CC BY
2
переход трудовых коллективов на полный хозрасчет, самоокупаемость и самофинансирование.
Одновременно повышается ответственность за производительность труда, трудовой н производственной дисциплины. Коллективу предоставлено реальное право распоряжаться заработанными средствами и распределять их в соответствии с личным трудовым вкладом каждого в общие результаты работы.
В последнее время и в медицинских учреждениях начали применять некоторые элементы организации оплаты труда про мышленных предприятий [I]. Однако в опубликованных реко мендациях |1], по нашему мнению, имеется ряд недостатков в частности, касающихся определения коэффициента трудо иого участия (КТУ), распределения размеров премий, доплат надбавок и др.
Исходя из вышеизложенного, мы поставили перед собой (адачу но разработке общих для большинства медицинских учреждений принципов организации труда, методов определения КТУ.
В разработанных нами методических рекомендациях по бригадной форме организации труда медицинских работников, рабочих и служащих медицинских учреждений выделены следующие разделы: 1. Перестройка организации оплаты труда — требование времени. 2. Нормирование труда. Роль нормирования труда в системе управления; методы, применяемые для установления норм труда. 3. Основы законодательства о труде. Права и обязанности администрации и сотрудников, порядок заключения индивидуального и коллективного договора. 4. Бригадная форма организации труда (БФОСТ) и ее оплата.
В последнем разделе отражены организационные вопросы: положение о бригаде, советов бригады и бригадиров; организация оплаты труда по сдельной системе; методика определения КТУ; варианты трудовых паспортов бригад и формулы расчета зарплаты с применением КТУ; ситуационные примеры начисления зарплат; некоторые нормативы на выполнение отдельных работ, утвержденные Минздравом СССР и Узбекской ССР и временные нормативы для некоторых ненормированных работ.
Основные задачи БФОСТ: правильное использование фонда зарплаты, направление фонда зарплаты на стимулирование количества и качества труда, НОТ; стимулирование сознательного повышения профессиональной квалификации; предотвращение искусственного сближения или необоснованного неравенства в оплате; стимулирование соблюдения трудовой дисциплины, внутреннего распорядка, противопожарных правил и общественного порядка; сроков и порядка выполнения возложенных задач; улучшение качества труда, своевременное выявление недостатков в работе и их устранение. Кроме того, БФОСТ должна способствовать повышению культурного уровня работников, созданию благоприятного морально-психологического климата в коллективе. Задачами БФОСТ являются также обеспечение ритмичной работы подразделений, связанных договорными обязательствами; достижение высокой моральной и материальной ответственности членов бригады за конечные результаты труда, взаимозаменяемость членов бригады при выполнении работ.
Применение имеющихся и разработка новых норм трудозатрат медицинских учреждений, определение по этим нормативам КТУ каждого в общей сумме трудозатрат коллектива и оплата по сдельной системе с учетом КТУ могут позволить существенно повысить эффективность организации и стимулирования труда медицинских работников.
Литература
1. Бригадная форма организации и стимулирования труда младшего и среднего медицинского персонала, служащих и рабочих Горьковской клинической больницы им. Н. А. Семашко: Метод, рекомендации.— Горький, 1988.
2. Иныиин А. А., Веллер М. В. Бригадная форма труда в промышленности.— М., 1988.
3. Лушин С. И. и др. Финансы в новых условиях хозяйствования.— М„ 1989.
4. Минин Э. В., Щербаков В. И. Заработная плата: вопросы и ответы.— М., 1989.
Поступила 09.10.91
Методы исследования
С КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1992
УДК 616-092:612.017.11-07:616.316-008.839.6-097-078.333
И. В. Стомахина, М. К. Данилова, Л. В. Каткова, М. Б. Новикова
КОМПЛЕКС МЕТОДОВ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ПО ИММУНОЛОГИЧЕСКИМ ПОКАЗАТЕЛЯМ СЛЮНЫ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина, Москва
Обоснование и проведение профилактических оздоровительных мероприятий базируется как на данных об уровне загрязнения окружающей среды, так и на информации об изменениях состояния здоровья населения. В последнем случае необходима выявление неблагоприятного действия факторов среды на организм на ранних стадиях развития патологического процесса. При этом известно, что именно изменение иммуно-Реактивности организма может быть одним из ранних проявлений этого воздействия |11].
Различают неспецифические и специфические факторы защиты. Показатели неспецифического иммунитета характеризуют способность противостоять вредному влиянию среды, являясь основой выработки полноценного иммунного ответа, "отражают состояние здоровья организма. Присутствие цело-го ряда факторов неспецифнческой резистентности в таком доступном биоматериале как слюна, делает их изучение крайне "ерспективным в гигиенических исследованиях, в особенности °ри оценке состояния здоровья детского населения, так как исключается взятие крови. Кроме того, наличие в слюне специфических секреторных иммуноглобулинов дает возможность °Ценивать состояние иммунной системы слизистых оболочек, вторые, являясь так называемыми «входными воротами», °беспечивают защиту организма от факторов биологической
и химической природы, а их состояние отражает общую резистентность организма |7, 14, 15). Однако в доступной нам литературе встречаются единичные сведения о комплексном изучении показателей неспецифнческой резистентности в слюне. По-видимому, это связано с достаточной трудоемкостью существующих методов и значительным объемом биоматериала.
Цель нашей работы — выбор и обоснование комплекса методов для оценки иммунологических показателей неспецифической резистентности в слюне и разработка микромодн-фикаций некоторых из них.
В слюне, как и в сыворотке крови человека, присутствуют гетерофильные антитела, способные взаимодействовать с антигенами, локализованными на поверхности клеток некоторых видов животных или микроорганизмов [9). При наличии имму-нодефицитных состояний и целого ряда патологий титр естественных антител резко снижается, что свидетельствует о подавлении функциональной активности иммунной системы. Титр гетерофильных антител определяли методом, аналогичным их выявлению в сыворотке крови, выражали в логарифмическом масштабе (1о52) (6]. Для постановки реакции необходимо 50 мкл цельной слюны.
Одним из неспецифических показателей, отражающих способность организма поддерживать гомеостаз клеток и системы
в целом, являются свободно «плавающие» в жидкостях организма фрагменты рецепторных белков, Р-белки, от концентра-, ции которых зависит в конечном итоге жизнеспособность клеток [5]. Неблагоприятные факторы среды, в первую очередь химической природы, могут вызывать гибель клеток тех или иных органов, что приводит к увеличению количества Р-бел-ков в жидкостях организма, в том числе в слюне. Поэтому А. Я. Кульбергом и соавт. [5] было предложено оценивать количество Р-белков в крови и биологических жидкостях как прогностический тест для раннего выявления групп риска развития различных процессов патологического характера. Уровень Р-белков определяли по торможению реакции ге-магглютинации между анти-Р-сывороткой (производства НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамален) и эритроцитами человека 0(1)Й1+ (консервированная кровь) |5).
Количественное содержание секреторного иммуноглобулина-А в слюне, одного из важнейших факторов местного иммунитета, определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини [3]. Концентрацию белков в секретах обычно выражают в миллиграммах на 1 мл, миллиграмм-процентах. Однако секреторные жидкости представляют собой нестандартные препараты, и общая концентрация в них белка, в том числе иммуноглобулинов, зависит от ряда неконтролируемых факторов. Так, на концентрацию иммуноглобулинов и других биологически активных веществ в слюне влияет физиологическое состояние организма, интенсивность слюноотделения, способ взятия пробы. Поэтому целесообразно рассчитывать количество иммуноглобулинов на миллиграмм общего белка в секрете.
Для определения концентрации белка в слюне нами была разработана микромодификация метода, основанного на способности красителя Кумасси 0-250, образовывать окрашенный комплекс, присоединяясь к белковым молекулам по пептидным связям [16). Интенсивность окраски, пропорциональную количеству белка, определяли по поглощению при длине волны 620 нм на спектрофотометре. Использование данного прибора позволило сократить объем исследуемой пробы: лучшие результаты были получены при разведении исходной слюны в 50 раз, т. е. для получения рабочего объема, равного 150 мкл, необходимо всего 3 мкл исходного образца слюны'. При таком разведении полученные результаты попадали на линейный участок зависимости «концентрация белка — оптическая плотность раствора». Для построения калибровочной кривой использовали альбумин человеческий (1}еапа1), концентрацию белка выражали в микрограммах на 1 мл. Кроме того, использование данного метода значительно сократило время исследования.
Для определения активности лизоцима в настоящее время используется несколько способов: нефелометрический метод оценки активности лизоцима [I, 2); титрование в пробирках [4|; метод диффузии в агаре [10]. Нефелометрический метод определения активности лизоцима отличается простотой постановки, объективностью результатов исследования, однако требует значительного количества биоматериала. С целью уменьшения объема биопробы и экономии времени нами разработана микромодификация метода с фиксацией результатов на спектрофотометре. Ход постановки реакции и соотношение реагентов не изменяли. Для исследования использовали 50 мкл разведенной в 10 раз биопробы, к которой добавляли 200 мкл подготовленной обычным способом взвеси микрококка. Планшет осторожно встряхивали и определяли исходную оптическую плотность образцов на указанном приборе при длине волны 540 нм. После инкубации в течение 1 ч при 37 °С спектрофотометрирование повторяли. Конечный результат определяли по следующей формуле:
Ал„з(%) =
Du
■D,
0„
•100 %,
где Алнз — активность лизоцима, выраженная в процентах; Оисх - исходная оптическая плотность; О, ч — оптическая плотность через 1 ч инкубации. При измерениях оптической плотности на спектрофотометре значение оптической плотности в контроле (без добавления биоматериала) автоматически вычитается из значения оптической плотности в опытных лунках.
Фотонефелометрический метод является также удобным и надежным способом исследования бактерицидной активности слюны (БАС) в отношении грамотрнцательных бакте-
1 Здесь и далее постановку реакций в микромодификациях осуществляли в 96-луночных плоскодонных планшетах для иммунологических исследований.
рий [8], однако он требует большого количества биоматериала. Разработанная нами микромодификация данного метода значительно уменьшает необходимый объем пробы и экономит •время исследования. Для постановки реакции использовали 50 мкл разведенной физиологическим раствором в 10 раз слюны. В каждую лунку вносили по 200 мкл взвеси Е. coli приготовленной обычным способом. Измерение оптической плотности проводили на спектрофотометре при длине волны 340 нм дважды: до исследования и после инкубации в течение 2 ч при 37 °С. Конечный результат определяли по формуле:
БАС (
%>= [
^ап(2 ч)—Дрп(ис»)
D
к(2 ч)-
-D
к(нсх)
] -100%,
где БАС — бактерицидная активность слюны (в %), Доп (исх), Dun |2 ч) — оптическая плотность опытных образцов, исходная и после инкубации; DK (2 ч)- (иск)~~ оптическая плотность в контроле, исходная и после инкубации. Контролем служила лукка иммунологического планшета, в которую внесено 50 мкл физиологического раствора.
Данный комплекс методов был апробирован при изучении состояния неспецифической резистентности у организованных групп детей, посещающих дошкольные учреждения, расположенные на разном удалении от предприятия микробиологического синтеза по производству кормовых аминокислот, и находящихся & условиях различных уровней загрязнения атмосферного воздуха. В динамике в различные сезоны года обследовано 175 детей 1984 года рождения.
В соответствии с предлагаемой схемой для выявления групп повышенного риска развития иммунопатологий на 1-м этапе обследования было проведено анкетирование детей [12, 13|. Например, в результате анализа анкетного опроса достаточно высокий процент практически здоровых детей (85%) был выявлен в детском саду, расположенном в 400 м от завода в зеленой зоне, что, казалось бы, находится в противоречии с рабочей гипотезой исследования. Однако изучение состояния иммунной системы слизистых оболочек по ряду показателей в лабораторных исследованиях показало, что у 35 % этих детей достоверно отличаются от нормы значения 2 и более показателей неспецифической резистентности организма, т. е. дети попадают в группу риска. Подробное описание результатов проведенного исследования предполагается опубликовать в следующем сообщении.
Таким образом, применение предлагаемого комплекса методов с использованием микромодификаций требует для получения результатов в одной повторности по 6 показателям всего 150 мкл слюны, значительно сокращает время исследования, так как для спектрофотометрирования одного планшета (95 проб, 1-й контроль) на приборе «Мультискан Мсс» необходимо не более 5 мин и, на наш взгляд, является перспективным для гигиенических исследований, так как позволяет с большой степенью объективности выявлять группы риска развития иммунопатологий среди населения.
Литература
1. Воробьева А. И., Волкотруб Л. П. // Гиг. н сан.— 1987,- № 5,- С. 83.
2. Дорофейчук В. Г. // Лаб.дело,— 1968.—№ 1,— С. 28—30.
3. Исследование иммуноглобулинов и других белков в секретах человека: Метод, рекомендации.— М., 1987.
4. Козарь М. И., Иванов А. Г. // Актуальные вопросы космической биологии и медицины.— Кишинев. 1971,— С. 328-330.
5. Методические рекомендации по определению Р-белков в сыворотке (плазме) крови человека: Метод, рекомендации,—М., 1989.
6. Методы оценки неспецифической резистентности человека по иммунологическим показателям при массовых гигиенических обследованиях населения: Метод, рекомендации.— М„ 1988.
7. Мольков Ю. Н., Горячева Н. В. и др. // Методология фундаментальных исследовании в гигиене окружающей среды.- М„ 1989,- С. 58-62.
8. Смирнова О. В., Кузьмина Т. Д. // Журн. микробиол.— 1966.— № 4,— С. 8—11.
9. Сохин А. А., Чернушенко Е. Ф. // Прикладная иммунология,— 1984.— С. 316.
10. Федорцов К. К., Кузьмин С. Н. и др. // Лаб. дело.— 1981,—№ 12.-С. 735-736.
11. Федосеева В. Н. // Состояние и перспективы развития
)
иммунологических исследований в гигиене окружающей среды / Под ред. Г. И. Сидоренко, Ю. А. Рахманина.— М„ 1985,— С. 47-51.
12. Федосеева В. Н., Аристовская Л. В., Лебедев С. Н. // Методология, организация и итоги массовых иммунологических обследований.— Ангарск, 1987.— С. 28—29.
13. Федосеева В. Н., Пинегин Б. В. и др. // Гиг. и сан.— 1989,- № 3,— С. 17-19.
14. Bienenstock J. // Immunology.— 1980,— Vol. 41,— P. 249— 270.
15. ¡Mwton A. R., Asofsky R., Mage R. G. // J. Immunol.— 1970,— Vol. 107,- P. 397.
16. Sedmak J. J., Grossberg S. E. 11 Analyt. Biochem.— 1977,— Vol. 79,— P. 544-552.
Поступила 16.07.91
© А. Л. ПРЯДКО, Т. В. АЛЕКСЕЕВА. 1992 УДК 628.544:621.311.22
А. Л. Прядко, Т. В. Алексеева
ПРИМЕНЕНИЕ БИОТЕСТИРОВАНИЯ ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ТОКСИЧНОСТИ ЗОЛОШЛАКОВ ТЭЦ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Загрязнение окружающей среды отходами промышленного производства в последние десятилетия приобретает все более широкие масштабы. Пристальное внимание в настоящее время привлекают предприятия теплоэнергетики. Это связано с тем, что хранение объемных золошлаковых отходов ТЭЦ представляет потенциальную экологическую угрозу возможного воздействия компонентов отходов на окружающую среду (почву, грунтовые воды, сельскохозяйственные растения) за счет входящих в их состав высокотоксичных элементов, в том числе тяжелых металлов [I, 4, 6, 13].
Вместе с тем золошлаковые отходы твердых топлив, образующиеся на ТЭЦ, являются ценным сырьем, которое может широко использоваться в народном хозяйстве для устройства подсыпок и строительства дорог, для производства строительных материалов и т. д.
В настоящее время разработана технология применения в сельском хозяйстве золошлаков ТЭЦ как удобрений в чистом виде и в составе органоминеральных компостов. Однако гигиеническая оценка этих способов утилизации золошлаков по их влиянию на контактирующие среды не проводилась.
Сделано немало попыток оценить степень опасности промышленных отходов для окружающей среды и человека с помощью тех или иных химико-аналитических исследований и токсикологических экспериментов на теплокровных живо~-ных [3, 5, 7]. Но трудоемкость и высокая себестоимость этих методов являются существенным недостатком и снижает оперативную ценность результатов. Поэтому в последние годы все большее внимание привлекают работы по оценке токсичности различных водных сред с помощью биотестирования |2, 8, 10, 12].
Цель работы заключалась в оценке эффективности использования 4 тест-объектов для выявления биологического Действия золошлаков ТЭЦ.
Поскольку наиболее перспективными для использования в сельском хозяйстве являются золы бурых углей [6, 7], были изучены водные экстракты высококальциевой ирша-бородин-ской золы (проба № 5), низкокальциевой шатурской (про-5а № 1), азейской (проба № 2), ступинской (проба № 6),
а также кузнецкой каменноугольной золы (проба № 3) и золы ТЭЦ Селенгинского целлюлозно-картонного комбината — СЦКК (проба № 4). Исследуемые экстракты были подготовлены в соответствии с методическими рекомендациями, разработанными Государственным институтом гигиены Минздра- ^ ва Венгрии (Будапешт, 1985 г.). Для этого 10 г пробы гомогенизированной и подготовленной золы смешивали с дистиллированной водой в соотношении 1:10. После суточного отстаивания и механического встряхивания в течение 2 ч жидкую и твердую фазы сепарировали путем фильтрации [8].
Затем в полученных водных вытяжках методом атомно-абсорбционной спектрометрии определяли содержание тяжелых металлов: марганца, меди, стронция, никеля, магния, хрома, цинка, кобальта, кадмия, свинца, железа.
В дальнейшем биотестирование проводили непосредственно на фильтратах проб золошлаков и при разбавлении их дехлорированной водой з разведениях 1:2, 1:3, 1:4, 1:5.
На первом этапе была проведена оценка потенциальной опасности поступления тяжелых металлов из золошлаков в их водные экстракты. Было установлено, что из 11 металлов, входящих в состав зол, в водные вытяжки переходят лишь стронций, магний, хром и железо, причем в незначительном количестве. Исключение составляла лишь вытяжка из золы Ирша-Бородинской ТЭЦ, где концентрация стронция достигала 28,54 мг/л, что, очевидно, связано с высоким содержанием металла в золошлаке (табл. 1).
На основании этих результатов можно заключить, что изучаемые золошлаки представляют собой сложную малорастворимую смесь элементов, представляющих потенциальную опасность для окружающей среды.
На втором этапе для ориентировочной оценки биологического действия золошлаков было проведено биотестирование их водных экстрактов на 4-тест объектах: инфузориях Tetra-hymena piriformis, дафниях Daphnia magna, одноклеточных водорослях Scenedesmus quadricauda, семенах злаковой культуры (ячмень).
Биотест на проращивание семян злаковой культуры дал возможность оценить степень фитотоксичности золы. Исследо-
Таблица I
Содержание элементов в пробах золошлаков (в мг/кг) (I) и их водных экстрактах (в мг/л) (II)
Элемент Шатурская Nt 1 Азейская № 2 Кузнецкая № 3 СЦКК № 4 Ирша-бородннская № 5 Ступинская № 6
1 II I II I II 1 II 1 11 1 II
Марганец 35,9 — 50,2 — 105,3 — 200,3 — 218,2 — 107,9 —
Медь 38,1 - 45,8 — 11,6 - 218,1 — 29,8 — 40,1 —
Стронций н. о. 0,68 н. о. 0.35 н. о. 0,3 6,5 0,2 108,2 28,54 и. о. 0,27
Никель 82,5 — 61,5 - 39,6 0,1 61,0 — 138,2 — 60,5 —
Загний 164,2 2,67 200,1 1.05 156,1 2,5 196,3 1,92 313,9 0,67 205,5 1,90
»ром 6,2 - 4,3 0.02 2,3 — 31,1 — 2,2 — 3,3 -
Цинк 168.8 — 47,6 - 16,5 — 46,0 - 53,3 0,05 45,2 —
обальт 12.6 - 3,5 — 3,2 — 36,0 — 9,5 - 3,8 —
Кадмий 2,7 — — — — — — — — — — —
Свинец 32,5 ___________
Железо 911,1 — 410,0 — 850,0 0,03 873,8 — 225,3 — 755,5 —
Примечание. Прочерк — ниже чувствительности определения; и.о. — не определяли.
