CC BY
40
Медицинская Иммунология 2004, Т. 6, № 6, стр 547-550 © 2004, СПб РО РААКИ
Оригинальные статьи
ИЗУЧЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОГО СТАТУСАУ ЖЕНЩИН С СИНДРОМОМ ПОТЕРИ ПЛОДА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВИДА ЛАТЕНТНОЙ ВИРУСНОЙ МОНОИНФЕКЦИИ
Владимирова Н.Ю., Чижова Г.В.
Министерство Здравоохранения Хабаровского края, Институт Повышения Квалификации Специалистов Здравоохранения, Россия
Резюме. Изучены особенности иммунного статуса у женщин с синдромом потери плода в зависимости от вида латентной вирусной моноинфекции. Вирус простого герпеса, цитомегаловирус и энтеровирусы способны непосредственно поражать клетки иммунной системы и вызывать вторичные иммунодефицитные состояния. Между тем, данные патогены обусловливают неравнозначные нарушения иммунологических показателей. Наиболее выраженные изменения всех изучаемых параметров обнаружены при латентной форме герпетической инфекции со значительной дефектностью клеточного и гуморального иммунного ответа. При цитомегаловирусной инфекции преимущественно наблюдается снижение параметров клеточного иммунитета, хотя выраженность этих нарушений менее значима, чем при персистенции вируса простого герпеса. Самое незначительное воздействие на состояние иммунной системы оказывает латентная энтерови-русная инфекция. Выявленные различия в степени и направленности иммунологических изменений при отдельных видах латентной вирусной инфекции являются патогенетической основой для выбора метода иммунокоррекции в ходе прегравидарной подготовки больных с синдромом потери плода.
Ключевые слова: синдром потери плода, латентная вирусная инфекция, иммунный статус.
Vladimirova N. Yu., Chizhova G.V.
CORRELATION BETWEEN IMMUNE PARAMETERS AND TYPE OF LATENT
VIRAL MONOINFECTION IN MISCARRIAGE SYNDROME
Abstract. Features of the immune status at women with a syndrome of loss of a fruit are investigated depending on a kind of a latent virus monoinfection. The virus Herpes Simplex, the Cytomegalovirus and the Enteroviruses are capable to amaze directly cells of immune system and to cause secondary conditions of deficit immunity system. Meanwhile, the data agents cause inadequate infringements immunology parameters. The most expressed changes of all investigated parameters are found out at the latent herpes infection with decrease in all parameters of the T-link of immunity and significant deficiency humoral the immune answer. At cytomegalovirus infections the T-cellular part of immunity though expressiveness of these infringements is less significant is mainly broken, than at the Herpes simplex virus migration. The most insignificant influence on a condition of immune system is rendered latent enterovirus infection. The revealed distinctions in a degree and orientations immunology changes at separate kinds of a latent virus infection are a pathogenetic basis for carrying out preparations for pregnansy of patients with a syndrome of loss of the fetus. (Med.Immunol., 2004, vol.6, № 6, pp 547-550)
роны, как внутриклеточный паразит, вирус подавляет функциональную активность лимфоидных клеток.
Вирус простого герпеса (ВПГ), цитомегаловирус (ЦМВ) и энтеровирусы относятся к вирусам, способным непосредственно поражать клетки иммунной системы, репродуцироваться в них в течение длительного времени, что обусловливает их гибель или снижение функциональной активности с формированием вторичного иммунодефицитного состояния. Вместе с тем, до настоящего времени нет дос-
Введение
Взаимодействие вирусов с иммунной системой человека, как известно, имеет двойственный характер [1]. Как антигенный раздражитель, вирус стимулирует развитие иммунных реакций. С другой сто-
Адрес для переписки:
Владимирова Н. Ю.
680000, г. Хабаровск, ул. Л. Толстого, д. 1, кв. 10,
Тел.: 421-2-35-72-26, 421-2-30-54-27.
Факс 421-2-23-31-58 ( для Трошина ).
таточно четкого представления о механизмах воздействия различных вирусных патогенов, находящихся в латентном состоянии, на иммунную систему человека.
В последнее время в литературе стало общепринятым понятие «синдром потери плода» за счет привычного невынашивания беременности (ПНБ) и случаев перинатальной смертности в анамнезе. Объединение разных нозологий стало возможным за счет общности патогенетических механизмов [2].
В ходе предыдущих исследований было доказано, что синдром потери плода может быть этиопато-генетически связан с латентной вирусной инфекцией и является иммуноопосредованным патологическим состоянием женского организма [5].
Данные о состоянии иммунитета у женщин с синдромом потери плода в литературе весьма ограничены и разноречивы. Результаты исследований В. М. Сидельниковой свидетельствуют о том, что при ВПГ-инфекции дисбаланс иммунной системы выражается в снижении CD4+ и CD8+, повышении или снижении NK [8]. При ЦМВ-инфекции страдает Т-звено иммунитета. У 50 % больных с ПНБ и хронической энтеровирусной инфекцией происходит снижение Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-цитотоксичес-ких клеток, NK [7]. В-лимфоциты при этом у 50 % больных повышаются, а у 50 % - снижаются.
Четкие представления об изменениях иммунного статуса, обусловленных персистенцией тех или иных вирусов в организме больных с синдромом потери плода, отсутствуют. Между тем, эти данные могли бы стать патогенетической основой для проведения прегравидарной подготовки и успешного исхода планируемой беременности.
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей иммунного статуса у женщин с синдромом потери плода в зависимости от вида латентной вирусной моноинфекции.
Материалы и методы
Всего было обследовано 984 женщины с синдромом потери плода. У 280 пациенток (28,5 %) была убедительно доказана этиопатогенетическая связь синдрома потери плода с латентной вирусной инфекцией. Другие причины формирования этой патологии, в том числе, наличие бактериальной и вируснобактериальной инфекции, тромбофилии и антифос-фолипидный синдром, в данном исследовании были исключены.
Основную группу исследования составили 115 женщин с синдромом потери плода, который был обусловлен латентной вирусной моноинфекцией: у 37 пациенток - ВПГ-инфекцией, у 37 - энтеровирусной инфекцией и у 41 больной - ЦМВ-инфекци-ей. Группу контроля составили 27 здоровых женщин репродуктивного возраста.
Вирусологические методы. Материалом для вирусологического исследования служили соскобы цервикального канала и эндометрия, венозная кровь, моча. Для диагностики герпес-вирусных инфекций использовали метод ПЦР-диагностики, иммунофер-ментный анализ. Для диагностики энтеровирусной инфекции использовали способ обнаружения вирусных антигенов в крови и моче методом непрямой иммунофлюоресценции на культуре ткани.
Выявление антигенов ВПГ, ЦМВ и энтеровирусов в эндометрии, хорионе, органах умерших плодов и новорожденных производили методом непрямой иммунофлюоресценции в культуре ткани [4].
Этиопатогенетическая связь синдрома потери плода и герпес-вирусных инфекций устанавливалась, если антигены ВПГ и ЦМВ обнаруживались не менее 2-х раз в эпителиоцитах цервикального канала и/или эндометрии только в сочетании с наличием специфических иммуноглобулинов класса IgG или IgG и IgM в крови.
Диагноз латентной энтеровирусной инфекции выставлялся при выявлении энтеровирусной виру-семии и/или вирусурии, антигенов энтеровирусов в эндометрии, хорионе, органах умерших плодов и новорожденных.
Иммунологические методы. Материалом для иммунологического исследования служила венозная гепаринизированная кровь. Иммунный статус изучался вне беременности, дважды с перерывом в 2 недели для исключения временных реакций на внешние воздействия. Идентификацию мембранных маркеров Т-лимфоцитных популяций осуществляли с применением панели моноклональных антител отечественного производства, серии ИКО (ВОНЦ РАМН). Панель моноклональных антител включала 7 маркеров к следующим субпопуляциям лимфоцитов: CD3+ (зрелые Т-лимфоциты), CD22+ (В-лимфоциты), CD4+ (Т-хелперы), CD8+ (Т-супрессоры/цитотоксические клетки), CD16+ (натуральные киллеры - NK). Подсчитывали им-мунорегуляторный индекс (ИРИ) соотношением CD4+ к CD8. Учет результатов проводили на проточном цитофлюориметре FACScan фирмы «Bec-ton Dickinson».
Количественное определение IgG, IgM и IgA в сыворотке крови осуществлялось методом радиальной диффузии в геле по методу Манчини и соавторов (1965).
Результаты
Иммунологические показатели женщин с синдромом потери плода изучены в зависимости от вида латентной вирусной моноинфекции и в сравнении с группой контроля (табл. 1).
Из представленной таблицы видно, что наиболее выраженные изменения иммунного статуса выявля-
Табл.1. РАЗЛИЧИЯ В ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЯХ ПРИ СИНДРОМЕ ПОТЕРИ ПЛОДА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВИДА ВИРУСНОЙ МОНОИНФЕКЦИИ
Показатели Латентная ЦМВ-инфекция, п = 41 Латентная ВПГ-инфекция. п = 37 Латентная энтеровирусная инфекция, п =37 Контроль, п = 27
CD3+ (Т-л), % *47,51+2,78 р<0,001 *32,84+2,0 р<0,001; Pi<0,01 58,28+2,55 63,74+1,35
CDa/ (В-л), % *14,49+2,24 р<0,01; Pi<0,001 *23,45+2,41 р>0,01 21,16+2,56 16,60+0,75
CD4+ (Т-х), % *21,36+2,45 р<0,001 *16,28+2,50 р<0,001; Pi<0,1 *30,07+2,80 47,8+1,05
CDjT (Т-с), % 20,53+2,45 р<0,2 *18,10+2,10 Р<0,01; р,<0,2 26,20±2,70 23,91+0,88
CD,6+ (NK), % *10,15+2,33 р<0,02 *6,95+2,21 р<0,001; Pi<0,2 16,10+1,27 18,30+1,42
ИРИ *1,04±0,13 Р>0,5 *0.89±0,13 Р<0,05; р,<0,1 *1,15+0,13 2,0+0,18
IgM, г/л *2,91+0,24 р<0,01; Pi>0,5 *2,82+0,27 р<0,01 *2,37+0,26 1,86+0,11
1дА, г/л *2,67+0,24 р<0,05; Pi>0,1 *3,34+0,28 р<0,01 1,96+0,25 2,12+0,08
IgG, г/л 16,38+2,32 Р<0,5 *11,06+1,62 р<0,01; Pi<0,01 18,77+2,17 17,90+0,82
Р - достоверность различий между показателями в группах с энтеровирусами и в группах с герпесвирусами. Р, - достоверность различий между показателями в группах ВПГ - и ЦМВ - инфекций.
* - отмечена достоверная разница между показателями в основных и контрольной группах (р<0,01).
ются при латентной форме герпетической инфекции, когда нарушены все 9 изучаемых показателей иммунограммы. Так, наблюдается снижение процентного содержания CD3+ в 2 раза, CD4+ - в 2,8 раза, CD8+ - в 1,5 раза, CD16+ - в 3 раза. При этом ИРИ уменьшается в 2 раза по сравнению с группой контроля. Кроме того, дефекты иммунологической реактивности выявлены и в отношении всех параметров гуморального иммунитета - увеличение CD22+ в 1,4 раза, повышение IgM и IgA в 1,5 раза на фоне аналогичного снижения IgG.
При латентной форме ЦМВ-инфекции тенденции нарушений иммунологических показателей были те же, но степень их выраженности была меньше, и изменялись только 7 изучаемых параметров. CD3+ были снижены в 1,3 раза, CD4+ - в 2,2 раза, CD16+ - в 1,8 раза, ИРИ - в 1,9 раза, IgG - в 1,3 раза. Увеличение процентного содержания CD22+, количества IgA было также менее значительным - в 1,1 раза и в 1,3 раза соответственно, a IgM - аналогичным изменениям при ВПГ-инфекции. Количество CD8+ достоверно не отличалось от такого же показателя в контрольной группе.
Самое незначительное воздействие на состояние иммунной системы женщин с синдромом потери плода оказывала латентная энтеровирусная инфекция. Наблюдались изменения 3 показателей иммунного статуса: незначительное, в 1,6 раза, уменьшение CD4+, ИРИ - до 1,14, повышение IgM в 1,3 раза.
При сравнении иммунологических показателей в группах энтеровирусов и обоих герпес-вирусов достоверные различия выявлены в содержании CD3+ (в 1,2 и 1,8 раза по сравнению с ЦМВ и ВПГ соответственно), CD4+ (в 1,4 и 1,8 раза), CD16+ (в 1,6 и 2,3
раза), ^М ( в 1,2 и 1,2 раза), (в 1,4 и 1,7 раза), ^А (в 1,4 и 1,7 раза). Остальные достоверные различия были присущи только одному из герпес-вирусов по сравнению с группой энтеровирусов.
При сравнении иммунологических показателей в группах с ВПГ- и ЦМВ-инфекцией статистически значимые различия выявлены в содержании СБЗ+ (в 1,4 раза), СБ22+ (в 1,6 раза), (в 1,5 раза). Несмотря на отсутствие достоверной разницы, персис-тенция ВПГ обусловливала более выраженное неблагоприятное воздействие на процентное содержание СБ4+ и СБ16+ с самым наименьшим показателем ИРИ во всех сравниваемых группах.
Обсуждение
Представленные данные свидетельствуют о том, что латентные вирусные инфекции при синдроме потери плода индуцируют вторичные иммунодефи-цитные состояния различной направленности и степени выраженности.
Наиболее значительные дефекты иммунологической реактивности наблюдаются при латентной форме герпетической инфекции, когда нарушены все основные параметры клеточного и гуморального иммунитета. Преимущественные нарушения клеточного иммунитета характерны для цитомегаловирус-ной инфекции, что совпадает с данными В.М. Си-дельниковой [8]. Между тем, выраженность этих нарушений менее значительна, чем при персистен-ции ВПГ в организме больных. Некоторое снижение Т-хелперов, обусловленное супрессорным действием энтеровирусов, согласуется с данными А. В. Ле-диной и соавторов [7]. В связи с этим показатель
ИРИ достоверно снижается, но не столь значимо, чем при герпес-вирусных инфекциях.
Угнетение МК также наиболее значительно проявляется при герпес-вирусных инфекциях, что обусловливает хронизацию инфекционного процесса и появление персистирующих форм инфекции [6].
Противогерпетический гуморальный иммунитет характеризуется увеличением содержания В-лимфо-цитов, высокой продукцией иммуноглобулинов класса А и М, низким содержанием иммуноглобулинов С. Особую роль в патогенезе латентности ВПГ играет дефектность гуморального иммунного ответа, связанная с длительной персистенцией иммуноглобулинов М и ингибицией синтеза иммуноглобулинов в, что согласуется с данными Т. П. Владимировой [3].
Высокие концентрации антител классов и ^А следует считать индикатором иммунологической недостаточности, что помимо герпетической инфекции присутствует при цитомегалии и частично - при энтеровирусной инфекции.
По-видимому, исходный иммунный статус, формирующийся под влиянием различных вирусных инфекций, определяет течение и исход последующей беременности. При этом тяжелые иммунные нарушения приводят к прерыванию беременности до срока живорожденности плода, а менее выраженные -к формированию внутриутробного инфицирования или внутриутробной инфекции.
Несмотря на то, что иммунные дефекты у женщин с синдромом потери плода являются, как правило, транзиторными, прегравидарная подготовка должна быть направлена на их коррекцию. Выявленные различия в степени и направленности иммунологических изменений при отдельных видах латентной вирусной инфекции могут стать осно-
вой для индивидуального подхода к иммунокоррекции.
Список литературы
1. Александрова Н. Н. Принципы иммунокоррекции при острых и хронических вирусных заболеваниях // Актуальные проблемы современной вирусологии: Сб. науч. трудов. - Екатеринбург, 1995. - С. 45-49.
2. Бицадзе В. О. Синдром потери плода и тром-бофилии. - Материалы V Российского форума «Мать и дитя». - М., 2003. - С. 32-33.
3. Владимирова Т. П. Иммунологическая реактивность при геморрагической лихорадке с почечным синдромом и разработка препаратов антител для этиотропной терапии. - Диссертация в виде науч. доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук. - Новосибирск, 1997. - 50 с.
4. Владимирова Н. Ю. Влияние реабилитационной терапии на состояние эндометрия женщин с привычным невынашиванием беременности: Дис. ... канд. мед. наук: 14.00.01. - Москва, 1997. - 165 с.
5. Владимирова Н. Ю., Чижова Г. В. Иммунный статус у женщин с синдромом потери плода вирусной этиологии. - Материалы V Российского форума «Мать и дитя». - М., 2003. - С. 43-44.
6. Дубенский В. В. Патогенетическое значение иммунных нарушений в развитии осложненных урогенитальных инфекций и болезни Рейтера и их коррекция с помощью препаратов интерферона и цитокинов: Автореферат дис.... докт. мед. наук. - Москва, 1999. - 38 с.
7. Ледина А. В., Грищенко С. В., Моргунова И. В. Особенности иммунитета у женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе // Акушерство и гинекология. - 1996. - № 4. С. 24-27.
8. Сидельникова В. М. Привычная потеря беременности. - М.: Триада-Х, 2000. - 304 с.
поступила в редакцию 09.04.2004 отправлена на доработку 27.04.2004 принята к печати 23.05.2004
