CC BY
4
пропорциональности выделения по отношению к другим летучим продуктам в качестве летучего компонента был избран ацетон [4].
Литература
1. Кривошапова Г. И., Свинтуховский О. А., Хвач П. А.// Сборник науч. работ Ростовск. гос. мед. ин-та. — 1974.— Т. 4, вып. 6. — С. 499—503.
2. Шевченко А. М., Яворовский А. П. Профилактика проф-
интоксикаций при производстве и применении эпоксидных смол.— Киев, 1985.
3. Шумская Н. И. // Токсикология новых промышленных химических веществ.— М., 1969. — Вып. П. —С. 39— 47.
4. Яворовский А. П. // Гиг. труда. — 1987. — № 8. — С. 28— 31.
5. Яворовский А. П., Васильев В. Н. // Гиг. и сан. — 1978, —№ 6.— С. 110—113.
Поступила 20.10.87
УДК 612.354:648.18
А. А. Калашников, Л. А. Иванова, 10. Н. Талакин, О. А. Матвеенко, В. Д. Алешина, Н. В. Животникова, Г. А. Мальцева
КИНЕМАТИКА СИНТЕТИЧЕСКОГО МОЮЩЕГО СРЕДСТВА «ЛОТОС» В СИСТЕМЕ ПЕРФУЗИРУЕМОЙ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ
Донецкий медицинский институт им. М. Горького
Синтетическое моющее средство (СМС) «Лотос» представляет собой многокомпонентную смесь. В его состав входят поверхностно-активное вещество — ПАВ (18%), триполифосфат натрия (40%), сульфат натрия (25%), силикат натрия (6—7%), карбоксиметилцеллюлоза (0,9 %), оптический отбеливатель (0,1—0,15 %), парфюмерная отдушка (0,1 %) и вода (до 100%).
Биологическая активность СМС обусловлена входящими в его состав ПАВ, в качестве которого в «Лотосе» используется алкилбензосульфонат натрия.
В механизме действия ПАВ большое значение имеет изменение биопотенциалов белково-липидных мембран клеток в связи с образованием сложных комплексов ПАВ с белковыми и липидными молекулами [4].
Целью настоящей работы явилось изучение биологического действия основных компонентов СМС на печеночные клетки с использованием модели перфузируемой печени крысы.
Перфузию печени проводили с помощью замкнутой установки, описанной Т. А. Поповым [8]. Подключение печени к перфузионной системе осуществляли в течение 5—10 мин через воротную вену с оттоком перфузата через нижнюю полую вену [7]. Животным предварительно внутрибрюшинно вводили тиопентал (1 мг/кг) и внутривенно — гепарин (1,5 мг/кг).
В состав перфузата входили 80 мл полусинтетической среды, состоящей из среды 199 (45 %), полиглюкина (40%), отмытой эритроцитной массы (5%) и аутокрови (10%), что обеспечивало содержание эритроцитов 0,12-Ю'г—0,15-10|2/л. Скорость оттока перфузата 1 мл/ /(мин-г). Оксигенацию осуществляли подачей в основание оксигенатора смеси кислорода (95 %) и углекислого газа (5 %) со скоростью 0,3 л/мин. рН перфузата поддерживали на уровне 7,0±0,15; давление в воротной вене 90— ПО мм вод. ст. Продолжительность перфузии 120 мин. Первые 30 мин температура перфузионной среды составляла 20 °С, далее ее поддерживали на уровне 37 °С.
18 % водный раствор СМС «Лотос» подавали в пер-фузионную среду в количестве 0,5 мл (15 мг, или 0,1 ЬО50 и 2,5 мл (75 мг, или 0,5 ЬО50) через 15 мин от начала перфузии, когда заканчивался период стабилизации перфузируемого органа. Контрольным животным раствор СМС в печень не подавали.
В каждой серии исследований было проведено 5 пер-фузий. Через 15, 30, 60, 90 и 120 мин от начала перфузии отбирали 2 мл оттекающего от печени перфузата. В нем определяли содержание ПАВ колориметрическим методом [3], неорганического фосфора по реакции с фосфомолибде-новой кислотой, натрия и калия пламенно-фотометриче-ским методом. В указанные сроки контролировали рН перфузата, скорость желчеотделения при кашолировании общего желчного протока.
О состоянии гепатоцитов судили по появлению в пер-фузате их маркерного фермента — каталазы [10], определяемой по методу [1]. Для характеристики функционального состояния непаренхиматозных клеток печени (макрофагов) использовали показатели активности в пер-фузате маркерных ферментов [5] глюкозо-6-фосфатдегид-рогеназы [ 1 ], кислой фосфатазы [6], катепсина D.
Кроме того, определяли активность растворимых ферментов цитозоля, свойственных обоим типам печеночных клеток: аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатами-нотрансферазы (ACT) [6], аргиназы [9]. Исследовали также способность клеток печени синтезировать мочевину [6]. По окончании перфузии в ткани печени определяли содержание ПАВ и неорганического фосфора упомянутыми выше методами.
Результаты исследований показали, что через 15 мин после введения раствора CMC в систему кровообращения перфузируемой печени происходит увеличение содержания ПАВ в перфузионной среде, однако не все количество ПАВ, внесенное с раствором CMC, переходит в перфузат. Около 48 % его обнаруживается в составе ткани печени после окончания перфузии, причем процент задержанного ПАВ не зависит от величины введенной дозы. Так как на протяжении 2 ч перфузии содержание ПАВ в перфузате изменялось мало, можно сделать заключение, что ткань печени прочно и длительно удерживает ПАВ.
Источником фосфора в составе «Лотоса» является триполифосфат натрия. В 75 мг CMC «Лотос» содержится 7,6 мг фосфора, а в 15 мг — 1,5 мг.
Количество неорганического фосфора в перфузате ин-тактных крыс оставалось неизменным на протяжении опыта и составляло около 2 мг. Введение раствора CMC независимо от дозы способствует переходу фосфора в перфузат уже через 15 мин. Содержание его при введении 75 мг CMC колеблется от 7,4 до 10,9 мг, а при введении 15 мг — от 2,6 до 3,5 мг.
Содержание неорганического фосфора в ткани печени, перфузированной с добавлением в среду CMC, не отличалось от контроля.
В растворах CMC обнаруживалось значительное количество натрия, входящего в состав триполифосфата и силиката натрия. После введения CMC содержание натрия в перфузате увеличивалось в зависимости от введенной дозы; при добавлении 75 мг CMC — на 47,2 мг, а 15 мг — на 5 мг.
Следует отметить, что нормальной физиологической реакцией ннтактной печени на перфузию являются задержка натрия клетками и потеря калия [2]. В нашем эксперименте задержка составляла 43 мг.
Добавление в перфузиоиную среду с раствором CMC повышенного количества натрия на 15—30 мин опыта изменит реакцию печени по сравнению с контролем. Однако через 60 мин после введения отмечается задержка ионов
натрия, причем степень ее не отличается от таковой в контроле. Выделение калия становилось особенно интенсивным после введения большой дозы CMC.
Следовательно, из компонентов CMC лишь ПАВ задерживается в ткани печени, остальные вещества поступают в русло кровообращения
Изменения функционального состояния печени под воздействием CMC незначительны. Сдвиг рН перфузата в сторону алкалоза (от 7,15±0.015 в «сходной пробе до 7,26± ±0,028 через 30 мин перфузии) отмечен лишь после введения большой дозы CMC. Через 30 мин этот сдвиг исчезал.
Под воздействием CMC в большой дозе происходило лишь некоторое снижение продукции мочевины. В то же время действие обеих интактьых доз приводило к полному прекращению желчеотделения.
В настоящее время считается, что интимные механизмы гепатотоксического действия различных патогенных агентов определяются влиянием их на мембраны гепатэ-цнтов [2].
Использование в качестве показателей токсического действия маркерных ферментов гепатоцитов и непаренхиматозных клеток (макрофагов) позволило установить, что химическое воздействие вызывает ответную реакцию со стороны обоих типов клеток. Так, с первых минут воздействия CMC в перфузате возрастала активность глюко-зо-6-фосфатдегидрогеназы, локализованной исключительно в макрофагах. Степень повышения активности этого энзима оказалась более выраженной после введения большой дозы. Деся'.нкратисе увеличение активности другого маркерного фермента макрофагов — кислой фосфатазы — отмечалось после введения 75 мг CMC. Несколько позже и в меньшей степени повышалась активность этого фермента после введения низкой дозы.
Как и кислая фосфатаза, лизосомальный фермент ка-тепсин D, являющийся индикаторным ферментом макрофагов, также увеличивал активность в перфузате после воздействия CMC. Время появления и степень выраженности этих изменений были пропорциональны величине дозы.
Резкое повышение каталазной активности в перфузате (особенно после введения 75 мг CMC) свидетельствует о повреждении гепатоцитов, так как 85 % каталазной активности печени- связано с этим типом клеток.
Сопоставление результатов исследований с данными литературы показывает, что характер действия CMC на клетки печени принципиально не отличается от такового
других веществ (этанол, тетрахлорметан, соли тяжелых металлов) и обусловлен повышением проницаемости клеточных мембран для ферментов субклеточных структур, и в первую очередь для растворимых ферментов цитозоля: АЛТ, ACT, аргиназы. Наиболее выраженные изменения активности этих ферментов отмечались при воздействии высокой дозы CMC, при этом активность щелочной фосфатазы изменялась мало.
Выводы. 1. Ткань печени прочно и длительно удерживает анионные ПАВ, входящие в состав большинства бытовых CMC.
2. Компоненты CMC, содержащие в составе натрий и фосфор, печенью не связываются.
3. CMC угнетает желчеобразовательную функцию печени.
4. Ответная реакция при воздействии CMC на перфу-знруемую печень наблюдается не только со стороны гепатоцитов, но и со стороны непаренхиматозных клеток (макрофагов).
5. Характер действия CMC на клетки печени определяется резким увеличением проницаемости клеточных и субклеточных мембран.
Литература
1. Асатиани В. С. Ферментные методы анализа. — М., 1969.— С. 596; 611.
2. Влюгер А. Ф., Майоре А. Я- //Успехи гепатологии:— Рига, 1982.— Вып. 10.— С. 12—35.
3. Волощенко О. И.. Голенкова Л. Г. //Гиг. и сан.— 1986. — № 2.— С. 68—69.
4. Волощенко О. И., Медяник Н. А. Гигиена и токсикология бытовых химических веществ. — Киев, 1983.
5. Гепатоцит: Функционально-метаболические свойства / Под ред. Л. Д. Лукьяновой. — М„ 1985.
6. Колб В. Г., Камышников В. С. Справочник по клинической химии, — /Минск, 1982, —С. 281—282.
7. Морозов Б. В. //Пат. физиол — 1980. — № 3. — С. 72— 77.
8. Попов Т. /4.//Бюл. экспер. бнол.— 1976. — № 3.— С. 122—124.
9. Porembska L., Barannik Р //Diagnost. Lab.— 1974.— Vol. 10, № 3, — P. 239—245.
10. van Berkel T. J. С.//Metabolic Comparlmentation / Ed. H. Siesl. New-York, 1982. — P. 437—483.
Поступила 28.04.87
УДК 615.285.7.015.4.[612.354.2/.3+612.351.11
С. 10. Буслович, А. И. Крысанова, Л. И. Сорока, С. Н. Кравченок,
И. В. Войнова, Т. А. Миклуиг
ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПУТЕЙ ВВЕДЕНИЯ ХЛОРПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОКСИКИСЛОТ НА ПРОЦЕССЫ МИКРОСОМАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ В ПЕЧЕНИ
Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт, Минск
В последние годы при изучении токсического действия пестицидов и разработке средств детоксикацин значительное место занимают исследования механизмов обезвреживания их в организме В подавляющем большинстве случаев в таких исследованиях модель интоксикации создается введением химических веществ через желудочно-кишечный тракт. Однако в условиях практического использования пестицидов их поступление в организм чаще всего происходит парентеральными путями, например через кожу или ингаляцнонно. При этом функционирование мо-нооксигеназной системы печени может значительно отличаться от наблюдаемого при виутрижелудочном поступлении ксенобиотиков, что связано с особенностями кровоснабжения печени и различной доступностью веществ для системы монооксигеназ.
В настоящей работе представлены результаты изучения состояния детоксицирующей системы печени и сопряженных с ней метаболических процессов при виутрижелудочном и накожном действии гербицидов — хлорпроизводных фенокснкислот: бутиловего Тфира 2,4-днхлорфеноксиуксус-ной кислоты (2,4-ДК) и натриевой соли 2,4-дихлорфенокси-а-пропионовой кислоты (?,4-ДПК), оказывающих выраженное индуцирующее действие на мнкросомальную систему печени [3J.
Эксперименты проведены на половозрелых белых крысах обоего пола массой 180—220 г, находившихся на стандартном пищевом рационе.
Для создания сопоставимых условий воздействия хлор-фенокснсоединений на детоксицирующую систему печени животным вводили эквитокснческие дозы ('/s LDso) пре-
