CC BY
4
К МЕТОДИКЕ САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ'
«
Л. Н. Шустова, С. Л. Петрович
Из Московской городской санитарно-эпидемиологической станции
С 1 мая 1954 г. введен в действие новый ГОСТ 2874-54 на нормы качества питьевой воды, значительно измененный по сравнению с предшествовавшим ему ГОСТ 2874-45. В новом ГОСТ изложены старые методы бактериологического исследования воды, указанные в ГОСТ 5216-50, имеющем четырехлетнюю давность.
Считаем необходимым на основании личного опыта и литературных данных высказать следующие замечания о действующей ныне стандартной методике бактериологического исследования воды.
Стандартные методы исследования вводятся с целью получения -сравнимых данных в результате унификации, под которой следует понимать применение одинаковых методов к однородным, но отнюдь не к разнородным объектам исследования.
Методы ГОСТ 5216-50 распространяются на производство санитарно-бактериологических анализов воды: в источниках водоснабжения, на всех этапах ее очистки на водопроводных станциях, в водопроводной сети. Таким образом, эти методы относятся к двум весьма различным по составу и качеству категориям воды: с одной стороны, к воде из открытых водоемов, содержащей обычно в значительном количестве как микробов группы кишечной палочки, так и сапрофитную микрофлору, и, с другой стороны, к воде из водопроводной сети, прошедшей очистку, подвергшейся ■обеззараживанию (хлорированию) и содержащей микрофлору в незначительном количестве.
Ясно, что для выявления и изучения микрофлоры этих категорий воды, столь различных по своему характеру, необходимы различные методические приемы.
Согласно § 7 ГОСТ 5216-50 разница в анализе в зависимости от характера исследуемой воды сводится лишь к следующему: при анализах вод разных категорий для исследования берут различные объемы (500, 300, 100, 10 мл и менее) и при отборе проб хлорированной воды рекомендуется применение дехлоранта. Этим исчерпываются указания о диферен-циации методики.
ГОСТ 5216-50, как известно, предусматривает 2 метода выявления палочек кишечной группы без диференцировки их по отношению к категории исследуемой воды: метод мембранных фильтров и метод бродильных проб.
При применении метода мембранных фильтров по ГОСТ 5216-50 предлагается производить проращивание мембран при температуре 37°. Эта температура мало пригодна для выявления палочек группы коли из воды источников, так как обильная сапрофитная микрофлора затрудняет развитие колоний кишечной палочки на мембране, и, кроме того, по нашим наблюдениям, при обильном росте сапрофитов на мембране нередко отмечается угнетение ферментативных свойств кишечной палочки 2.
Что касается проращивания мембран после фильтрации водопроводной хлорированной воды, то в этом случае температура 37° вполне достаточна, поскольку необходимость в тормозящем влиянии на сопутствующую микрофлору отпадает.
1 Доложено 22 июня 1954 г. на сессии санитарно-гигиенических институтов и кафедр гигиены медицинских институтов РСФСР.
2 Указания на необходимость проращивать мембраны после фильтрации загрязненной воды при температуре 43° появились в отечественной литературе еще в 40-х годах, «о они не были учтены при составлении ГОСТ 5216-50.
При применении метода бродильных проб по ГОСТ 5216-50 предусматривается выращивание первичных посевов при температуре 43% опять-таки независимо от характера исследуемой воды. Между тем этот температурный режим вполне обоснован лишь в отношении загрязненной зоды. Что касается водопроводной воды, то температура 43° не благоприятствует развитию палочек группы коли, подвергшихся в процессе очистки и обеззараживания воды действию ряда угнетающих факторов и„ возможно, ослабленных в своей жизнедеятельности.
Таким образом, унификация методических приемов, рекомендуемых ГОСТ 5216-50 для вод различного характера, препятствует в одном случае выявлению палочек группы коли в воде источников (проращивание мембран при температуре 37°), в другом случае — выявлению их в водопроводной воде (постановка бродильной пробы при температуре 43°).
Мы считали бы правильным рекомендовать следующие варианты методики исследования воды:
а) при применении метода мембранных фильтров проращивать мембраны после фильтрации воды источников при температуре 43°, а после фильтрации водопроводной воды, прошедшей очистку, при температуре 37°, предусмотренной ГОСТ 5216-50;
б) при применении метода бродильных проб выращивать первичные посевы водопроводной воды при температуре 37°, а для воды источников оставить температуру 43°.
Особого рассмотрения заслуживает вопрос о применении температуры 43° для диференциации санитарно-показательных штаммов кишечной палочки в различных климатических условиях. Работами отечественных авторов (И. Е. Минкевич и др.) и зарубежных, главным образом индусских, давно установлено, что в условиях жаркого климата штаммы, выделяемые из внешней среды и из кишечника холоднокровных, в силу адаптации к высокой температуре воздуха, так же относятся к выращиванию при температуре 43°, как и штаммы свежефекального происхождения. Ценность «температурного теста» (43°), вполне оправдавшая себя в северных и средних районах нашей страны, в условиях южных широт резко снижается. Вопрос о диференциации штаммов кишечной палочки в жарком климате еще не решен.
Наблюдения И. Е. Минкевича подтверждаются работами Е. Н. Ми-шустина по «зональной» изменчивости свойств почвенных микробов в различных климатических поясах и в постепенном повышении их температурного оптимума по мере приближения к югу. Вполне вероятно, что при учете «зональной» изменчивости и при внимательном ее изучении создастся возможность разработки «зональных» нормативов и «зональных» методик.
Из других недочетов существующего положения следует отметить несогласованность между указаниями ГОСТ 2874-54 по нормам качества воды и указаниями ГОСТ 5216-50 по методам ее исследования. Это обстоятельство затрудняет как практическое производство анализа, так и санитарную оценку получаемых результатов.
Согласно ГОСТ 2874-54, вода питьевая, подаваемая в сети потребителям, должна удовлетворять следующим бактериологическим показателям:
а) при применении метода мембранных фильтров коли-индекс должен быть не более 3;
б) при использовании метода бродильных проб титр кишечной палочки должен быть не менее 300;
в) общее количество бактерий должно быть не выше 100.
Никаких иных норм ГОСТ 2874-54 не устанавливает. Между тем в
ГОСТ 5216-50 (раздел В, п. 37) имеются ссылки на схемы исследования, которые представлены в виде общеизвестных стандартных расчетных таблиц. Табл. 5 «Вода артезианских скважин, водопровод Москвы» рас-
считана на общий засеваемый объем в 500 мл. Эта таблица явно не соответствует бактериальным нормативам ГОСТ 2874-54, предусматривающим для всех водопроводов общий засеваемый объем 300 мл. Кроме того, в ГОСТ 5216-50 (раздел V, п. 25) имеется следующее указание: «Для чистых вод (централизованное водоснабжение, артезианские скважины и т. п.) общие объемы, подлежащие фильтрации, вариируют от 300 до 500 мл в зависимости от общей предполагаемой характеристики источника водоснабжения». Непонятно указание на необходимость вариировать общие объемы исследуемой воды при наличии твердого норматива в 300 мл, непонятна и ссылка на выбор объемов «...в зависимости от общей предполагаемой характеристики источников водоснабжения». Последнее было бы обосновано лишь в отношении воды открытых водоемов.
Поэтому у практических работников возникает вопрос, в каких объемах засевать воду артезианских скважин и водопровода Москвы? Каких требований придерживаться при их санитарно-бактериологической оценке? Очевидно, необходимо или дополнить ГОСТ 2874-54 в отношении воды артезианских скважин и водопровода Москвы указанием на нормы содержания кишечной палочки не более 2 в 1л' (коли-титр 500), или внести соответствующие исправления в ГОСТ 5216-50 (табл. 5 и раздел V, п. 25).
Попутно напомним, что эти нормативы были предусмотрены временным стандартом 1939 г. для водопровода Москвы. В том же стандарте общее количество бактерий в 1 мл воды допускалось не более 20. Многолетняя практика исследования водопроводной воды в Москве подтверждает правильность указанных нормативов, поскольку в подавляющем большинстве случаев общее количество колоний, вырастающих при посеве 1 мл воды, исчисляется единицами, а коли-индекс с постоянством держится менее 2. Эти данные не были учтены при пересмотре стандарта на нормы качества воды.
Обращает на себя внимание табл. 4 (ГОСТ 5216-50) «Вода водопроводная, грунтовые колодцы и т. п.». Схема исследования по данной таблице рассчитана на общий объем 300 мл. Непонятно, почему в табл. 4 ГОСТ 5216-50 о воде источников водоснабжения и воде водопроводной упоминается и о грунтовых колодцах, вода которых не относится ни к той, ни к другой категории.
Вопрос о предъявлении к качеству воды грунтовых колодцев таких же высоких требований, как к воде водопроводной (хлорированной), остается еще спорным.
Большим недочетом стандартных методов, указываемых ГОСТ 5216-50, является отсутствие регламентированного способа учета кишечной палочки при применении метода мембранных фильтров вообще и особенно при исследовании загрязненной воды.
Учет результатов анализа методом мембранных фильтров (ГОСТ 5216-50, раздел V, пп. 24—30) вызывает ряд затруднений. Отсутствие необходимых методических указаний предоставляет возможность каждому работнику производить количественный учет кишечной палочки по своему усмотрению, что не гарантирует получения сравнимых результатов.
В ГОСТ 5216-50 (раздел V, п. 26) есть указание: «При анализе загрязненных вод следует применять фильтрование после предварительного разведения». Оно не разрешает возникающих в процессе работы трудностей, так как часто не удается предугадать нужной степени разведения воды, чтобы получить рост изолированных колоний кишечной палочки на мембранах. Кроме того, при фильтрации воды, содержащей много сапро-фитов и относительно небольшое количество кишечных палочек, бывает нередко, что путем разведений удается достичь рассеянного роста колоний сапрофитов, но при этом не оказывается колоний кишечной палочки, поскольку их значительно меньше.
При анализе чистой воды обычно профильтровывают ее большой объем (300 мл) соответственно установленным нормативам. На мембране
4 Гигиена и санитария, № 12
25
подсчитывают количество выросших колоний кишечной палочки, и пересчет на 1 л (коли-индекс) «е приводит к большой ошибке. Что касается загрязненных вод, то профильтровывают разные, обычно небольшие объемы, поэтому возникает ряд вопросов в связи с установлением коли-индекс а: нужно ли основываться на числе колоний кишечной палочки, выросших из наименьшего, пропущенного через фильтр объема воды, или выводить среднее арифметическое из суммы колоний, выросших на всех мембранах; какое наименьшее количество выросших колоний можно считать достаточным, чтобы не допустить грубой ошибки при пересчете на 1 л. Например, можно ли на основании подсчета 3—5 колоний в 0,1 мл воды сделать пересчет на 1 л?
Учитывая неравномерность распределения кишечной палочки в воде, нужно считать, что все эти вопросы имеют существенное значение, так как они влияют на конечный результат анализа.
Работа С. Л. Петрович «О применении метода мембранных фильтров к исследованию воды грунтовых колодцев»1 посвящена специально вопросу унификации метода и уточнению учета кишечной палочки в загрязненной воде. Автор рекомендует: а) фильтровать не менее 4 убывающих объемов, кратных 10; б) проращивать мембраны при температуре 43°; в) учитывать наличие и отсутствие колоний кишечной палочки на соответствующих мембранах; на основании положительных и отрицательных результатов выявления кишечной палочки на всех мембранах устанавливать коли-индекс (коли-титр), пользуясь таблицами, применяемыми обычно при бродильном методе.
Этот способ учета кишечной палочки для загрязненных вод вполне оправдал себя на практике и получил положительную оценку со стороны ряда работников санитарной бактериологии (Л. Б. Доливо-Доброволь-ский, А. А. Преображенский и др.).
Последнее замечание, которое мы считаем необходимым сделать, касается нового показателя качества воды, внесенного в ГОСТ 2874-54. Согласно этому показателю: «Вода не должна содержать различаемых невооруженным глазом водных организмов». Это требование заслуживает пристального внимания.
В работе Л. Н. Шустовой и П. В. Мозжухина (1939) 2 указывается на прохождение через скорые фильтры, особенно в весенне-летние месяцы, до 50% животного и растительного планктона, содержащегося в воде, поступающей на. фильтры.
Введение нового показателя в нормативы, естественно, требует разработки указании по осуществлению контроля за соответствием качества воды этому показателю. Необходимо установить, в каком объеме, как часто и кому следует проводить это наблюдение.
На основании изложенного считаем возможным сделать вывод о необходимости пересмотра стандартных методов исследования воды с учетом научных работ отечественных авторов и наблюдений практических работников.
Поступила 9/Х1 1954 г.
-¡V -й-
1 Гигиена и санитария, 1952, № 6.
2 Водоснабжение и санитарная техника. 1939. № 3
