Научная статья на тему 'Клинико-диагностическое значение исследования перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты при хронической обструктивной болезни легких с различным генотипом гена NAT2'

Клинико-диагностическое значение исследования перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты при хронической обструктивной болезни легких с различным генотипом гена NAT2 Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
199
59
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ХРОНИЧЕСКАЯ ОБСТРУКТИВНАЯ БОЛЕЗНЬ ЛЕГКИХ (ХОБЛ) / ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ БЕЛКОВ / ЛИПИДОВ / ГЕНЫ / ДЕТОКСИКАЦИЯ / CHRONIC OBSTRUCTIVE LUNG DISEASE (COLD) / PEROXIDATION ANTIOXIDANT OF PROTEINS / LIPIDS / GENS / DETOXICATION

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Новикова Н. Е., Кудряшева И. А.

В данной работе было изучено клинико-диагностическое значение исследования некоторых продуктов перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты в крови у 90 больных хронической обструктивной болезнью легких с различным генотипом по полиморфизму гена второй фазы детоксикации NAT2. Было выявлено, что при обострении у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких отмечается интенсификация процессов свободнорадикального окисления как липидов, так и белков. Степень выраженности перекисного окисления липидов наряду с полиморфным вариантом гена второй фазы детоксикации NAT2 связана с тяжестью течения хронической обструктивной болезни легких и может являться диагностическим и прогностическим критерием течения заболевания.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Новикова Н. Е., Кудряшева И. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE CLINICODIAGNOSTIC RESEARCH VALUE OF SOME PRODUCTS OF LIPIDS AND PROTEINS PEROXIDATION, ANTIOXIDATION DEFENSE AT CHRONIC OBSTRUCTIVE LUNG DISEASE WITH DIFFERENT GENOTYPE AT GEN NAT21State budget educational institution of higher professional education «Astrakhan state medical academy»

Clinicodiagnostic research value of some products of lipid peroxidation antioxidant, proteins, antioxidant defense was studied in 90 patients' blood with chronic obstructive lungs disease with different genotype at gen polymorphism of the second detoxication NAT2. It was marked the intensification of process of free radical oxidation as in lipids so in proteins during the recurrence of chronic obstructive lungs disease. The intensity and products input of lipids peroxidation antioxidant along with the second phase detoxication gen NAT2 may be the diagnostic and prognostic criterion of disease course. It shows the severity of the disease.

Текст научной работы на тему «Клинико-диагностическое значение исследования перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты при хронической обструктивной болезни легких с различным генотипом гена NAT2»

средней степени тяжести незначительный процент применения альбумина отмечен только у родильниц с гемодилюционной коагулопатией. Сравнивая пациенток без нарушений гемостаза и женщин с лабораторной стадией той или иной коагулопатии, выявлена более высокая частота применения препаратов крови в последнем случае.

Таким образом, основным нарушением системы гемостаза, формирующимся при преэклампсии, является гемодилюционная коагулопатия, обусловленная гиперволемией беременных, усиливающейся при развитии преэклампсии. В дородовом периоде она выявлена почти у 70% пациенток. У 6-8% женщин до родов отмечался хронический ДВС-синдром. Примерно у половины пациенток, не имевших нарушений в системе гемостаза до родоразрешения, после родов формировалась гемодилюционная коагулопатия, что является следствием перераспределения внесосуди-стой жидкости. После родоразрешения частота наличия гемодилюционной коагулопатии и хронического ДВС-синдрома начинала снижаться к концу первых суток у женщин с преэклампсией средней степени тяжести и только к концу вторых послеродовых суток у пациенток с тяжелой преэклампсией. Выраженность и длительность коррекции нарушений белкового и водного баланса, лежащие в основе патогенеза пре-эклампсии, зависели от ее степени тяжести и от наличия у пациенток нарушений системы гемостаза. У женщин с коагулопатиями отмечалась более выраженная исходная гиперволемия, что подчеркивает значимость гемостазиологических нарушений в механизме формирования преэклампсии. Практическим отображением полученных результатов была частота применения препаратов крови у анализируемых пациенток. Свежезамороженная плазма и раствор альбумина достоверно чаще применялись у пациенток с тяжелой преэклампсией, имеющих нарушения системы гемостаза.

ЛИТЕРАТУРА

1. Айламазян Э. К., Кулаков В. И., Радзинский В. Е., Савельева Г. М. Акушерство: Национальное руководство. - М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2009. - 1200 с.

2. Бабаев В. А. и соавт. Длительная эпидуральная анестезия в интенсивной терапии беременных с гестозом // Материалы I Евро-Азиатского конгресса. - Санкт-Петербург, 2004.

3. Венцковский Б. М., Запорожан В. В и соавт. Гестозы: Руководство для врачей. - М.: Медицинское информационное агентство, 2005. - 312 с.

4. Воробьев А. И., Городецкий В. М., Шулутко Е. М. Острая массивная кровопотеря. - М.: «ГЕОТАР-МЕД», 2001. - 340 с.

5. Гельфанд Б. Р., Салтанов А. И. Интенсивная терапия: Национальное руководство, том 2. - М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2009 - 784 с.

6. Заболотских И. Б., Синьков С. В., Шапошников С. А. Диагностика и коррекция расстройств системы гемостаза. - М.: Практическая медицина, 2008. - 331 с.

7. Ланцев Е. А., Абрамченко В. В. Анестезия, интенсивная терапия и реанимация в акушерстве. - М.: «МЕДпресс-информ», 2011. - 623 с.

8. Макацария А. Д., Бицадзе О. В. Тромбофилии и проти-вотромботическая терапия в акушерской практике. - М.: «Триа-да-Х», 2003. - 903 с.

9. Макацария А. Д., Бицадзе О. В., Акиньшина С. В. Тромбозы и тромбоэмболии в акушерско-гинекологической клинике. - М.: Медицинское информационное агентство, 2007. - 1064 с.

10. Музыченко В. П., Тимохова С. Ю., Капущенко И. Н. и соавт. Структура нарушений гемостаза у беременных с гестозом // Куб. науч. мед. вестник. - 2011. - № 5 (128). - С. 99-102.

11. Приказ Министерства здравоохранения РФ от 25 ноября 2002 г. № 363 «Об утверждении инструкции по применению компонентов крови».

12. Макаров О. В., Ткачева О. Н., Волкова Е. В. Преэклампсия и хроническая артериальная гипертензия. Клинические аспекты. -М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2010. - 136 с.

13. Макаров О. В. и соавт. Артериальная гипертензия у беременных. Только ли гестоз? Руководство для врачей. - М.: Медицинское информационное агентство, 2006. - 173 с.

14. Преэклампсия, эклампсия, HELLP-синдром. - Петрозаводск: «ИнтелТек», 2002. - 432 с.

15. Шулутко Е. М., Васильев С. А., Буланов А. Ю. Гемо-дилюция и гемодилюционная коагулопатия // Терапевтический архив. - 2006. - № 7. - С. 90-94.

16. Alexander J. M., Lucas M. J., Ramin S. M. et al. The course of labor withand without epidural analgesia // Am. j. obstet. gynecol. -1998. - V. 178 (3). - Р. 516-520.

17. Bernstein I. M., Ziegler W., Badger G. J. Plasma volume expansion in early pregnancy // Obstet gynecol. - 2001. - V. 97. - P. 72-76.

18. Brenner B. Haemostatic changes in pregnancy // Thromb res. - 2004. - V. 114. - P. 409-414.

19. David H. Chestnut et al. Obstetric anesthesia: principles and practice - 4ht ed., 2009. - 1222 p.

Поступила 13.01.2013

Н. E НОВИКОВА, И. А. КУДРЯШЕВА

клинико-диагностическое значение исследования

перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты при хронической обструктивной

болезни легких с различным генотипом гена nat2

НУЗ «Медико-санитарная часть» г. Астрахани, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121. Тел. (8512) 52-41-43.

E-mail: irina-nurzhanova@yandex.ru

В данной работе было изучено клинико-диагностическое значение исследования некоторых продуктов перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты в крови у 90 больных хронической обструктивной болезнью легких с различным генотипом по полиморфизму гена второй фазы детоксикации NAT2. Было выявлено, что при обострении у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких отмечается интенсификация процессов свободнорадикального окисления

как липидов, так и белков. Степень выраженности перекисного окисления липидов наряду с полиморфным вариантом гена второй фазы детоксикации NAT2 связана с тяжестью течения хронической обструктивной болезни легких и может являться диагностическим и прогностическим критерием течения заболевания.

Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), перекисное окисление белков, липидов, гены, де-токсикация.

N. E. NOVIKOVA, I. A. KUDRYASHOVA

THE CLINICODIAGNOSTIC RESEARCH VALUE OF SOME PRODUCTS OF LIPIDS AND PROTEINS PEROXIDATION, ANTIOXIDATION DEFENSE AT CHRONIC OBSTRUCTIVE LUNG DISEASE WITH

DIFFERENT GENOTYPE AT GEN NAT2

State budget educational institution of higher professional education «Astrakhan state medical academy», Russia, 414000, Astrakhan, Bakinskaya str., 121. Tel. (8512) 52-41-43. E-mail: irina-nurzhanova@yandex.ru

Clinicodiagnostic research value of some products of lipid peroxidation antioxidant, proteins, antioxidant defense was studied in 90 patients' blood with chronic obstructive lungs disease with different genotype at gen polymorphism of the second detoxication NAT2. It was marked the intensification of process of free radical oxidation as in lipids so in proteins during the recurrence of chronic obstructive lungs disease. The intensity and products input of lipids peroxidation antioxidant along with the second phase detoxication gen NAT2 may be the diagnostic and prognostic criterion of disease course. It shows the severity of the disease.

Key words: chronic obstructive lung disease (COLD), peroxidation antioxidant of proteins, lipids, gens, detoxication.

Окислительный стресс, развивающийся в результате дисбаланса между оксидантной и антиоксидантной системами, является одним из ключевых патогенетических компонентов, инициирующих возникновение и развитие воспалительных заболеваний, в том числе хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). Избыток активных форм кислорода (АФК) приводит к сдвигу метаболизма арахидоновой кислоты, что снижает бета-адренергическую активность рецепторов, которые регулируют в легких и бронхах продукцию АФК нейтрофи-лами и моноцитами. Это вызывает неконтролируемое образование ими свободных радикалов [1, 2, 3].

Усиление процессов свободнорадикального окисления патологически воздействует на бронхиальную стенку, обусловливая основные клинические проявления: воспаление, развитие обструкции и усиление гиперреактивности бронхов, нарушение функции внешнего дыхания [2, 4]. Это связано с тем, что свободные радикалы быстро реагируют с ненасыщенными липидами мембран, способствуя образованию липидных перекисей, в частности малонового диальдегида. Патологические последствия оксидативного стресса, как показали морфологические исследования бронхиальной ткани, связаны с интерстициальным отеком, гиперплазией интерстици-альных клеток, ремоделированием дыхательных путей.

К настоящему моменту накоплены многочисленные данные о важной патогенетической роли процесса пе-рекисного окисления липидов и белков [3, 4] при брон-холегочной патологии. Это явилось основанием для изучения процессов перекисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты у больных ХОБЛ.

Цель исследования - изучить клинико-диагностическое значение исследования некоторых продуктов пере-кисного окисления липидов, белков и антиоксидантной защиты в крови у больных ХОБЛ с различным генотипом по полиморфизму гена второй фазы детоксикации NAT2.

Материалы и методы исследования

В работе участвовали 90 пациентов с ХОБЛ, находившихся на стационарном лечении в пульмонологи-

ческом отделении ГБУЗ АО «Городская клиническая больница № 4 имени В. И. Ленина» г. Астрахани, и 30 соматически здоровых лиц.

Спирометрия проводилась при оценке кривых «поток - объем» на аппаратах «КСП-1» фирмы «Экомед», Россия, и «Spiroanalyzer ST-350R» фирмы «Fukuda SANGYO», Япония.

Генетическое исследование для определения полиморфизма гена второй фазы детоксикации (NAT2) выполнялось в лаборатории пренатальной диагностики наследственных болезней Института акушерства и гинекологии имени Д. О. Отта (г. Санкт-Петербург). Определение полиморфных вариантов гена второй фазы детоксикации проводили методом ПЦР с последующим рестрикционным анализом.

Активность супероксиддисмутазы в данной работе оценивалась косвенным методом, который позволяет учитывать концентрацию веществ-индикаторов, в данном случае I. N. T. (2-, 4-iodophenyl, 3-, 4-nitro phenyl, 5-phenyl tetrazolium chloride), преобразуемых супероксидом (С. Чевари и соавт.,1985, с добавлениями М. Арутюнян и соавт., 2000). Оптическую плотность регистрировали спектрофотометрическим методом на биохимическом автоматическом анализаторе «HumaStar-80», Германия, при длине волны 600 нм.

Результаты исследования и их обсуждение

На первом этапе исследования была определена частота встречаемости полиморфизма гена второй фазы детоксикации NAT2 в группе больных ХОБЛ и у практически здоровых лиц (доноров).

Частоты генотипов в группе больных ХОБЛ составили: S/S - 54 (60%), S/F - 31 (34,4%), F/F - 5 (5,6%), в группе доноров: S/S - 15 (50%), S/F - 9 (30%), F/F -6 (20%). Частоты аллелей в группе больных ХОБЛ составили: S - 164 (67,2%), F - 80 (32,8%), в группе доноров: S - 27 (67,5%), F - 13 (32,5%).

Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей гена NAT2 между выборками больных с ХОБЛ и донорами не выявил статистически значимых различий.

Наблюдаемое распределение частот генотипов не отличалось от теоретически ожидаемого по уравнению Харди - Вайнберга. У больных ХОБЛ и практически здоровых лиц жителей г. Астрахани преобладал гомозиготный генотип S/S. Различия между больными ХОБЛ и практически здоровыми по частоте генотипов и аллелей были статистически незначимы (р>0,05; Kruskal-Wallis ANOVA test).

Окислительный стресс, развивающийся в результате дисбаланса между оксидантной и антиоксидантной системами, является одним из ключевых патогенетических компонентов, инициирующих возникновение и развитие воспалительных заболеваний, в том числе ХОБЛ. Это явилось основанием для изучения процессов перекисного окисления липидов и белков у больных ХОБЛ.

На следующем этапе был изучен вклад вторичного продукта перекисного окисления липидов - малонового диальдегида (МДА) - наряду с геном второй фазы де-токсикации в формирование характера течения ХОБЛ.

Уровень МДА в крови определялся у доноров и больных ХОБЛ. Проводились межгрупповые сравнения по изучаемому показателю и внутригрупповые сравнения в зависимости от генотипа.

Уровень МДА в крови у доноров при генотипе S/S по полиморфизму локуса гена второй фазы детоксика-ции NAT2 составил 4,16±0,4 моль/л, при генотипе S/F -1,93±0,4 моль/л, при генотипе F/F - 2,71±0,3 мкмоль/л. Различия в уровне МДА у доноров в зависимости от генотипа были статистически значимы (р=0,041; Kruskal-Wallis ANOVA test). Обращает на себя внимание, что даже в группе соматически здоровых лиц уровень МДА при генотипе S/S был статистически значимо выше, чем при генотипе S/F (р=0,016; Mann-Whitney test) и при генотипе F/F (р=0,037; Mann-Whitney test).

У больных ХОБЛ различия в уровне МДА в крови также были статистически значимыми в зависимости от генотипа. Уровень МДА при генотипе S/S составил 9,34±1,0 моль/л, что было статистически значимо выше, чем при генотипе S/F - 4,80±1,06 моль/л и при генотипе F/F - 5,16±0,90 моль/л (р=0,043; Kruskal-Wallis ANOVA test). Уровень МДА у больных ХОБЛ при генотипе S/F и F/F статистически значимо не отличался (р=0,756; Mann-Whitney test). Однако данные показатели были статистически (р=0,001; Kruskal-Wallis ANOVA test) выше, чем в группе доноров.

Таким образом, более интенсивное образование продуктов перекисного окисления липидов связано с наличием генотипа S/S как в группе пациентов с ХОБЛ, так и в группе соматически здоровых лиц.

Представляло интерес изучение продуктов переки-сного окисления белков - карбонильных групп в зависимости от полиморфизма гена второй фазы детоксикации.

Уровень карбонильных групп в крови определялся у доноров и больных ХОБЛ, с проведением межгрупповых и внутригрупповых сравнений в зависимости от генотипа.

Уровень карбонильных групп в крови у доноров при генотипе S/S гена второй фазы детоксикации NAT2 составил 5,86±0,48 ед. опт. пл/мл, при генотипе S/F -6,02±0,45 ед. опт. пл/мл, при генотипе F/F - 5,9±0,43 ед. опт. пл/мл. Различия в уровне карбонильных групп у доноров в зависимости от генотипа были статистически незначимы (р=0,351; Kruskal-Wallis ANOVA test).

Статистически значимое увеличение уровня карбонильных групп у больных ХОБЛ по сравнению с

донорами (р=0,001; Kruskal-Wallis ANOVA test) обнаруживалось при всех выявленных генотипах и составила при генотипе S/S - 10,14±1,09 ед. опт. пл/мл, при генотипе S/F - 12,77±1,06 ед. опт. пл/мл, при генотипе F/F - 15,15±1,90 ед. опт. пл/мл. У больных ХОБЛ статистически значимых межгрупповых различий уровня карбонильных групп в зависимости от генотипа выявлено не было (р=0,061; Kruskal-Wallis ANOVA test).

Таким образом, у больных ХОБЛ наблюдалась активизация процессов перекисного окисления белков, однако не было выявлено влияния полиморфизма гена второй фазы детоксикации NAT2 на данные процессы.

Накопление большого количества вторичных продуктов перекисного окисления липидов у больных ХОБЛ и выявление неслучайных ассоциаций «функционально неблагоприятных» генотипов второй фазы детоксикации NAT2 требуют изучения вклада эндогенного антиоксиданта - супероксиддисмутазы (СОД) в ответ организма на интоксикацию.

Активность СОД в крови определялась у доноров и больных ХОБЛ с проведением межгрупповых и внутригрупповых сравнений в зависимости от генотипа.

У доноров при генотипе S/S по полиморфизму локуса гена второй фазы детоксикации NAT2 уровень СОД составил 17,18±0,44 у. е./мл, при генотипе S/F -21,11±0,22 у. е./мл, F/F - 25,25±0,18 у. е./мл. Различия в уровне СОД в зависимости от генотипа у доноров были статистически значимы (р=0,032; Kruskal-Wallis ANOVA test).

У больных ХОБЛ при генотипе S/S уровень СОД составил 9,76±1,12 у. е./мл, при генотипе S/F - 12,61±1,55 у. е./мл, при генотипе F/F - 15,11±0,22 у. е./мл. Различия в уровне СОД в зависимости от генотипа у больных были статистически значимы (р=0,021; Kruskal-Wallis ANOVA test), причем данные показатели были статистически (р=0,001; Kruskal-Wallis ANOVA test) ниже, чем в группе доноров.

Таким образом, в условиях активации воспалительных реакций при хронической обструктивной болезни легких происходит интенсификация процессов свобод-норадикального окисления как липидов, так и белков при снижении антиоксидантной защиты.

Была установлена связь между наличием генотипа S/S гена второй фазы детоксикации NAT2 и интенсификацией процессов перекисного окисления липидов, что выражалось в повышении уровня МДА; а также между наличием данного генотипа и снижением антиоксидантной защиты, а именно снижением активности СОД как в группе соматически здоровых лиц, так и в группе больных хронической обструктивной болезнью легких.

ЛИТЕРАТУРА

1. Болдырев А. А. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона // Успехи физиол. наук. - 2003. - Т. 34. № 3. - С. 21-34.

2. Губский Ю. И., Беленичев И. Ф. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях // Современные проблемы токсикологии. - 2005. - № 3. - С. 126-135.

3. Дубинина Е. Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток // Физиологические и клинико-биохи-мические аспекты. - СПб: Медицинская пресса, 2006. - С. 10-32.

4. Дубинина Е. Е., Шугалей И. В. Окислительная модификация белков // Успехи совр. биол. - 1993. - Т. 113. №1. - С. 71-81.

Поступила 04.12.2012

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.