CC BY
2016. Chan T., Barra N.G., Lee A.J. et al. Innate and adaptive immunity against herpes simplex vurus type 2 in the genital mucosa. J. Reproductive Immunology. 2011, 88: 210-218.
17. Nigro G., Mazzocco M., Mattia E. et al. Role of the infections in recurrent spontaneous abortion. J. Mater. Fetal Neonatal Med. 2011, 24 (8): 983-989.
18. North J., Coombs R., Levy J. Photodynamic inactivation of free and cell-associated HIV-1 using the photosensitizer, benzoporphyrin derivative. J. Acquir. Immune Defic. Syndr. 1994, 7 (9): 891-898.
19. Tao J.N., Duan S.M., Li J. Experimental studies on treatment of HSV infections with photo-dynamic therapy using 5-aminolevulinic acid. Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. 2007, 21 (1): 79-82.
20. Tao L., Suhua C., Juanjuan C. et al. In vitro study on human cytomegalovirus affecting early pregnancy villous EVT's invasion function. Virology J. 2011, 8: doi: 10.1186/1743-422X-8-114.
21. Yang Y.G., Zou X.B., Zhao H. et al. Photodynamic therapy of condyloma acuminata in pregnant women. Chin. Med. J. 2012, 125 (16): 2925-2928.
22. Yin H., Li Y, Zheng Y. et al. Photoinactivation of cell-free human immunodeficiency virus by hematoporphyrin monomethyl ether. Lasers in Medicine Science. 2012, 27 (5): 943-950.
23. Wainwright M. Local tretment of viral disease using photodynamic therapy. Photochem Photobiol. Sci. 2004, 3 (5): 406-411.
24. Wainwright M. Photoinactivation of viruses. Photomed Laser Surgery. 2009, 27 (2): 357363.
Поступила 18.06.13
Контактная информация: Свитич Оксана Анатольевна, д.м.н.,
105064, Москва, М.Казенный пер., 5А, р.т. (495)674-55-01
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014
А.В.Семенов1, И.А.Власова2, Ю.В.Останкова1, Арег А.Тотолян1
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ HBsAg В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И КОЛЬЦЕВОЙ КОВАЛЕНТНО ЗАМКНУТОЙ ДНК ВИРУСА ГЕПАТИТА В В ТКАНИ ПЕЧЕНИ КАК МАРКЕРЫ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В
1НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, 2Городской вирусологический консультативно-диагностический центр, Санкт-Петербург
Цель. Количественная оценка содержания кольцевой ковалентно замкнутой ДНК (ккзДНК) ВГВ в тканях печени пациентов с ХВГВ умеренной активности течения по сравнению с неактивными носителями HBsAg, а также установление возможной связи между количеством ккзДНК ВГВ в клетках печени и уровнем HBsAg в сыворотке крови у этих групп пациентов. Материалы и методы. Пациентов (п=34) с диагнозом ХВГВ обследовали на уровень АЛТ, HBsAg (качественно и количественно), анти-НВсог IgG, анти-НВе IgG, анти-НСУ IgG+IgM, анти-ВГД IgG+IgM, ВГВ ДНК в качественном и количественном варианте. У всех пациентов взята биопсия печени. В ткани печени определяли ккзДНК ВГВ по методу РоШсто Т. et а1. (2004). Результаты. По результатам ПЦР ДНК ВГВ пациенты выделены в группу неактивных носителей HBsAg (п=16) и ХВГВ (п=18) умеренной активности. Вирусная нагрузка у пациентов с ХВГВ составила в среднем 540+230 МЕ/мл. Уровень АЛТ у носителей был несколько ниже, чем у пациентов с ХВГВ. Уровень HBsAg в крови у неактивных носителей был значительно ниже и составил 940+259 МЕ/мл против
2559±982 МЕ/мл у пациентов с ХВГВ (р<0,05). Количество ккзДНК на 1 клетку у неактивных носителей HBsAg — 0,15±0,14, а у пациентов группы ХВГВ с умеренной активностью — 1,71±1,32 (р=0,034). Заключение. Был отработан метод количественного определения ккзДНК ВГВ в ткани печени пациентов. Различие в количественном содержании HBsAg в сыворотке крови неактивных носителей и больных ХВГВ умеренной активности отражает различия в степени инфицированности гепатоцитов ВГВ.
Журн. микробиол., 2014, № 1, С. 55—61
Ключевые слова: ХВГВ умеренной акьтивности, неактивные носители HBsAg, ккзДНК ВГВ
A.V.Semenov1, I.A.Vlasova2, Yu.V.Ostankova1, AregA.Totolyan1
QUANTITATIVE DETERMINATION OF HBsAg IN BLOOD SERA AND HEPATITIS B VIRUS COVALENTLY CLOSED CIRCULAR DNA IN LIVER TISSUE AS MARKERS OF CHRONIC VIRAL HEPATITIS B ACTIVITY
1Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology, 2City Virological Consultative-Diagnostic Centre, St. Petersburg, Russia
Aim. Quantitative evaluation of HBV covalently closed circular DNA (cccDNA) content in liver tissue of patients with moderately active CHBV course compared with inactive HBsAg carriers as well as establishment of a possible link between HBV cccDNA in liver cells and HBsAg level in blood sera in these groups of patients. Materials and methods. Patients (n=34) with CHBV diagnosis were examined for levels of ALT, HBsAg (qualitatively and quantitatively), anti-HBcor IgG, anti-HBe IgG, anti-HCV IgG+IgM, anti-HDV IgG+IgM, HBV DNA in qualitative and quantitative variant. Liver biopsy was carried out in all the patients. HBV DNA was determined in liver tissue by Pollicino Т. et al. (2004). Results. Based on HBV DNA PCR, the patients were allocated to a group of inactive HBsAg carriers (n=16) and CHBV (n=18) of moderate activity. Viral load in CHBV patients had a mean of 540±230 IU/ml. ALT level in carriers was comparatively lower than in patients with CHBV. HBsAg level in blood of inactive carriers was significantly lower, 940±259 IU/ml against 2559±982 IU/ml in patients with CHBV (p<0.05). The quantity of cccDNA per 1 cell in inactive HBsAg carriers — 0.15±0.14, and in patients group of CHBV with moderate activity — 1.71±1.32 (p=0.034). Conclusion. The method of quantitative determination of HBV cccDNA in liver tissue of patients was worked out. Differences in quantitative content of HBsAg in blood sera of inactive carriers and CHBV patients with moderate activity reflect changes in the extent of hepatocyte infection by HBV.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2014, No. 1, P. 55—61
Key words: moderately active CHBV, inactive HBsAg carriers, HBV cccDNA
Для лабораторной диагностики вирусного гепатита В (ВГВ) используется широкий спектр серологических и молекулярно-биологических маркеров. Их диагностическое значение и варианты интерпретации хорошо изучены и подробно описаны как в специализированной литературе, так и в различных справочных изданиях [2-4]. Однако сложный жизненный цикл вируса и многообразие вариантов иммунного ответа организма на инфицирование ВГВ предопределяют различные сценарии исхода острого вирусного гепатита В, вероятность его перехода в хронический вирусный гепатит В (ХВГВ), а также различные варианты активности течения хронической инфекции. Одним из вариантов течения ХВГВ является носительство HBsAg с минимальной репликативной активностью вируса, когда в сыворотке/плазме крови определяется HBsAg, а ПЦР ДНК ВГВ, как правило, определяется в крайне низких количествах либо совсем не выявляется в плазме крови. Уровень цитолиза у таких пациентов нормальный либо незначи-
тельно превышает норму, индекс гистологической активности при проведении пункционной биопсии печени соответствует минимальным значениям. Большинство из таких пациентов не нуждается в немедленном назначении противовирусной терапии, а может находиться на диспансерном наблюдении в течение значительного времени.
Молекулярный механизм, лежащий в основе явления носительства HBsAg неоднократно освещался в работах различный авторов [7]. В основе возникновения явления носительства HBsAg лежат процессы иммунологического и эпигенетического регулирования трансляции субгеномных (сгРНК) и прегеномных копий РНК (пгРНК) с молекулы кольцевой ковалентно замкнутой ДНК (ккзДНК) ВГВ. Молекулы сгРНК являются матрицами для синтеза вирусных белков, в том числе и HBsAg, тогда как молекула пгРНК является матрицей для синтеза вирусного генома, опосредованного активностью вирусной полимеразы [6]. При наличии достаточного контроля со стороны иммунной системы хозяина сборка и выход полноразмерных вирусных частиц ВГВ из инфицированного гепатоцита подавляется вплоть до недектируемого методом ПЦР уровня, в то время как транскрипция вирусных белков с сгРНК ВГВ происходит с интенсивностью, достаточной для определения HBsAg в пробах периферической крови методом рутинного ИФА [14].
Подавление вирусной репликации при переходе ХВГВ в стадию носительства не сопровождается элиминацией ккзДНК вируса из гепатоцитов. При этом интенсивность трансляции вирусных белков снижается, что отражает количественное изменение уровня инфицированности гепатоцитов ккзДНК ВГВ, поскольку доказана прямая связь между степенью инфицированности гепатоцита и интенсивностью процесса повреждения печени при ХВГВ [13]. Удобным суррогатным маркером для оценки пораженности гепатоцитов ВГВ может служить количественное определение HBsAg [1]. Ранее было показано, что количественная оценка содержания HBsAg является значительно более информативным показателем эффективности противовирусной терапии ХВГВ пегилированными интерферо-нами (ПЭГ-ИФН), чем применение количественной ПЦР с измерением вирусной нагрузки [8], поскольку достоверное снижение содержания HBsAg в сыворотке крови пациентов с ХВГВ коррелировало с устойчивым вирусологическим ответом при применении ПЭГ-ИФН. Приведенные выше данные позволяют обоснованно утверждать о наличии прямой корреляционной связи между содержанием ккзДНК ВГВ в инфицированных клетках печени и содержанием HBsAg в сыворотке периферической крови пациентов с ХВГВ. В пользу подобного утверждения свидетельствует сам механизм персистенции ВГВ с образованием уникальных транскрипционных интермедиатов во внутриклеточном жизненном цикле вируса — молекул ккзДНК как основного источника для синтеза вирусных белков.
Целью настоящего исследования являлась количественная оценка содержания ккзДНК ВГВ в тканях печени пациентов с ХВГВ умеренной активности течения по сравнению с неактивными носителями HBsAg, а также установление возможной связи между количеством ккзДНК ВГВ в клетках печени и уровнем HBsAg в сыворотке крови у этих групп пациентов.
Пациенты с диагнозом хронический вирусный гепатит В проходили лабораторное обследование и пункционное биопсийное обследование в стационарах Санкт-Петербурга. Часть биоптата (1 — 3 мм), полученного при пункционной биопсии печени по общепринятой методу [9], подвергалась замораживанию при -80°С в среде Игла (200 мкл) до обследования. Сыворотка пациента обследовалась на HBsAg, анти-Мсо! ^в, анти-Ме ^в, анти-НСУ ^в+^М (ЗАО «Вектор-Бест»), анти-ВГД И^в+И^М (НПО «Диагностические системы»). Плазма крови исследовалась на наличие ВГВ ДНК (ООО «Интерлабсервис») с использова-
нием магнитного формата выделения ДНК (набор «МАГНО-сорб», ООО «Интерлабсервис») из объема плазмы 1 мл для повышения аналитической чувствительности метода. Все исследования проводили по стандартным методикам.
Пациенты с наличием антител к ВГС — HCV IgG+IgM (+) и ВГД исключались из анализа. Пациентам с положительным результатом ПЦР ДНК ВГВ выполняли количественные исследования с целью определения вирусной нагрузки ДНК ВГВ. Для оценки активности течения ХВГ проводилось определение уровня АЛТ.
Для определения ккзДНК использовали метод Pollicino Т. et al. [11] со стандартным протоколом выделения ДНК с протеиназой К по Sambrook et al. (1989) с незначительными модификациями. Полученный образец использовали для ПЦР. Выделенную ДНК из биоптатов обрабатывали эндонуклеазой Mung Bean («Сибэнзим») из расчета 1 Ед фермента на 1 мкг ДНК для удаления одноцепочеч-ных ДНК и РНК и расщепления геномной ДНК ВГВ (частично кольцевой).
В качестве праймеров использовали HBV P23 5'-CTGAATCCTGCGG ACGACCC-3' 1441 — 1460 F и HBV P24 5-CCCAAGGCACAGCTTGGAGG-3 1889 — 1869 R, меченные FAM [11]. Для детекции использовали канал FAM. Для внутреннего контроля использовали амплификацию гена ß-глобина следующей парой праймеров, меченных HEX: forward: 5'-CTGGGCAGGCTGCTGGTG-3', reverse: 5'-GCTTGTCACAGTGCAGCTC-3'. Детекцию проводили по каналу HEX. Подбор условий и выполнение исследование проводили на приборе iCycler iQ5 («Bio-Rad»). Для количественной стандартизации амплификации с праймерами HBV P23 и HBV P24 использовали предварительно охарактеризованные с помощью набора «АмплиСенс HBV-Монитор-FRT» для количественной амплификации образцы ДНК ВГВ. Для количественной стандартизации амплификации с праймерами гена ß-глобина использовали предварительно количественно охарактеризованные лейкоцитарные взвеси, полученные из образцов периферической крови.
Количественное определение HBsAg выполняли с использованием набора «HBsAg-ИФА-Бест-количественный» (ООО «Вектор-Бест») с предварительным разведением сывороток 1:10, 1:100 и 1:1000.
Для статистической обработки использовали общепринятые методы статистического анализа. Всего были обследованы 34 пациента.
Маркеры инфицированности ВГВ были выявлены у всех обследуемых пациентов (n=34). HBsAg также выявляли во всех 34 исследованных пробах крови, при этом в 18 пробах был получен положительный результат ПЦР ДНК ВГВ, что позволило этих пациентов отнести к группе ХВГВ. У 16 пациентов результат ПЦР ДНК ВГВ был отрицательным либо <10 ME/мл при аналитической чувствительности тест-системы — 10 МЕ/мл, что позволило отнести их к группе неактивных носителей HBsAg. Уровень цитолиза у обследованных пациентов при неактивном носительстве HBsAg (АЛТ=39±12 Ед/л) был незначительно, но недостоверно ниже, чем в группе пациентов с ХВГВ умеренной активности (АЛТ=51±18 Ед/л, р>0,05).
Все положительные по результатам качественного определения ДНК ВГВ в плазме крови пробы были подвергнуты количественному анализу. Вирусная нагрузка у пациентов с ХВГВ варьировала в пределах 230 — 1170 МЕ/мл и составила в среднем 540±230 МЕ/мл.
Определение количества HBsAg в сыворотке периферической крови также выявило различия между неактивными носителями HBsAg и пациентами с ХВГВ. Уровень HBsAg в крови у неактивных носителей был значительно ниже и составил 940±259 МЕ/мл против 2559±982 МЕ/мл у пациентов с ХВГВ (р<0,05).
При анализе препарата ДНК, выделенного из биоптата печени, ккзДНК ВГВ
была выявлена во всех 34 проанализированных образцах, что соответствует современному представлению о патогенезе ВГВ. Количественный анализ содержания ккзДНК в пересчете на 1 копию гена в-глобина выявил существенные различия между группами неактивных носителей HBsAg (0,15±0,14 копий/кл) и пациентами с ХВГВ с умеренной активностью (1,71+1,32 копий/кл).
В результате проведенных исследований был отработан метод количественного определения ккзДНК ВГВ в ткани печени пациентов. Благодаря постэкстракционному применению нуклеазы Mung bean удалось разделить ккзДНК и циркулирующую в инфицированных гепатоцитах геномную ДНК ВГВ в силу селективной тропности нуклеазы к одноцепочечным молекулам ДНК, в том числе частично не замкнутым кольцевым молекулам (как в случае геномной ДНК ВГВ).
Положительный результат выявления ДНК ВГВ в ткани печени у всех пациентов, вне зависимости от результатов определения ДНК ВГВ в периферической крови, соответствует современным представлениям о патофизиологическом механизме ВГВ [5], а также коррелирует с активностью инфекционного процесса. Согласно современным рекомендациям по ведению пациентов с ХВГВ основной целью терапии ХВГВ является предотвращение прогрессирования хронического заболевания в цирроз и гепатоцеллюлярную карциному за счет устойчивого снижения уровня репликации вируса вплоть до недетектируемых величин [12]. Таким образом, группа неактивных носителей HBsAg не нуждается в активной противовирусной терапии, а подлежит диспансерному наблюдению с целью своевременного выявления возможной реактивации ХВГВ. Пока критерием, позволяющим выявить «истинных» неактивных носителей HBsAg, является метод ПЦР. Несмотря на высокую информативность ПЦР, продолжаются поиски иных лабораторных маркеров, позволяющих дифференцировать стадии ХВГВ.
Одним из возможных маркеров может служить количественное определение HBsAg в сыворотке крови методом иммуноферментного или иммунохемилюми-несцентного анализа. Полученные результаты показали, что содержание HBsAg в сыворотке периферической крови позволяет достоверно выделить группу пациентов с неактивным носительством HBsAg. При этом уровень АЛТ в сравниваемых группах отличался недостоверно, что не позволяет использовать этот показатель для выделения группы неактивных носителей.
Различие в количественном содержании HBsAg в сыворотке крови неактивных носителей и больных ХВГВ умеренной активности отражает различия в степени инфицированности гепатоцитов ВГВ: если у пациентов с ХВГВ инфицирован практически каждый гепатоцит (от 0,3 до 2 копий генома ВГВ в виде ккзДНК на клетку), то у неактивных носителей соотношение инфицированных и неинфици-рованных клеток печени было значительно ниже и колебалось от 1:120 до менее, чем 1:3 клетки.
При низком содержании ккзДНК ВГВ в клетках печени должен понижаться синтез специфических вирусных белков, что совпадает с полученными результатами по количественному определению HBsAg и соответствует данным из литературных источников [7]. Таким образом, содержание HBsAg в сыворотке периферической крови отражает уровень накопления ккзДНК ВГВ в клетках печени.
Также следует подчеркнуть, что один из возможных неблагоприятных вариантов течения неактивного носительства HBsAg является реактивация ХВГВ, при которой происходит значительное возрастание репликативной активности вируса и в ткани печени накапливается ккзДНК. Одним из критериев для разделения «истинных» неактивных носителей (т.е. таких, где реактивация не наблюдается в течение длительного времени) и неактивных носителей из группы потенциаль-
ного риска служит количественное определение ДНК ВГВ в плазме крови. Считается, что при уровне ДНК ВГВ >2000 МЕ/мл значительно возрастает риск развития цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы даже при уровне АЛТ в пределах нормальных значений. Пациенты с нормальными значениями АЛТ и уровнем виремии <2000 МЕ/мл относятся к неактивным носителям, нуждающимся в динамическом наблюдении с определением уровня АЛТ каждые 6 — 12 месяцев [12]. Однако данные литературы [6, 10] показывают, что минимум у 22% пациентов с уровнем ДНК ВГВ <2000 МЕ/мл и нормальным уровнем АЛТ происходит реактивация неактивного носительства и переход его в ХВГВ с умеренной или даже высокой активностью в течение 1,5 — 2 лет наблюдения. Предлагается ужесточить критерий выделения «истинных» неактивных носителей, для чего новым критерием выделения этой группы послужит критический уровень ДНК ВГВ <200 МЕ/мл [6], что достаточно близко к нижней границе чувствительности большинства тест-систем для количественного определения ДНК ВГВ. Использованная нами в этой работе тест-система для количественного определения ДНК ВГВ имеет нижний порог аналитической чувствительности при стандартном выделении ДНК в 150 МЕ/мл. В настоящем исследовании мы ориентировались на предложенные новые, более строгие критерии выделения «истинных» неактивных носителей.
При измерении количественного содержания HBsAg в сыворотке крови выявляются также достоверные различия между «истинными» неактивными носителями и пациентами с ХВГВ, даже если проводить это разделение по более жесткому критерию вирусной нагрузки <200 МЕ/мл ДНК ВГВ. При этом полученные в настоящей работе данные, несмотря на небольшую выборку, позволяют вполне уверенно разделять группы пациентов. Несомненно, для определения пороговой величины содержания HBsAg в сыворотке крови для разделения неактивных носителей ВГВ и пациентов с ХВГВ нужно провести дополнительные исследования на большем числе образцов биологического материала. Однако уже по данным полученной выборки можно сделать заключение о перспективности применения количественного определения HBsAg для скрининга пациентов с ХВГВ и адекватного выделения группы неактивных носителей ВГВ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Мукомолов С.Л. Эпидемиологическая и клинико-лабораторная характеристика хронических носителей HBsAg в зависимости от выраженности патологического процесса. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Л., 1984.
2. Семенов А. В., Гончарова Л. Б. Вирусологические исследования. Молекулярно-биологические методы. В: Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство. В.В. Долгов, В. В. Меньшиков (ред.). М., ГЭОТАР-Медиа, 2012.
3. Семенов А. В. Интерпретация результатов лабораторного выявления маркеров гепатита В. Справочник заведующего КДЛ. 2012, 11: 14-21.
4. Шахгильдян И. В., Михайлов М. И., Онищенко Г. Г. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика). М., ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2003.
5. EASL clinical practice guidelines: management of chronic hepatitis B. J. Hepatol. 2009, 50 (2): 227-242.
6. Kim E.S., Seo Y.S., Keum et al. A threshold HBV DNA level for discriminating patients with hepatitis b e antigen-negative chronic hepatitis b from inactive carriers. Hep. Monthly. 2011, 5 (11): 351-357.
7. Levrero M., Pollicino T., Petersen J. et al. Control of cccDNA function in hepatitis B virus infection. J. Hepatol. 2009, 51: 581-592.
8. Moucari R., Makiewich L., Lada O. et al. Early serum HBsAg drop: a strong predictor of sustained virological response to pegylated interferon alfa-2a in HBeAg-negative patients. Hepatology. 2009, 49: 1151-1157.
9. Menghini G. One-second needle biopsy of the liver. Gastroenterology. 1958, 35: 190.
10. Malmst^m S., Larsson S. B., Lindh M. Hepatitis B viral DNA decline at loss of HBeAg is mainly explained by reduced cccDNA load — down-regulated transcription of pgRNA has limited impact. PLoS One. 2012, 7 (7): e36349.
11. Pollicino T., Squadrito G., Cerenzia G. et al. Hepatitis B virus maintains its pro-oncogenic properties in the case of occult HBV infection. Gastroenterology. 2004, 126 (1): 102-110.
12. Sorrell M.F., Belongia E.A., Costa J. et al. National Institutes of Health consensus development conference statement: management of hepatitis B. Hepatology. 2009, 49 (5): 4-12.
13. Yuki N., Nagaoka T., Yamashiro M. et al. Long-term histologic and virologic outcomes of acute self-limited hepatitis B. Hepatology. 2003, 37: 1172-1179.
14. Zerbini A., Pilli M., Boni C. et al. The characteristics of the cell-mediated immune response identify different profiles of occult hepatitis B virus infection. Gastroenterology. 2008, 134: 1470-1481.
Поступила 18.06.13
Контактная информация: Семенов Александр Владимирович, к.б.н.,
197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14, р.т. (812)232-3155
© О.Г.МАЛЫГИНА, ТА.БАЖУКОВА, 2014
О.Г.Малыгина, Т.А.Бажукова
ВЛИЯНИЕ АНТИБИОТИКОВ НА ФОРМИРОВАНИЕ МИКРОЭКОЛОГИИ У НЕДОНОШЕННЫХ ДЕТЕЙ С НИЗКОЙ И ЭКСТРЕМАЛЬНО НИЗКОЙ МАССОЙ ТЕЛА ПРИ РОЖДЕНИИ
Северный государственный медицинский университет, Архангельск
Цель. Изучение влияния антибиотикотерапии на формирование микрофлоры основных биотопов (носоглотка, толстая кишка, мочевыделительная система) организма недоношенного ребенка весом менее 1500 г при рождении в стационаре. Материалы и методы. Проведено бактериологическое исследование отделяемого верхних дыхательных путей, мочи, содержимого толстой кишки у 58 недоношенных детей при поступлении и при выписке из отделения патологии новорожденных и недоношенных детей. Для построения факторных моделей влияния антибиотиков на формирование микробиоценоза основных биотопов применяли метод факторного анализа. Результаты. У всех детей при поступлении в отделение отмечен дефицит облигатных представителей нормофлоры во всех трех биотопах. К выписке отмечено заселение всех биотопов облигатными представителями, но показатели не достигают возрастной нормы. Основным фактором является антибактериальная терапия, во всех биотопах превалируют условно патогенные и патогенные микроорганизмы. Заключение. У недоношенных детей, получающих массивную антибактериальную терапию, не происходит формирования микробиоценозов основных биотопов и отмечается носительство патогенных и условно патогенных микроорганизмов.
Журн.микробиол, 2014, № 1, С. 61—65
Ключевые слова: антибиотики, биотоп, микробиоценоз, недоношенный ребенок O.G.Malygina, T.A.Bazhukova
INFLUENCE OF ANTIBIOTICS ON FORMATION OF MICROECOLOGY IN PREMATURE CHILDREN WITH LOW AND EXTREMELY LOW BODY WEIGHT AT BIRTH
Northern State Medical University, Arkhangelsk, Russia
Aim. Study the influence of antibiotic therapy on the formation of main biotope microflora (nasopharynx, large intestine, urinary system) of the premature child organism weighing less than 1500 g at birth in hospital. Materials and methods. Bacteriological study of upper respiratory tract
