CC BY
67
Лечение и профилактика
УДК 619:615.015.4
ОСТРАЯ И СУБХРОНИЧЕСКАЯ ТОКСИЧНОСТЬ КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ЛЕВАМИЗОЛА И
ТРИКЛАБЕНДАЗОЛА
Ю.А СИДОРОВ
соискатель В.Е. АБРАМОВ доктор ветеринарных наук
Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, 123022, Москва, Звенигородское ш., 5, тел. 253-14-91, e-mail: [email protected]
Изучена острая и субхроническая токсичность комбинированного препарата на основе левамизола и трик-лабендазола. ЛД50 препарата для белых мышей при введении в желудок составила 364 мл/кг. При введении препарата в дозе 1/50, 1/100 и 1/1000 от ЛД50 в течение 15 сут не отмечено изменений в состоянии и поведении мышей, гематологических и биохимических показателях, за исключением снижения уровня гемоглобина у животных, получавших препарат в дозе 1/50 и 1/100 от ЛД50.
Ключевые слова: левамизол, триклабендазол, токсичность, белые мыши.
Для дегельминтизации животных в настоящее время успешно используют комплексные антигельминтные препараты (сантомектин, ивомек плюс, кло-зальбен и др.), состоящие из двух и более компонентов, обладающие широким спектром действия на гельминтов разных видов. Одним из недостатков этих препаратов является слабая их эффективность на юные формы фасциол [1, 4].
Нам для изучения был предложен комплексный препарат, в составе которого в качестве действующих веществ использованы триклабендазол и левамизол. Целью нашей работы явилось изучение острой и субхронической токсичности комплексного антигельминтного препарата с содержанием двух действующих веществ для расширения спектра антигельминтного действия. Предлагаемый антигельминтный препарат представляет собой суспензию для пе-рорального применения, содержащую 7,5 % левамизола и 10 % триклабендазола.
Триклабендазол обладает трематодоцидной, а левамизол нематодоцид-ной активностью, а их совместное использование обеспечивает антигель-минтную эффективность при трематодозах и нематодозах животных. Следует отметить, что триклабендазол обладает антигельминтным действием как против юных, так и половозрелых гельминтов, что несомненно повышает ценность данного препарата [2, 3].
Материалы и методы
Острую токсичность препарата изучали на 60 клинически здоровых белых мышах обоего пола массой 18-22 г, которых разделили на опытные и контрольную группы по 6 животных в каждой. Содержание и кормление животных опытных и контрольных групп было аналогичным. Препарат в форме 3,5%-ной суспензии вводили белым мышам внутрижелудочно с помощью
Российский паразитологический журнал, 2009, № 4
шприца и иглы с оливой в дозах от 0,1 до 0,5 мл на животное. За экспериментальными животными наблюдали в течение 14 сут.
В процессе опыта учитывали внешний вид и поведение животных, состояние шерстного покрова и видимых слизистых оболочек, отношение к пище, подвижность, ритм и частоту дыхания, отмечали время возникновения интоксикации, ее тяжесть, обратимость, срок гибели животных, а также патоло-го-анатомические изменения в органах и тканях.
Для оценки субхронической токсичности комбинированного препарата из 40 мышей-самцов сформировали 4 группы по 10 голов каждой с исходной массой тела 18-23 г. Ранее проведенными сериями экспериментов было установлено, что ЬБ50 препарата при пероральном введении мышам составляет 364 мг/кг. Схема проведения опыта приведена в таблице 1.
Таблица 1
Схема проведения опыта
Группа Доза от ЬБ50 (мг/кг/сутки) Количество животных в группе
1 1/50 (7,28) 10
2 1/100 (3,64) 10
3 1/1000 (0,364) 10
4 Контроль (1%-ный крах- 10
мальный клейстер)
Препарат разводили 1%-ным крахмальным клейстером. Животные 4-й группы из 6 мышей аналогичной массы и пола ежедневно получали 1%-ный крахмальный клейстер и служили контролем.
Во всех случаях исследуемый препарат вводили в течение 15 сут, ежедневно регистрируя массу тела. После введения препарата через 15 сут подопытных и контрольных животных убивали, отбирали пробы крови (с и без антикоагулянта) для проведения последующих гематологических и биохимических исследований. В последнем случае использовали биохимический анализатор «8реко1 220/221» (Германия).
После убоя животных внутренние органы взвешивали и определяли массовые коэффициенты.
Статистическую обработку полученных результатов проводили по Стью-денту-Фишеру с использованием 1>критерия.
Результаты и обсуждение
В процессе проведения опыта по изучению острой токсичности препарата, после введения его в летальных дозах у животных наблюдали клинические признаки острого отравления: возбуждение, угнетение, затем судороги и смерть. Гибель мышей отмечали в течение первых трех суток после введения препарата. При вскрытии павших животных обнаружили гиперемию и кровоизлияния в желудке и тонком кишечнике, местами отслоение слизистой оболочки. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Исходя из результатов исследований, определены следующие параметры острой токсичности для белых мышей: ЛД0 = 152,5 мл/кг, ЛД16 = 178, ЛД50 = 364 (276 - 480), ЛД84 = 510, ЛД100 = 725 мл/кг и в соответствии с ГОСТом 01.07.74 данный препарат относится к умеренно опасным (3 класс опасности) веществам.
Введение испытуемого препарата в течение 15 сут в дозе 1/50 от ЛД50 приводило к отставанию в приросте массы тела по сравнению с контрольными мышами.
Таблица 2
Результаты изучения острой токсичности комбинированного препарата
Доза Эффект Разность, Слагаемые
мг/кг ед. наблюдаемый ожидаемый % для X2
(по пало/ % пробит пробит %
зтором} было
дв>
175 2,243 0/6 0,3 2,25 2,71 1,1 0,8 0,0068
262,5 2,419 1/6 16,7 4,03 15,4 1,3 1,3 0,0011
350,0 2,544 3/6 50 5,00 45,2 4,8 4,8 0,0750
437,5 2,641 1/6 16,7 4,03 73,2 56,5 56,5 1,5000
525,0 2,720 5/6 83,3 5,96 87,8 4,5 4,5 0,0200
612,0 2,787 6/6 98,5 7,17 6,66 95,2 3,3 0,0230
Значения массовых коэффициентов сердца, легких, печени, почек и селезенки у мышей, которым вводили препарат, и контрольных животных достоверно не отличались (хотя, имелась тенденция к увеличению данного показателя для сердца и легких при введении препарата в дозе 1/50 от ЛД50).
Влияние комплексного препарата на гематологические показатели приведены в таблице 3.
Привведении препараталевамизол + триклабендазолвдвухдозах (1/50 и 1/100 от ЛД50) наблюдали достоверное снижение концентрации гемоглобина по сравнению с контролем. Так, например, уровень гемоглобина у мышей, получавших препарат в дозе 1/50 и 1/100 от ЛД50, составил соответственно 143,5±1,54 и 144,6±0,99 против 153,3±4,03г/% в контроле.
Остальные гематологические показатели (количество эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, цветной показатель, СОЭ) не претерпели достоверных изменений по сравнению с контрольными животными.
Комбинированный препарат при введении в дозе 1/1000 от ЛД^, не привел к достоверным изменениям анализируемых гематологических показателей.
В таблице 4 приведены данные по определению биохимических показателей у мышей после введения препарата в трех дозах в сравнении с контролем. Как следует из приведенных данных, введение препарата не оказало достоверного влияния на значения тестируемых показателей.
Особое внимание следует обратить на тот факт, что активность аспартат-и аланинаминотрансферазы не изменилась после введения левамизола + триклабендазола. В свою очередь, активность данных ферментов является показателем функционального состояния печени и отсутствие изменений служит доказательством отсутствия нарушений в ее состоянии.
Отсутствие достоверных изменений в значении концентрации креатини-на свидетельствует о том, что тестируемый препарат не оказал отрицательного влияния на функциональное состояние почек.
Литература
1. ДемидовН.В. Антигельминтики в ветеринарии. - М.: Колос, 1982. - 338 с.
2. Sanyal P.K. Plasma levels of fenbendazole metabolites in buffalo and cattle after long-term intraruminal administration // Vet. Q. - 1993. - V. 15, N 1. - P. 157-159.
3. Smeal M.G., Hall C.A. The activity of triclabendazole against immature and adult Fasciola hepatica infection in sheep // Australian Vet. J. - 1983. - V. 60, N 2. - P. 329-331.
4. Wolff K., Ekskert J., Schneiter G., LutzH. Efficacy of triclabendazole against Fasciola hepatica in sheep and goats // Vet. Parasitol. - 1983. - V. 13, N 1. - P. 145-150.
Таблица 3
Гематологические показатели животных после введения комплексного препарата
Группа Доза от ЛД50 Гемоглобин, г/л Эритроциты, 1012/л Цветовой показатель Тромбоциты, 109/л Лейкоциты, 109/л соэ, мм/ч Лейкоцитарная формула, %
лимфоциты сегмен-тоядер-ные эозино-филы моноциты па-лоч-коядер-ные
1 1/50 140,4±1,0* 4,43±0,05 0,96±0,02 266,6±5,8 3,2±0,13 2,0±0,26 60,2±0,87 35,2±0,9 2,0±0,52 2,6±0,45 -
2 1/100 141,7±0,8* 4,43±0,03 0,98±0,01 293,6±3,7 3,20±0,17 1,8±0,25 71,5±0,69 23,3±0,75 2,0±0,29 3,2±0,36 -
3 1/1000 152,0±1,74 4,48±0,07 0,98±0,01 295,3±6,54 3,4±0,25 1,7±0,21 60,5±1,24 34,2±1,78 1,5±0,17 3,8±0,53 -
4 Кон- 153,3±4,03 4,53±0,1 0,97±0,01 290,8±12,26 3,5±0,44 1,5±0,17 63,6±2,48 31,7±2,75 1,2±0,13 3,5±0,69 -
троль
Примечание. * - Различие достоверно между опытной и контрольной группами (Р < 0,05).
112
Российский паразитологический журнал, 2009, № 4
Таблица 4
Биохимические показатели крови мышей после назначения комбинированного препарата
Показатель, ед. Значения показателя после назначе- Контроль
изм. ния препарата в дозе от ЛД50
1/50 1/100 1/1000
Белок, мг/мл 55,3±0,23 54,4±0,26 55,1±0,18 55,55±0,35
Щелочная фосфа- 9,20±0,18 9,44±0,16 9,82±0,09 9,73±0,25
таза, ед./л
Холестерин, мг/дл 116,9±0,16 116,1±0,24 114,4±0,32 116,4±0,43
Аспартатамино-
трансфераза, ед./л 39,2±0,66 40,2±0,62 38,35±0,38 38,5±0,77
Аланинамино-
трансфераза, ед./л 41,9±0,95 39,8±0,44 39,9±0,49 39,5±0,43
Креатинин,
мкмоль/л 111,43±0,88 109,1±1,41 110,5±0,59 109,5±1,5
Acute and subchronic toxicity of the combined preparation on a basis of levamisole and triclabendazole
Yu.A. Sidorov, V.E. Abramov
Acute and subchronic toxicity of the combined preparation is investigated. LD50 of the preparation for white mice at introduction in stomach has made 364 ml/kg. At introduction of the preparation in a doze of 1/50, 1/100 and 1/1000 from LD50 during 15 days is not marked changes in state and behaviour of mice, hemato-logical and biochemical parameters, except for reduction of level of hemoglobin at animals receiving the preparation in a doze of 1/50 and 1/100 from LD50.
Keywords: levamisole, triclabendazole, toxicity, white mice.
