Изучение параметров острой токсичности и эмбриотоксических свойств диапкилорто-фталатов Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 615.632

A.A. Семенов2, В.В. Ильина1, В.В. Бенеманский1

изучение параметров острой токсичности и эмбриотоксических свойств диалкилорто-фталатов

1АФ-НИИ медицины труда и экологии человека ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН (Ангарск) 2Научно-производственная фирма ООО «Сольвей» (Иркутск)

В представленных материалах показано, что изучаемая лекарственная форма на основе смеси диалкилфталатов при внутрижелудочном поступлении относится, к нетоксичным, малоопасным веществам, и. на всем протяжении, беременности, крыс-самок (19 дней) в дозе 500 мг/кг массы, тела не оказывает, эмбриотоксического действия.

Ключевые слова: диалкилфталаты, токсичность, эмбриотоксичность, белые крысы

study on parameters of acute toxicity and embryo-toxic properties of dialkylortho-phtalates

A.A. Semionov2. V.V. Iliyna1. V.V. Benemanskiy1

’Angarsk branch of Research institute of occupational medicine and human ecology of SE SC ME ESSC

SB RAMS, Angarsk

2Scientific production Joint-Stock company SOLVEY, Irkutsk

A medicinal form studied, based, on the mixture of dialkylphthalates in intragastric intake was found relate to the non-toxic and scarcely dangerous substances and. the embryonic toxic effects were not observed to occur in the pregnant rats at the dose 500 mg/kg of the body weight during a full rat pregnancy period. (19 days). The study results are presented, in these materials.

Key words: dialkylphthalates, toxic, embryonic toxic, rats

Диалкиловые эфиры оршо-фталевой кислоты (диалкилфталаты-ДФ) производятся химической промышленностью и широко используются при производстве пластических масс и в других областях. Их токсические свойства достаточно хорошо изучены. Острая токсичность чистых ДФ для грызунов лежит в пределах 5 — 20 г/кг. Не выявлены токсичные свойства при хроническом парентеральном и пероральном поступлении этих веществ в организм [1, 2, 7].

Перспектива использования соединений ДФ в качестве гепатопротекторов диктует необходимость проведения исследований с целью определения параметров острой токсичности и эмбрио-токсических свойств новой лекарственной формы (ЛФ), представляющей собой смесь диэтилового и н-дибутилового эфиров оршо-фталевой кислоты в соотношении 9:2, нанесенную на десятикратное по массе количество мелкоизмельченного порошка травы Salsola соШпа [5, 6].

материал и методы

Острую токсичность изучаемой лекарственной формы оценивали по описанным в литературе методам [3, 4]. Эксперименты проводили на 96 половозрелых беспородных крысах и мышах обоего пола массой, соответственно, 180 — 230 г и 17 — 20 г. Все животные были распределены на группы, каждая из которых состояла из 6 особей. Изучаемый препарат вводили внутрижелудочно с помощью зонда в дозах 1,0, 3,0, и 6,0 г/кг массы тела в 15% растворе крахмала. Ввиду того, что ЛФ представляла собою густую взвесь, с большим

трудом проходящую через зонд, необходимую дозу давали дробно 2 — 3 раза в сутки с интервалом 1 час. Дозу, превышающую 6 г/кг, ввести не удалось. За животными наблюдали в течение 14 суток. Среднесмертельную дозу рассчитывали по методу Литчфилда и Уилкоксона. После завершения опытов животных забивали путем декапитации, внутренние органы (почки, печень, слизистую желудка и кишечника, легкие) заключали в парафин для последующего патоморфологического исследования.

Определение эмбриотоксического действия ЛФ проводили на белых нелинейных крысах-самках массой 180 — 220 г в соответствии с требованиями [4]. Группы животных формировали после обследования 60 самок, находящихся в вольере совместно с крысами-самцами. Первый день беременности определяли по наличию сперматозоидов в вагинальных мазках крыс.

Группы были сформированы следующим образом.

Группа 1 — контрольная, животным на протяжении всей беременности внутрижелудочно вводили по 5 мл 1% раствора крахмала.

Группа 2 — опытная, животным на всем протяжении беременности внутрижелудочно вводили ЛФ в дозе 500 мг/кг массы тела в 5 мл 1% крахмала.

Группа 3 — положительный контроль, животным на всем протяжении беременности внутри-желудочно вводили азотнокислый свинец в дозе 5 мг/кг массы тела. Введение изучаемых веществ осуществляли с 1-го по 19-й день беременности.

В каждой группе было по 10 белых крыс-самок. На всем протяжении беременности за животными вели тщательное наблюдение. Вскрытие проводили на 20-й день беременности. Оценивали следующие показатели эмбриотоксичности: количество желтых тел, количество живых плодов, количество мест имплантации, количество резорбций, количество мертвых эмбрионов, рост эмбрионов, вес эмбрионов. Предимплантационную смертность определяли по разности между количеством желтых тел в яичниках и количеством мест имплантации в матке; постимплантационную смертность — по разности между количеством мест имплантаций и количеством живых плодов.

Животных содержали в условиях вивария при естественном освещении и свободном доступе к пище и воде. Опыты проводили в одно и то же время суток. Полученные данные подвергали статистической обработке с определением достоверности различий по ^критерию Стьюдента.

результаты исследования

За время наблюдения животные, получавшие ЛФ во всех испытуемых дозах, по внешнему виду и поведению не отличались от контрольных. Гибели лабораторных животных во время наблюдения не наблюдалось. Отсутствовала видовая и половая чувствительность. При патоморфологическом обследовании после окончания срока наблюдения во внутренних органах (почки, печень, слизистая желудка и кишечника, легкие) никаких патологических отклонений ни у одного животного не выявлено. Таким образом, ЛФ в дозах до 6 г/кг массы тела не вызывала гибели белых крыс и белых

мышей обоего пола и каких-либо патологических отклонений во внутренних органах. В соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 исследованную ЛФ следует отнести к 4-му классу (вещества малоопасные).

Наблюдение за беременными крысами-самками не выявило отличий во всех группах животных по внешнему виду, способности поглощать пищу и по характеру поведения. Г ибели животных с 1-й по 19-й день беременности не отмечено.

Количественные показатели эмбриотоксического действия ЛФ представлены в таблицах 1 и 2.

Как следует из полученных результатов, все изучаемые показатели эмбриотоксичности у белых крыс, получавших во время беременности ЛФ, достоверно значимо не отличались от показателей в контрольной группе. Так, показатель беременности составлял 80 %, а среднее количество желтых тел на одну самку — 9,0 и 9,3; количество мест имплантации — 8,6 и 9,0; количество живых плодов — 8,5 и 9,0; доимплантационная гибель — 4,4 и 3,2 % соответственно. Средняя длина эмбрионов также не отличалась, в то время как масса эмбрионов в группе с введением ЛФ имела четкую тенденцию к увеличению (t = 1,75). В обеих группах не отмечалось гибели эмбрионов. Следует заметить, что в группе белых крыс, получивших внутрижелудоч-ное введение азотнокислого свинца на протяжении всей беременности, показатели эмбриотоксичности отличались от результатов животных, получивших изучаемую ЛФ, и свидетельствовали о наличии эмбриотоксического эффекта в условиях данного эксперимента. Так, в группе сравнения встречалась гибель эмбрионов, количество резорбций было повышенным, достоверно значимо

Показатели эмбриотоксического действия ЛФ

Таблица 1

Показатели эмбриотоксичности Группы животных

Контрольная группа ЛФ Азотнокислый свинец

Абс. На самку Абс. На самку Абс. На самку

Количество желтых тел 72 9,0 ± 0,4 75 9,3 ± 1,2 123 11,2 ± 0,5

Количество мест имплантации 69 8,6 ± 0,5 72 9,0 ± 1,0 113 10,3 ± 0,5

Количество живых плодов ев 8,5 ± 0,5 72 9,0 ± 1,3 106 9,6 ± 1,0

Количество резорбций 1 0,12 - - 5 0,45

Количество мертвых эмбрионов - - - - 2 0,2

Рост эмбрионов (мм) - 30,1 ± 0,3 - 32,6 ± 0,2 - 33,0 ± 0,3

Масса эмбрионов (г) - 2,3 ± 0,2 - 2,8 ± 0,2 - 2,5 ± 0,2

Обобщенные показатели эмбриотоксического действия ЛФ

Таблица 2

Показатели (%) Группы животных

Контрольная группа ЛФ Азотнокислый свинец

Количество беременных самок 80 % 80 % 78,6 %

Предимплантационная гибель 4,4 ± 0,3 3,2 ± 0,3 8,0 ± 0,7*

Постимплантационная гибель 1,4 ± 0,09 - 6,1 ± 0,7*

примечание: различия статистически значимо достоверны, по сравнению с контрольной группой (р < 0,05).

отличалась и количественные показатели пред- и постимплантационной гибели. При макроскопическом обследовании, а также при морфологическом исследовании, видимой патологии у эмбрионов не выявлено.

заключение

Изучаемая лекарственная форма на основе смеси ДФ при внутрижелудочном поступлении относится к нетоксичным малоопасным веществам и на всем протяжении беременности крыс-самок (19 дней) в дозе 500 мг/кг массы тела не оказывает эмбриотоксического действия.

литература

1. Лазарев Н.В. Вредные вещества в промышленности / Н.В. Лазарев. — Л., 1976. — Т. 2.

- С. 194-197.

2. Левина Э.Н. Вредные вещества в промышленности / Э.Н. Левина. — Л.: Химия, 1985. — С. 142 — 144.

3. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств: РД 64-126-91.

— М., 1992.

4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М., 2005.

5. Патент РФ RU 2277925 С2 / Семенов А.А., Сырчина А.И., Ажунова Т.А., Толстихина В.В.. — 2006.

6. Патент РФ RU 2 322 975 С1 / Семенов А.А., Громова А.С., Луцкий В. И., Неретина О. В., Плотникова Ю.К., Малов И.В., Лязин А.Б. — 2008.

7. Штейфель В.О. Вредные вещества в промышленности / В.О. Штейфель. — М.: Химия, 1991. — С. 223 — 224.