CC BY
6the presence the common with mycobacteria antigen in corynebacteria. In animals infected with mycobacteria, there was an increase in the number of T- and B-lymphocytes throughout the experiment. In animals infected with corynebacteria there was a decrease in B-cells at the third stage of the study and T-lymphocytes at the second one. The results of the production experiment were confirmed laboratory indicators. In a tuberculosis-free farm, 14 tuberculin-responsive animals (cattle) with unspecified results of a simultaneous test were divided into 2 groups, 7 animals were examined in a simultaneous test with tuberculin and corynebacteriosis sensitin, 7 - with nocardial. The specificity of the monoallergens studied was revealed: the response to corynebacteriosis sensitin is more intense than to tuberculin (6.3 ± 0.09 and 5.8 ± 0.17, respectively), in the second group, the intensity was 4.3 ± 0.15 per nocardial allergen and 6.2 ± 0.27 per tuberculin. The data obtained expand the understanding of the causes of the sensitization of a macroorganism to tuberculin.
Сведения об авторах:
Баратов Магомед Омарович, доктор вет. наук, заместитель директора Прикаспийского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан» (ФАНЦ РД); д. 88, ул. Дахадаева, г. Махачкала, Республика Дагестан, Российская Федерация, 367000; e-mail: alama500@rambler.ru; тел.: +7 (928) 501 09 48
Гусейнова Патимат Султановна, младший научный сотрудник лаборатории инфекционной патологии Прикаспийского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан» (ФАНЦ РД); д. 88, ул. Дахадаева, г. Махачкала, Республика Дагестан, Российская Федерация, 367000
Author affiliation:
Baratov Magomed Omarovich, Sc. D. in Veterinary Medicine, Deputy Director of the Caspian Zonal Veterinary Research Institute - a branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution (FSBSI) «Federal Agrarian Scientific Center of the Republic of Dagestan (FASC RD)»; house 88, Dakhadaev str., Makhachkala city, Republic of Dagestan, Russian Federation, 367000; e -mail: alama500@rambler.ru; phone: +7 (928) 501 09 48.
Huseynova Patimat Sultanovna, Junior Researcher at the Laboratory of Infectious Pathology of the Caspian Zonal Veterinary Research Institute - a branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution (FSBSI) «Federal Agrarian Scientific Center of the Republic of Dagestan (FASC RD)»; house 88, Dakhadaev str., Makhachkala city, Republic of Dagestan, Russian Federation, 367000
DOI: М25690^ЕТРАТ2020.17Ю03 УДК 619:616.155.392:-616.9-092.9 Дроздова Л. И., Тимина Л. И.
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРОМИЦЕТОВ НА ОРГАНИЗМ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ В УСЛОВИЯХ ИММОБИЛИЗАЦИИ
Ключевые слова: иммобилизационный, стресс, условно-патогенные микромицеты, адаптационная энергия, лабораторные животные, полиэтиологический стресс.
Резюме: Цель исследования состояла в оценке возможности создания экспериментальной ми-котической инфекции у лабораторных белых мышей в условиях иммобилизации с тем, чтобы в дальнейших исследованиях определить способ экспериментального воспроизведения модели полиэтиологического стресса. Для этого была воспроизведена модель иммобилизации у лабораторных животных (ЛЖ), создана модель экспериментальной микотической инфекции у ЛЖ, вызванной условно-патогенными микромицетами, подтверждена грибковая природа инфекции у ЛЖ. В ходе экспериментальных исследований авторы использовали макро- и микроскопические методы исследований, в результате которых было установлено, что последовательное влияние двух экспериментальных воздействий, одно из которых обусловлено введением условно-патогенных микромицетов, а второе ограничением движения, приводит к гибели экспериментальных животных, которая наступала на первые, вторые сутки от начала воздействия иммобилизации и составила 100 % в группе № 1; 75 % в группе № 2; 40 % в группе № 3. В контрольных и опытных группах № 4-6 животные оставались живыми до конца экспериментального исследования. Кроме того, авторами выявлена закономерность развития диссеминации и появления микромицета в периферической крови животных опытных групп в более ранние сроки, чем у животных контрольных групп, что обусловлено, возможно, предшествующей введению Р. сус1оршт и А. $о1ат, иммобилизацией, которая способна приводить к снижению естественной резистентности животных и, следовательно, более раннему развитию генерализованного процесса. Такая же тенденция была отмечена в скорости развития мицелия. Приведенные результаты экспериментальных исследований, позволяют оценить возможность воспроизведения экспериментальной микотической инфекции у лабораторных животных в условиях иммобилизации. Выяснено, что сочетанное влияние двух факторов, один из которых обусловлен введением условно-патогенного микромицета, приводит к возрастанию патогенности микромицета в условиях иммобилизации.
Введение
Проблема стресса в последние годы становится одной из самых актуальных тем современного животноводства, что обусловлено интенсивным выращиванием и эксплуатацией животных. К наиболее сильным стрессовым факторам, сопряженным с промышленной технологией относят ранний отъем молодняка, транспортировку, безвыгульное стойловое содержание и т. д. [1-4].
В настоящее время микроорганизмы-возбудители также рассматриваются с точки зрения стрессового воздействия, которые в нормальных условиях могут находиться в организме сельскохозяйственных животных и не вызывать патологических изменений. Однако при нарушении условий содержания и кормления, а также при снижении резистентности и иммунологической реактивности макроорганизма они способны приобретать вирулентные свойства.
Одними из наиболее частых этиологических агентов способных индуцировать заболевание являются условно-патогенные микромицеты, которые чаще всего попадают в организм сельскохозяйственных животных через дыхательные пути или с кормами, пораженными микроскопическими грибами.
Необходимо отметить, что одновременное или последовательное воздействие
двух или нескольких стрессоров, один из которых обусловлен попаданием в организм условно-патогенной микрофлоры, например, микромицетов приводит к очень сильной стрессовой реакции. Может развиться, так называемый, полиэтиологический стресс, в процессе которого у животных интенсифицируются процессы распада в обмене веществ, прекращается рост молодняка, уменьшается масса тела взрослых животных, возникают ареактивное состояние, истощение жизненных сил и гибель животного [5, 6].
Несмотря на то, что полиэтиологический стресс явление довольно частое в современном животноводстве, изучен он недостаточно и возникает чаще всего при интенсивном ведении промышленного животноводства, предусматривающего максимальное использование биологического потенциала сельскохозяйственных животных.
Учитывая вышеизложенное, представлялось актуальным оценить возможность создания экспериментальной микотиче-ской инфекции у лабораторных белых мышей в условиях иммобилизации, с тем, чтобы в дальнейших исследованиях определить способ экспериментального воспроизведения модели полиэтиологического стресса. Для разрешения данного вопроса необходимо было решить следующие задачи:
1. Воспроизвести модель иммобилизации у лабораторных животных (ЛЖ).
2. Создать модель экспериментальной микотической инфекции у ЛЖ, вызванной условно-патогенными микромицетами.
3. Подтвердить грибковую природу инфекции у ЛЖ.
Материалы и методы исследований
Объектом исследования настоящей работы являлись лабораторные животные - беспородные белые мыши, которые, по мнению ряда исследователей, являются наиболее удачной биологической моделью для воспроизведения экспериментальной микотической инфекции [7, 8]. Животных использовали в количестве 425-ти особей, обоего пола, массой 18-22 г. Животные содержались в соответствии со стандартом (GLP) - надлежащей лабораторной практики [9, 10].
В работе использовали культуры ми-кромицетов, Alternaria solani, Paecilomyces variotii, Pénicillium cyclopium. Выбор ми-кромицетов был обусловлен малой изученностью Alternaria solani и Paecilomyces variotii в отношении влияния на макроор-гнизм и частотой встречаемости в современных животноводческих промышленных комплексах последнего. Микромице-ты вводили однократно внутрибрюшин-ным способом, который достаточно часто используется исследователями для введения антигена. Микромицеты вводили, в до-
зах: Pénicillium cyclopium 41Д106 кл., Alternaria solani 3,75-106 кл., Paecilomyces variotii 8,6-106 кл.
Моделирование стресса у экспериментальных животных чаще всего производят посредством иммобилизации, болевых воздействий, чрезвычайных мышечных нагрузок, охлаждения и т. д. Мы в своей работе в качестве стрессора использовали экспериментальную модель ограничения движения животных, которая по данным ряда исследователей достоверно приводит к снижению резистентности животных [11, 12]. Мышей иммобилизовали по семь часов в течение восьми суток. В целом наблюдение за животными составило 45 суток.
На рис. 1 представлена экспериментальная модель иммобилизации лабораторных животных.
Группы животных формировали с учетом экспериментального воздействия и видовой принадлежности микромицета. Перечень групп животных используемых в эксперименте представлен в табл. 1.
Первую, вторую и третью опытные группы составили животные, которым вводили микромицет, а потом применяли иммобилизацию. Четвертую, пятую и шестую опытные группы сформировали из животных, которых сначала иммобилизовали в пеналах, а затем вводили микроми-цет. Контрольные группы № 7-10 составили животные, к которым применяли только один вид экспериментального воздей-
Рис. 1. Экспериментальная модель иммобилизации белых мышей
Таблица 1. Группы животных, используемых в эксперименте
№ группы Экспериментальное воздействие
1 Р. сус1ортт +ИМО
2 А.эоШт+ИМО
3 Р. уапоШ+ИМО
4 ИМО+ Р. сус1ортт
5 ИМО+ А. $о1ат
6 ИМО+ Р. уапоШ
Контроль-7 Р. сус!оршт
Контроль-8 А^о1ат
Контроль-9 Р. уапоШ
Контроль-10 ИМО
ствия.
Критерием воспроизведения экспериментальной микотической инфекции у лабораторных животных считали обнаружение мицелия, плодовых тел микромицетов в крови экспериментальных животных, а также выделение культуры из посевов-отпечатков органов экспериментальных животных.
С целью обнаружения мицелия, спор и других элементов гриба, каждые трое суток у лабораторных животных проводили забор периферической крови (ПК).
Результаты и обсуждение
Необходимо отметить, что в ходе эксперимента в периферической крови ЛЖ (группа № 4) обнаруживали септирован-ный мицелий и плодовые тела с характерными для Р. сус1оршт конидиеносцами на восьмые сутки исследования, в то время как, у животных контрольной группы № 7 элементы гриба обнаруживали только на 17-е сутки наблюдения. На рис. 2 представлен микромицет Р. сус1оршт в периферической крови лабораторных животных на
восьмые сутки наблюдения.
Микромицеты А. solani обнаружили в крови ЛЖ (группа № 5) на 10-е сутки, а у животных контрольной группы № 8 только на 15-е сутки наблюдения. На рис. 3 представлена спора микромицета А. so-1ат в периферической крови лабораторных животных.
Мицелий и другие клеточные элементы микромицета в периферической крови лабораторных животных опытных групп № 3 и 6 обнаружить не представилось возможным.
Учитывая, что достоверным подтверждением грибковой природы инфекции является прорастание возбудителя в мицелий, выделяли чистую культуру путем посева на плотную питательную среду отпечатков срезов органов экспериментальных животных. Прорастание гриба в мицелий происходило почти во всех исследуемых органах, что может свидетельствовать о развитии диссеминированного процесса. Однако в тех группах опытных животных, где введению возбудителя предшествовала иммобилизация, прорастание
Рис.2. Плодовоетело микромицета Р. суе1оршт в крови белоймыши (группа № 4), окраска по Романовскому-Гимзе, увеличение х 1000
Рис.З.Спорамикромицета А.$о1ат в крови белой мыши (группа № 5), окраска по Романовскому-Гимзе, увеличение х 1000
мицелия происходило значительно раньше. На рисунках 4-6 представлены колонии микромицетов Р. сус1оршт, А. sdani и Р. уапоШ, выросшие из отпечатков органов экспериментальных животных.
Для подтверждения видовой принадлежности гриба готовили препарат «раздавленная капля». На рисунках 7-9 представлены нативные препараты микроми-
цетов Р. сус1оршт, А. sdani и Р. уапоШ из мицелия, выросшего при посеве на плотную питательную среду отпечатков срезов органов белых мышей.
В ходе экспериментальных исследований также установили, что последовательное влияние двух экспериментальных воздействий, одно из которых обусловлено введением условно-патогенных микроми-
Рис.4.Колонии микромицета Р. сус/оршш,выросшиеизотпечатка печени белой мышина7-есутки наблюдения (группа №4)
Рис.7.Микроскопическая картинакультуры Р. сус/оршш,выделеннойпри посеве отпечаткапечени, зараженнойбелой мыши(группа №4)
Рис.5. Колониимикромицета А. $йат, вы- Рис. 8. Микроскопическая картина культуры А. $Лат,
росшие из отпечатка печени белой мыши на 6-е сутки наблюдения (группа № 5)
выделенной при посеве отпечатка печени, зараженнойбелой мыши(группа№ 5)
Рис. 6. Колонии микромицета Р. уапоШ, выросшие изотпечаткалегкогобелоймыши на8-есуткинаблюдения(группа№6)
Рис. 9. Микроскопическая картина культуры Р. уапоШ, выделенной при посеве отпечатка легкого зараженной белоймыши(группа№6)
цетов, а второе ограничением движения, приводит к гибели экспериментальных животных. В таблице 2 приведены обобщенные результаты проведенных экспериментальных исследований.
Выявленная нами закономерность развития диссеминации и появления микро-мицета в периферической крови лабораторных мышей (группы № 4 и 5) в более ранние сроки, чем у животных контрольных групп обусловлена, возможно, предшествующей введению Р. сус1оршт и А. solani иммобилизацией, которая способна приводить к снижению естественной резистентности животных и, следовательно, более раннему развитию генерализованного процесса.
предположить, что животные, максимально адаптированные к экспериментальной инфекции, теряют в значительной степени свою резистентность и способность к адаптации по отношению ко второму экспериментальному воздействию - иммобилизации. Это явление можно объяснить большим расходованием адаптационной энергии при воздействии первого стрессорно-го агента.
Адаптационная энергия, которой обладает каждый организм, всегда имеет количественный предел и, каков бы ни был ее первоначальный запас, она может расходоваться либо очень медленно в течение длительного существования на приспособление организма к обычным воздействиям любого рода, либо очень быстро при резко изменившихся окружающих услови-
Такая же тенденция отмечена в скорости развития мицелия. Условно-патогенные микромицеты прорастали в мицелий из посевов отпечатков органов опытных групп ЛЖ (№ 4-6) в более ранние сроки, чем в других контрольных и опытных группах.
Кроме того, нами был выявлен факт гибели ЛЖ в опытных группах № 1-3, которая наступала на первые, вторые сутки от начала воздействия иммобилизации и составила 100 % в группе № 1; 75 % в группе № 2; 40 % в группе № 3. В контрольных и опытных группах № 4-6 животные оставались живыми до конца экспериментального исследования. На основании полученных экспериментальных данных можно
ях, предъявляющих максимальные требования к адаптации. В данном случае можно говорить об исчерпывании адаптационной энергии у ЛЖ (группы № 1, 2, 3). Острое истощение, вызванное интенсивным воздействием инфекта с последующей иммобилизацией, приводит к гибели экспериментальных животных.
Выводы и заключение
Полученные результаты экспериментальных исследований позволяют сделать вывод о том, что сочетанное влияние двух факторов, один из которых обусловлен введением условно-патогенного микроми-цета, приводит к возрастанию патогенно-сти микромицета в условиях иммобилизации.
Таким образом, в результате экспери-
Таблица 2. Результаты экспериментальных исследований по изучению влияния условно-патогенных микромицетов на организм _ лабораторных мышей в условиях иммобилизации_
№ группы Экспериментальное воздействие Появление клеточных элементов гриба в ПК ЛЖ на...сут. Прорастание мицелия, выросшего из отпечатков органов ЛЖ на Гибель/ выживаемость ЛЖ (%)
... сут
1 Р. суе1оршш +ИМО - - 100/0
2 Ало1ат+ИМ£> - 12 75/25
3 Р. уапоШ+ИМО Не обнаружено 14 40/60
4 ИМО+ Р. суе1оршш 8 7 0/100
5 ИМО+ А. хо1ат 10 6 0/100
6 ИМО+ Р. уапоШ Не обнаружено 8 0/100
Контроль-7 Р. суе1оршш 17 - 0/100
Контроль-8 А.зо1ат 15 12 0/100
Контроль-9 Р. уапоШ Не обнаружено 14 0/100
Контроль-10 ИМО - - 0/100
ментальных исследований была произведена модель иммобилизации (ЛЖ), а также попытка создания экспериментальной микотической инфекции. Для более точного понимания возможности воспроизведения экспериментального микоза, и поли-
этиологического стресса в целом необходим комплекс дополнительных исследований (клинических, патоморфологических, гистологических, иммунологических и т. д.)
Библиографический список:
1. Шахов А. Г. Эколого-адаптационная стратегия за-
щиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / А. Г. Шахов. -Воронеж, 2001. - 207 с.
2. Околышев С. В. Причины гибели поросят-сосунов
/ С. В. Околышев, А. Н. Анисимов // Животноводство России. - 2013. - № 2. - С. 38.
3. Барашкин М. И. Влияние различных факторов на
иммунную систему крупного рогатого скота при промышленных технологиях содержания / М. И. Барашкин // Аграрный вестник Урала. - 2015. -№ 2. - С 16-9.
4. Дроздова Л. И. Адаптация организма животных
в условиях техногенного прессинга / Л. И. Дроздова // 18-аяеждународной научно-методической конференции Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных : материалы, Москва, 2014. - С. 29-33.
5. Данилкина О. П. Физиология стресса животных:
метод. указания / О. П. Данилкина. - Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2016. -32 с.
6. Медведева М. А. Клиническая ветеринарная ла-
бораторная диагностика / М. А. Медведева. - М.: 2013. - 415 с.
7. Руководство по лабораторным животным и аль-
тернативным моделям в биомедицинских технологиях / под ред. Н. Н. Каркищенко // М.: Профиль, 2010. - 358 с.
8. Красичкова А. Г. Мыши / А. Г. Красичкова. - Изд-
во Вече, 2008. - 220 с.
9. Гост Р-53434-2009 Принципы надлежащей лабора-
торной практики. - 2009. - 16 с.
10. Положение о государственном ветеринарном надзоре в Российской Федерации. - М., 2001. - № 295.
11. Каркищенко В. Н. Разработка методики оценки физической выносливости мелких лабораторных животных для изучения адаптогенной активности некоторых лекарственных препаратов / В. Н. Каркищенко Г Д. Капанадзе, С. Е. Деньгина, С. Н. Станкова // Биомедицина. - 2011. - № 1. - С. 72-74.
12. Горизонтов П. Д. Стресс / П. Д. Горизонтов, Ю. Г Бобкова, М. Е. Вартанян // - 3-е изд. - М.: Медицина, 1985. - 158 с.
1. Shahov A. G. Ekologo-adaptatsionnaya strategiya zaschityi zdorovya i produktivnosti zhivotnyih v sovremennyih usloviyah [Ecological adaptation strategy for protecting animal health and productivity in modern conditions] / A. G. Shahov. -Voronezh, 2001. - 207 s.
2. Okolyishev S. V Prichinyi gibeli porosyat-sosunov [Causes of death of pine piglets] / S. V Okolyishev, A. N. Anisimov // Zhivotnovodstvo Rossii. - 2013. - # 2. - S. 38.
3. Barashkin M. I. Vliyanie razlichnyih faktorov na immunnuyu sistemu krupnogo rogatogo skota pri promyishlennyih tehnologiyah soderzhaniya [Influence of various factors on the immune system of cattle in industrial maintenance technologies] / M.
1. Barashkin // Agrarnyiy vestnik Urala. - 2015. - #
2. - S 16-9.
4. Drozdova L. I. Adaptatsiya organizma zhivotnyih v
usloviyah tehnogennogo pressinga [Adaptation of the animal organism in the conditions of man-made pressing] / L. I. Drozdova // 18-ayaezhdunarodnoy nauchno-metodicheskoy konferentsii Sovremennyie problemyi patologicheskoy anatomii, patogeneza i diagnostiki bolezney zhivotnyih : materialyi, Moskva, 2014. - S. 29-33.
5. Danilkina O. P. Fiziologiya stressa zhivotnyih: metod.
ukazaniya [Animal stress physiology: method. Instructions] / O. P Danilkina. - Krasnoyar. gos. agrar. un-t. - Krasnoyarsk, 2016. -32 s.
6. Medvedeva M. A. Klinicheskaya veterinarnaya
laboratornaya diagnostika [Clinical veterinary laboratory diagnostics] / M. A. Medvedeva. - M.: 2013. - 415 s.
7. Rukovodstvo po laboratornyim zhivotnyim i alternativnyim modelyam v biomeditsinskih tehnologiyah [Manual on laboratory animals and alternative models in biomedical technologies] / pod red. N. N. Karkischenko // M.: Profil, 2010. - 358 s.
8. Krasichkova A. G. Myishi [Mouse] / A. G. Krasichkova.
- Izd-vo Veche, 2008. - 220 s.
9. Gost R-53434-2009 Printsipyi nadlezhaschey laboratornoy praktiki [Principles of Good Laboratory Practice]. - 2009. - 16 s.
10. Polozhenie o gosudarstvennom veterinarnom nadzore v Rossiyskoy Federatsii [Regulation on state veterinary supervision in the Russian Federation]. -M., 2001. - # 295.
11. Karkischenko V. N. Razrabotka metodiki otsenki fizicheskoy vyinoslivosti melkih laboratornyih zhivotnyih dlya izucheniya adaptogennoy aktivnosti nekotoryih lekarstvennyih preparatov [Development of a methodology for evaluation of physical endurance of small laboratory animals for study of adaptogenic activity of some medicines] / V. N. Karkischenko G. D. Kapanadze, S. E. Dengina, S. N. Stankova // Biomeditsina. - 2011. - # 1. - S. 72-74.
12. Gorizontov P D. Stress [Stress] / P D. Gorizontov, Yu. G. Bobkova, M. E. Vartanyan // - 3-e izd. - M.: Meditsina, 1985. - 158 s.
DOI: 10.25690/VETPAT.2020.1.71.003 Drozdova L. I., Timina L. I.
STUDYING THE INFLUENCE OF CONDITIONALLY PATHOGENIC MICROMYCETES ON THE LABORATORY MOUSE UNDER IMMOBILIZATION
Key Words: immobilization, stress, conditionally pathogenic micromycetes, adaptive energy, laboratory animals, polyetiological stress.
Abstract: The purpose of the study was to assess the feasibility of creating an experimental mycotic infection in laboratory white mice under conditions of immobilization in order to determine in further studies how to experimentally reproduce the model of polyetiological stress. For this, a model of immobilization in laboratory animals (LV) was reproduced, a model of experimental mycotic infection in the LV caused by opportunistic micromycetes was created, and the fungal nature of the infection in LV was confirmed. In experimental studies, the authors used macro- and microscopic methods of research which have established that the sequential impact of two experimental effects, one of which is due to the introduction of conditionally pathogenic micromycetes, and the second - limitation of motion, leads to the death of experimental animals, which occurred in the first, the second day from the onset of exposure to immobilization and was 100 % in group 1; 75 % in group 2; 40 % in group 3. In control and experimental groups 4-6, the animals remained alive until the end of the experimental study. In addition, the authors revealed a pattern of the development of dissemination and the appearance of micromy-cete in the peripheral blood of animals of the experimental groups earlier than in animals of the control groups, which is probably due to the introduction of P. cyclopium and A. solani, immobilization, which can lead to a decrease natural resistance of animals and, therefore, the earlier development of a generalized process. The same trend was noted in the rate of development of mycelium. The results of experimental studies allow us to evaluate the possibility of reproducing an experimental mycotic infection in laboratory animals under conditions of immobilization. It was found that the combined effect of two factors, one of which is due to the introduction of opportunistic micromycete, leads to an increase in the pathogenicity of micromycete under immobilization conditions.
Сведения об авторах:
Дроздова Людмила Ивановна, доктор вет. наук, профессор, заведующая кафедрой морфологии, экспертизы и хирургии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения (ФГБОУ) высшего образования (ВО) «Уральский государственный аграрный университет»; д. 42, ул. К. Либкнехта, г. Екатеринбург, Россия, 620075; тел.: 8(343) 371 33 63; e-mail: drozdova43@mail.ru
Тимина Лидия Ивановна, канд. биол. наук, старший научный сотрудник лаборатории микробиологии ФГБУ «48 ЦНИИ» МО РФ; д. 1, ул. Звездная, г. Екатеринбург, Россия, 620048; e-mail: 12345timus6789@gmail.com
Author affiliation:
Drozdova Ludmila Ivanovna, D. Sc. in Veterinary Medicine, Professor, Head of the Department of Morphology, Expertise and Surgery of the Federal State Budget Educational Institution (FSBEI) of Higher Education (HE) «Ural State Agrarian University»; house 42, Karla Libknekhta str., Yekaterinburg city, Russia; phone: +7 (343) 371 33 63; e-mail: drozdova43@ mail.ru
Timina Lidia Ivanovna, Ph. D. in Biology, Senior Researcher of the Laboratory of Microbiology of FSBI «48 CRI» of the MD of the Russian Federation; house 1, Zvezdnaya str., Yekaterinburg city, Russia, 620048; e-mail: 12345timus6789@gmail.com
ВЕТЕРИНАРНАЯ КЛИНИКА
ЦЕНТР
344068, г. Ростов-на-Дону, ул.Фурмановская, д.106/43
(863)2926537 www.vetcentr.com
DOI 10.25690/VETPAT.2020.1.71.002 УДК 619:616.98:579.842(470.61) Торопыно А. В., Шевченко А. А.
БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ФЕЦЕС КУЛЬТУР E. COLI И ЧУВСВИТЕЛЬНОСТЬ ЭШЕРИХИЙ К АНТИБИОТИКАМ
Ключевые слова: эшерихиоз, антибиотики, бактериологическое исследование, фецес, жидкие среды, антибиотикочувствительность.
Резюме: Работа выполнялась в двух хозяйствах Неклиновского района Ростовской области. Для определения образования индола культуру высевали в пробирку с бульоном Хоттингера. Во всех образцах, кроме № 1371, 1, 2, 131, 139 отмечалось присутствие красного слоя на поверхности культуральной жидкости, что указывает на положительную реакцию. На следующий день появилось кольцо, что подтверждает наличие индола. Для определения способности утилизировать цитрат культуры высевали на поверхность среды Симмонса. В образцах № 1371, 1, 2, 131, 139 отмечалось изменение зеленого цвета среды на синий, что указывает на положительную реакцию. Все испытуемые образцы, кроме № 1371, ферментировали глюкозу, сахарозу, лактозу и манит, что характерно для Escherichia coli. Для определения образования сероводорода культуры засевали на трехсахарный агар. В образце № 1371 отмечалось почернение на столбике среды, что указывает на образование сероводорода. В 11-ти культурах, кроме образцов под № 1, 2, 131, 139, 1371, сероводород не продуцировался, столбик и скошенная часть среды желтого цвета, наличие в столбике пузырьков газа. А в образцах под № 1, 2, 131, 139 сероводород продуцирует, столбик и скошенная часть среды желтого цвета, почернение среды в столбике. Таким образом, из 16-ти исследуемых образцов установлено, что образец под № 1371 можно отнести к бактериям вида Pseudomonas aeruginosa. В четырех образцах под № 1, 2, 131, 139 культуры принадлежат к бактериям группы E. coli + Citrobacterfreundii. А в 11 образцах культуры принадлежат к бактериям группы Escherichia coli. В процессе выполнения работы исследованы фекалии от телят 1-8 дневного возраста. Выделены и идентифицированы культуры эшерихий. Чувствительность культур эшерихий к антибактериальным препаратам (меропенем, имепенем, пефлокса-цин, энрофлоксацин, карбенициллин, цефотаксим, цефтриаксон, ванкомицин, фурадонин, фос-фомицин, гентамицин, нетилмицин, колистин, левофлоксацин, тетрациклин, левомицетин, ци-профлоксацин, хлорамфеникол, норфлоксацин, фурагин, ванкомицин, спектиномицин, докси-циклин, норфлоксацин) исследовали с помощью стандартных дисков. Исследование показало, что в первом хозяйстве из 8-ми проб культуры эшерихии наиболее чувствительны к антибиотикам: фосфомицину, энрофлоксацину, имепенему, меропенену, левофлоксацину, ванкомицину, гентамитацину. Во втором хозяйстве из 9-ти проб культуры эшерихии чувствительны к энроф-локсацину, имепенему, меропенену, левофлоксацину, ванкомицину, гентамитацину, цефотакси-му, норфлоксацину.
Введение
В настоящее время среди инфекционных болезней молодняка крупного рогатого скота особое место занимают желудочно-кишечные заболевания бактериальной этиологии. Ведущую роль в нозологическом профиле данных заболеваний играют патогенные штаммы Escherichia coli, которые вызывают расстройства желудочно-кишечного тракта у телят в первые недели жизни. Несмотря на изученность эше-рихиоза, эта проблема остается значимой и в настоящее время в хозяйствах не только нашей страны, но и за рубежом [1-5].
В основе профилактики и борьбы с
эшерихиозом предпочтение отдается вакцинации и антибиотикотерапии, но антибиотики не всегда эффективны из-за низкой чувствительности к тем или иным штаммам E. coli поскольку у бактерий быстро приобретается устойчивость к ним [6,
7].
Применение новых ассоциаций проби-отических бактерий является на сегодня одним из актуальных направлений в профилактике желудочно-кишечных инфекций у телят [8, 9]. Поэтому при выборе терапии и профилактики болезни целесообразно контролировать чувствительность патогенных и условно-патогенных микро-
