CC BY
81
УДК 618.11-006.6-07:612.112.91
КИСЛОРОДЗАВИСИМАЯ АНТИМИКРОБНАЯ СИСТЕМА НЕЙТРОФИЛОВ В ДИНАМИКЕ РАЗВИТИЯ РАКА ЯИЧНИКОВ
Инна Ивановна Антонеева
Кафедра лучевой диагностики, лучевой терапии и онкологии (зав. — канд. мед. наук Р.Х. Мусина) Ульяновского государственного университета, е-таИ: [email protected]
Реферат
В нейтрофилах периферической крови 145 больных раком яичников на различных клинических стадиях по FIGO цитохимически определяли активность миелопероксидазы и показатели спонтанного и индуцированного теста НСТ. Установлено снижение уровня миелопероксидазы в периферической крови больных по сравнению с таковой у 120 доноров, прогрессировавшее в процессе развития опухоли, и отсутствие существенных изменений показателей НСТ-теста на всех клинических стадиях заболевания.
Ключевые слова: нейтрофилы, рак яичников, прогрессирование опухоли, миелопероксидаза, НСТ-тест.
Кислородзависимая антимикробная система нейтрофилов (Нф), представляющая особенный интерес в плане экстра-целлюлярной секреции оксидантов [6], токсична не только для вирусов, грибов и бактерий, но и для опухолевых клеток [3, 11]. При этом, с одной стороны, депрессия функции Нф рассматривается как фактор, усиливающий распространение опухоли [10], с другой — с начала 1980-х годов накапливается информация о мутагенном действии активированных Нф на макроорганизмы и канцерогенном — на клетки животных [8, 9]. НСТ-тест является информативным методом, отражающим итоговую реакцию этой ключевой ферментной системы. Известно, что в периферическом кровотоке Нф находятся в состоянии готовности к выполнению своих функций, и их потенциал может быть выявлен при использовании нагрузочных тестов.
Целью исследования была оценка активности миелопероксидазы (МПО), а также показателей спонтанного и индуцированного НСТ-теста в Нф периферической крови в динамике прогрессии рака яичников (РЯ).
В Нф периферической крови 120 практически здоровых женщин и 145 больных 476
РЯ (у 52 была I-II клинические стадии по FIGO, у 69 — III, у 24 — IV) цитохимически определяли активность МПО [7]. Результат выражали в виде среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Пробу с восстановлением нитросинего тетразолия (НСТ) в спонтанном и стимулированном опсонизированными частицами зимо-зана вариантах НСТ-теста проводили по А.А. Быковой и Н.С. Сединой [4]. Тесты выявляли изначальную активность и резервы при функционально-метаболической активации. Показатель интенсивности НСТ-теста выражали в условных единицах (у.е.). Обработку данных производили с использованием непараметрических статистических методов. Для определения значимости различий между несколькими группами использовали Н-критерий Крускала-Уоллиса. Силу связи между признаками устанавливали ранговой корреляцией Спирмена.
МПО принято считать маркером первичных азурофильных гранул. Этот фермент выявляется на всех этапах диф-ференцировки гранулоцитов. Начиная с промиелоцита активность фермента возрастает по мере созревания клеток и достигает максимума в зрелых Нф. В достаточно обширной литературе, представляющей результаты изучения этого фермента в Нф, не существует единой точки зрения об активности его у больных злокачественными заболеваниями. Авторы публикаций 1999-2007 гг. сообщают о снижении, повышении или нормальной активности МПО [1, 2, 13]. В результате проведенных нами исследований установлено (см. рис.), что активность МПО в Нф больных РЯ уже на I-II клинических стадиях заболевания досто-
2,5
1 ,5
0,5
т
1111
■
И
норма
I-II стадия
II! стадия
IV стадия
активность МПО
Рис. Изменение активности МПО в Нф больных РЯ в процессе опухолевой прогрессии. Корреляция по Спирмену со стадиями РЯ отрицательная сильная (г=-0,8213).
верно ниже, чем в Нф доноров (1,60±0,12 против 2,03±0,01), и продолжает снижаться в процессе прогрессирования опухоли (1,44±0,07 и 1,30±0,04 в НФ больных с III и IV клинической стадией заболевания соответственно). Различия статистически значимы (р=0,0001).
Как показали исследования И.П. Терещенко и А.П. Кашулиной [8], применительно к Нф периферической крови хорошо работает правило исходного состояния Вильдера—Лейтеса, согласно которому ведущим признаком при характеристике функциональной активности биологической системы является не величина исходного показателя, а исходное физиологическое состояние, которое может быть различным при одних и тех же значениях изучаемого показателя. Нагрузочные тесты позволяют оценить степень соответствия исходной величины показателя в каждом конкретном
Показатели спонтанного и индуцированного НСТ-г
случае исходному физиологическому состоянию. В качестве стимулятора использовались опсонизированные частицы зимозана. Результаты оценки НСТ-теста представлены в табл. 1.
Среднее значение НСТ-теста в группе доноров и у больных раком яичников на всех клинических стадиях заболевания сравнимы по величине. Добавление в качестве стимулятора in vitro опсонизи-рованного зимозана приводило к существенному повышению процента формазан-положительных Нф у доноров (в 2,1 раза) и у больных (в 1,9 раза). При этом у больных РЯ по сравнению с группой доноров был существеннее разброс показателей как спонтанного, так и индуцированного НСТ-теста.
Таким образом, у больных РЯ по сравнению с донорами нами установлено снижение активности МПО в НФ, прогрес-
Таблица 1
теста НФ при РЯ в процессе опухолевой прогрессии
Группы обследованных Спонтанный НСТ-тест Стимулированный НСТ-тест
% активных клеток НСТ, усл.ед. % активных клеток НСТ, усл.ед.
Доноры (п=120) 9,0±1,1 21,4±1,3 29,3±2,1 45,6±1,9
Больные РЯ Ы! стадии (п=52) 9,6±1,7 20,7±3,2 30,1±1,9* 40,3±2,6*
Ш стадия (п=69) 10,1±2,1 22,3±3,4 31,4±1,8* 41,9±2,3*
IV стадия (п=24) 9,2±1,4 21,9±4,0 28,3±2,6* 39,6±3,1*
Коэффициент корреляции по Пирсону -0,04225 0,326164 -0,32847 -0,0869
* Различия статистически значимы (р=0,0001).
сирующее в процессе развития опухоли, и отсутствие существенных изменений показателей НСТ- теста у больных РЯ на всех клинических стадиях заболевания. Исходя из того, что изменение состояния Нф под влиянием растущей опухоли и эффективность их участия в противоопухолевой защите определяются в том числе характером биологической активности новообразования, следует, видимо, предполагать снижение киллерного эффекта Нф при РЯ на поздних клинических стадиях заболевания.
На сегодняшний день иммунотерапия в качестве метода лечения РЯ не имеет широкого распространения. Более того, получены данные, подтверждающие отрицательное влияние иммуномодуляторов, в частности ронколейкина, на выживаемость больных РЯ [12]. Полученные нами данные могут быть использованы для обоснования схем лечения РЯ, включающих иммуномодулирующую сопроводительную терапию [5].
ЛИТЕРАТУРА
1. Асадов Ч.Д., Нумерова Л.С. Функциональная активность нейтрофилов крови при хроническом миело-лейкозе // Лаб.дело.-1990.- № 10.- С.59.
2. Блиндарь В.Н. Функциональные особенности нейтрофилов крови онкологических больных: Авто-реф. дисс. ...докт. биол.наук. -М., 2002.
3. Блиндарь В.Н, Зубрихина Г.Н. Современное представление о роли нейтрофилов в противоопухолевом иммунитете // Клин.лаб.диагност. — 2005. — № 8. — С.51.
4. Быкова А.А., Седина Н.С. Состояние фагоцитарной системы крови в НСТ-тесте в отдаленном периоде у участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Клин.лаб.диагност. — 2003. — № 7. — С.16.
5. Ганцев Ш.Х., Рахматуллина И.Р. Оптимизация методов сопроводительной терапии рака яичников // Росс.онкол.журн. - 2001. - № 4. - С.23.
6. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз. — Екатеринбург, 2001. — С.41.
7. Лабораторные методы исследования в клинике Под ред. В.В. Меньшикова. — М.,1987. -356 с.
8. Терещенко И.П., Кашулина А.П. Роль системы ней-трофильных гранулоцитов в формировании особенностей развития патологического процесса // Пат.физиол. — 1993.- № 4. — С.56.
9. Browder D.E. et al. Antiangiogenic scheduling of chemotherapy improves efficacy against experimental drug-resistant cancer // Cancer Res. — 2000. — Vol.60. — P.1878.
10. Burcher E.C. Cellular and molecular mechanism that direct leukocyte traffic // Ann.Pathol. — 1990. — Vol.136. — P.3.
11. Clark R., Klebanoff S.I. The mieloperoxidasehydrogen peroxidase-halide system as effector of neutrophil — mediated tumor cell cytotoxity // J.Immunol. — 1981. — Vol.126, № 4. — P.1295.
12. Marth C, Alberts D, Alvarez R.D. et al. A randomized phase 3 trial of interferon gamma-1b plus standard carboplatin/paclitaxel (c/p) versus carboplatin/paclitaxel alone for first-line treatment of advanced ovarian (OC) and primary peritoneal carcinomas (PPC): results from a prospectively design // 15th international meeting of the european society of gynaecological oncology (ESGO). — Berlin, Germany, 2007. — P.1185.
13. Sulowicz W. Phagocytosis and peroxidasa activity in neutrophils from peripherai blood of patients with maligmant tumours of lang, stomach and large intestine // Folia haematol. — 1983.-Vol.110.-P. 48.
Поступила 15.02.08.
OXYGEN-DEPENDENT ANTIMICROBIAL SYSTEM OF NEUTROPHILS IN THE DYNAMICS OF OVARIAN CANCER
I.I. Antoneeva
Summary
Myeloperoxidase activity and indicators of spontaneous and induced NBT-test were studied in peripheral blood neutrophils of 145 patients with different stage of ovarian cancer. The tumor-progression-dependent reduction of myeloperoxidase activity in peripheral blood was found in patients compared with 120 donors, while no significant changes in NBT-test was determined at all stages of disease.
