CC BY
49
НИКИПЕЛОВА Е. А., КИТ О. И., ШАПОШНИКОВ А. В., ЗЛАТНИК Е. Ю., НОВИКОВА И. А.
NIKIPELOVA E. A., KIT O. I., SHAPOSHNIKOV A. V., ZLATNIK E. Y., NOVIKOVA I. A.
I Колоканцерогенез: онкоиммунология локальных изменений
Цитирование: Никипелова Е. А., Кит О. И., Шапошников А. В., Златник Е. Ю., Новикова И. А. Колоканцерогенез: онкоиммунология локальных изменений // Злокачественные опухоли.- 2016.- № 4, спецвыпуск 1. С.- 81-86.
DOI: 10.18027/2224-5057-2016-4s1-81-86
Резюме
Целью исследования явилось изучение локального иммунитета при раке толстой кишки, аденоматозных полипах и поверхностных хронических колитах для оценки роли иммунокомпетентных клеток и цитокинов в канцерогенезе толстой кишки. Выявлено, что аденокарцинома толстой кишки формируется в условиях локального угнетения эффекторных звеньев специфического иммунитета (цитотоксических CD3+CD8+ и Т-лимфоцитов с рецепторами уб) на фоне стимуляции клеток врожденной (NK) и адаптивной иммунной системы (CD3+, Т-хелперно-индукторных -CD3+CD4 и Т-лимфоцитов с рецепторами ар). Развитие тубулярной аденомы толстой кишки происходит на фоне местного нарушения NK и В-клеточных звеньев иммунной системы, и так же, как при раке - стимуляции субпопуляций Т-хелперно-индукторных (CD3+CD4+) и Т-лимфоцитов с рецепторами оф. При поверхностных хронических колитах слизистая оболочка толстой кишки характеризуется высоким уровнем клеток эффекторного звена иммунитета: натуральных киллеров (NK); цитотоксических (CD3+CD8+) и Т-лимфоцитов с рецепторами yS; а также цитокинов IL-2, IL-10, IL-8, с параллельным угнетением В-клеточного звена и низкой продукцией провоспалительных цитокинов (TNF-a, IL-1 a, IL-6, IL-1RA). Исследуемые иммунокомпетентные клетки, находящиеся в микроокружении аденокарциномы, не осуществляют барьерную противоопухолевую защиту вследствие угнетения цитотоксических звеньев адаптивной (CD3+CD8+, TCRyS) иммунной системы, а В-лимфоциты являются сдерживающим фактором прогрессии опухоли. Микроокружение тубулярной аденомы осуществляется преимущественно посредством клеток врожденного иммунитета - натуральных киллеров (NK).
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА
канцерогенез толстой кишки, аденоматозные полипы, поверхностный хронический колит, локальный иммунитет КОНТАКТНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Никипелова Елена Алексеевна - ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, Ростов-на-Дону, e-mail: rnioi@list.ru
Кит Олег Иванович - ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, Ростов-на-Дону, e-mail: rnioi@list.ru
Шапошников Александр Васильевич - ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, Ростов-на-Дону, e-mail: alexshap@donpac.ru
Златник Елена Юрьевна - ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, Ростов-на-Дону, e-mail: elena-zlatnik@mail.ru
Новикова Инна Арнольдовна - ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, Ростов-на-Дону, e-mail: novikovainna@yahoo.com
В России колоректальный рак входит в первую десятку злокачественных опухолей, как по заболеваемости, так и по смертности. В общей структуре онкологических заболеваний шестое место занимает ободочная кишка (6,1%), седьмое -прямая кишка (5,2%) [3].
Механизмы возникновения и развития колоректального рака различны. Существуют экзогенные (пища, алкоголь, курение и др.) и эндогенные факторы (сахарный диабет, метаболический синдром, нарушение жирового обмена и др.), влияющие на развитие заболеваний желудочно-кишечного тракта [7, 16]. Кроме того, к факторам возникновения колоректального рака можно отнести и семейную предрасположенность, так называемые наследственные раки, гендерные различия, возрастные изменения, состояние микрофлоры кишечника [4, 3, 10].
Наличие аденом ободочной кишки является одним из самых существенных факторов риска развития рака. Аденоматозные полипы являются весьма распространенной патологией слизистой оболочки кишечника. Несмотря на то обстоятельство, что в экспериментальных условиях показана возможность развития рака толстой кишки на фоне неизмененной слизистой оболочки, подавляющее число как отечественных, так и зарубежных авторов полагают, что рак ободочной кишки в большинстве случаев развивается из аденом [1, 8, 35]. Большинство исследователей полагают, что полипы толстой кишки, особенно множественные, являются предраковым заболеванием, и большая часть карцином проходит стадию железистого полипа. Степень эпителиальной дис-
плазии в аденоме обычно позитивно коррелирует с её размерами. Наиболее частыми типами полипов толстой кишки являются: аденоматозные полипы или аденомы; ювениль-ные полипы; гиперпластические полипы [1, 8]. Аденоматозные полипы представляют наибольшую опасность с точки зрения возможности малигнизации. По морфологическому строению различают три основные группы аденом: тубулярные, тубулярно-ворсинчатые и ворсинчатые аденомы (виллезные опухоли). Последняя разновидность аденом наиболее часто малигнизируется [1, 8]. Хроническое воспаление в той или иной степени выраженности может служить фоном для возникновения колорек-тального рака [21]. Воспалительные заболевания кишечника делятся на ряд патологических процессов с различной этиологией: язвенный колит, болезнь Крона (БК), недифференцированный колит (НК), занимающий промежуточное положение между язвенным колитом и болезнью Крона [2, 5, 9]. Воспалительные заболевания кишечника вызывают пролиферацию в слизистой оболочке толстой кишки, что ведет к возникновению опухоли. Толстая кишка является онко-генной зоной организма и носителем ряда предопухолевых процессов: микробиота, состав которой меняется, может быть источником воспаления слизистой оболочки; длительные воспалительные хронические заболевания с аутоиммунным деструктивным компонентом (язвенный колит, болезнь Крона); полипозный синдром. Отправной точкой реализации онкоизменений являются эпителиальные клетки слизистой оболочки кишки [12].
Иммунная система желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) представлена лимфоидной тканью, ассоциированной с кишечником (GALT-gut associated lymphоid tissue), располагается в трех частях - диффузно распределена по собственной пластинке под кишечным эпителием, в самом эпителии и в организованных лимфоидных фолликулах, таких как пейеровы бляшки. Она находится в самом тесном контакте с громадным потоком микробного и аллергенного материала, поступающего из просвета кишечника, и служит первым барьером на его пути [6, 24].
Ткани колоректального рака человека инфильтрированы различными иммунными/воспалительными клетками. Имму-ногистохимические исследования показали, что большое значение имеет число Т-лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, что является прогностическим фактором более длительной выживаемости больных раком толстой кишки [30]. Обычно ткань опухоли толстой кишки инфильтрирована малым количеством Т-лимфоцитов. В-клетки чаще всего наблюдаются в лимфоидных фолликулах [31]. Интраэ-пителиальные лимфоциты или туморинфильтрирующие лимфоциты - это обычно CD8+ Т-клетки. Число туморин-фильтрирующих интраэпителиальных CD8+ Т-клеток достоверно коррелировало с более длительной выживаемостью [22]. И, напротив, значительное количество CD8+ Т-клеток в строме опухоли и вдоль инвазивного ее края не являлось важным прогностическим фактором выживаемости больных [26]. Полученные результаты позволили предположить, что значение имеет не только, какие иммунокомпетентные клетки присутствуют в опухоли, но и где они расположены. Лимфоцитарный инфильтрат при колоректальном раке почти всегда сопровождается нейтрофильными и макрофагаль-ными клетками.
A. C. Diederichsen et al. показали, что низкое соотношение туморинфильтрирующих лимфоцитов CD4+/CD8+, выявленное при цитометрическом анализе, является независимым прогностическим фактором более длительной выживаемости больных [17]. Хотя в их исследованиях точно
не доказывается локализация туморинфильтрирующих лимфоцитов TIL in situ, в нем четко показано, что соотношение CD4+/ CD8+ очень важно и что этот фактор взаимосвязан с ролью CD4+ CD25+ FOXP3+ регуляторных клеток в опухолевой ткани [19,22]. Проанализировав иммунные ответные реакции при колоректальном раке, F. Pages с соавт. провели всесторонний анализ TIL [27]. Они концентрировали свое внимание на ранней метастатической инвазии, которая включала следующие гистологические параметры - сосудистые эмболы (опухолевые клетки, лимфоцитарную инвазию, периневральную инвазию - все эти параметры авторы объединили в понятие VELIPI). На основании анализа 959 больных было показано, что VELIPI является независимым прогностическим фактором. Генетический анализ 75 больных показал, что уровни мРНК гранзима В и гранулизина в CD8+, выше в VELIPI отрицательных опухолях, чем в VELIPI положительных опухолях. Эти авторы выполнили цитометриче-ский анализ 39 больных, с целью дифференцировки между наивными Т-клетками (CD3+CCR7+), Т-клетками памяти (CD45RO+CCR7-CD28+CD27+) и эффекторными клетками памяти (CD45RO+CCR7-CD28-CD27-) в опухолевой ткани. VELIPI отрицательные опухоли содержат высокое число зрелых CD8+ Т-клеток. Более того, было показано, что VELIPI отрицательные опухоли при иммуногистохимическом анализе у 377 больных содержат высокое число CD45RO+ клеток памяти. VELIPI отрицательные опухоли у больных без рецидивов имели достоверное повышение ТЫ медиатора Т-ВЕТ, интерферонрегуляторного фактора-1 и INF-y по сравнению с VELIPI положительными опухолями у больных с рецидивом. И при регрессионном анализе СОХ было обнаружено, что число CD45+RO+ является независимым прогностическим фактором наряду с классификацией ТNM. Данное исследование подтверждает предположение о том, что иммунологические наблюдения имеют важное прогностическое значение при колоректальном раке [19, 22].
J. Gaton et al. показали, что экспрессия рецепторов ТЫ адаптивного иммунитета обратно коррелирует с рецидивом опухоли [18]. Больные CD3crhlsh, CD3iмhlsh + CD45ROCThlsh CD45cмhlgh имели более длительную безрецидивную выживаемость, в то время как больные с CD3crl°w, CD3iмlоw + CD45ROcrl°w CD45imtow имели более низкую выживаемость, что позволяет предположить, что плотность рецепторов иммунных клеток является более значимым прогностическим фактором, чем стадия TNM [26].
Пользуясь высокочувствительным методом, T. Tachibana с соавт. удалось показать, что при колоректальном раке в опухоли уровень NK-T клеток с экспрессией маркера ранней активации CD69+ больше, чем в неизмененной слизистой оболочке кишки [33]. Инфильтрация NK-T положительно коррелировала с меньшим числом метастазов в лимфоузлы, а число NK-T клеток являлось независимым прогностическим фактором для более длительной выживаемости и безрецидивного периода, хотя в их работе не указывается на точную локализацию инфильтрации NK-T клеток в тканях рака ободочной кишки. T. Tsuruyama и F Pag§s et al. показали, что клетки располагаются вдоль инвазивного поля [34, 28].
Известно, что экспрессия МНС I на поверхности клетки является предпосылкой для распознавания Т клеток-мишеней. A. G. Menоn et al. показали, что сниженная экспрессия МНС I, особенно экспрессия HLA-A в опухолевых клетках, коррелировала с более длительной безрецидивной выживаемостью [23]. Авторы показали, что наличие CD8+ и CD57+ клеток является независимым прогностическим фактором более длительной выживаемости в безрецидивном периоде.
Инфильтрация опухоли CD8+ и CD57+ клетками обратно коррелировала с экспрессией HLA-B/C и HLA-A опухолевыми клетками, те же авторы подтвердили, что интраэпители-альных клеток CD56+ было меньше в опухоли, чем инраэ-пителиальных клеток CD8+, и что потеря МНС I в клетках злокачественной опухоли связана с более высоким числом интраэпителиальных клеток CD8+, но не NK клеток с CD56+ [29]. Однако интерпретация этих данных пока еще не совсем ясна. Таким образом, интраэпителиальные Т-клетки CD8+ могут присутствовать, несмотря на снижение экспрессии МНС I раковыми клетками ободочной кишки. И CD8+ и NK-клетки играют важную роль в противоопухолевом иммунитете при колоректальном раке [30]. Дендритные клетки (DK) - это наиболее активные анти-генпрезентирующие клетки. Их основные функциональные зоны - это региональные лимфоузлы [11]. Однако DK распределены и в периферических воспалительных тканях. При колоректальных раках зрелые DK распределены вдоль инвазивного края опухоли вместе с Т-клетками [32]. DK имеют важное прогностическое значение. A. R. Dadabayev et al. показали, что DK, экспрессирующие МНС II, в основном распределены в строме опухоли, и их большое содержание в опухоли связанно с более коротким сроком выживаемости [14], однако возможно, что эти DK могут быть незрелыми, поскольку зрелые DK и Т-клетки обычно не находятся в строме опухоли [28], а чрезмерная экспрессия молекул адгезии (ICAM-I) фибробластами в строме может нарушать функции DK.
Было показано, что низкое содержание перитуморальных макрофагов (CD68+) и интраэпителиальных CD8+ Т-клеток обратно взаимосвязано со стадией опухолей [13]. Это может быть следствием подавления системной иммунной супрессии при запущенных стадиях; и наоборот, недостаточная инфильтрация этих клеток может быть причиной метастазов. K.E. de Visser et al. подчеркивают стимулирующий эффект макрофагов и нейтрофилов на прогрессирование рака [15]. Данные воспалительные клетки являются важным фактором развития рака, в основе которого лежит хроническое воспаление (например, рак желудка при гастрите Н.рПоп, рак ободочной кишки, гепатокарцинома при вирусном гепатите) [21]. Однако есть и противоречивые данные - при колоректальном раке может быть и иная ситуация. Как указывалось выше, нейтрофилы в основном расположены вдоль инвазив-ного края опухоли. Исследования показали, что число ней-трофилов при иммуногистохимическом анализе оказалось не значимым прогностическим фактором для выживаемости больных при колоректальном раке [25]. Функция макрофагов может быть как противоопухолевой (М1), так и проопухолевой (М2) [20]. Фенотипический переход от M1 до M2 может быть под действием цитокинов, секретируемых опухолевыми клетками и лимфоцитами, так IFN-y стимулирует фенотипическую поляризацию макрофагов в M1, а IL-4, IL-10 и IL-13 в М2 [20].
Таким образом, анализ данных литературы выявил разнонаправленные мнения о роли локального иммунитета в патогенезе рака толстой кишки. Недостаточно данных о роли локального иммунитета в микроокружении опухоли при раке и полипах толстой кишки, и хронических колитах.
ЦЕЛЬ
Изучить локальный иммунитет при раке толстой кишки, аде-номатозных полипах и поверхностных хронических колитах и оценить роль иммунокомпетентных клеток и цитокинов в канцерогенезе толстой кишки.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
На клиническом материале 200 больных с заболеваниями толстой кишки (113 больных раком толстой кишки, 47 больных аденоматозными полипами толстой кишки, 40 больных поверхностным хроническим колитом) изучены в сравнительном аспекте локальные иммунологические механизмы канцерогенеза толстой кишки. Материалом исследования служили ткань опухоли, а также участки кишки на расстоянии 1-3 см от опухоли - перитумораль-ная зона и 7-10 см от опухоли - линия резекции, взятые интраоперационно. У больных аденоматозными полипами исследовали биопсийный материал ткани полипа, а также слизистую оболочку кишки отступая на 1-3 см и 7-10 см от полипа. При эндоскопическом исследовании проводили забор биопсийного материала больных поверхностным хроническим колитом. Иммунофенотипирование тканевых лимфоцитов (CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD16+ CD56+, CD19+, Т-лимфоциты с рецепторами aß и yô) оценивали с использованием моноклональных антител методом проточной цитофлюориметрии. Уровень цитокинов (TNF-a, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IL-1RA) определяли иммуноферментным методом. Статистическая обработка результатов исследования проведена с использованием пакета современных компьютерных программ STATISTICA 7.0 (StatSoft Inc., США) и MedCalc (версия 9.3.5.0).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Оценка локального иммунного статуса при местно-распро-страненном раке толстой кишки показала, что содержание Т-хелперно-индукторных лимфоцитов (CD3+CD4+) в ткани опухоли было статистически достоверно выше на 45,0%. Соответственно в 1,8 раза и на 52,0% был выше индекс CD4+/CD8+ по сравнению с показателями условно здоровой ткани и пери-туморальной зоны (р<0,05), но снижено на 19% количество СD8+-клеток и В-лимфоцитов на 22,0% по сравнению с показателями условно здоровой ткани и на 43,0% относительно пери-туморальной зоны (р<0,05) (табл. 1). В перитуморальной зоне, напротив, было отмечено высокое содержание CD19+ клеток (на 36,0%), но также низкое количество цитотоксических клеток (CD8+) (на 19,0%) по сравнению с показателями по линии резекции (р<0,05) (табл. 1). По другим критериям достоверных отличий не обнаружено. Исследования локального иммунного статуса в различных отделах толстой кишки (ободочная (сигмовидная) и прямая) не выявили достоверных отличий. В целом, местно-распространенный процесс характеризовался высоким содержанием туморинфильтрирующих Т-хел-перно-индукторных лимфоцитов (CD3+CD4+, CD3+CD4+/ CD3+CD8+) и низким эффекторных цитотоксических (CD3+CD8+ и CD19+) клеток. Однако, перитуморальная зона, возможно, сохраняла иммунный барьер за счет повышенного содержания туморассоциированных В (CD19+)-лимфоцитов по сравнению с интактной тканью.
Сравнительный анализ локальных иммунологических показателей у больных II и III стадией рака толстой кишки не выявил существенных различий, что подтверждает однонаправленность локальных иммунных механизмов при местно-распро-страненном раке.
Иные изменения были при раке толстой кишки с метастазами в печень. В ткани опухоли при местно-распространенном и метастатическом раке толстой кишки изменения были однонаправленные, т.е. процесс характеризовался высоким содержанием туморинфильтрирующих Т-хелперно-индукторных лимфоцитов (CD3+CD4+), но низким - цитотоксических (CD3+CD8+)
■
Таблица 1. Иммунологические показатели в тканях кишки у больных местнораспространенным, метастатическим раком и полипами толстой кишки, %
Субпопуляция Местно-распространенный рак, п=73 Метастатический рак, п=40 Аденома, п=47
лимфоцитов опухоль перитумор. зона линия резекции опухоль перитумор. зона линия резекции полип 1-3 см от полипа 7-10 см от полипа
CD3+ 65,5±2,7 52,5±2,0 59,1±3,1 63,6±3,8 • 41,1±3,2 56,9±3,6 77,8±3,4 57,6±3,3 * 70,6±3,6
CD3+ CD4+ 35,9±1,7 * 24,9±1,7 24,7±1,5 34,2±2,8 * 25,5±2,9 25,9±2,9 41,3±2,6*^ 24,9±3,8 31,8±3,2
CD3+ CD8+ 29,2±1,7 * 29,1±2,1 * 36,1±2,5 24,0±3,3 19,8±2,8 * 28,2±2,7 35,2±2,2 32,2±2,9 36,5±2,6
CD16+ CD56+ 12,3±1,9 11,3±2,0 10,5±1,5 14,1±3,6 *• 9,3±2,9 7,7±2,4 9,0±2,3 21,5±2,3* 13,1±1,9
CD19+ 18,6±2,0 * 32,4±2,9 * 23,7±2,4 26,2±2,4 *• 43,5±3,4 * 34,1±2,7 12,8±3,0 20,6±2,0 16,8±2,9
TСRcф 42,8±5,1 31,9±3,6 36,1±4,3 33,2±4,1 32,9±3,9 33,6±3,6 21,9±2,2 17,3±2,1 16,3±2,6
TCRY8 10,9±1,5 9,0±0,98 10,8±1,4 6,1±1,2 5,5±1,3* 9,1±1,3 20,4±2,1 17,9±1,9* 24,5±2,6
CD4+/CD8+ 1,7±0,2 * 1,12±0,2 0,94±0,1 1,4±0,1 1,4±0,2 1,4±0,3 1,9±0,5 0,9±0,2 1,1±0,4
Примечание - статистически достоверно относительно линии резекции (7-10 см - условно-здоровая ткань): * - по критерию Стьюдента, р<0,05; • - по Z-критерию, р<0,05
Рис. 1. Уровень субпопуляций лимфоцитов в условно-здоровых зонах
и В(CD19+) клеток. При метастазах отмечен значительно более высокий уровень туморинфильтрирующих натуральных киллеров. Перитуморальная зона характеризовалась сниженным количеством цитотоксических Т- (CD3+CD8+) клеток с рецепторами TCR уд и повышенным - В-клеток (табл. 1). Оценка локального иммунного статуса аденомы показала однонаправленные изменения, как и при злокачественном процессе, но в отличие от рака в полипе было низкое содержание натуральных киллеров при повышенном уровне CD3+CD8+-лимфоцитов.
Микроокружение аденомы (1-3 см от полипа) характеризовалось, напротив, высоким уровнем Ж-клеток (в 2 раза), но низким количеством ТТО3+)-клеток и лимфоцитов с рецепторами ТСН уд (на 18,0 и 27,0% соответственно) (р<0,05) (табл. 1). Представлялось интересным изучить соотношение «условно-здоровых» тканей в исследуемых группах, т.е. выявить насколько опухолевый процесс затрагивает изменения непосредственно в иммунном микроокружении опухоли в сравнении с отдаленными участками кишки (рис.1).
Таблица 2.
Уровень цитокинов в тканях кишки при полипах и раке толстой кишки
Цитокины Аденома, n=47 Аденокарцинома, n=113
полип 1-3 см 7-10 см опухоль перитумор. зона линия резекции
IL-2 34,97±8,01 33,4±5,8 1 61,5±9,5 17,4±3,031 6,9±1,56 5,34±0,87
TNF-a 6,8±1,31 5,6±1,2 4,49±0,94 16,69±1,21 11,17±1,5 11,98±0,77
IL-6 20,4±8,6 24,5±6,9 39,24±9,4 197,9±25,921 72,2±17,32 54,41±10,6
IL-8 183,2±43,1 166,4±53,7 166,04±33,3 517,91±27,011 239,33±40,9 1 126,02±16,9
IL-10 21,6±3,3 13,4±2,8 17,0±2,8 7,56±2,14 5,92±1,49 8,02±2,72
IL1a 44,5±6,0 49,4±6,02 59,2±8,1 268,12±36,51 82,24±11,95 101,13±14,2
IL-1RA 3755,3±268,8 2335,3±39,1 2881,2±256,0 5652,2±258,41 3748,9±313,4 3774,2±394,8
Примечание - отличия статистически достоверны от показателей линии резекции (7-10 см от полипа или опухоли) по критерию Стью-дента, р<0,05
Найдено, что слизистая оболочка толстой кишки при поверхностном хроническом колите характеризовалась высоким уровнем натуральных киллеров, цитотоксических (CD3+CD8+) и Т-лимфоцитов с рецепторами у&, но угнетением В-клеточ-ного звена иммунитета. Обратная тенденция наблюдалась при раках. Полипы занимали промежуточное положение (рис. 1). Представляло особый интерес изучение тканевого цитокинового спектра. Цитокины, как известно, являются главными продуктами иммунокомпетентных клеток, которые, с одной стороны, влияют на функции этих клеток с усилением их противоопухолевой активности, а с другой - стимулируют рост опухоли. Мы изучили уровень тканевых цитокинов (IL-2, TNF-a, IL-6, IL-8, IL-10, IL-1, IL-1RA) в опухоли и в окружающих тканях (табл. 2).
В основном все изученные цитокины в аденокарциноме имели высокий уровень, кроме IL-10. Так, содержание IL-2, IL-6, IL-8, IL-1a в ткани опухоли было выше в 2-4 раза, чем в перитуморальной зоне и в 3-5 раз по сравнению с зоной резекции. При этом в области линии резекции уровень IL-8 статистически достоверно был ниже в 2 раза по сравнению с перитуморальной зоной (табл. 2).
В полипе, а также вокруг него (1-3 см), снижено содержание IL- 2 (на 43,0 и 44,0% соответственно, р<0,05), продуцентами которого являются Т-хелперно-индукторные лимфоциты. Несмотря на их высокое количество в аденоме, эти клетки, по всей вероятности, оказались функционально не состоятельны для реализации специфической иммунной защиты. Кроме того, в аденоме отмечен низкий уровень IL-6 (на 48,0%) и относительно высокий IL-1RA (р<0,05). Отмечено разнонаправленное содержание тканевого IL-10. Так, его уровень в доброкачественной опухоли
был выше на 27,0%, а в 1-3 см от неё - ниже на 21,0%. Такая же тенденция наблюдалась и для IL-1RA - в опухоли его было выше на 30,0%, а в прилегающей зоне ниже на 19,0%. Таким образом, в ткани аденомы повышено содержание провоспали-тельных цитокинов (TNF-a, IL-8, IL-10, IL- 1RA) (табл. 2). Найденная прямая корреляционная зависимость между уровнем TNF-a в аденоме и в интактных тканях (r=0,72 по сравнению с 1-3 см, r=0,98 по сравнению 7-10 см, р<0,05) и между «условно здоровыми зонами» (r=0,57, р<0,05), демонстрирует, что продукция TNF-a в ткани аденомы может дистантно влиять на ее микроокружение.
Цитокиновый уровень в условно-здоровых тканях толстой кишки имел более низкие значения за исключением высокого содержания IL-2, IL-10 и IL-8 в слизистой оболочке при колите, продуцентами которых являются Т-лимфоциты, антигенпре-зентирующие клетки, а также клетки эпителия кишечника.
ВЫВОДЫ
Таким образом, развитие злокачественного процесса при раке толстой кишки во многом определяется взаимовлиянием пула опухолевых и иммунокомпетентных клеток, продуктов их активности - цитокинов. Локальные иммунологические нарушения в пренеопластических тканях толстой кишки предопределяют патогенетическую инициацию рака толстой кишки. Микроокружение неоплазмы по иммунологическим параметрам является опухолевым полем, способствующим дальнейшему прогрессированию аденокарциномы толстой кишки, а при аденоматозных полипах определяет либо его злокачественную трансформацию, либо служит буферной зоной.
ЛИТЕРАТУРА
1. Давыдов, М. И. Онкология: учебник / М. И. Давыдов, Ш. Х. Ганцев.- М.: Геотар-Медиа, 2010.- 920 с. 2.
2. Ильинская, О. Н. Особенности культивируемой бактериальной микрофлоры кишечника при колоректальном канцерогенезе / О. Н. Ильинская // Креативная хирургия и онкология.-2011.- № 4.- С. 114-117.
3. Каприн, А. Д. Злокачественные новообразования в России в 2014 году (заболеваемость и смертность) / А. Д. Каприн,
В. В. Старинский, Г. В. Петрова.- М.: МНИОИ им. П. А. Герцена филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России, 2016.-250с.
4. Кит, О. И. Некоторые клинические особенности первично-множественного рака толстой кишки / О. И. Кит, Ю. А. Геворкян, Е. А. Никипелова, Е. М. Франциянц и др. // Современные проблемы науки и образования.-2013.- № 2; URL: http://www.science-education.ru/ 108-8681.
5. Ривкин, В. Л. Сочетанная колоректальная патология /
В. Л. Ривкин // Гастроэнтерология.- 2012.- № 2.- С. 50-51.
6. Хаитов, Р. М. Новые данные о строении и функционировании иммунной системы желудочно-кишечного тракта /
Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Анналы хирургической гепатологии.- 2002.- Т. 2, № 2.- С. 105-110.
7. Шапошников, А. В. Колоректальный рак. Канцерогенез
и онкопревенция / А. В. Шапошников.- М.: Форте принт, 2015.- 160 с. 8. Шелыгин, Ю.А., Молекулярно-генетическое исследование наследственной предрасположенности к разным формам полипоза толстой кишки / Ю. А. Шелыгин.,
B. Н. Кашников., С. А. Фролов // Колопроктология, научно-практический журнал.- 2013.- № 1 (43).- С. 9-14.
9. Andersen, V. Colorectal cancer in patients with inflammatory bowel disease: Can we predict risk? / V. Andersen, Halfvarson, U. Vogel // World. Gastroenterology.- 2012.- Vol.18, N31.-
P. 4091-4094.
10. Aziz, Q. Gut microbiota and gastrointestinal health: current concept and future directions / Q. Aziz et al. // Neurogastroenterol. Motil.- 2013.- Vol.25.- P. 4-15.
11. Banchereau, J. Dendritic cells as therapeutic vaccines against cancer / J. Banchereau, A. K. Palucka // Nat Rev Immunol.- 2005; 5: 296-306.
12. Bruin, S. С. The role of clinical, pathological and molecular characteristics in colorectal cancer management / S. С. Bruin // Leiden University Repository.- 2013; 09:26. (// hdl.handle.net)
13. Chiba, T. Intraepithelial CD8+ T-cell-count becomes a prognostic factor after a longer follow-up period in human colorectal carcinoma: possible association with suppression of micrometastasis / T. Chiba, H. Ohtani, T. Mizoi, Y. Naito,
E. Sato, H. Nagura, A. Ohuchi, K. Ohuchi, K. Shiiba, Y. Kurokawa, S. Satomi // Br J Cancer.- 2004; 91: 1711-1717.
14. Dadabayev, A. R. Dendritic cells in colorectal cancer correlate with other tumor-infiltrating immune cells / A. R. Dadabayev, M. H. Sandel, A. G. Menon, H. Morreau, C. J. Melief, R. Offringa, S.H.van der Burg, C. Janssen-van Rhijn, N. G. Ensink,
R. A. Tollenaar, C.J. van de Velde, P. J. Kuppen // Cancer Immunol Immunother.- 2004; 53: 978-986.
15. de Visser, K. E. Paradoxical roles of the immune system during cancer development / K.E. de Visser, A. Eichten, L. M. Coussens // Nat Rev Cancer.- 2006; 6: 24-37.
16. Derry, M. M. Identifying molecular targets of lifestyle modifications in colon cancer prevention / M. M. Derry, K. Raina,
C. Agarwal, R. Agarwal // Frontiers in oncology.- 2013.- Vol.3, art. 119.
17. Diederichsen, A. C. Prognostic value of the CD4+/CD8+ ratio of tumour infiltrating lymphocytes in colorectal cancer and HLA-DR expression on tumour cells / A. C. Diederichsen, J. B. Hjelmborg, P. B. Christensen, J. Zeuthen, C. Fenger // Cancer Immunol Immunother.- 2003; 52: 423-428.
18. Galon, J. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome / J. Galon, A. Costes, F. Sanchez-Cabo, A. Kirilovsky, B. Mlecnik,
C. Lagorce-Pages, M. Tosolini, M. Camus, A. Berger, P. Wind,
F. Zinzindohoue, P. Bruneval, P. H. Cugnenc, Z. Trajanoski, W. H. Fridman, F. Pages // Science.- 2006; 313: 1960-1964.
19. Grizzi, F. Prognostic value of innate and adaptive immunity in colorectal cancer / F. Grizzi, P. Bianchi, A. Malesci, L. Laghi // World J Gastroenterol.- 2013 January 14; 19(2) 174-184.
20. Mantovani, A. Tumor-associated as prototypic type II polarized phagocyte population: role in tumor progression / A. Mantovani, P. Allavena, A. Sica // Eur. J. Cancer.- 2004.- Vol/ 40, N11.-
P. 1660-1667.
21. McLean, M. H. The inflammatory microenvironment in colorectal neoplasia / M.H. McLean, G. I. Murray, K. N. Stewart, G. Norrie,
C. Mayer, G. L. Hold, J. Thomson, N. Fyfe, M. Hope, N. A. Mowat, J. E. Drew, E. M. El-Omar // PLoS One.- 2011; 6: e15366 [PMID:21249124 DOI: 10.1371/journal.pone.0015366].
22. Mei, Z. Tumor-infiltrating inflammation and prornosis in colorectal cancer: systematic review and meta-analysis / Z. Mei, Y. Liu, C. Liu, A. Cui, Z. Liang, G. Wang, H. Peng, L. Cui and C. Li // British Journal of Cancer.- 2014; 110: 1595-1605.
23. Menon, A. G. Down-regulation of HLA-A expression correlates with a better prognosis of colorectal cancer / A. G. Menon,
H. Morreau, R. A. Tollenaar, E. Alphenaar, M. Van Puijenbroek, H. Putter, C. M. Janssen-Van Rhijn, C. J. Van De Velde,
G. J. Fleuren, P. J. Kuppen // Lab Invest.- 2002; 82: 1725-1733.
24. Meresse, B. Innate T cell responses in human gut / B. Meresse, N. Cerf-Bensussan // Seminars in Immunology.- 2009.- Vol.21.-P. 121-129.
25. Nathan, C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities / C. Nathan // Nat Rev Immunol.- 2006; 6: 173-182.
26. Nosho, K. Tumour-infiltrating T-cell subsets, molecular changes in colorectal cancer, and prognosis: cohort study and literature review / K. Nosho, Y. Baba, N. Tanaka, K. Shima, M. Hayashi,
J. A. Meyerhardt, E. Giovannucci, G. Dranoff, C. S. Fuchs, S. Ogino // J Pathol.- 2010; 222:350-366 [PMID: 20927778 DOI: 10.1002/ path.2774].
27. Pages, F. Effector memory T cells, early metastasis, and survival in colorectal cancer / F. Pages, A. Berger, M. Camus, F. Sanchez-Cabo, A. Costes, R. Molidor, B. Mlecnik, A. Kirilovsky, M. Nilsson,
D. Damotte, T. Meatchi, P. Bruneval, P. H. Cugnenc, Z. Trajanoski, W. H. Fridman, J. Galon // N Engl J Med.- 2005; 353:2654-2666.
28. Pages, F. Immune infiltration in human tumors: a prognostic factor that should not be ignored / F. Pages, J. Galon, M. C. Dieu-Nosjean, E. Tartour, C. Sautes-Fridman, W. H. Fridman // Oncogene.- 2010; 29: 1093-1102 [PMID: 19946335 DOI: 10.1038/ onc.2009.416].
29. Sandel, M. H. Natural killer cells infiltrating colorectal cancer and MHC class I expression / M. H. Sandel, F. M. Speetjens, A. G. Menon, P. A. Albertsson, P. H. Basse, M. Hokland,
J. F. Nagelkerke, R. A. Tollenaar, C.J. van de Velde, P. J. Kuppen // Mol Immunol.- 2005; 42: 541-546.
30. Schreiber, R. D. Cancer immunoediting: integrating immunity's roles in cancer suppression and promotion / R. D. Schreiber,
L. J. Old, M. J. Smyth // Science.- 2011; 331: 1565-1570.
31. Sobin, L. H. Eds. TNMclassification of malignant tumours. 6th ed. / L. H. Sobin, Ch. Wittekind - New York (NY): John Wiley & Sons. Inc.; 2002.
32. Suzuki, A. Mature dendritic cells make clusters with T cells in the invasive margin of colorectal carcinoma / A. Suzuki, A. Masuda,
H. Nagata, S. Kameoka, Y. Kikawada, M. Yamakawa, T. Kasajima // J Pathol.- 2002; 196: 37-43.
33. Tachibana, T. Increased intratumor Valpha24-positive natural killer T cells: a prognostic factor for primary colorectal carcinomas /
T. Tachibana, H. Onodera, T. Tsuruyama, A. Mori, S. Nagayama, H. Hiai, M. Imamura // Clin Cancer Res.- 2005; 11: 7322-7327.
34. Tsuruyama, T. NKT cell infiltration in human colorectal cancer as a prognostic factor / T. Tsuruyama et al. // 95th General Meeting of the Japanese Society of Pathology.- 2006.
35. Yanhong Shi, Zhenfeng Li, Wei Zheng et al., Changes of immunocytic phenotypes and functions from human colorectal adenomatous stage to cancerous stage: Update / Yanhong Shi, Zhenfeng Li, Wei Zheng et al. // Immunobiology 220 (2015) 1186-1196.
