CC BY
48
DOI: 10.24411/0235-2990-2019-10050
Комбинированная терапия как путь к предотвращению антибиотикорезистентности бактерий: линезолид—даптомицин против Staphylococcus aureus
К. Н. АЛИЕВА, М. В. ГОЛИКОВА, Ю. А. ПОРТНОЙ, *А. А. ФИРСОВ
ФГБУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе» (ФГБНУ «НИИНА»), Москва
Antibiotic Combinations Preventing Bacterial Resistance: Studies on an in vitro Model with Staphylococcus aureus Exposed to Linezolid—Daptomycin
K. N. ALIEVA, M. V. GOLIKOVA, Y. A. PORTNOY, *A. A. FIRSOV
Gause Institute of New Antibiotics, Moscow
С целью прогнозирования антимутантной эффективности комбинированной терапии исследовали селекцию резистентных мутантов Staphylococcus aureus при моделировании в динамической системе in vitro режимов 5-дневного введения линезо-лида и даптомицина отдельно и в комбинации. Во всех случаях значения площади под кривой «концентрация — время» (ПФК24) составляли 120 мкгХч/мл (линезолид) и 240 мкгХч/мл (даптомицин). При монотерапии популяция стафилококка обогащалась линезолидорезистентныши и, в меньшей степени, даптомицинорезистентныши мутантами. Применение тех же антибиотиков в комбинации позволило предотвратить или ингибировать развитие резистентности у стафилококков к линезолиду и даптомицину, соответственно. Отмеченное усиление антимутантной эффективности происходило на фоне снижения значений МПКм антибиотиков под влиянием друг друга и увеличением времени, в течение которого концентрация антибиотика превышает МПКМ. Полученные результаты подтверждают возможность прогнозирования антимутант-ной эффективности комбинированной антибиотикотерапии по результатам оценки МПКМ.
Ключевые слова: линезолид, даптомицин, комбинация, резистентность S.aureus, динамическая система in vitro.
To predict the anti-mutant effects of antibiotic combinations against Staphylococcus aureus, the mutant prevention concentrations (MPCs) of linezolid and daptomycin were determined at a linezolid-to-daptomycin concentration ratio that corresponds to the ratio of the 24-hour areas under the concentration-time curve (AUC24s) that were used in pharmacokinetic simulations in an in vitro dynamic model. The enrichment of linezolid-resistant mutants of two S.aureus strains was observed under linezolid exposure. The growth of daptomycin-resistant mutants exposed to daptomycin was less pronounced. Combination therapy prevented or restricted the development of S.aureus resistance to linezolid or daptomycin, respectively. These findings support the applicability of MPC determination to predict the anti-mutant effects of combination therapy with linezolid and daptomycin.
Keywords: linezolid, daptomycin, combination, S.aureus resistance, in vitro dynamic model.
Введение
Проблема распространения резистентных штаммов бактерий на фоне широкого применения антибиотиков в клинике приобретает всё большее значение, поскольку является причиной снижения их эффективности. Возрастание значений МПК антибиотиков в отношении бактери-альныгх штаммов в свою очередь влечёт за собой снижение клинических значений ПФК24/МПК (площади под фармакокинетической кривой в пределах 24 ч, ПФК24, деленной на МПК), которые могут не достигать антимутантных уровней. Прогноз антимутантной эффективности клинических режимов антибиотикотерапии на основа-
© Коллектив авторов, 2019
*Адрес для корреспонденции: 119021, Большая Пироговская ул., д. 11, стр. 1. НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе
нии зависимости развития резистентности у Staphylococcus aureus к 4 фторхинолонам от моделируемых значений их ПФК24/МПК был впервые осуществлён с применением динамических систем in vitro [1]. При этом терапевтические значения ПФК24/МПК трёх из четырёх фторхинолонов оказались ниже их антимутантных значений ПФК24/МПК по отношению к S.aureus. Позднее подобная ситуация была отмечена и с другими антибиотиками, например с линезолидом [2, 3], что согласуется с сообщениями о случаях выделения устойчивых штаммов S.aureus в процессе длительной терапии линезолидом [4—12]. В этой связи проведение исследований по изучению антиму-тантной эффективности комбинаций линезолида с другими антистафилококковыми препаратами представляется актуальным. Ранее, комбинации линезолида с рифампицином [13] или гентамици-
ном [14] в динамических системах in vitro характеризовались повышенной антимутантной эффективностью, которую удалось объяснить изменениями значений минимальной концентрации, подавляющей рост резистентных мутантов (МПКм), каждого из препаратов в присутствии второго. Соотношения концентраций линезолида и рифампицина или линезолида и гентамицина при оценке МПКМ соответствовали отношениям их ПФК24, моделируемых в фармакодинамичес-ких экспериментах. Снижение значений МПКМ обоих препаратов в комбинации обеспечивало более продолжительное нахождение моделируемых концентраций антибиотиков на уровнях, превышающих МПКМ и, как следствие, повышало ан-тимутантную эффективность комбинированной терапии. В настоящей работе тот же подход был использован при изучении антимутантной эффективности комбинации линезолида с даптоми-цином, который по результатам оценки антиста-филокковой активности методом шахматной доски показывал синергизм с линезолидом [15].
Антимутантные свойства комбинации линезолида с даптомицином по сравнению с таковыми при монотерапии изучали при моделировании субтерапевтических значений их ПФК24. Отношение моделируемых значений ПФК24 линезолида и даптомицина, равное 1:2, также было использовано при определении значений МПКМ линезолида и даптомицина в комбинации.
Материал и методы
Антибиотики, бактериальные штаммы. Линезолид был приобретён в Molekula Limited (Darlington, United Kingdom), даптомицин — в Acros Organics (Geel, Belgium). Поскольку антибактериальная активность даптомицина в значительной степени обусловлена присутствием ионов Са2+, все эксперименты с использованием даптомицина проводили в питательной среде, содержащей ионы Са2+ в концентрации, равной значению, установленному в крови у человека (50 мг/л) [16].
В работе были использованы 2 штамма S.aureus: клинический — S.aureus 2061, и коллекционный — S.aureus ATCC 700699.
Определение МПКМ. Значения МПКМ линезолида и даптомицина по отдельности и в комбинации определяли по описанной ранее методике [13]. МПКМ антибиотиков в комбинации определяли при соотношении концентраций линезолида и даптомицина, равном 1:2. Это соответствует отношению моделируемых значений ПФК24 линезолида (120 мкгХч/мл) и даптомицина (240 мкгХч/мл) в фармакодинамических экспериментах. При определении МПКМ линезолида, в том числе в присутствии даптомицина, использовали инокулят, полученный путём смешивания клеток родительского штамма S.aureus и клеток линезолидорезистентных мутантов, полученных из родительских штаммов S.aureus путём искусственной селекции в присутствии линезолида, согласно описанной ранее методике [17]. В результате соотношение количества клеток родительского штамма к количеству мутантных клеток S.aureus в 1 мл инокулята составляло 108 к 1. Описанная процедура обеспечивает присутствие в общей популяции стафилококка мутантных клеток, устойчивых к линезолиду.
Моделируемые фармакокинетические профили. Моноэкспоненциальное снижение концентрации линезолида и даптомици-на в экспериментах как с моно-, так и с комбинированной терапией антибиотиками, моделировали с периодами полувыведе-
ния, установленными в клинических исследованиях (6 ч для ли-незолида [18, 19] и 9 ч для даптомицина [20]), соответственно. Антибиотики вводили в течение 5 дней: линезолид — 2 раза в сутки с интервалом в 12 ч, даптомицин — 1 раз в сутки с интервалом в 24 ч. Моделируемые значения ПФК24 линезолида и даптомицина составляли 120 и 240 мкгХч/мл, соответственно, и были в 2 раза ниже соответствующих терапевтических значений ПФК24, достигаемых при применении линезолида в дозе 600 мг 2 раза в сутки [18, 19] и даптомицина в дозе 4 мг/кг 1 раз в сутки [20]. Все эксперименты проводились в двух или более повторностях.
Динамическая система in vitro. Для изучения антимутант-ного эффекта линезолида или даптомицина использовали динамическую систему in vitro, описанную ранее [3]. Она представляет собой две камеры — одна со свежим бульоном Мюл-лера—Хинтон (МХБ), другая с МХБ, содержащим бактериальную культуру и антибиотик (центральная камера). Объём центральной камеры составлял 100 мл. Перистальтические насосы обеспечивали приток стерильного бульона в центральную камеру и отток её содержимого с объёмными скоростями, равными 12,7 и 8,5 мл/ч в случае линезолида и дапто-мицина, соответственно.
Поскольку линезолид и даптомицин характеризуются разными периодами полувыведения, при моделировании комбинированных режимов их дозирования использовался принцип суперпозиции потоков [21]. К системе присоединяли дополнительную камеру объёмом 54 мл, заполненную свежим МХБ с такой же концентрацией даптомицина, как в центральной камере. Свежий бульон подавался в дополнительную камеру со скоростью 4,2 мл/ч, и с той же скоростью среда с даптомицином перемещалась из дополнительной камеры в центральную. Одновременный приток МХБ в центральную камеру шёл со скоростью 8,5 мл/ч, а отток её содержимого — со скоростью 12,7 мл/ч.
Надёжность воспроизведения фармакокинетических профилей антибиотиков была подтверждена при помощи ВЭЖХ [3, 22]. Фактические значения периодов полувыведения линезолида и даптомицина при моно- (в среднем 6,2 ч и 8,8 ч, соответственно) и комбинированной терапии (в среднем 6 ч и 8,6 ч, соответственно) были близки к заданным (6 и 9 ч, соответственно).
Перед началом опыта динамическую систему заполняли свежим МХБ и термостатировали центральную камеру при 37°С. В центральную камеру вносили 18-часовую бактериальную культуру для получения клеток в концентрации, равной
107 КОЕ/мл. Через 2 ч, когда концентрация клеток достигала
108 КОЕ/мл, начинали введение антибиотиков. При проведении исследований с линезолидом, перед введением антибиотиков, в центральную камеру добавляли 1 мл суспензии лине-золидорезистентных мутантов S.aureus с концентрацией 102 КОЕ/мл. Поскольку объём МХБ в центральной камере составлял 100 мл, финальная концентрация мутантных клеток в МХБ составляла 1 КОЕ/мл [17].
Введение антибиотиков, а также отбор биопроб из центральной камеры проводили при помощи компьютеризованной системы. Популяционный анализ проводили путём высева биопроб каждые 24 ч на чашки с МХА, содержащим линезолид или даптомицин в концентрации, равной 2ХМПК. При необходимости пробы разводили стерильной дистиллированной водой перед посевом на чашки с МХА. С целью снижения предела количественного обнаружения резистентных клеток стафилококка в биопробах использовали метод глубинного посева: 100 мкл суспензии без разведения в воде вносили в чашку Петри с 10 мл тёплого (40°С) расплавленного МХА, содержащего антибиотик в заданной концентрации. Поскольку стафилококки являются факультативными анаэробами, культивирование в условиях дефицита кислорода при глубинном посеве не влияло на ростовые свойства клеток.
Оценка эффекта антибиотиков в отношении резистентной субпопуляции S.aureus. Изменения численности резистентных мутантов S.aureus характеризовали площадью под кривой в пределах от 0 до 120 часов (интегральный параметр ППКм).
Значения МПКм антибиотиков (в мкг/мл)
Штамм МПКМ мПКм линезолида МПКМ МПКМ даптомицина
линезолида в присутствии даптомицина в присутствии
даптомицина линезолида
З.аигеш 2061 10 4 10 8
З.аигеш АТСС 700699 10 3 14 6
Результаты исследования
Определение МПКм. Значения МПКм линезо-лида и даптомицина, применяемых по отдельности и в комбинации, показаны в таблице. Присутствие второго антибиотика вызывало значительное снижение МПКМ, причём снижение МПКМ линезоли-да под влиянием даптомицина и МПКМ даптоми-цина под влиянием линезолида было соизмеримым. В случае с клиническим штаммом Б.аигет 2061 величина МПКМ линезолида снизилась в 2,5 раза, а МПКМ даптомицина — в 1,25 раза. Чуть бо-
лее заметным этот эффект был в отношении коллекционного штамма Б.аигеш: величина МПКМ линезолида снизилась в 3,3 раза, а МПКМ даптомицина — в 2,3 раза.
Антимутантный эффект антибиотиков, применяемых по отдельности и в комбинации. Динамика изменения численности клеток, резистентных к 2хМПК линезолида или даптомицина, на протяжении 120 ч после начала введения каждого антибиотика или их комбинации показана на рис. 1. Как видно на рис. 1, при моделировании режимов
Авигеи« 2061 аигеих АТСС 700699 10 - -
Время, ч
□ Линезолнд В „1 мнеюлнд в присутствии дяптомицпна Дэпто.чнцин Даптомшднн в присутствии лннемлтнди
Рис. 1. Численность антибиотикорезистентных клеток S.aureus под воздействием линезолида и даптомицина, вводимых по отдельности и в комбинации.
Нижний предел количественного определения обозначен пунктирной линией.
Рис. 2. Значения площади под кривой изменения численности антибиотикорезистентных мутантов S.aureus в пределах 120 ч и соответствующие значения ^МПКм при моделировании режимов моно- и комбинированной терапии линезолидом и даптомицином.
монотерапии линезолидом происходило неуклонное возрастание численности линезолидоре-зистентных мутантов и обогащение популяции штаммов Б.аыгвт 2061 и АТСС 700699 резистентными клетками в конце эксперимента — до 8,7 и 8 ^ КОЕ/мл, соответственно. Под влиянием дап-томицина численность линезолидорезистентных к нему клеток Б.аыгвт 2061 и Б.аыгвт АТСС 700699 снижалась до уровня порога чувствительности (1 ^ КОЕ/мл). При моделировании режимов монотерапии даптомицином селекция дапто-мицинорезистентных мутантов тех же штаммов была выражена слабее — до 2,3 ^ КОЕ/мл (Б.аигеш 2061) и 5,8 ^ КОЕ/мл (Б.аитет АТСС 700699). Под влиянием линезолида такая селекция подавлялась почти полностью.
С целью выявления взаимосвязи между изменениями значений МПКм антибиотиков под влиянием друг друга и их антимутантной эффективностью сопоставили значения ППКМ со временем, в течение которого моделируемая концентрация антибиотика превышает МПКМ
(Т>МПКМ) при моно- и комбинированном применении линезолида и даптомицина. Как видно на рис. 2, применительно к обоим штаммам Б.аитет снижение значений ППКМ в результате комбинированной терапии линезолидом и дапто-мицином прямо связано с возрастанием Т>МПКМ. При этом заметно больший защитный эффект даптомицина в отношении селекции ли-незолидорезистентных стафилококков по сравнению с эффектом линезолида на селекцию дап-томицинорезистентных клеток также удалось объяснить более значительными изменениями Т>МПКМ. В первом случае — от 0 до 63% интервала дозирования (Б.аигет 2061) или от 0 до 84% (Б.аигеш АТСС 700699), во втором — от 27 до 73% интервала дозирования (Б.аигеш АТСС 700699) и от 44 до 57% (Б.аигеш 2061).
Обсуждение
При определении значений МПКМ линезолида и даптомицина применяемых в комбинации, соотношение концентраций препаратов (1:2) соответствовало отношению моделируемых значений их
ПФК24 в фармакодинамических экспериментах. Значения МПКм антибиотиков снижались под влиянием друг друга. Комбинация линезолида с даптомицином обеспечивала полное подавление роста линезолидорезистентных клеток S.aureus, наблюдаемое при монотерапии линезолидом. Анти-мутантная эффективность комбинации антибиотиков в отношении даптомицинорезистентныж мутантов S.aureus быша сравнима с таковой при монотерапии даптомицином (S.aureus 2061) или превосходила её (S.aureus ATCC 700699). Установлено, что антимутантный эффект сочетанного применения линезолида с даптомицином обусловлен возрастанием значений Т>МПКМ, которые, в свою очередь, обусловлены снижением МПКМ антибиотиков под влиянием друг друга. Например, предотвращение развития резистентности к линезолиду происходило на фоне выраженного изменения Т>МПКМ линезолида в присутствии даптомицина (с 0 до 63—84% от интервала дозирования, в зависимости от штамма стафилококка). Аналогичный ан-тимутантный эффект на линезолидорезистентную субпопуляцию S.aureus, связанный с резким повышением значений Т>МПКМ линезолида, наблюдался у комбинаций линезолида с рифампицином [13] или гентамицином [14]. Ситуация с даптоми-цинорезистентными мутантами в комбинированных режимах выплядела менее однозначно. При воздействии на клетки клинического штамма S.aureus, понижение МПКМ даптомицина приводило лишь к незначительному возрастанию Т>МПКМ (13%) и, как следствие, к отсутствию различий в антимутантном эффекте комбинации дап-томицина с линезолидом и даптомицина, вводимого в режиме монотерапии. Вместе с тем, относительно низкая численность даптомицинорезис-тентных мутантов S.aureus 2061 во всех экспериментах с применением даптомицина указывает на
ЛИТЕРАТУРА
1. Firsov A.A., Vostrov S.N., Lubenko I.Y., Drlica K, Portnoy Y.A., Zinner S.H. In vitro pharmacodynamic evaluation of the mutant selection window hypothesis using four fluoroquinolones against Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother 2003; 47: 1604-1613.
2. Firsov A. A., Golikova M. V., Strukova E.N., Portnoy Y A., Romanov A. V., Edelstein M.V. et al. In vitro resistance studies with bacteria that exhibit low mutation frequencies: prediction of «antimutant» linezolid concentrations using a mixed inoculum containing both susceptible and resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother 2015; 59: 1014-1019.
3. Firsov A.A., Alieva K.N., Strukova E.N., Golikova M.V., Portnoy Y.A., Dovzhenko S.A. et al. Testing the mutant selection window hypothesis with Staphylococcus aureus exposed to linezolid in an in vitro dynamic model. J Antimicrob Chemother 2017; 72: 3100-3107.
4. Tsiodras S., Gold H.S., Sakoulas G, Eliopoulos G.M., Wennersten C, Venkataraman L. et al. Linezolid resistance in a clinical isolate of Staphylococcus aureus. Lancet 2001; 358: 207-208.
5. Wilson P., Andrews J.A., Charlesworth R, Walesby R, Singer M, Farrell D.J. et al. Linezolid resistance in clinical isolates of Staphylococcus aureus. J Antimicrob Chemother 2003; 51: 186-188.
6. Meka V.G., Pillai S.K., Sakoulas G, Wennersten C, Venkataraman L, DeGirolami P.C. et al. Linezolid resistance in sequential Staphylococcus aureus isolates associated with a T2500A mutation in the 23S rRNA gene and loss of a single copy of rRNA. J Infect Dis 2004; 190: 311-317.
7. Gales A.C., Sader H.S., Andrade S.S., Lutz L, Machado A., Barth A.L. Emergence of linezolid-resistant Staphylococcus aureus during treatment of pulmonary infection in a patient with cystic fibrosis. Int J Antimicrob Agents 2006; 27: 300-302.
наличие собственной антимутантной активности липопептида. Аналогичное наблюдение было сделано и в работе по изучению фармакодинамичес-кого взаимодействия линезолида и гентамицина, когда антимутантный эффект аминогликозида в терапевтической дозе был соизмерим с эффектом его комбинации с линезолидом [14]. Применительно к коллекционному штамму S.aureus ATCC 700699 комбинированная терапия характеризовалась протективным эффектом как в отношении ли-незолидо-, так и даптомицинорезистентных мутантов, отчётливо демонстрируя взаимосвязь с резким возрастанием значений Т>МПКм обоих антибиотиков под действием друг друга.
Заключение
При моделировании фармакокинетики линезолида и даптомицина в динамической системе in vitro была подтверждена возможность прогнозирования антимутантных свойств комбинации антибиотиков по значениям МПКМ, определяемым в присутствии друг друга. Соотношение концентраций линезолида и даптомицина при определении их МПКМ соответствовало отношению моделируемых значений ПФК24 антибиотиков. Установлено, что полное или частичное подавление роста антибиотикорезистентных мутантов золотистого стафилококка происходит на фоне снижения значений МПКМ (повышения Т>МПКМ) линезолида и даптомицина при комбинированной терапии. Полученные результаты подтверждают возможность прогнозирования антимутант-ной эффективности комбинированной терапии.
Источник финансирования. Исследование проведено благодаря финансовой поддержке Российского научного фонда (грант РНФ, соглашение № 18-15-00433).
8. Hentschke M, Saager B, Horstkotte M.A., Scherpe S., Wolters M, Kabisch H. et al. Emergence of linezolid resistance in a methicillin resistant Staphylococcus aureus strain. Infection 2008; 36: 85—87.
9. Locke J.B., Hilgers M, Shaw K.J. Mutations in ribosomal protein L3 are associated with oxazolidinone resistance in staphylococci of clinical origin. Antimicrob Agents Chemother 2009; 53: 5275-5278.
10. Yoshida K, Shoji H, Hanaki H, Yanagisawa C, Ikeda-Dantsuji Y, Fukuchi K. et al. Linezolid-resistant methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolated after long-term, repeated use of linezolid. J Infect Chemother 2009; 15: 417-419.
11. Hill R.L., Kearns A.M., Nash J., North S.E, Pike R, Newson T. et al. Linezolid-resistant ST36 methicillin-resistant Staphylococcus aureus associated with prolonged linezolid treatment in two paediatric cystic fibrosis patients. J Antimicrob Chemother 2010; 65: 442-445.
12. Ikeda-Dantsuji Y, Hanaki H, Nakae T, Takesue Y, Tomono K, Honda J. et al. Emergence of linezolid-resistant mutants in a susceptible-cell population of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother 2011; 55: 2466-2468.
13. GolikovaM.V., StrukovaE.N., Portnoy Y.A., DovzhenkoS.A., KobrinM.B., Zinner S.H. et al. Pharmacokinetically-based prediction of the effects of antibiotic combinations on resistant Staphylococcus aureus mutants: in vitro model studies with linezolid and rifampicin. J Chemother 2017; 29: 267-273.
14. Zinner S.H., Golikova M. V., Strukova E.N., Portnoy Y.A., Firsov A.A. Predicting antibiotic combination effects on the selection of resistant Staphylococcus aureus: In vitro model studies with linezolid and gentam-icin. Int J Antimicrob Agents 2018; 52: 854-860.
15. Aktas G, Derbentli S. In vitro activity of daptomycin combined with dalba-vancin and linezolid, and dalbavancin with linezolid against MRSA strains. J Antimicrob Chemother 2017; 72: 441-443.
16. Hanberger H, Nilsson L.E., Maller R, Isaksson B. Pharmacodynamics of daptomycin and vancomycin on Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus demonstrated by studies of initial killing and postantibiotic effect and influence of Ca2+ and albumin on these drugs. Antimicrob Agents Chemother 1991; 35: 1710-1716.
17. Алиева КН., Струкова E.H., Голикова M.B., Портной Ю.А., Фирсов A.A. Зависимая от концентрации антибиотика селекция линезоли-доусточивых стафилококков в динамической системе in vitro. Антибиотики и химиотерапия. — 2016. — Т. 61. — № 9-10. — С. 28-32. / Alieva K.N., Strukova E.N., Golikova M.V., Portnoy Y.A., Firsov A.A. Zavisimaya ot koncentraciy antibiotika selekciya linezolidoustoichivyh stafilokokkov v dinamicheskoy sisteme in vitro. Antibiotiki I Khimioter 2016; 61 (9-10): 28-32. [in Russian]
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:
18. Moellering R.C. Jr. A novel antimicrobial agent joins the battle against resistant bacteria. Ann Intern Med 1999;130: 155-157.
19. StalkerD.J., Jungbluth G.L. Clinical pharmacokinetics oflinezolid, a novel oxazolidinone antibacterial. Clin Pharmacokinet 2003; 42: 1129-1140.
20. Dvorchik B.H., Brazier D., DeBruin M.F., Arbeit R.D. Daptomycin pharmacokinetics and safety following administration of escalating doses once daily to healthy subjects. Antimicrob Agents Chemother 2003; 47: 1318-1323.
21. Blaser J., Stone B.B., Zinner S.H. Two compartment kinetic model with multiple artificial capillary units. J Antimicrob Chemother 1985; 15 (Suppl A): 131-137.
22. SmirnovaM.V., VostrovS.N., StrukovaE.N., DovzhenkoS.A., KobrinM.B., Portnoy Y.A. et al. The impact of duration of antibiotic exposure on bacterial resistance predictions using in vitro dynamic models. J Antimicrob Chemother 2009; 64: 815-820.
Портной Юрий Абрамович — с. н. с., лаборатория фарма-кокинетики и фармакодинамики, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе» (ФГБНУ «НИИНА»), Москва Фирсов Александр Алексеевич — чл.-корр. РАН, профессор, д. б. н., заведующий лабораторией фармакокинетики и фармакодинамики, научный руководитель, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе» (ФГБНУ «НИИНА»), Москва
Алиева Камилла Натиговна — м. н. с., лаборатория фарма-кокинетики и фармакодинамики, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе» (ФГБНУ «НИИНА»), Москва Голикова Мария Владимировна — к. б. н., с. н. с., лаборатория фармакокинетики и фармакодинамики, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе» (ФГБНУ «НИИНА»), Москва
