CC BY
4в
-Спецвыпуск № 1, 2015 !
Клиническая и экспериментальная хирургия
97
УДК 619:616.411-089.843-074
Байматов В. Н., Николаев А. А. Baymatov V. N., Nikolaev А. А.
КЛИНИКО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ У КРЫС
ПОСЛЕ СПЛЕНЭКТОМИИ И АУТОТРАНСПЛАНТАЦИИ СЕЛЕЗЕНКИ
CLINICAL AND BIOCHEMICAL CHANGES IN RATS AFTER SPLENECTOMY AND AUTO TRANS PLANTATION OF THE SPLEEN
Полученные данные на крысах показывают, что спленэк-томия не безразлична для организма и развивается обычная клиническая картина послеоперационного синдрома: на 1-2 градуса повышается температура тела, на 12-30 % частота сердечных сокращений и дыхательных движений, появляется лейкоцитоз, который уже к 7-11 дню сменяется лейкопенией. Строение селезенки крыс типично другим животным. Имеются достоверные биохимические изменения в организме крыс после спленэктомии: диспротеине-мия, гиперпротеинемия, гиперальбуминемия, увеличение АЛТ и гипоглобулинемия. У крыс спленэктомированных и с аутрансплантацией селезенки имелись клинические изменения с 1 до 7 дня. После внесения трансплантатов к брюшине у всех животных выявили лейкоцитоз и лимфоцитоз, но через 24-40 часов они погибали. В брюшной полости появляется экссудат, единичные спленоиды, но эти узелки не компенсируют утраченную функцию селезенки. Гистологическое исследование узелков показывает, что в них присутствуют все элементы селезенки - красная, белая пульпы, трабекулы. Капсула несколько толще, чем у селезенки крыс контрольной группы и представлена фиброзными и мышечными волокнами. Выраженность различных отделов имплантированной ткани зависит от ее кровоснабжения, особенно в 1-е сутки после имплантации. Визуально узелки имеют вид плотных, пурпурных образований с фиброзной капсулой величиной от 2 мм до нескольких сантиметров. Через 20-30 дней погибали крысы которым трансплантировали селезенку к мышечной ткани, а через 30-40 к сосудам брыжейки.
The data obtained on rats indicate that splenectomy is not indifferent to the body and develops the usual clinical picture of post-operative syndrome: 1-2 degrees, the body temperature rises, 12-30 % of heart rate and respiratory movements appears leukocytosis, which has to 7-11 day followed by radiation. The structure of the spleen of rats typically other animals. There is reliable biochemical changes in the body of rats after splenectomy: dysproteinemia, hyperproteinemia, hyperalbu-minemia, increased ALT and hypoglobulinemia. In rats splenect-omised and outrospective spleen had clinical changes from 1 to 7 days. After making the grafts to the peritoneum in all animals revealed leukocytosis and lymphocytosis, but after 24-40 hours they died. In the abdominal cavity appears exudate, single sele-noid, but these nodules do not compensate for the lost function of the spleen. Histological examination of nodules shows that there are presence-contained all of the elements of the spleen -red, white pulp, trabeculae. Capsule is slightly thicker than the spleen of the rats of the control group and presents the fibrous and muscular fibers. The severity of different departments of the implanted tissue depends on its blood supply, especially in the 1st day after implantation. Visually nodules have the form of a dense, purple formations with fibrous capsule size from 2 mm to several centimeters. 20-30 days were killed rats which transplanted spleen to muscle tissue, and 30-40 to the vessels of the mesentery.
Keywords: rats, spleen, splenectomy, auto transplantation, blood.
Ключевые слова: крысы, селезенка, спленэктомия, аутотрансплантация, кровь.
Байматов Валерий Нурмухаметович -
доктор ветеринарных наук, профессор кафедры общей патологии, Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина, г. Москва,
Тел.8(495) 377-93-44 Е mail: baymatovvaleriy@rambler.ru
Николаев Алексей Алексеевич -
аспирант кафедры общей патологии, Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина, г. Москва, Тел .8-9258490013 Е mail: anikolaev89@bk.ru
Baymatov Valeriy Nurmuchametovich -
Ph.D. in Veterinary
medicine Sciences, professor
chair of Pathology Moscow Academy
and Biotechnology
named after KI Scriabin t.Moscow
Теl. 8(495) 377-93-44
Е mail: baymatovvaleriy@rambler.ru
Nykolaev Aleksei Alekseevich -
graduate chair of Pathology Moscow Academy and Biotechnology named after KI Scriabin t. Moscow Теl.8-9258490013 Е mail: anikolaev89@bk.ru
Селезенка — сложный иммунокомпе-тентный орган, но она также принимает участие в детоксикации бактериальных эндотоксинов, влияет на гемопоэз. В ней осуществляется регуляция тромбо-цитопоэза (секвестрирует около 30 % об-
щего их количества) и вырабатывается VIII фактор свертывания крови. Она элиминирует из кровотока стареющие эритроциты, лейкоциты, тромбциты, продукты распада клеток и чужеродные элементы. В селезенке вырабатывается в 70 раз больше антител
98
Ежеквартальный
научно-практический
журнал
В
образующих клеток, чем в лимфатических узлах, поэтому при ее удалении компенсация не бывает полной [3, с. 331-333].
При этом угнетаются пролиферация и диф-ференцировка иммунокомпетентных клеток [1, с. 49-51;4,с. 87-89]. Операционная травма, является стрессорным воздействием для организма из-за высвобождения биологически активных веществ, гормонов, поэтому представляет интерес послеопрерационный период у животных после удаления селезенки [2, с. 90-96].
Цель исследования: изучить клинико-биохимические особенности у крыс после спленэктомии и аутотрансплантации. Для реализации данной цели нами были поставлены следующие задачи: провести клинико- биохимические исследования у трех групп крыс со спленэктомией и аутотрансплантацией.
Материалы и методы. Нами на кафедре общей патологии имени В. М. Коропова МГАВМиБ были проведены опыты по спленэктомии. Были созданы 3 группы животных (по 10 в каждой, п = 30): 1 - контрольная; 2 - после удаления селезенки; 3 - с аутотрансплантацией. Крысам этой группы извлекали селезенку, измельчали и вносили в брюшную полость непосредственно к брюшине (п = 3), к сосудам брыжейки (п = 3), к мышцам (п = 4). У каждого животного до опыта, а затем на 1, 3, 7,11,15 и 21 день определяли температуру, пульс, дыхание. Из хвостовой вены до опыта, через 7, 14 и 21 день брали кровь для биохимических исследований. После опытов животных убивали декапитированием и брали кусочки органов для фиксации в нейтральном формалине. Затем готовили гистосрезы, окрашивали их гематоксилином и эозином, анализировали под микроскопом с различным увеличением. Фотографирование проводили цифровой камерой. Полученные материалы обрабатывали математически по существующим методикам.
Результаты исследования. Полученные данные показывают, что спленэктомия не безразлична для организма и развивается обычная клиническая картина послеоперационного синдрома. Спленэктомированные крысы находились
под наблюдением в течение года. По поведению, активности они не отличались от контрольных животных. У животных после спленэктомии на 1-2 градуса повышается температура тела (рис. 1), на 12-30 % частота сердечных сокращений (рис. 2) и дыхательных движений (рис. 3). Затем у животных 2 и 3 группы учащается пульс и дыхание и неоднозначно изменяется температура тела. У животных 2 группы она снижается, а у животных 3-повышается.
Рисунок 1 - Температура тела у крыс до, после спленэктомии и аутотрансплантации
Рисунок 2 - Динамика изменений сердечных сокращений у крыс после спленэктомии и аутотрансплантации
Таблица - Показатели хромопротеидного обмена у крыс со спленэктомией
Показатели крови До опыта Через 7 дней после спленэктомимии Через 14 дней после спленэктомимии Через 21 день после спленэктомимии
Общий белок, г/л 68,44±1,45 69,68±1,89 89,41±9,78* 90,82±4,74**
Альбумины, г/л 27,87±1,74 28,48±1,29 58,01±2,97** 65,21±1,49***
Глобулины, г/л 40,2±1,33 35,2±1,54 25,4±1,54** 21,44±2.46**
Мочевина ммоль/л 5,58±0,53 6,32±0,79 6, 86±0,55 6,84±0.45
Креатинин мг/мл 58,01±2,26 56,11±3,27 46,62±1,85 64,45±1,83
Общий билирубин, мкмоль/л 8,78±1,57 14,34±3,21 8,82±1,39 6,22±1,16
Прямой билирубин, мкмоль/л 2,76±0,57 6,68±0,28*** 4,72±0,26** 3,74±0,53
АСТ нмоль/мл/мин 226,45±5,79 246,43±6,61 259,22±6,77 233,83±4,24
АЛТ нмоль/мл/мин 59,66±1,84 55,01±2,95 60,32±3,83 94,22±1,95
Щелочная фосфотаза 162,66±16,12 127,47±11,86 184,35±13,71 207,07±11,28**
в
-Спецвыпуск № 1, 2015:
Клиническая и экспериментальная хирургия
99
Рисунок 3 - Изменение дыхательных движений у крыс после спленэктомии и аутотрансплантации
Вначале у крыс после спленэктомии выражен лейкоцитоз, который уже к 7-11 дню сменяется лейкопенией, т.е. появляется иммунодефицит дающий предрасположенность к инфекциям, нарушению гомеостаза. Анатомическое строение селезенки крыс типично другим животным. Она состоит из капсулы, отходящих от нее трабекул, разделяющих орган на красную (пространства ретикулярной ткани, заполненные эритроцитами) и белую пульпу (лимфатические фолликулы и пе-риартериальные лимфатические футляры), перифолликулярную и краевую зону. Поэтому в мазках крови крыс после спленэктомии содержат эритроциты с тельцами Жолли. После удаления селезенки возможны инциденты инфекционных заболеваний: плевролегочные осложнения, раневая инфекция, тонзиллиты, гастриты, хронические воспалительные процессы [6, с. 48]. Из таблицы видно, что такие изменения в организме объясняются диспро-теинемией: регистрируется гиперпротеине-мия, гиперальбуминемия, увеличение АЛТ и гипоглобулинемия. Другие биохимические показатели имеют тенденцию к изменениям, но они не характерны. По данным ряда авторов, после спленэктомии восприимчивость к инфекции увеличивается в 60-540 раз. Риск бактериемии возрастает в 8 раз, инфекционные осложнения при одних и тех же заболеваниях возникают в 58 раз чаще, чем у с сохраненным органом, а летальность в 14 раз выше [2, с. 93]. Благоприятный исход спленэкто-мии объясняется появлением очагов рези-дуальной селезеночной ткани. Кроме того, в компенсаторном восстановлении иммунологических реакций, по мнению ряда авторов, принимает участие весь лимфоидный аппарат организма. Автор достоверной разницы не выявил в восприимчивости к инфекциям и частоте злокачественных заболеваний после спленэктомии, что объясняет увеличением активности эффекторных клеток (Т-киллеров и макрофагов). При исследовании спленэкто-мированных крыс третьей группы (с аутран-сплантацией) у них отмечали клинические изменения с 1 до 7 дня.После внесения транс-
плантатов к брюшине в крови всех животных этой группы выявили лейкоцитоз и лимфоци-тоз, что согласуется с данными других авторов [4, с. 88]. Затем через 24-40 часов они погибали. Данные состояния приводят к развитию постспленэктомической инфекции и сепсису, тромбозам с высоким процентом тяжелых осложнений и летальности. Поэтому, при этих осложнениях необходимо применять низкомолекулярные гепарины и тромболити-ки [5,с.18]. У крыс после спленэктомии и ау-тотрансплантации отмечали случаи спленоза
- компенсаторной постспленэтомической имплантации селезеночной ткани, что является приспособительной реакцией, эктопической регенерации ткани селезёнки, замещающей часть функции удаленной селезенки. В брюшной полости появляется экссудат, единичные спленоиды, но эти узелки не компенсируют утраченную функцию селезенки. Гистологическое исследование узелков показывает, что в них присутствуют все элементы селезенки
- красная, белая пульпы, трабекулы. Капсула несколько толще, чем у селезенки крыс контрольной группы и представлена фиброзными и мышечными волокнами. Выраженность различных отделов имплантированной ткани зависит от ее кровоснабжения, особенно в 1-е сутки после имплантации. Визуально узелки имеют вид плотных, пурпурных образований с фиброзной капсулой величиной от 2 мм до нескольких сантиметров. Их питание осуществляется за счет мелких множественных артерий, а не централизовано, как в нормальной селезенке. При гистологическом исследовании эти узелки похожи на селезеночную ткань. Данная реакция является приспособительной и призвана заменить утраченные функции селезенки. При постспленэктоми-ческом синдроме количество тромбоцитов повышается, что ведет к укорочению времени свертывания и времени рекальцификации, повышению толерантности плазмы к гепарину, гиперфибриногенемии [6, с. 86]. Через 20-30 дней погибали крысы которым трансплантировали селезенку к мышечной ткани, а через 30-40 к сосудам брыжейки. Это связано с недостатком иммуномодулиру ющих и других биологически активных веществ - лим-фокинов, монокинов, лейкотриенов, иммуноглобулинов, опсонинов, интерферонов, лизо-цима, пропердина. Известно, что селезенка вырабатывает тафтсин — глобулин, который стимулирует фагоцитарную активность ней-трофилов, образование Т- и В-лимфоцитов [5, с. 16]. Следовательно, интоксикация, септические процессы приводили животных к гибели в разные сроки после трансплантации.
Выводы:
Полученные нами данные позволяют полнее понять клинико-биохимические изменения у крыс после спленэктомии и трансплантации. Чем ближе к сосудам подсажены трансплантаты, тем дольше оказался срок жизни животных.
Ежеквартальный
научно-практический
журнал
Литература:
1. Аверин В. И., Катько В. А. Аутотрансплан-тация ткани селезенки при ее травматических повреждениях у детей // Здравоохранение Белоруссии. 1998. № 11. С. 49-51.
2. Бордуновский В. Н. Хирургия селезенки. Челябинск : Южно-Уральское книж. изд-во. 1995. 192 с.
3. Динамика активности Т-киллеров селезенки мыши после ее удаления и резекции / Л. В. Ванько, Г Х. Сухих, А. Г. Бабаева, Н. В. Юдина, П. Д. Сулеманона // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.1984. № 9. С.331-333.
4. Виноградов В. В., Денисенко В. И. Гетеро-топическая аутотрансплантация селезеночной ткани после спленэктомии // Хирургия. 1986. № 2. С. 87-89.
5. Лиарцин К.А.Аутотрансплантацияткани селезенки в условиях хирургической инфекции живота (клинико-экспериментальное исследование) : автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Иркутск, 1995. 24 с.
6. Орлянская В. Ф. Оценка органосохраня-ющих операций на селезенке при ее повреждении в эксперименте // Здравоохранение Белоруссии.1981. № 3. С. 48-51.
References:
1. Averin V. I., Katika V. A. Auto transplantation of spleen tissue when it is traumatic injuries in children // Zdravoohr. Belarusian. 1998. № 11. P. 49-51.
2. Bordunovski V. N. Surgery of the spleen. Chelyabinsk, 1995. 192 p.
3. Dynamics of activity of T-killer cells in the spleen of the mouse after its removal resection / L.V. Wanko, G. H. Suhih, A. G. Babae-va, N. V. Yudina, P. D. Suleymanona // Bulletin of experimental biology and medicine. 1984. № 9. P. 331-333.
4. Vinogradov V. V., Denisenko V. I. Heterotop-ic auto transplantation of splenic tissue after splenectomy // Surgery. 1986. № 2. P. 8789.
5. Liarcin K. A. Auto transplantation of spleen tissue in surgical infections of the abdomen (clinical - experimental study) : autor. diss. ... candidate of medical sciences. Irkutsk, 1995. 24 p.
6. Orlyanscaya V. F Evaluation of organ-sparing surgery for spleen if it is damaged in the experiment // Zdravoohr. Belarusian. 1981. № 3. P. 48-51.
