CC BY
26
DOI: 10.24412/2074-5036-2022-3-42-49 УДК: 619:615.076.9:615.283:615.015.33
Ключевые слова: тинидазол, левамизола гидрохлорид, острая токсичность, субхроническая токсичность, раздражающее действие.
Key words: tinidazole, levamisole hydrochloride, acute toxicity, subchronic toxicity, irritant effect.
Бутенко А. В., Оробец В. А., Киреев И. В.
ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ТИНИДАЗОЛА И ЛЕВАМИЗОЛА
STUDY OF THE TOXICOLOGICAL PARAMETERS OF THE PREPARATION BASED
ON TINIDAZOLE AND LEVAMISOLE
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет» Адрес: 355017, Российская Федерация, г. Ставрополь, Зоотехнический пер., 12 Stavropol State Agrarian University Address: 355017, Russian Federation, Stavropol, 12 Zootechnicheskiy Ln
Бутенко Александр Вячеславович, аспирант кафедры терапии и фармакологии, е-mail: [email protected] Butenko Aleksandr Vyacheslavovich, Post-Graduate Student of the Department of Therapy and Pharmacology,
e-mail: [email protected]
Оробец Владимир Александрович, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой терапии
и фармакологии, е-mail: [email protected] Orobets Vladimir Aleksandrovich, Doctor of Veterinarian Science, Professor, Chef of the Department of Therapy
and Pharmacology, e-mail: [email protected] Киреев Иван Валентинович, доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры терапии и фармакологии,
е-mail: [email protected]
Kireev Ivan Valentinovich, Doctor of Biological Sciences, Associate Professor, Professor of the Department of Therapy
and Pharmacology, e-mail: [email protected]
Аннотация. В результате проведенных исследований установлено, что предлагаемый препарат на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида по среднесмертельной пероральной дозе в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 относится к четвертому классу опасности (вещества малоопасные) и не обладает выраженной субхронической токсичностью и раздражающим действием. Многократное применение действующего вещества в течение 14 дней не вызывает достоверных изменений в клиническом состоянии, гематологическом и биохимическом профиле лабораторных животных. Полученные данные позволяют перейти к проведению клинического этапа тестирования разработанного препарата на целевых животных для определения его эффективности и безопасности. Изучение фармакотоксикологических параметров препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида проводили на базе лаборатории доклинических исследований факультета ветеринарной медицины Ставропольского государственного аграрного университета. Эксперименты на животных проводили согласно правилам, принятым Директивой 2010/63/eu Европейского парламента и Совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года, по охране животных, используемых в научных целях. Определение острой токсичности, хронической токсичности, раздражающего действия препарата проводили согласно «Руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств» (2012).
Summary. Intestinal parasitic diseases cause not only anxiety to the animal but also gastrointestinal disorders, which create suitable conditions for the secondary microflora propagation. This leads to indigestion, diarrhea, vomiting, water deprivation with possible lethal consequences. The article presents the research results of test drugs with different active ingredient proportions. The research subject were dogs infested in a natural way with Giardia lamblia, Entamoeba histolytica and Toxocara canis. It was found that different combinations of ornidazole and levamisole hydrochloride showed high therapeutic efficacy. The most appropriate treatment for dogs infested with intestinal parasites is the following component proportion: ornidazole - 67,7 %, levamisole hydrochloride - 8,0 %, microcrystalline cellulose - 2,8 % magnesium stearate - 0,4 %, with the rest of distilled water.
Введение
Кишечные простейшие являются возбудителями желудочно-кишечных заболеваний у людей и животных во всем мире [2]. Инвазия человека происходит при прямом контакте или употреблении инфицированной пищи и воды.
42
Дети и люди с ослабленным иммунитетом более восприимчивы к заболеваниям, вызванным кишечными простейшими [4]. Протозой-ные заболевания - это заболевания, вызванные группой одноклеточных организмов, которые паразитируют в кишечном тракте человека и
Таблица 1
Схема внутрижелудочного введения препарата для определения острой токсичности
Название группы Количество животных Дозировка препарата, мг/кг
Опытная группа №1 10 1575
*Контрольная группа №1 10 1575
Опытная группа №2 10 2100
*Контрольная группа №2 10 2100
Опытная группа №3 10 2625
*Контрольная группа №3 10 2625
Опытная группа №4 10 3150
*Контрольная группа №4 10 3150
Опытная группа №5 10 3675
*Контрольная группа №5 10 3675
Опытная группа №6 10 4200
*Контрольная группа №6 10 4200
Опытная группа №7 10 4725
*Контрольная группа №7 10 4725
Опытная группа №8 10 5250
*Контрольная группа №8 10 5250
Опытная группа №9 10 5775
*Контрольная группа №9 10 5775
Опытная группа №10 10 6300
*Контрольная группа №10 10 6300
* Белые крысы контрольных групп получали равный объем физиологического раствора
животных [1]. Инвазия происходит при проглатывании человеком или животным цист кишечных простейших, которые находятся на предметах окружающей среды [8]. Инвазия кишечными простейшими имеет место по всему миру и особенно распространена в тропиках и субтропиках, где ежегодно регистрируются миллионы случаев диареи [7].
Метронидазол является стандартным противопротозойным и противомикробным препаратом для лечения животных, больных кишечными протозойными заболеваниями. Противопротозойное действие метронида-зола может быть недостаточным для эли-
минации цист Giardia lamblia и Entamoeba histolytica. Устойчивость кишечных простейших к метронидазолу привела к разработке альтернативных лекарств [3].
По сравнению с метронидазолом, тинида-зол может быть более эффективным для лечения животных, больных кишечными про-тозойными заболеваниями. Комбинированная терапия на основе тинидазола может быть более эффективной для повышения эффективности против кишечных протозойных заболеваний по сравнению с метронидазолом [3].
Тинидазол - это пероральный противо-микробный препарат широкого спектра
Таблица 2
Схема внутрижелудочного введения препарата для определения субхронической
пероральной токсичности
Название группы Количество животных Показатель от LD50 Дозировка, мг/кг
Контрольная группа 10 - -
Опытная группа №1 10 1/10 504,0
Опытная группа №2 10 1/20 252,0
Опытная группа №3 10 1/30 168,0
Таблица 3
Результаты определения массы тела лабораторных животных (п=10), г
Название группы Хср±Д
Исходная 1 сутки 3 сутки 7 сутки 9 сутки 14 сутки
Опытная группа № 1 181,4±5,19 183,0±5,09 185,9±4,98 191,8±5,22 194,7±5,27 202,3±5,09
Контрольная группа № 1 183,3±4,98 184,9±4,89 188,0±4,91 194,0±4,93 197,0±4,74 204,6±4,99
Опытная группа № 2 179,6±6,53 181,2±6,63 184,2±6,62 190,6±6,88 193,6±7,04 201,0±7,21
Контрольная группа № 2 182,4±4,88 183,8±4,82 186,6±4,81 192,4±4,93 195,4±4,87 202,7±5,07
Опытная группа № 3 183,9±4,69 185,3±4,62 188,0±4,79 194,3±4,69 197,2±4,62 204,8±4,65
Контрольная группа № 3 187,3±7,16 189,0±7,23 192,0±7,34 197,8±7,55 200,8±7,49 208,4±7,34
Опытная группа № 4 184,0±5,76 185,5±5,59 188,5±5,59 194,2±5,55 197,1±5,47 204,9±5,27
Контрольная группа № 4 180,6±3,41 182,2±3,37 185,5±3,24 191,9±3,42 195,0±3,65 202,6±3,66
Опытная группа № 5 182,8±4,45 184,0±4,44 186,5±4,49 191,6±4,67 194,1±4,84 200,2±4,76
Контрольная группа № 5 181,7±5,57 183,1±5,49 185,8±5,55 191,3±5,82 194,5±5,75 202,0±5,76
Опытная группа № 6 182,2±6,15 183,4±6,15 186,0±6,06 191,1±6,09 193,6±5,91 199,8±6,01
Контрольная группа № 6 184,5±5,0 185,9±4,98 188,9±5,0 195,5±4,82 198,5±4,8 206,2±4,89
Опытная группа № 7 179,7±5,47 180,9±5,43 183,5±5,45 188,6±5,21 191,0±5,19 197,3±5,09
Контрольная группа № 7 181,7±4,66 183,3±4,63 186,2±4,73 192,2±4,92 195,6±4,95 203,0±5,09
Опытная группа № 8 180,6±5,08 181,8±5,03 184,2±5,07 188,8±5,06 191,1±5,06 196,9±4,96
Контрольная группа № 8 183,5±6,67 184,8±6,68 187,8±6,53 193,6±6,48 196,4±6,42 203,9±6,51
Опытная группа № 9 183,4±2,2 184,6±2,15 186,6±2,15 191,0±2,25 193,4±2,25 198,6±2,45
Контрольная группа № 9 184,0±6,43 185,5±6,51 188,6±6,58 194,6±6,42 197,5±6,43 205,3±6,43
Опытная группа № 10 - - - - - -
Контрольная группа № 10 - - - - - -
* р < 0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с показателями контрольной группы
действия, используемый для лечения бактериальных, протозойных и паразитарных заболеваний. Тинидазол представляет собой
5-нитроимидазола с антипротозойными свойствами. Механизм действия полностью не изучен. Предполагается, что тинидазол метабо-лизируется с образованием нитрит-анионов и метронидазола. Токсичность тинидазола достигается за счет истощения сульфгидрильных групп и разрывов нитей ДНК с множественными попаданиями, имеющими аддитивный эффект и приводящими к гибели клеток.
Левамизола гидрохлорид - антигельминт-ное средство широкого спектра для лечения паразитарных, вирусных и бактериальных инфекций. Левамизол представляет собой
6-фенил-2,3,5,6-тетрагидроимидазо[2,1-Ь][1,3] тиазол с Б-конфигурацией (рисунок 2). Лева-мизола гидрохлорид используется (обычно в виде моногидрохлоридной соли) для лечения паразитарных инфекций у свиней, овец и крупного рогатого скота, а ранее использовался у людей в качестве адъюванта к химиотерапии для лечения различных видов рака (из-за его иммуномодулирующего действия) [3].
Материалы и методы исследований
Для оценки острой токсичности препарата сформировали опытные и контрольные группы белых крыс линии Wistar массой тела 180±5,96 грамм. Схема внутрижелудочного введения препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида контрольным и опытным группам белых крыс отображена в таблице 1.
Для исследования острой токсичности препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида готовили суспензию с использованием эмульгатора «Полисорбат 80». Приготовленную суспензию в разных дозировках вводили посредством внутрижелудочного зонда опытным животным и равный объем физиологического раствора контрольной группе белых крыс.
Для оценки субхронической перораль-ной токсичности препарата н сформировали опытные и контрольную группы белых крыс линии Wistar массой тела 188,1±5,85 грамм. Препарат вводили посредством внутрижелу-дочного зонда в течение 14 суток (таблица 2).
Гематологические исследования крови лабораторных животных выполняли при
I Выжившие лабораторные животные ■ Павшие лабораторные животные
Ns1 №2 Ns3 №4 №5 №6 №7 №8 №9 №10 Номер опытной группы лабораторных животных
Рис. 1. Количество выживших и павших лабораторных животных при введении препарата.
5 4 - -
3675,0 4200.0 4725,0 5250,0 5775,0 6300,0
Дозировка препарата, мг/кг
Рис. 2. Количество павших животных в зависимости от времени и дозировки препарата.
Глубокое угнетение ф Нарушение дыхания 9 Тахикардия ф Сонливость ф Паралич ф Атаксия
3150,0 3675,0 4200,0 4725,0 5250,0 5775,0 6300,0
Дозировка препарата, мг/кг
Рис. 3. Сочетание клинических признаков лабораторных животных.
ф Ф лдо ф ЛД16 ф ЛД50 ф ЛД84 ф ЛД100
3,04 4,0
6,0 6,69
Рис. 4. Графическое отображение острой токсичности препарата.
45
помощи автоматического гематологического анализатора РСЕ-90Уе1 (США). Биохимические исследования сыворотки крови лабораторных животных выполняли при помощи автоматического биохимического анализатора АССЕОТ-200 (Польша).
Для исследования раздражающего действия препарата, после его конъюнктиваль-ной аппликации лабораторным кроликам, использовали флюоресцеиновый тест: применяли раствор флюоресцеина, который наносили на поверхность роговицы лабораторных животных при помощи шприца. Флюоресцеиновый тест позволяет определить повреждения участков роговицы по окрашиванию в зеленый цвет.
Результаты и обсуждение
При изучении острой токсичности препарата установлено, что в контрольных № 1 - 10 и опытных № 1 - 4 группах не отмечено гибели лабораторных животных, а в опытных группах № 5 - 10 зарегистрировано 29 случаев гибели белых крыс (рисунок1). При введении препарата на основе ти-нидазола и левамизола гидрохлорида в дозе 3675 мг/кг зафиксирована гибель одной крысы, что составляет 10 % опытной группы № 5. При введении препарата в дозе 5250 мг/кг зарегистрировано 5 павших животных или 50 % опытной группы № 8, а при введении 6300 мг/кг - 10 павших лабораторных животных, т. е. все животные опытной группы № 10.
а) б)
ч
В) V Г)
Рис. 5. Состояние конъюнктивы лабораторного кролика после инстилляции препарата: а) через 15 минут, б) через 120 минут, в) через 240 минут, г) через 480 минут.
При наблюдении за клиническим состоянием и поведением лабораторных животных на фоне внутрижелудочного введения препарата установлено, что период до проявления признаков отравления составил от 10 минут до 16 часов. Зависимость времени наступления летального исхода от дозировки действующего вещества препарата (рисунок 2).
Гибель лабораторных животных зарегистрирована после внутрижелудочного введения препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида в следующих дозировках: 3675 мг/кг в период от 480 до 960 минут, 4200 мг/кг в период от 60 до 480 минут,
Таблица 4
Расчет LD 50 действующих веществ тинидазола и левамизола гидрохлорида
методом Миллера и Тейнтера
Название Дозировка, Количество животных Гибель, Соответствую-
группы мг/кг Выживших Павших % щие пробиты
Опытная группа № 1 1575 10 0 0 3,04
Опытная группа № 2 2100 10 0 0 3,04
Опытная группа № 3 2625 10 0 0 3,04
Опытная группа № 4 3150 10 0 0 3,04
Опытная группа № 5 3675 9 1 10 3,72
Опытная группа № 6 4200 8 2 20 4,16
Опытная группа № 7 4725 7 3 30 4,48
Опытная группа № 8 5250 5 5 50 5,00
Опытная группа № 9 5775 2 8 80 5,84
Опытная группа № 10 6300 0 10 100 6,69
Таблица 5
Параметры острой токсичности препарата при внутрижелудочном введении, мг/кг
Вид животного Параметры токсичности ^50
МПД ^50 ^84 ^100
Белые крысы линии Wistar 3150,0 мг/кг 4013,5 мг/кг 5040,0 мг/кг 5875,6 мг/кг 6300,0 мг/кг ±31,0 мг/кг
Таблица 6
Результаты определения массы тела животных при определении субхронической
пероральной токсичности (п=10), г
Название группы Хср±Д
Исходная 3 сутки 7 сутки 14 сутки
Контрольная группа 190,6±4,83 195,1±4,9 201,1±4,67 211,6±4,82
Опытная группа № 1 189,5±5,28 194,0±5,25 200,2±5,34 210,5±5,61
Опытная группа № 2 193,9±3,74 198,3±3,71 204,5±3,97 214,8±3,91
Опытная группа № 3 190,5±4,6 195,1±4,6 203,9±4,71 211,5±5,07
* р < 0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с показателями контрольной группы.
Таблица 7
Влияние препарата на гематологические показатели крови лабораторных животных, (п=10)
Показатель Название группы лабораторных животных
Контрольная группа Опытная группа № 1 Опытная группа № 2 Опытная группа № 3
WBC, 10л9/1 6,44±0,27 6,44±0,29 6,55±0,35 6,51±0,26
LYM, 10л9/1 4,52±0,24 4,52±0,29 4,58±0,28 4,51±0,3
МОК, 10л9/1 0,61±0,08 0,65±0,09 0,65±0,09 0,58±0,07
GRA, 10л9/1 2,06±0,43 2,11±0,32 2,27±0,32 2,18±0,46
LYM, % 61,86±6,58 58,11±4,9 58,35±6,71 63,57±5,79
МОК, % 9,02±0,51 9,16±0,5 8,98±0,65 8,99±0,59
GRA, % 2,99±0,49 2,6±0,4 3,1±0,58 3,14±0,69
RBC, 10л12/1 4,74±0,56 4,87±0,6 4,85±0,54 4,68±0,39
HGB, g/1 159,15±6,38 158,63±7,01 158,39±5,51 158,88±5,42
НСТ, 1/1 0,39±0,06 0,37±0,05 0,41±0,07 0,41±0,05
МСУ, А 88,32±6,22 87,51±4,91 89,83±5,52 90,43±4,33
МСН, pg 30,65±2,02 29,98±2,13 30,63±2,53 31,56±1,61
МСНС, g1 330,31±8,3 332,48±10,65 332,02±11,97 330,81±12,7
RDW, % 12,4±0,93 12,05±1,75 11,85±1,36 11,8±1,18
RDW-SD, fl 29,86±2,5 29,31±2,16 31,26±2,62 31,67±2,15
РЦТ, 10л9/1 225,78±31,76 223,39±38,16 214,13±39,2 219,07±38,87
МРУ, fl 7,81±0,59 8,21±0,54 7,76±0,56 7,9±0,42
* р < 0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с показателями контрольной группы.
47
Таблица 8
Влияние препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида на биологические показатели крови у белых крыс
Показатель Название группы животных
Контрольная группа Опытная группа № 1 Опытная группа № 2 Опытная группа № 3
Общий белок, г/л 79,15±0,43 79,12±0,55 78,83±0,49 78,94±0,52
Альбумин, г/л 39,93±2,12 39,94±2,19 40,18±2,67 40,48±3,17
Мочевина, моль/л 5,03±0,2 5,13±0,21 5,12±0,27 4,89±0,21
Креатинин, мкмоль/л 54,96±2,45 53,38±2,65 54,19±2,94 56,5±1,82
Глюкоза, моль/л 7,61±0,8 7,41±0,85 7,86±0,58 7,53±0,88
Билирубин прямой, мкмоль/л 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0
Билирубин общий, мкмоль/л 0,5±0,0 0,5±0,0 0,5±0,0 0,5±0,0
AST, U/L 22,12±4,08 28,57±3,48 27,87±3,1 23,1±3,99
ALT, U/L 88,52±13,44 95,45±3,72 92,12±3,18 92,15±4,23
Щелочная фосфатаза, U/L 179,47±14,85 177,3±16,33 164,94±12,27 179,65±13,0
ГГТ, U/L 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0
Креатинкиназа, U/L 7175,5±1029,5 7295,8±1050,0 6782,3±959,5 6987,4±1004,2
* р < 0,05 - разница статистически достоверна в сравнении с показателями контрольной группы.
4725 мг/кг в период от 30 до 240 минут, 5250 мг/кг в период от 10 до 240 минут, 5775 мг/кг в период от 10 до 60 минут и 6300 мг/кг в период от 10 до 60 минут.
В контрольных № 1 - 10 и опытных группах № 1 - 4 не зарегистрировано нарушения поведенческих реакций лабораторных животных, видимых признаков интоксикации не отмечено.
В опытных группах № 5 - 10 отмечено нарушение поведенческих реакций животных, которое проявлялось нарушением поедания корма и потребления воды, отсутствием реакций на внешний раздражитель. Острое отравление лабораторных животных сопровождалось следующими клиническими признаки: атаксия, паралич, угнетение, тахикардия, учащенное дыхание, которое становилось поверхностным, прерывистым. Смерть наступала в состоянии глубокого угнетения (рисунок 3).
Контроль массы тела лабораторных животных опытных и контрольных групп проводили до введения, на первые, третьи, седьмые, девятые и четырнадцатые сутки. Поскольку в опытной группе № 10 погибли все лабораторные животные, и гибель наступила в период
от 10 до 60 минут, данную группу в расчетах массы тела не учитывали (таблица 3).
При регистрации массы тела белых крыс опытных и контрольных групп не установлено статистически достоверных различий показателей за весь период наблюдения. В то же время, необходимо отметить, что в группах опытных лабораторных животных, в которых испытывали препарат в дозе от 3675 мг/кг до 5250 мг/ кг, установлены в сравнении с контролем более низкие значения прироста массы тела.
Полученные результаты исследований острой токсичности препарата позволили рассчитать данные для определения значений летальных доз при внутрижелудочном введении препарата лабораторным животным (таблица 4). LD16 и LD84 рассчитывали при построении пробитного графика, где сопоставлены дозы эффекта и соответствующие пробиты (рисунок 4).
Исходя из полученных данных препарат на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида по среднесмертельной пероральной дозе по ГОСТ 12.1.007-76 (классификация и общие требования безопасности) относится к четвертому классу опасности, вещества малоопасные (таблица 5).
48
При оценке субхронической токсичности препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида на функциональное состояние центральной нервной системы отмечено, что белые крысы сохраняли реакции на внешние раздражители и двигательную активность, сопоставимую с активностью у контрольных лабораторных животных. В течение 14 дней не зарегистрировано расстройств пищеварения и мочеотделения. Установлено, что многократное применение препарата в течение 14 дней во всех испытанных дозах не вызывает значимых изменений в клиническом состоянии животных.
Результаты гематологического анализа периферической крови белых крыс линии Wistar после внутрижелудочного введения препарата на основе орнидазола и левами-зола гидрохлорида показали, что в опытных группах показатели существенно не изменялись и колебались в пределах контрольных величин (таблица 7). Все незначительные изменения, обнаруженные в гематологической картине крови белых крыс линии Wistar, соответствовали референсным значениям для данного вида животных.
Результаты биохимического анализа сыворотки крови белых крыс после внутрижелу-дочного введения препарата на основе орнида-зола и левамизола гидрохлорида показали, что биохимический профиль у животных опытных групп существенно не изменялся и находился в пределах контрольных величин (таблица 8). Все незначительные изменения, обнаруженные в биохимической картине крови опытных групп крыс, соответствовали референсным значениям для данного вида животных.
Через 15, 120, 240 и 480 минут после выполнения конъюнктивальных проб препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида у лабораторных животных не обнаружено повреждений роговицы (рисунок 5).
Конъюнктивальной пробой с использованием флюоресцеинового теста на лабораторных кроликах на протяжении 48 часов не выявил повреждений участков роговицы у лабораторных животных. Проведенное исследование раздражающего действия позволяет говорить о том, что препарат на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида
не обладает выраженным раздражающим действием.
Выводы
Проведенное исследование фармакоток-сикологических свойств препарата на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида позволяет утверждать, что данный препарат не обладает выраженной острой, субхронической токсичностью и раздражающим действием. Исходя из полученных данных препарат на основе тинидазола и левамизола гидрохлорида по среднесмертельной перо-ральной дозе по ГОСТ 12.1.007-76 относится к четвертому классу опасности, вещества малоопасные. Полученные данные позволяют перейти к проведению клинического этапа тестирования разработанного препарата на целевых животных для определения его эффективности и безопасности.
Список литературы
1. Cama V. A. Infections by Intestinal coccidia and Giardia duodenalis. / V. A. Cama, B. A. Mathison // Clin Lab Med. 2015;35(2):423-444. doi: 10.1016/j. cll.2015.02.010.
2. Giangaspero A. Human cyclosporiasis. / A. Giangaspero, R. B. Gasser // Lancet Infect Dis. (2019) 19:e226-36. doi: 10.1016/S1473-3099(18)30789-8
3. Gonzales M. L. M. Antiamoebic drugs for treating amoebic colitis. / M. L. M. Gonzales, L. F. Dans, J. Sio-Aguilar // Cochrane Database Syst Rev. 2019;1(1):CD006085. Published 2019, Jan, 9. doi:10.1002/14651858.CD006085.pub3 в
4. J. L. Y. Ren. Risk Evaluation of Pathogenic Intestinal Protozoa Infection Among Laboratory Macaques, Animal Facility Workers, and Nearby Villagers From One Health Perspective. / J. L. Y. Ren, H. Chen, W. Huang, X. Feng, W. Hu // Front. Vet. Sci., 29 September 2021. doi:10.3389/ fvets.2021.696568 а
5. National Center for Biotechnology Information (2022). PubChem Compound Summary for CID 26879, Levamisole. Retrieved January 30, 2022 from https:// pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Levamisole.
6. National Center for Biotechnology Information (2022). PubChem Compound Summary for CID 5479, Tinidazole. Retrieved January 30, 2022 from https:// pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Tinidazole.
7. Thompson R. C. A. Molecular epidemiology of Giardia and Cryptosporidium infections. / R. C. A. Thompson, A. Ash // Infect Genet Evol. 2016;40:315-323. doi: 10.1016/j.meegid.2015.09.028
8. Torgerson P. R. The global burden of foodborne parasitic diseases: an update. / P. R. Torgerson, N. R. de Silva, E. M. Fevre // Trends Parasitol. 2014;30(1):20-26. doi: 10.1016/j.pt.2013.11.002.
49
