CC BY
23
DOI 10.31588/2413-4201-1883-241-1-143-146
УДК 619:615.9:599.323.4
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА
«З - 88» НА БЕЛЫХ МЫШАХ
Медетханов Ф.А. - д.б.н., доцент, Аухадиева З.Ф. - аспирант, Новоселов О.Н. - студент
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: острая токсичность, белые мыши, комплексное средство «З-88» Keywords: acute toxicity, white mice, the complex tool «Z-88»
Роль лекарственных веществ в оздоровлении животных и повышении их продуктивности всё время возрастает. В общем комплексе этих средств важное значение имеют химиотерапевтические средства, количество которых неуклонно увеличивается. В то же время, до сих пор остается актуальным изыскание таких препаратов, которые бы обладали повышенным этиотропным действием, влияли губительно на устойчивые формы микроорганизмов, не оказывали побочного действия на животных, активизировали защитные механизмы организма.
В справочнике приведено описание 230 препаратов, производимых 36 компаниями из 18 стран, включенных в «Реестр лекарственных средств для ветеринарного применения», зарегистрированных в РФ по состоянию на 14 сентября 2016 года, среди которых имеются ряд новинок [1]. В этом направлении ведутся работы и отечественными учеными, предлагающими свои разработки практикующим врачам и специалистам в области ветеринарии и зоотехнии [2, 3, 4, 5, 7]. Все это свидетельствует о том, что изыскание эффективных средств и путей воздействия на организм животных с целью повышения их продуктивности и качества продукции остается одной из важнейших задач современной фармакологии.
Материал и методы исследований. Экспериментальная часть работы выполнена в виварии ФГБОУ ВО КГАВМ имени Н.Э. Баумана. Теоретическая и аналитическая часть работы выполнена в условиях кафедры фармакологии, токси-
кологии и радиобиологии Казанской ГАВМ.
Объектом исследования являлось органическое средство природного происхождения под лабораторным шифром «З-88», полученное по методике М.П. Тушнова, в нашей модификации.
Общетоксическое действие средства «З-88» определяли на лабораторных мышах с исходной массой 17-20 граммов. В эксперименте использовали здоровых животных с хорошими показателями экстерьера, выдержанных в условиях карантина в течение 14 суток. Кормление мышей осуществляли в утренние и вечерние часы, для чего использовали кормовую смесь из зерна, в состав которой входит: пшеница 15 %, овес 50 %, просо 20 %, ячмень 10 % и семена подсолнуха 5%. Кроме того, они получали рыбий жир и мел через день. За сутки до включения в опыт их подвергали пищевой депривации со свободным доступом к воде. Кормушки устанавливали обратно сразу же после затравки животных тестируемыми средствами. Всего использовано 44 самки и 44 самца белых мышей, распределенные в 9 групп, по принципу пар-аналогов. В первую группу были включены 4 самки и 4 самца и им ничего не вводили (интактная). В каждую последующую группу вошли по 5 самок и 5 самцов, где во второй опытной группе мышам, принудительно, с помощью специального атравматического зонда интрагастрально, вводили средство под лабораторным шифром «З - 88», из расчета 0,5 мл на одно животное. Затравку мышей третьей опытной группы осуществля-
ли путем инокуляции средства внутримышечно в дозе 0,5 мл, в четвертой группе -путем подкожного введения его в объеме 1,0 мл, а животные 5-й группы получали средство внутривенно в дозе 0,5 мл в боковую вену хвоста. Шестая, седьмая, восьмая и девятая группы подопытных мышей были контрольными, которым в соответствии с указанными выше путями введения использовали стерильный физиологический раствор в аналогичных дозах (Таблица 1).
Самок содержали отдельно от самцов. Использованные дозы являются максимально допустимыми для данного вида лабораторных животных, в зависимости от массы тела и пути введения [8]. За животными вели наблюдения в течение 14 суток с момента введения препарата, причем, в течение первых суток за мышами осуществляли наблюдение: в течение первых шести часов постоянно, а спустя указанное время, один раз через каждые 2 часа. Начиная со вторых суток осмотр животных проводили 2 раза в сутки, до завершения опыта.
Для оценки картины интоксикации принимали во внимание общее состояние
Результаты исследований. Острая токсичность - вредное действие лекарственного средства, проявляющееся после его однократного применения или повторного введения через короткие интервалы времени в течение суток, для определения переносимых, токсических и летальных
животных, с учетом таких поведенческих реакций, как двигательная активность, положение тела в пространстве, отношение их к корму, груминг, состояние волосяного покрова, нервно-мышечное возбуждение, показатели массы тела в динамике, характер и степень интоксикации, цвет видимых слизистых оболочек, сроки гибели животных. Контроль массы тела у подопытных мышей осуществляли непосредственно перед началом опыта и по его завершении. В конце эксперимента отдельных животных подвергали эвтаназии под эфирным наркозом для оценки состояния внутренних органов.
Все исследования проведены с учетом требований Директивы 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского Союза от 22.09.2010 по охране животных, используемых в научных целях [9] и Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях [10].
Результаты исследования обработаны статистически с применением стандартного пакета программ Microsoft Office Excel 2007.
доз вещества и причин наступления гибели животных [6].
Исследованиями установлено, что введение средства «З-88» внутрь белым мышам сопровождалось их адинамией. Сразу после введения тестируемого средства отмечали болевую реакцию в виде су-
Таблица 1 - Схема использования средства «З - 88» белым мышам, при определении острой токсичности
Группа Количество животных в группе/использованное средство Гендерная принадлежность Метод введения Доза, (мл) Кратность введения Пало
самец самка
1 - интактная 8 4 4 - - - -
2 - опытная 10/«З-88» 5 5 Per os 0,5 1 0
3 - опытная 10/«З-88» 5 5 в/м 0,5 1 0
4 - опытная 10/«З-88» 5 5 п/к 1,0 1 0
5 - опытная 10/«З-88» 5 5 в/в 0,5 1 0
6 - контрольная 10/физраствор 5 5 Per os 0,5 1 0
7 - контрольная 10/физраствор 5 5 в/м 0,5 1 0
8 - контрольная 10/физраствор 5 5 п/к 1,0 1 0
9 - контрольная 10/физраствор 5 5 в/в 0,5 1 0
дорожных стягиваний мышц, продолжительность которых составила 20-30 минут. Животные выгибали спину, прижимали брюшину к основанию клетки, забивались в угол, дыхание преимущественно грудного типа, уреженное, вплоть до полного прекращения его в течение нескольких секунд. Вслед за этим мыши совершали одиночные, глубокие вдохи с признаками ин-спираторной одышки. Данное явление связывают с биологически активными веществами, входящими в состав средства и введением максимального объёма жидкости интрагастрально, что создавало препятствие для нормального участия диафрагмы в акте дыхания.
В 6-й группе животных, при аналогичном способе введения физиологического раствора признаков болевых реакций не отмечали, в то же время наблюдали критическое урежение дыхательных движений, грудной тип дыхания, скученность, отказ от корма, в течение первых 2-3 часов. Признаки интоксикации в виде судорожных стягиваний мышц, явлений апноэ и ограничение поведенческой активности у мышей 2-й подопытной группы проходили постепенно спустя 30-40 минут после затравки их средством «З-88», однако число дыхательных движений продолжало оставаться уменьшенным, чем у аналогов ин-тактной и 6-й контрольной группы. Спустя указанное время животные постепенно восстанавливали двигательную активность, дыхание становилось умеренным и на 5-6 час после начала опыта поведенческая активность была близка к показателям мышей интактной и 6-й контрольной группы. Мыши подходили к поилкам, принимали воду, совершали груминг, но корм не принимали. Полное восстановление клинических признаков интоксикации до физиологических показателей происходило спустя 12-24 часа после затравки.
В третьей и четвертой опытной группах, где испытуемое средство вводили грызунам внутримышечно и подкожно отмечали беспокойство их, болезненность при инокуляции средства, учащение дыхания. Мыши двигались по клетке, затем
прижимались друг к другу, сбиваясь в кучу.
Длительность указанных поведенческих реакций составила 10-15 минут, после чего животные осторожно двигались по клетке, совершали груминг, но случаев подхода к поилкам отмечено не было. Мыши начинали принимать воду спустя 40
- 60 минут после использования средства, а прием корма через 1,5-2 часа после начала опыта. Аналогичные реакции отмечены и у контрольных особей 7-й и 8-й групп.
У грызунов 5-й опытной группы после внутривенного введения средства «З
- 88» отмечали резкую двигательную активность, мыши начинали хаотично двигаться по клетке, дыхание становилось учащённым, спустя 3-5 минут они забивались в угол, прижимались друг к другу. У контрольных аналогов 9 группы наблюдали аналогичную реакцию на внутривенное введение стерильного раствора натрия хлорида. В последующие 30-40 минут подопытные животные успокаивались, начинали подходить к поилке, а прием корма спустя 1,5-2 часа.
При всех указанных методах введения средства «З-88», визуализируемых изменений со стороны слизистых оболочек мышей не отмечено ни в одном случае. Явлений тремора мышц, парезов, параличей и гибели животных не наблюдали. При взвешивании грызунов в конце опыта, разницы по массе тела между группами не установлено. При патологоанатомической оценке картины интоксикации у мышей после эвтаназии, в макроструктуре органов изменения не выявлены.
ЛИТЕРАТУРА:
1. ВИДАЛЬ Ветеринар Справочник «Лекарственные средства для ветеринарного применения в России» М.: Видаль Русь, 2017 г. - 448 с.
2. Грачева, О.А. Влияние «Янтове-та» на клинико-физиологический статус сухостойных коров / О.А. Грачева, А.Р. Шагеева // Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2019. - Т. 237.
- С. 51-56.
3. Грачева, О.А. Профилактика и лечение телят, больных диспепсией, с применением «Янтовета» / О.А. Грачева // Учёные записки Казанской государствен-
ной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2019. - Т. 239 (III) - С.100-104.
4. Мингалеев, Д.Н. Изучение терапевтической активности нового противотуберкулезного препарата - Линарола / Д.Н. Мингалеев // Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -2017. - Т.229 (1). - С. 24 - 27.
5. Семененко М.П. Терапевтическая эффективность гепрасана при сочетанных микотоксикозах птиц / М.П. Семененко [и др.] // Вестник АПК Ставрополья. - 2017 -№ 3(27). - С. 18-22.
6. Тарасов, А.В. Фармако-токсикологическая оценка мази Гентадио-вет и её применение при лечении инфицированных кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота: дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Тарасов Александр Вячеславович. - Краснодар, 2018. - 165 с.
7. Тяпкина Е.В. Опыт применения ликверола в терапии заболеваний печени у
коров / Е.В. Тяпкина [и др.] // Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и практики. Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института 22-23 июня 2016 г, Краснодар. - 2016. - С. 121-125.
8. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриева. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.
9. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (Text with EEA relevance) / European Commission: Brussels, Belgium, 2010.
10. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes // European Treaty Series. European Union, 1986. - 11 p.
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА «З - 88»
НА БЕЛЫХ МЫШАХ
Медетханов Ф.А., Аухадиева З.Ф., Новоселов О.Н.
Резюме
В статье представлены результаты экспериментальных исследований, целью которых было изучение параметров острой токсичности комплексного средства «З - 88». Исследованиями установлено отсутствие токсического влияния испытуемого средства на организм белых мышей при различных способах затравки их, в максимально допустимых дозах. По степени воздействия на теплокровных животных средство классифицируется как малотоксичное и может быть отнесено к 4-му классу опасности (малоопасные вещества).
STUDY OF ACUTE TOXICITY OF COMPLEX AGENT «Z-88» IN WHITE MICE
Medetkhanov F. A., Aukhadieva Z. F., Novoselov O. N.
Summary
The article presents the results of experimental studies aimed at studying the parameters of acute toxicity of the complex agent «Z-88». Studies have established the absence of toxic effects of the test agent on the body of white mice with various methods of priming them, in the maximum permissible doses. According to the degree of exposure to warm-blooded animals, the product is classified as low-toxic and can be assigned to the 4-th hazard class (low-dangerous substances).
