation on ICSI outcome in cases of donated oocytes. Arch Gynecol Obstet 2019;300(1):207-15. DOI: 10.1007/s00404-019-05133-9.
Вклад авторов
Е.А. Епанчинцева: концепция и дизайн исследования, сбор и обработка материала, статистический анализ данных, написание и редактирование текста статьи;
B.Г. Селятицкая: концепция и дизайн исследования, написание и редактирование текста статьи;
C.В. Янковская: статистический анализ данных. Authors' contributions
E.A. Epanchintseva: developing the research design and concept, obtaining the data, statistical analysis, article writing and editing; V.G. Selyatitskaya: developing the research design and concept, article writing and editing; S.V. Yankovskaia: statistical analysis.
ORCID авторов / ORCID of authors
Е.А. Епанчинцева / E.A. Epanchintseva: http://orcid.org/0000-0002-9041-2687
B.Г. Селятицкая / V.G. Selyatitskaya: http://orcid.org/0000-0003-4534-7289
C.В. Янковская / S.V. Yankovskaia: http://orcid.org/0000-0001-8486-3185
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Financing. The study was performed without external funding.
Соблюдение прав пациентов и правил биоэтики. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Compliance with patient rights and principles of bioethics. All patients gave written informed consent to participate in the study.
E ra E
Статья поступила: 29.11.2020. Принята к публикации: 03.06.2021. Article submitted: 29.11.2020. Accepted for publication: 03.06.2021.
