CC BY
55
УДК 616.153.915:612(085)
И. Н. Кустикова, И. Я. Моисеева, Л. В. Ионичева, Н. И. Микуляк
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ СОЧЕТАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЦИКЛОФОСФАНА И НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО 3-ОКСИПИРИДИНА-БИСЭТИЛМЕТИЛГИДРОКСИПИРИДИНА СУКЦИНАТА НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА ВЕНОЗНОЙ КРОВИ И ГЕМОПОЭЗ КРОЛИКОВ
Аннотация. Изложены результаты исследования влияния нового производного 3-оксипиридина-бисэтилметилгидроксипиридина сукцината на лейкоцитарный состав венозной крови и лейкопоэз кроликов, применяемых на фоне моделирования курса противоопухолевой терапии циклофосфаном. Показано, что би-сэтилметилгидроксипиридина сукцинат в изученном режиме введения уменьшает последствия токсического влияния циклофосфана, предотвращает развитие лейкопении, снижает степень развития нейтропении, эозинопении, моноцитопении и лимфоцитопении в периферической крови, имеет миелопротек-торный эффект.
Ключевые слова: онкология, циклофосфан, антиоксидант, костный мозг.
Abstract. Results of research of influence new derivative 3-oksipiridina - bisethyl-metylhydroksipiridina sukcynat on leukocytic structure of venous blood and leu-kopoiesis the rabbits applied against modelling of a course of antineoplastic therapy cyclophosphamide are stated. It is shown, that bisethylmetylhydroksipiridina sukcynat in the studied mode of introduction reduces consequences of toxic influence cyclophosphamide, prevents development leukopenia, reduces development degree granulopenia, eosinopenia, monocytopenia and lymphocytopenia in peripheral blood, renders mieloprotective effect.
Keywords: оncology, cyclophosphamide, antioxidant, spongy bone.
Химиотерапия является одним из основных методов лечения онкологических больных. Применение даже современных и дорогостоящих препаратов ограничивается развитием побочных эффектов, в числе которых гематок-сичность и миелосупрессия [1-3]. Имеются данные, что одним из механизмов цитотоксичности химиотерапии является индукция ими окислительного стресса. Образование свободных радикалов становится причиной повреждения биомакромолекул - перекисного окисления липидов, свободнорадикального повреждения нуклеиновых кислот, окисления белковых молекул и полисахаридов, а также изменения интегративных межклеточных и внутриклеточных сигнальных процессов, в том числе и в костном мозге. В результате возникает блокирование митотического цикла гемопоэтических элементов и подавление пролиферативной деятельности костного мозга. Циклофосфан, являясь эффективным алкилирующим цитостатическим средством, входит в состав наиболее оптимальных комбинаций химиотерапии [4-7], но оказывает достаточно выраженное ингибирующее действие на гемопоэз в виде нейтро-пении различной степени, анемии, тромбоцитопении, лимфоцитопении, связанное с индукцией множественных двуцепочечных разрывов в ДНК кроветворных клеток, приводящих к мутациям и хромосомным аберрациям и, в конечном счете, к гибели клеток, индуцирует окислительный стресс [7-10].
Учитывая, что у онкологических больных одним из механизмов реакции на возникновение и развитие опухоли является активация перекисного окисления липидов и значительные нарушения ферментативного звена анти-окислительной защиты [11, 12], а также токсические эффекты цитостатиче-ской терапии, которые сопровождаются активацией липопероксидации, применение препаратов с антиоксидантным типом действия позволит снизить цитотоксические эффекты химиотерапии [13-16].
Для фармакологической коррекции окислительного стресса используются природные или синтетические антиоксиданты. Представителями этой группы средств являются производные 3-оксипиридина, фармакологическая эффективность которых включает антиоксидантные, мембранопротективные, антиги-поксические свойства, способность модулировать активность мембраносвязанных ферментов и рецепторных комплексов [17, 18]. На наш взгляд, для коррекции негативного влияния на гемопоэз заслуживает внимания новое производное 3-оксипиридина-бисэтилметилгидроксипиридина сукцинат (БЭМГС) близкое по химической структуре к мексидолу (мексидол является солью янтарной кислоты: 3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцинат), который проявляет антиоксидантное действие и благодаря наличию в структуре янтарной кислоты улучшает энергетический обмен в клетке [17-19].
Цель работы: изучение влияния нового производного 3-оксипиридина-бисэтилметилгидроксипиридина сукцината, применяемого на фоне моделирования курса противоопухолевой химиотерапии циклофосфаном, на лейкоцитарный состав периферической крови и лейкопоэз.
1 Материалы и методы исследования
Для проведения экспериментов применялись следующие фармакологические препараты:
- Циклофосфан К'-бис-ф-Хлорэтил)-№-О-триметиленовый эфир диамида фосфорной кислоты - противоопухолевый цитостатический препарат. Использовался для моделирования курса противоопухолевой терапии. Препарат (порошок по 0,1 г во флаконе) ОАО «Биохимик», Саранск (Россия).
- Соединение бис-2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат
(БЭМГС) - производное 3-оксипиридина синтезировано и любезно предос-
тавлено для исследования профессором |Л. Д. Смирновым| (институт биохимической физики им. Н. М. Эммануэля Российской академии наук).
Эксперименты были выполнены на половозрелых кроликах-самцах породы шиншилла массой 3,0-3,5 кг. Животные содержались в стандартных условиях вивария при естественном световом режиме на стандартной диете, свободном доступе к воде и пище, в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страстбург, 1986).
Животные первой (контрольной) серии (n = 10) получали курс циклофосфана в дозе 20 мг/кг (1/10 ЛД50) (курсовая доза 100 мг/кг), предварительно препарат разводили стерильной водой для инъекций, инфузию осуществляли в краевую ушную вену 1 раз в день, через день, всего пять инъекций. Животным второй серии (n = 10) курс циклофосфана дополняли одновременным внутривенным введением БЭМГС в дозе 1 % от LD50 - 5 мг/кг 1 раз в день, вливания проводили через день в течение четырех недель. Десяти кро-
ликам (интактная группа n = 10) при тех же условиях вводили 0,85 % раствор хлорида натрия.
Венозную кровь забирали до начала эксперимента, на восьмые, 15-е, 22-е и 29-е сутки из краевой вены уха кроликов. В периферической крови определяли: абсолютное число лейкоцитов, лейкоцитарную формулу венозной крови с расчетом индекса ядерного сдвига.
Для исследования костного мозга до начала эксперимента, на восьмые, 15-е, 22-е и 29-е сутки проводили пункцию подвздошной кости под местным обезболиванием раствором новокаина 2 % - 2,0 мл при помощи асептической аспирации иглой Кассирского и шприцем (обезвоженными). Из части полученного пунктата быстро готовили мазки, другую разводили для подсчета миелокариоцитов. Производили цитологический анализ мазков пунктата. В костном мозге определяли абсолютное число миелокариоцитов, абсолютное и относительное количество бластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов, а также абсолютное и относительное количество клеток в состоянии митотического деления. Рассчитывали индекс созревания нейтрофилов.
Статистическую обработку результатов экспериментального исследования проводили с помощью пакета статистических программ: русифицированная версия программы STATISTICA (StatSoft - Russia, 1999), BIOSTAT (S.A. Glantz, McGraw Hill, перевод на русский язык - «Практика», 1998). Результаты представлены в виде средней арифметической и ее ошибки (М ± m). Проверка нормальности распределения проводилась по критерию Шапиро-Уилка. Для оценки достоверности различий независимых переменных между группами использовали /-критерий Стьюдента. В случае распределения, отличного от нормального, для оценки достоверности различий между независимыми переменными использовался непараметрический критерий Манна-Уитни. Различия считались статистически значимыми при р < 0,05 от уровня показателей интактной серии, рк < 0,05 от уровня показателей контрольной серии.
2 Результаты исследования и их обсуждение
Результаты реакции кроветворного костного мозга и клеточного состава крови, полученные нами при создании экспериментальной модели цикло-фосфанового повреждения системы крови, соответствовали уже описанным в литературе [19].
После применения циклофосфана в крови животных с 15-х суток развивалась лейкопения со снижением общего количества лейкоцитов в периферической крови от 5,69 ± 0,05*103/мкл до 0,60 ± 0,03*103/мкл (р < 0,001) на 29-е сутки наблюдения. БЭМГС предупреждал развитие циклофосфановой лейкопении в течение первых двух недель, на 22-й день эксперимента количество лейкоцитов в этой серии снижалось на 28 % (р < 0,001) от исходной величины, через неделю показатель статистически значимо не отличался от уровня лейкоцитов в интактной серии (р > 0,05) (рис. 1).
На фоне сочетанного применения циклофосфана и изучаемого соединения на 15-й и 22-й дни опыта в венозной крови присутствовали метамиелоциты в количестве 220,00 ± 20,00 и 80,00 ± 10,00 клеток на 1 мкл (в гемо-
грамме 4,00 ± 0,26 % и 2,00 ± 0,26 %). К концу наблюдения юные формы в периферической крови не обнаруживались. В контрольной серии омоложение нейтрофильного состава крови отмечалось с восьмых суток до 22-го дня, нужно отметить, что в пробах присутствовали и более юные клетки - миелоциты.
0 исход 8 сут 15 сут 22 сут 29 сут
Интактные животные — - Циклофосфан - - ЦФ + БЭМГС
* Достоверность отличия с данными интактной серии (р < 0,05);
# Достоверность отличия с данными контрольной серии (р < 0,05)
Рис. 1 Динамика уровня лейкоцитов крови кроликов на фоне введения циклофосфана и сочетанного введения циклофосфана и БЭМГС
При сочетанном применении химиопрепарата и БЭМГС на протяжении всего опыта наблюдалось умеренное статистически значимое накопление в крови палочкоядерных нейтрофилов. На 29-е сутки их абсолютное количество в 1,5 раза превышало показатель интактной серии, составив 0,40 ± 0,03*103/мкл (р < 0,001). В контрольной группе до конца третьей недели эксперимента отмечалась аналогичная динамика, на 29-й день при общем количестве лейкоцитов 0,60 ± 0,03*103/мкл определение палочкоядерных нейтрофилов было невозможно.
Абсолютное количество сегментоядерных нейтрофилов в венозной крови на фоне БЭМГС до 15-х суток эксперимента статистически значимо не отличалось от интактной серии (р > 0,05), затем через неделю снижалось до 1,06 ± 0,01*103/мкл (р < 0,001), спустя еще семь дней составило
1,00 ± 0,04*103/мкл (р < 0,001). Относительное содержание данных клеток снижалось на протяжении всего эксперимента от 35,03 ± 0,17 % в начале опыта до 20,00 ± 0,47 % (р < 0,001) к концу. В серии без коррекции наблюдалась аналогичная динамика, но показатели были в среднем в 2 раза ниже до 29-х суток, когда ввиду глубокой лейкопении данные клетки вообще не определялись в пробах.
При комплексном использовании БЭМГС удалось несколько снизить степень омоложения состава нейтрофильных гранулоцитов крови, вызванную
циклофосфаном. Индекс ядерного сдвига увеличился с 15-х суток до
0,52 ± 0,09 (в интактной серии 0,13 ± 0,01) (р < 0,001) и сохранялся на данном уровне до конца наблюдения. У животных, не получавших лечения, отмечалось более выраженное омоложение нейтрофилов периферической крови.
Динамика изменений абсолютного количества эозинофилов в группе с применением БЭМГС и контрольной, до середины эксперимента статистически значимо не отличалась, с 22-го дня наметилась тенденция к повышению уровня эозинофилов в серии с дополнительным введение БЭМГС, а к концу наблюдения, когда в контрольной серии данные клетки в пробах крови не обнаруживались, их определялось 100,00 ± 4,0 в 1 мкл (в интактной серии 170,00 ± 1,00 в 1 мкл, рк < 0,001). В лейкоцитарной формуле также наблюдалось снижение показателя от 3,03 ± 0,05 % до 2,00 ± 0,26 % (р < 0,001).
В конце третьей недели от начала введения цитостатика и изучаемого соединения абсолютное количество моноцитов снижалось на 26 % от показателей интактной серии (р < 0,001), еще через семь дней наблюдалась нормализация абсолютного количества моноцитов (р > 0,05). Относительное количество данных клеток увеличилось только на 29-е сутки эксперимента от 7,46 ± 0,11 % до 10,00 ± 0,47 % (р < 0,001). В серии без коррекции численность моноцитов в крови постоянно сокращалась до полного исчезновения из проб.
У животных, получавших БЭМГС, на всех этапах эксперимента статистически значимых колебаний количества лимфоцитов не определялось. В группе контроля во второй половине опыта наблюдался статистически значимый дефицит данных клеток (р < 0,001).
В костном мозге на фоне курса циклофосфана и БЭМГС общее количество костномозговых миелокариоцитов в конце первой и второй недель эксперимента составило 10000,00 ± 235,70 и 9000,00 ± 235,70 (р < 0,001) на 1 мкл пунктата (у интактных животных - 15767,50 ± 389,45/мкл). Спустя еще семь дней общий объем клеточной массы повысился до 19700,00 ± 471,40 (р < 0,01). На 29-е сутки опыта произошло повторное сокращение клеточно-сти костного мозга до 10000,00 ± 288,68/мкл (р < 0,001). В контрольной серии на всем протяжении опыта отмечалось уменьшение общего количества мие-локариоцитов, на 29-е сутки их величина не превышала 1000,00±198,33/мкл.
БЭМГС снижал тяжесть циклофосфановой супрессии пролиферативных процессов в костном мозге. Количество митотически делящихся миело-кариоцитов, как и в группе контроля, уменьшалось в течение двух недель. С 22-го дня количество митозов в этой серии возросло и до конца эксперимента не отличалось от показателей в интактной серии 0,089 ± 0,001/мкл (р > 0,05), в контрольной группе митотически делящихся клеток не определялось.
При совместном применении циклофосфана и БЭМГС абсолютное количество недифференцированных бластных клеток в первой половине опыта уменьшалось от 570,00 ± 50,00/мкл до 256,00 ± 20,00/мкл (р < 0,01), затем наблюдался выраженный подъем показателя до 1210,00 ± 90,00/мкл (рк < 0,001). На 29-е сутки определялось исходное количество бластных клеток
520,00 ± 80,00/мкл (р > 0,05). В миелограммах животных отмечалось двукратное статистически значимое повышение относительного количества бла-стных клеток до 5,00 ± 0,26 % на восьмые и 29-е сутки опыта (рк < 0,001). В контрольной серии на протяжении всего эксперимента наблюдалось сни-
жение абсолютной и относительной величины бластных клеток, к концу эксперимента их количество составляло 10,00 ± 2,00/мкл и 1,10 ± 0,13 % (р < 0,001) соответственно.
На фоне комплексного использования цитостатика и БЭМГС в первой половине опыта содержание в костном мозге промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов постоянно снижалось и на 15-е сутки составляло 30-50 % от первоначального уровня (р < 0,001). Во второй половине эксперимента применение БЭМГС способствовало ограничению токсического влияния цитостатика на пролиферативный пул гранулоцитов - на 22-е сутки в контрольной серии величина пролиферативного гранулоцитарного пула составляла
0,22 ± 0,01х103/мкл (р < 0,001), в серии с БЭМГС - 2,56 ± 0,0Ш03/мкл (рк < 0,001), на 29-й день 0,06 ± 0,01*103/мкл (р < 0,001) и 1,49 ± 0,01*103/мкл (р < 0,001, рк < 0 ,001) соответственно. Относительная величина клеток пролиферативного гранулоцитарного пула также была более стабильной в серии с БЭМГС.
Циклофосфан вызывал уменьшение количества палочкоядерных нейтро-филов с восьмых суток, их число на 29-й день составило 0,06 ± 0,04*103/мкл (у интактных 1,21 ± 0,04*103/мкл, р < 0,001). При коррекции БЭМГС наблюдалась противоположная динамика. Уровень палочкоядерных нейтрофилов был повышен на восьмые сутки эксперимента от 1,01 ± 0,04*103/мкл до 1,40 ± 0,05*103/мкл (рк < 0,01), на 15-е до 1,35 ± 0,06*103/мкл (рк < 0,001). В конце третьей недели содержание в костном мозге данных клеток превышало исходную величину в 2 раза (ри < 0,001), на 29-й показатель вернулся к исходному уровню (р > 0,05).
У животных контрольной серии циклофосфан вызывал снижение абсолютного количества сегментоядерных нейтрофилов в два раза на 15-е сутки (р < 0,001) и в 24 раза на 29-й день (р < 0,001). В опытной серии с БЭМГС содержание в костном мозге абсолютного количества сегментоядерных ней-трофилов в первые две недели снизилось от 1,46 ± 0,07*103/мкл до 1,08 ± 0,03*103/мкл (р < 0,05), затем наблюдался непродолжительный период подъема показателя до 1,70 ± 0,14*103/мкл (р < 0,05). В конце эксперимента абсолютное количество данных клеток было на 24 % меньше, чем в интакт-ной серии (р < 0,05). В миелограмме процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов статистически значимо не отличалось на протяжении всего эксперимента (р > 0,05), тогда как у кроликов контрольной группы наблюдалось снижение показателя с 22-х суток на 30 % от уровня интактных животных (р < 0,001).
Как и в контрольной серии, индекс созревания нейтрофилов в группе с применением БЭМГС к концу эксперимента снижался, но уменьшение показателя было менее интенсивным, чем в контрольной серии (рк < 0,01).
В течение первых двух недель количество эозинофилов в костном мозге в серии с дополнительным введением БЭМГС и контрольной статистически значимо не отличалось. На 22-й день опыта абсолютное количество эози-нофилов под влиянием соединения соответствовало исходной величине и количеству в интактной серии (р > 0,05), на 29-й день дефицит данных клеток составлял 45 % от интактной группы животных (р < 0,001), у животных контрольной серии данные клетки полностью отсутствовали.
Сочетанное применение цитостатика и БЭМГС вызвало повышение абсолютного и относительного содержания в костном мозге клеток моноцитар-
ного ряда с восьмого дня опыта и до конца наблюдения, на 29-й день количество абсолютного и относительного содержания моноцитов составило 0,30 ± 0,03*103/мкл и до 3,00 ± 0,25 % (р < 0,001). В группе контроля сокращение численности клеток моноцитарного ряда начиналось с восьмого дня (р < 0,001), на 29-й день данные клетки в пунктате не определялись.
Полный курс химиопрепарата индуцировал в конечном итоге разрушение лимфоцитарного ростка, на 29-е сутки в мазках определялось только
0.10.± 0,02*103/мкл (р < 0,001) лимфоцита. Применение БЭМГС в комплексе с цитостатиком уменьшало потери лимфоидных клеток костного мозга во второй половине эксперимента. Так, на 22-е сутки в пунктате определялось до 4,58 ± 0,12^10 /мкл данных клеток, что в семь раз больше результата группы контроля в этот же момент наблюдения (рк < 0,001), в конце эксперимента количество лимфоцитов в этой серии составило 1,59 ± 0,12^10 /мкл
(рк < 0,001).
Выводы
1. Применение нового производного 3-оксипиридина-бисэтилметил-гидроксипиридина сукцината в данном режиме введения уменьшает последствия токсического влияния циклофосфана, предотвращает развитие лейкопении, снижает степень развития нейтропении, эозинопении, моноцитопении и лимфоцитопении в периферической крови.
2. Миелопротекторный эффект бисэтилметилгидроксипиридина сукци-ната на лейкоцитарный росток кроветворения в данном режиме введения развивается через три недели от начала использования, значительно снижая ци-тотоксические эффекты циклофосфана на лейкопоэз.
Список литературы
1. Chan, S. Prospectiv Randomized Trial of Docetacaxel Versus Doxorubicin in Patients with Metastatik Breast Cancer / S. Chan, K. Friedrichs, D. Noel [et al.] // J. Clin. Oncol. - 1999. - V. 17. - P. 2341-2354.
2. Семиглазова, Т. Ю. Кселода (капецитабианц) в лечении диссеминированного рака молочной железы после исчерпанного эффекта антрациклинов и такса-нов / Т. Ю. Семиглазова, М. Л. Гершанович // Вопросы онкологии. - 2001. -Т. 47. - № 3. - С. 298-302.
3. Карпова, Г. В. О миелотоксичности ингибиторов ядерных энзимов ириноте-кана и этопозида / Г. В. Карпова, Е. В. Абрамова, Т. И. Фомина // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2006. - Т. 69. - № 1. - С. 42-47.
4. Bertelsen, K. A randomize study of cyclophosphamide and cisplatin with or without doxorubicin in advanced ovarian carcinoma / K. Bertelsen, A. Jakobsen, J. Anderson [et al.] // Gynecol. Oncol. - 1987. - V. 28. - P. 161-169.
5. Omura, G. Randomized trial of cyclophosphamide plus cisplatin with or without doxorubicin in ovarian carcinoma: A Gynecologic Oncology Group study / G. Omura, B. Bundy, J. Berek [et al.] // J. Clin. Oncol. - 1989. - V. 7. - P. 457-465.
6. Масчан, А. А. Лечение детей с апластическими анемиями, рефрактерных к ан-тилимфоцитарному глобулину и циклоспорину А, высокими дозами циклофос-фамида или флюдарабином / А. А. Масчан, Н. Ю. Богачева, Д. В. Литвинов [и др.] // Гематология и трансфузиология. - 2001. - № 6. - Т. 46. - С. 3-6.
7. Загоскина, Т. П. Эффективность применения комбинации флударабина, циклофосфана и митоксантрона в лечении хронического лимфолейкоза / Т. П. Загоскина, И. А. Докшина, В. И. Шардаков [и др.] // Гематол. и трансфузиол. - 2005. -№ 1. - Т. 50. - С. 13-17.
8. Yu, L. J. In vivo modulation of alternative pathways of P 450-catalyzed cyclophosphamide metabolism: impact on pharmacokinetics and antitumor activity / L. J. Yu, P. Drewes, K. Gustafsson [et al.] // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1999. - V. 288 (3). -Р. 928-937.
9. Cohen, J. L. Pharmacokinetics of cyclophosphamide in man / J. L. Cohen, J. V. Jao, W. J. Jusko // Brit. J. Pharm. - 1971. - V. 43. - P. 677-680.
10. Загоскина, Т. П. Эффективность комбинации ритуксинаба, флударабина и циклофосфана при лечении хронического лимфолейкоза / Т. П. Загоскина // Гема-тол. и трансфузиол. - 2006. - № 6. - Т. 51. - С. 12-67.
11. Николин, В. П. Влияние экзогенной ДНК на восстановление лейкопоэза и противоопухолевый эффект циклофосфана / В. П. Николин, Н. А. Попова, Т. Е. Себелева [и др.] // Вопросы онкологии. - 2006. - № 3. - Т. 52. - С. 336-340.
12. Brown, M. R. Overexpression of human catalase inhibits proliferation and promotes apoptosis in muscular smooth muscle cells / M. R. Brown, F. J. Miller, W. G. Li // Circ. Res. - 1999. - V. 85. - P. 524-533.
13. Кормош, Н. Г. Уровень перекисного окисления липидов как фактор прогноза у больных распространенным раком яичников / Н. Г. Кормош, К. П. Лактионов, А. А. Чеснокова // Экспериментальная онкология. - 2000. - № 3. - С. 15-17.
14. Fulda, S. Molecular aspects of apoptosis induced by anticancer drugs in neuroblastoma cells / S. Fulda, S. A. Susin, G. Kroemer // Cancer Res. - 1998. - V. 58. -P. 4453-4460.
15. Олейник, А. В. Влияние циклофосфана на перекисное окисление липидов / А. В. Олейник // Вопросы онкологии. - 1985. - Т. 31. - № 7. - С. 97-101.
16. Patel, J. M. Effect of cyclophosphamide (CP) and acrolein (ACR) on lung antioxidant, enzymes, lipid peroxidation and O2 toxicity / J. M. Patel, E. R. Block // Toxicol. Lett. - 1983. - V. 18. - Suppl. 1. - P. 74.
17. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Владимиров // Вестник РАМН. - 1998. - № 7. - С. 43-51.
18. Сейфулла, Р. Д. Проблема фармакологии антиоксидантами. Классификация препаратов / Р. Д. Сейфулла, И. Т. Борисова // Фармакология и токсикология. -1990. - № 6. - С. 3-10.
19. Скопин, П. И. Влияние комбинированного применения циклофосфана и эмок-сипина на степень эндотоксикоза и рост холангиоцеллюлярного рака РС-1 и меланомы В-16 в эксперименте : дис. ... канд. мед. наук / П. И. Скопин. - Саранск,
2005.
Кустикова Ирина Николаевна старший преподаватель, кафедра общей и клинической фармакологии, Медицинский институт, Пензенский государственный университет
Kustikova Irina Nikolaevna Senior lecturer, sub-department of general and clinical pharmacology, Medical institute, Penza State University
E-mail: medsekr@pnzgu.ru
Моисеева Инесса Яковлевна доктор медицинских наук, профессор,
Медицинский институт, Пензенский государственный университет
заведующая кафедрой общей и клинической фармакологии,
Moiseeva Inessa Yakovlevna Doctor of medical sciences, professor, head of sub-department of general and clinical pharmacology,
Medical institute, Penza State University
E-mail: medsekr@pnzgu.ru
Ионичева Любовь Владимировна
кандидат медицинских наук, доцент, кафедра физиологии человека Медицинский институт, Пензенский государственный университет
E-mail: normphys@mail.ru
Микуляк Надежда Ивановна
кандидат биологических наук, доцент, заведующая кафедрой физиологии человека, Медицинский институт, Пензенский государственный университет
E-mail: normphys@mail.ru
УДК 616.153.915:612(085)
Кустикова, И. Н.
Изучение влияния сочетанного применения циклофосфана и нового производного 3-оксипиридина-бисэтилметилгидрок№пиридина сук-цината на некоторые показатели клеточного состава венозной крови и гемопоэз кроликов / И. Н. Кустикова, И. Я. Моисеева, Л. В. Ионичева,
Н. И. Микуляк // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. - 2009. - № 1 (9). - С. 24-32.
Ionicheva Lubov Vladimirovna Candidate of medical sciences, associate professor, human physiology sub-department, Medical institute, Penza State University
Mikulyak Nadezhda Ivanovna Candidate of biological sciences, associate professor, head of human physiology sub-department,
Medical institute, Penza State University
