Научная статья на тему 'К методике определения кишечной палочки в почве'

К методике определения кишечной палочки в почве Текст научной статьи по специальности «Математика»

CC BY
126
16
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Область наук
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «К методике определения кишечной палочки в почве»

позволят, следует приступать к оздоровлению территории и колодца, проводя санацию и оборудование его, как описано в статье. Хлорирование воды в колодцах можно допускать лишь в крайних случаях. Наиболее надежным является метод суперхлорирования, менее надежно и более сложно хлорирование обычными дозами. При хлорировании малыми дозами количество остаточного хлора не должно падать ниже 0,6—0,5 мг/л. Для контроля за хлорированием необходимо иметь портативный набор или более простой индикатор для определения остаточного хлора. Без объективного контроля хлорирование воды в колодце ненадежно и нецелесообразно.

2. Следует продолжить работу по изысканию более простых, надежных и обоснованных методов хлорирования воды в колодцах, так как этот вопрос продолжает оставаться актуальным и в настоящее время.

М. В. ГОДЛЕВСКАЯ

К методике определения кишечной палочки в почве

Из кафедры общей гигиены Саратовского медицинского института

* .

С целью выявления наилучшего метода опредления кишечной палочки в почве нами были испытаны различные среды: бродильные (среда Эйкмана), жидкие среды, содержащие антисептические вещества (среда Кесслер-Свенертона), бриллиант-желчный бульон и желчно-глюкозный' бульон, плотные среды для непосредственного посева на них почвы (среды карбол-Эндо, агар-бромтимолблау, Ди-нерта). Кроме того, мы применили метод фильтрования почвенной болтушки через мембранные фильтры, с последующим выращиванием задержанных на фильтрах бактерий на плотных средах (Эндо, карбол-Эндо, Динерта), а также на жидких и полужидких средах с наполнителем. '

Среда Кесслер-Свенертона, бриллиант-желчный и желчно-глю-козный бульон в большинстве случаев дали совпадение коли-титра с бродильным титром, в то время как среда Эйкмана в 11 случаях из 13 дала ложное газообразование. При сравнении высеваемости кишечной палочкн на среде Кесслер-Свенертона с другими жидкими средами видно, что среда Эйкмана во всех случаях дает меньшую высеваемость; на бриллиант-желчном и желчно-гл1ркозном бульоне в большинстве случаев высеваемость кишечной палочки совпадает со средой Кесслер-Свенертона. Следовательно, среда Эйкмана оказалась наименее чувствительной и элективной из жидких сред; бриллиант-желчный и желчно-глюкозный бульон не имеет никаких преимуществ перед средой Кесслер-Свенертона.

На плотных средах, а также на мембранных фильтрах, как правило, имеется ббльшая высеваемость кишечных палочек, чём на жидкой среде Кесслер-Свенертона. Наряду с большей чувствительностью методы непосредственного посева почвы на плотные среды и с помощью мембранных фильтров позволяют сокращать срок анализа на сутки, экономят среды и посуду, исключают действие микробов-антагонистов на кишечную палочку, позволяют более полно учитывать все разновидности В. coli, которые имеются в почве. Метод мембранных фильтров по сравнению с непосредственным посевом на

плотные среды еще более экономит среды и посуду, а также время, необходимое для испарения жидкости с поверхности плотной сред^л.

Испытанные нами плотные среды оказались по своей чувствительности почти одинаковыми. Что касается их специфичности, то следует отметить, что среда агар-бромтимолблауг по нашему мнению, является в этом отношении наихудшей, так как, наряду с кишечной палочкой, на ней беспрепятственно растут посторонние микроорганизмы, затрудняющие диферендирование колоний по внешнему виду. Среды Динерта и карбол-Эндо, содержащие фенол, хорошо заглушают рост посторонних микробов, но на первой среде затруднительно отличие кишечной, палочки от других видов микробов, так как колонии В. coli на этой среде часто имеют нетипичный вид или быстро меняют свою окраску при стоянии в термостате (возможно, такие результаты зависят от качества красок, входящих в состав среды).

Итак, из плотных сред лучшей оказалась среда карбол-Эндо, так как она' хорошо подавляет рост посторонних микробов и дает хорошо окрашенные, легко отличимые от других видов колонии кишечной палочки.

Выяснив возможность использования мембранных фильтров для анализа почвы, мы занялись дальнейшей разработкой этого метода. Исходя из указаний Диановой и Ворошиловой о том, что на средах с уменьшенным содержанием агара или совсем без агара облегчается рост бактерий, что выражается в увеличении размера колоний и ускорении их роста, мы попытались применить полужидкие среды с. наполнителем для выращивания кишечных палочек, задержанных на мембранных фильтрах. Применялись одновременно среды Эндо, карбол-Эндо и Динерта с обычным и уменьшенным (0,5%) содержанием агара. Полужидкие среды с наполнителем имели обычный состав лишь с меньшим содержанием агара. В качестве наполнителя применялось измельченное стекло, которое просеивалось через 2-мм сито, стерилизовалось кипячением в воде, подсушивалось и рассыпа-^ лось по чашкам Петри. На стекло наливалась питательная среда. Чтобы проследить скорость роста кишечной палочки на полужидких средах, результаты отмечались через 16,20 и 24 часа содержания посевов в термостате. Эти опыты показали, что методы определения кишечной палочки в почве с помощью мембранных фильтров как на плотных средах, так и на полужидких обладают одинаковой чувствительностью. Но на полужидких средах Эндо и карбол-Эндо типично окрашенные колонии кишечной* палочки вырастают быстрее, чем на плотных средах.

, Чтобы выяснить наиболее приемлемую концентрацию агара в полужидких средах, почва подвергалась исследованию на средах Эндо и карбол-Эндо с различным содержанием агара (3, 0,5, 0,3, 0,1%) и без агара (жидкие среды). В полужидких и жидких средах увеличивалось количество фуксина с 0,5 до 0,8 мл на 100 мл среды, что способствует более яркой окраске колоний кишечной палочки и более быстрому ее появлению. Имея указания Минкевича и Довженко об удовлетворительном росте бактерий при уменьшении количества сахара в питательных средах, мы пытались уменьшить количество лактозы до 0,5% в плотных и полужидких средах Эндо и карбол-Эндо. В то время как на плотных средах вырастали типично окрашенные колонии кишечных палочек, на полужидких средах получались бесцветные колонии. Очевидно, интенсивный рост бактерий на полужидких средах должен быть обёспечен большим количеством лактозы для получения соответствующей окраски колоний. Следовательно, снижение количества лактозы в средах, содержащих уменьшенное количество агара, недопустимо.

зГООШ и ciitfrriffcnr, № Т п ———

МЕДИЦИНСК. БИБЛ1 .. .Л I 17

Снизив количество агара в питательной среде в 10 раз (с 3 до 0,3%), мы получили ускорение роста кишечной палочки на 10 часов. Лучшей средой по нашим наблюдениям является среда карбол-Эндо с 0,3% агара. Среды с 0,1% агара и без агара не ускоряют роста бактерий по сравнению со средой, содержащей 0,3% агара, не застывают и, вследствие своего жидкого состояния, легко переливаются при переносе чашки и окрашиваются в тёмнокрасный цвет, затрудняя счет колоний.

Метод определения кишечной палочки в почве с помощью мембранных фильтров в сочетании с полужидкой средой карбол-Эндо проверялся на 100 образцах проб естественной городской почвы, и полученные результаты сравнивались с общепринятым методом Кесслер-Свенертона. Из 48 проб почвы, где найдена кишечная палочка, отмечается совпадение коли-индекса на мембранных фильтрах со средой Кесслер-Свенертона в 5 пробах, на фильтрах коли-индекс оказался выше в 35 пробах, на среде Кесслер-Свенертона — в 8 пробах. Из приведенных цифр видно, что испытанный нами для почвы метод определения кишечной палочки с помощью мембранных фильтров в сочетании с полужидкой средой карбол-Эндо, содержащей 0,3% агара, дает в большинстве случаев большую высеваемость В. coli, чем среда Кесслер-Свенертона, не говоря о других преимуществах метода (экономия времени, сред, посуды и др ).

Наряду с определением кишечной палочки, проводился санитарно-химический анализ почвы и определение термофильных бактерий. Пробы брались в канализованном (35 проб) и в неканализованном районе (35), в оврагах (20), на лугах (6), на огородах (4) (табл. 1); 11 проб были взяты во дворах канализованного района. Последние 11 проб подвергались только исследованию на кишечную палочку.

Таблица 1

Хлоридц Нитраты Аммиак Влажность в % Всего

Районы города среднее максимум минимум среднее максимум минимум среднее максимум минимум среднее максимум минимум

Овраги..... 27,64 107,44 2,23 6,46 23,39 0,05 0,28 1,26 0 18,79 29,74 8,31 20

Неканализованный

район ..... 22,21 225,91 0,81 3,20 22,96 0 0,13 1,91 0 12,24 36,46 0„95 35

Канализованный

район ..... 13,27 75,05 0,80 2,95 31,82 0 0,20 2,40 0 11,68 23,88 3,19 35

Огороды .... 2,09 4,88 0,81 2,50 5,17 0,22 0,20 0,62 0,06 6,97 18,80 1,84 4

Луга...... 1,70 3,54 0,80 0,57 2,52 0,17 0,100,15 1 0,04 7,99 16,20 1,30 в

Среднее содержание хлоридов и нитратов по районам распределяется в следующем порядке: почва оврагов содержит наибольшее количество этих соединений, в неканализованном районе их содержится меньше, в канализованном—еще меньше. Средние цифры аммиака не дают такой закономерности. Но средние данные химического анализа имеют относительное значение для оценки санитарного состояния почвы из-за большой разницы между максимальными и минимальными цифрами. Данные бактериологического .исследования дают возможность сделать окончательный вывод о санитарном состоянии почвы различных районов города. В табл. 2 указана количество кишечных палочек, найденных в почве районов Саратова.

Все пробы луговой почвы и большинство проб канализованного района не дали роста кишечной палочки в 1 г почвы, т. е. коли-

Таблица 2. Коли-индекс в пробах ПоЧвЫ различных районов

■ч" Районы города Коли-индекс Всего проб

<1 1-10 10-300 100—1000 1000- —ю о:о >10С03

Овраги ...... 0 3 1 9 4 3 20*

Неканализованный

район .... 9 8 7 6 3 1 2 35

Канализованный

район ..... 20 5 1 2 5 2 с5

Огороды .... 2 1. 1 0 0 0 4

Луга...... 6 0 ■ 0 О 0 0 6

Дворы канализо-

ванного района 0 1 1 4 2 ' 3 11

индекс оказался ниже 1. В почве.неканализованного района 25% проб имели коли-индекс ниже 1. Пробы же, взятые в оврагах и дворах, дали высокий коли-индекс (100—1 000-^ 10ООО).

Термофильные бактерии в городской псчве встречаются довольно редко. Они содержатся главным образом в почве оврагов и некана-лизованного района; их наличие в большинстве случаев совпадает с высоким содержанием кишечной палочки.

При рассмотрении результатов анализа отдельных проб не удается установить евязи между показателями химического и бактериального загрязнения. В тех пробах почвы, где много хлоридов, нитратов « аммика, часто наблюдается мало кишечных палочек. Такое несоответствие между отдельными показателями санитарного состояния почвы можно объяснить различной судьбой их в поцве.

Преобладающее большинство штаммов кишечных палочек, выделенных из почвы Саратова летом 1946 г., относится к цитрат-позитивным разновидностям (В. coli aerogenes и В. citrovorum), способным давать брожение на среде Булира при 43°.

Выводы

1 у Среди жидких питательных сред накопления лучшей средой для анализа почвы является среда Кесслер-Свенертона, которая i.o чувствительности и элективности стоит выше других жидких сред (среды Эйкмана, бриллиант-желчкого бульона и желчно-глюкозного бульона).

2. Из плотных сред наилучшей является среда карбол-Эндо, которая по сравнению со средами Динерта и агар-бромтимолблау лучше подавляет рост посторонних микробов и дает типичные колонии кишечных палочек, легко отличимые от других видов бактерий.

3. Метод непосредственного посева почвы на плотные среды имеет преимущество по сравнению с жидкими средами накоплений: сркращает срок анализа на сутки, экономит питательные среды и посуду, исключает антагонистическое действие других кикробов на кишечную палочку, позволяёт полнее диференцироЕать все имекщиеся разновидности кишечной палочки и более точно установить их коли чество.

4. Метод исследования почвы с помощью мембранных фильтров-по своей чувствительности не уступает методу непосредственного посева на плотные среды и исключает недостатки последнего: длительное испарение жидкости с поверхности среды и потребность в большом количестве чашек для анализа. Преимуществом метода является возможность использования мембранных, фильтров с полужидкими

средами с наполнителями, что сокращает срок анализа еще на 6 — 8 часов и экономит агар (лучшей средой, по нашим данным, является среда карбол-Эндо, содержащая 0,3% агара).

5. При сравнении данных анализа отдельных проб почвы Саратова отмечается несоответствие между бактериальным загрязнением почвы ^наличйе кишечной палочки) и данными химического исследования, что подтверждает необходимость при санитарном исследовании" обращать особое внимание на содержание, в почве кишечной палочки.

. 6. В почве Саратова преобладают цитрат-позитивные разновидности кишечной палочки (В. coli aerogenes и В. coll citrovorum), относящиеся к пробе Булира при 43°, как В. coli теплокровных.

7. Наиболее загрязненной оказалась почва оврагов и неканализован-ного района, в особенности незамошенная часть его; в меньшей степени загрязнена почва канализованного района (следует отметить большую загрязненность почвы территории базаров и дворов); наименее загрязнена почва пригородных1 огорОдов и лугов.

Проф. Д. А. ЗИЛЬБЕР и И. П. РУСАНОВ ---

Применение люминесцентных ламп дневного света при тонких зрительных

работах

Из Ленинградского института гигиены труда и профзаболеваний

В последние годы в технике электрического освещения наблюдается огромный прогресс, вызванный применением новых источников света — люминесцентных ламп. По сравнению с лампами накаливания люминесцентные лампы обладают рядом преимуществ, имеющих большое гигиеническое значение. Известно, что лампы накаливания имеют спектр с преобладанием красных и оранжевых лучей, поэтому применение их при работах, связанных с различением цветов, весьма затруднительно, так как цветопередача освещаемых предметов отлична от цветопередачи при естественном свете. Люминесцентные же лампы дневного света, имеющие спектральную характеристику, которая почти соответствует дневному свету, сохраняют цветопередачу почти неизменной. Далее, люминесцентные лампы обладают небольшой яркостью (порядка 0,4 — 0,8 сб), значительно меньшей, чем яркость нитей лампы накаливания. Наконец, люминесцентные лампы дают возможность создать равномерно рассеянное освещение при помощи больших светящихся поверхностей,что затруднено при применении ламп накаливания.

Однако, наряду с' большим преимуществом, люминесцентные лампы имеют существенный недостаток: они вызывают так называемый стробоскопический эффект, сущность которого состоит в том, что при питании переменным током, вследствие уменьшения тока до нуля в каждый полупериод, возникают колебания светового потока. Поэтому световой поток люминесцентной лампы производит впечатление мерцающего, что приводит к искажению движущихся и вращающихся предметов. Правда, в настоящее время достигнут большой успех в устранении этого недостатка люминесцентных ламп: 2 — 3 или больше ламп включаются одновременно по разным фазам, вследствие чего при уменьшении светового потока одних ламп до нуля в других лампах он достигает максимума, так что при совместном дей-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.