CC BY
30
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ Клинические исследования
© Е.В.Селивёрстова, А.А.Соловьёв, Р.А.Насыров, Ю.В.Наточин, 2009 УДК 616.611-002-053.32:577.175.343:612.815.1
Е.В. Селиверстова1, А.А. Соловьёв2, Р.А. Насыров3, Ю.В. Наточин1
ИЗУЧЕНИЕ ЛОКАЛИЗАЦИИ РЕЦЕПТОРОВ ВАЗОПРЕССИНА В ПОЧКЕ ДЕТЕЙ ПРИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЕ
E.V. Seliverstova, A.A. Solovyov, R.A. Nasyrov, Yu.V. Natochin
STUDY OF LOCALIZATION OF VASOPRESSIN RECEPTORS IN KIDNEY OF CHILDREN WITH GLOMERULONEPHRITIS
1 Лаборатория физиологии почки и водно-солевого обмена Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН,
2 кафедра госпитальной педиатрии, 3 кафедра патологической анатомии с курсом судебной медицины Санкт-Петербургской государственной медицинской педиатрической академии, Россия
РЕФЕРАТ
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Изучение локализации рецепторов вазопрессина в структурах почки человека. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. Исследованы биоптаты почек 12 детей с различными морфологическими формами гломерулонефрита. Локализация Via- и V2-рецепторов изучена методами световой и электронной микроскопии, иммуногистохимии и иммуноэлек-тронной микроскопии. РЕЗУЛЬТАТЫ. В клубочках и эпителии проксимальных канальцев нефрона были выявлены изменения ультраструктуры, клетки дистального сегмента нефрона не имели выраженных изменений. Использование специфических антител позволило установить, что V2-рецепторы локализованы в клетках собирательных трубок и дистального сегмента нефрона, V1a-рецепторы - в клетках мезангия клубочка, стенок сосудов, дистального сегмента нефрона и интерстиция. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Впервые представлены данные о локализации V1a- и V2-рецепторов в почке детей. Выявленное распределение V-рецепторов в структурах почки хорошо сопоставимо с результатами изучения функционального ответа почек на вазопрессин.
Ключевые слова: вазопрессин, V1a-рецептор, V2-рецептор, кора почки, нефрон, иммуногистохимия, иммуноэлектрон-ная микроскопия.
ABSTRACT
THE AIM. Study of localization of vasopressin receptors in the structures of human kidney. PATIENTS AND METHODS. Renal tissue studied 12 children with different morphological forms of glomerulonephritis. Localization of V1a-and V2-receptor studied by light and electron microscopy, immunohistochemistry and immunoelectron microscopy. RESULTS. In the glomeruli and the epithelium of the proximal tubules of the nephron were identified changes in the ultrastructure of cells. The cells of distal segment of the nephron were not expressed by the changes. Using specific antibodies revealed that the V2-receptors localized in the cells of the collecting duct and the distal segment of the nephron, V1a-receptors - in the mesangial cells, the walls of blood vessels, the distal segment of the nephron and interstitium. CONCLUSION. For the first time presents data on the localization of V1a-and V2-receptors in the kidneys of children. The observed distribution of V-receptors in the structures of the kidney are well comparable with the results of the study of the functional response of the kidneys to vasopressin.
Key words: vasopressin, V1a-receptor, V2-receptor, kidney cortex, nephron, immunohistochemistry, immunoelectron microscopy.
ВВЕДЕНИЕ
Аргинин-вазопрессин (АВП) играет ключевую роль в регуляции объема и осмоляльности жидкостей внутренней среды у млекопитающих животных и человека. Эффект АВП в почке обусловлен его взаимодействием с Via- и У2-рецепторами. Опубликованы данные о локализации рецепторов вазопрессина в почке крысы [1-5], кролика [1, 68], мыши [6, 7], но крайне мало известно о локализации V2- и Via-рецепторов в почке человека. Методом гисторадиографии с использованием меченых агонистов установлено преимуществен-
Селивёрстова Е.В. Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН, лаборатория физиологии почки и водно-солевого обмена. 194223, Санкт-Петербург, пр. Тореза, 44, т. 552-30-86, E-mail: natochin@iephb.ru
ное распределение Via-рецепторов в коре почки человека, однако не проведена точная идентификация отделов нефрона, в которых они выявлены [6]. Методами гибридизации in situ и иммуноцито-химии с использованием маркеров для разных отделов нефрона была подтверждена экспрессия mRNA Via-рецепторов преимущественно в коре почек человека, а также выявлен небольшой уровень экспрессии в наружном мозговом веществе [9, 10]. Экспрессия mRNA Via-рецепторов обнаружена в главных и вставочных клетках собирательных трубок коры почки [9] и исключительно во вставочных клетках (А типа) собирательных трубок мозгового вещества почки [9]. Наибольший уровень экспрессии mRNA V2-рецепторов был выявлен в собирательных трубках внутреннего
слоя наружного мозгового вещества, низкий уровень - во внутреннем мозговом веществе и минимальный - в коре и наружном слое наружного мозгового вещества [9, 10]. Ярко выраженная экспрессия mRNA У2-рецепторов выявлена в толстом восходящем отделе петли Генле [10], macula densa [10], связующем отделе и в собирательных трубках коры и мозгового вещества почки [9, 10], более слабая экспрессия характерна для эпителия кортикальных отделов петель Генле и дистальных извитых канальцев. У2-рецепторы в клетках петли Генле обнаружены как на люминальных, так и на базолатеральных мембранах [10].
Участие вазопрессина в регуляции реабсорб-ции натрия и воды, продемонстрированное в экспериментах на животных, а также многочисленные данные о нарушении водно-солевого обмена при патологических процессах, выявленные у пациентов в нефрологической клинике, безусловно свидетельствуют об актуальности детального изучения локализации рецепторов аргинин-вазопрес-сина в почке у человека. Задача настоящего исследования заключалась в выяснении локализации V2- и У1а-рецепторов в структурах коры почки у детей старше 9 лет, у которых полностью сформирована реакция почек на вазопрессин и по медицинским показаниям (гломерунефрит) проводилась пункционная биопсия почек.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Обследованы 12 больных (5 девочек и 7 мальчиков) в возрасте от 9 до 17 лет, с различными морфологическими формами гломерулонефрита (длительность заболевания - до 7 лет). Мочевой синдром у большинства больных проявлялся сочетанием протеинурии (от 0,5 до 3,0 г/сут) и гематурии (у 7 детей - микрогематурия, у 5 - периодические приступы макрогематурии). В дебюте заболевания эк-страренальные проявления варажались отечным синдромом у 4 больных, во время проведения биопсии почек отечного синдрома не было. 4 больных имели в дебюте заболевания признаки системного поражения (1 - СКВ, 1 - капилляротоксический нефрит, 2 - АНЦА ассоциированный васкулит). У 5 больных отмечены периодические подъемы артериального давления. В крови больных выявлены умеренные воспалительные изменения с небольшой диспротеинемией, небольшое повышение СОЭ (10~20 мм/ч), у 2 больных в момент проведения биопсии почек наблюдалась гипоальбуминемия (25-30 г/л). 6 больных получали лечение преднизо-лоном, 2 - цитостатическую терапию (циклофосфан и циклоспорин А). Патоморфологический диагноз верифицирован по результатам биопсии почек.
Пункционную биопсию левой почки проводили под контролем УЗИ. Информационное согласие на проведение биопсии было получено. Извлеченный столбик ткани делился на четыре части для исследования методами световой, электронной микроскопии, проведения иммуногисто- и иммуноци-тохимического анализа.
Для иммуногистохимических исследований образец биоптата фиксировали в 10% нейтральном параформальдегиде в течение 20 мин и заключали в парафин. Срезы 3-5 мкм готовили на ротационном микротоме ИМ 325 («Microm Zeiss», Германия), монтировали на предметные стекла, депара-финировали, а после реакций восстановления антигенов инкубировали в растворах антител к рецепторам Via (AVP1A11-A, Alpha Diagnostic Int.) и V2 (AVPV21-A, Alpha Diagnostic Int.) в разведении 1:20 на PBS с 0,1% BSA при +40С в течение 12 ч. После отмывки на срезы наносили систему En Vision («DAKO», Германия) на 45 мин, для визуализации иммуногистоимической реакции срезы инкубировали в растворе 0,3% ДАВ (3,3-диамино-бензидина) в течение 2-3 мин, контролируя интенсивность реакции в микроскопе. Затем срезы отмывали, слабо докрашивали гематоксилином и изучали в световом микроскопе Leica DMLB 2 («Leica Microsystems», Германия).
Для ультраструктурных иследований образцы фиксировали в растворе 2,5% глютарового альдегида на 0,1 М натрий-какодилатном буфере (Sigma, рИ 7,2-7,4) в течение 2-4 ч, отмывали в том же буфере и проводили постфиксацию в растворе 1% четырехокиси осмия на 0,1 М натрий-какодилат-ном буфере. Затем образцы отмывали буфером, обезвоживали в серии спиртов возрастающих концентраций, абсолютном ацетоне и заключали в смесь эпона и аралдита. Ультратонкие срезы готовили на ультратоме Leica Ultracut UCT (Германия), собирали на медные сетки и затем контрастировали растворами уранил-ацетата и цитрата свинца. Полученные образцы изучали в электронном микроскопе Leo-910 («Leica», Германия) при ускоряющем напряжении 60 кВ.
Локализацию рецепторов вазопрессина исследовали методом иммуноэлектронной микроскопии. Образцы фиксировали при +40С в течение 2-4 ч в смеси 0,05% глютарового альдегида («Sigma-Aldrich») и 4% параформальдегида («Sigma-Aldrich») на 0,01 М фосфатно-солевом буфере (PBS, рИ 7,3), затем - в растворе 4% параформальдегида, отмывали от фиксаторов PBS (2 х 15 мин), обезвоживали в серии спиртов (30, 50, 70, 96, 100%), пропитывали и заключали в смолу LR-White (Agar). Ультратонкие срезы (50 нм) получали на ультрато-
ме Leica Ultracut UCT («Leica», Germany) и переносили на покрытые бутваром никелевые сетки. При проведении иммуноцитохимической окраски сетки сначала инкубировали на каплях PBS с 1% бычьим сывороточным альбумином (AURION BSA-cTM, Aurion) в течение 30 мин, затем переносили на капли с раствором первичных антител к рецепторам Via (AVPR1A, Lifespan Biosciences) и V2R (Affinity Bioreagents) в разведении 1:10 на 0,01М PBS с 0,1% AURION BSA-cTM (PBS-BSA). В качестве контроля использовали антитела к ак-вапорину AQP1 (AQP11-A, Alpha Diagnostic Int.) в том же разведении или пропускали обработку первыми антителами. После инкубации в течение 2 ч при комнатной температуре сетки отмывали на каплях PBS-BSA и инкубировали в течение 1 ч в растворе коньюгата коллоидного золота Protein-Agold (Sigma) в разведении 1:25 на PBS-BSA. После отмывки в PBS-BSA и дистиллированной воде срезы контрастировали уранил-ацетатом и цитратом свинца и исследовали в электронном микроскопе LEO 910 (LEO Electron Microscopy Group, Germany) при 60 кВ. Локализацию рецепторов вазопрессина определяли по распределению метки коллоидного золота (Protein-A-gold).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Исследование тканей почки у 8 обследованных детей не выявило интерстициального фиброза и атрофии канальцевого эпителия. Морфологические диагнозы у этих больных были: IgA-нефропатия (5 пациентов), гломерулонефрит с минимальными изменениями (1), капилляротоксический нефрит (1), системная красная волчанка - III класс (1). Установлено преимущественное поражение клубочков с различной степенью дистрофии проксимальных канальцев. У 4 больных выявлен фиброз интерсти-ция с различной степенью атрофии канальцев. Морфологические диагнозы - АНЦА ассоциированный васкулит (2 больных) и мембранозно-про-лиферативный гломерулонефрит (2). Клинико-биохимическое и клинико-физиологическое обследование детей показало, что у них эффективно реализуется гомеостатическая функция почек (таблица). Это обеспечивает сохранение на уровне нормы концентрации органических и неорганических компонентов сыворотки крови. Для оценки осморегулиру-ющей функции почек была проведена проба С.С. Зимницкого. Нарушения функции почек по осмотическому разведению и концентрированию мочи выявлено не было. У обследованных детей (n=12) максимальное значение удельной плотности мочи составило
1,020±0,005, а минимальное - 1,006±0,003, что свидетельствует о достаточной сохранности осморе-гулирующей функции почек.
Ультраструктурные изменения, вызванные гло-мерулонефритом, выявлены в клубочках и эпителии проксимальных канальцев нефрона. Обнаружена в разной степени выраженная деформация и редукция щеточной каймы, выпячивание апикальной цитоплазмы клеток и уменьшение просвета канальцев, повышенная вакуолизация цитоплазмы, утолщение базальной мембраны. В эпителии дис-тальных отделов нефрона и собирательных трубок не найдено значительных морфологических изменений.
Иммуногистотохимическим методом У1а-ре-цепторы обнаружены в стенках сосудов (рис. 1, а,
в), в клетках мезангия клубочков (см. рис. 1, а, б,
г), а также в интерстициальных клетках (см. рис. 1, а, г). Слабое окрашивание У1а-рецепторов выявлено в собирательных трубках, причем только в отдельных клетках (см. рис. 1, а, б, г). Яркая метка обнаружена в немногочисленных профилях канальцев нефрона вблизи клубочков, отличающихся от собирательных трубок более высоким эпителием (см. рис. 1, г). Они представляют собой, по-видимому, профили канальцев дистального сегмента нефрона. В этих канальцах метка локализована во всех клетках, в основном на апикальных мембранах (см. рис. 1, в). Метка к У2-рецепто-рам обнаружена, главным образом, в клетках собирательных трубок и, в меньшей степени, в клетках дистального сегмента нефрона. У2-рецепто-ры выявлены во всех типах клетках собирательных трубок, преимущественно в цитоплазме клеток (рис. 1, е), хотя четкая метка видна и на апикальных мембранах (рис. 1, д). В клетках проксимальных канальцев У1а- и У2-рецепторы не обнаружены (см. рис. 1, а-е).
Результаты иммуноцитохимических исследований также указывают на преимущественную ло-
Параметры сыворотки крови и мочи обследованных детей
Параметр Ед. измерения Концентрация, X±m Норма*
Общий белок г/л 74,2±2,4 62-82
Альбумин г/л 47,9±0,8 37-52
Мочевина ммоль/л 6,5±0,5 2,5-8,3
Креатинин ммоль/л 0,08±0,01 0,035-0,11
Холестерин г/л 5,1±0,4 4,9-8,2
Ь-липопротеиды % 47,6±8,0 34,6-50,3
Натрий ммоль/л 141,0±0,5 137-147
Калий ммоль/л 4,6±0,1 3,69-5,12
Кальций общий ммоль/л 2,31±0,07 2,50-2,87
Фосфор неорг. ммоль/л 1,6±0,1 0,65-1,62
Клиренс креатинина мл/мин/ 1,73 м2 94±5 80-150
* - Значение нормы по Д.Б. Сыромятникову [11].
Рис. 1. Иммуногистохимическое локализация Via- (а - г) и V2 (д, е)-рецепторов вазопрессина в канальцах почки человека. ДК - дистальный каналец; КЛ - клубочек; ПК - проксимальный каналец; С - сосуд; СТ -собирательная трубка; стрелками указаны места наибольшего скопления оптически плотной метки. Масштабная линейка - 10 мкм.
Рис. 2. Локализация рецепторов вазопрессина Via (а, в), V2 (б,г) и аквапорина 1 (д, е) методом иммуноэлектронной микроскопии в клетках канальцев почки человека: собирательных трубок (а, е), проксимальных канальцев (в, г, д), дисталь-ных канальцев (б). БМ - базальная мембрана; М - митохондрии; МП - межклеточное пространство; ЩК - щеточная кайма; Я - ядро; метка - электронно-плотные гранулы. Масштабная линейка - 1 мкм.
кализацию У2-рецепторов в клетках собирательных трубок (рис. 2, а) с преобладающим распределением в цитоплазме, хотя метка отмечалась на базолатеральной и, в меньшей степени, на апикальной мембране эпителиоцитов (см. рис. 2, а). Им-муноположительный ответ на У2-рецепторы выявлен и в клетках проксимальных канальцев, но в отличие от собирательных трубок метка найдена на базолатеральных и апикальных мембранах, в инвагинациях апикальной мембраны и в межклеточном пространстве (рис. 2, в). В некоторых случаях метка к У2-рецепторам была найдена в клетках дистальных канальцев. Метка к У1а-рецепто-рам обнаружена в дистальных отделах нефрона и в клетках проксимальных отделов (рис. 2, б, г). У1а-рецепторы были локализованы в основном на апикальных и базолатеральных мембранах клеток (см. рис. 2, б, г). Метка к специфическому каналу для воды - аквапорину 1 (Л0Р1) - обнаружена только на апикальных мембранах клеток проксимальных канальцев (рис. 2, д).
ОБСУЖДЕНИЕ
Одно из важнейших функциональных назначений почек состоит в поддержании в строгих границах нормальных значений физико-химических параметров жидкостей внутренней среды. К ним относится онкотическое и осмотическое давление крови, концентрация физиологически важных ионов. Данные клинико-биохимического и клинико-физио-логического обследования детей с гломерулонеф-ритом, которые явились объектом исследования, не отличались от показателей у здоровых детей (таблица). В сыворотке крови концентрация белка, мочевины, креатинина, ионов находилась в пределах нормальных значений [11]. Расчет клиренса креатинина как меры скорости клубочковой фильтрации и оценка осмотического разведения и концентрирования мочи по данным пробы С.С. Зим-ницкого свидетельствовали о сохранности функций основных структур почки.
В исследованиях, проведенных методами им-муногистохимии и иммуноэлектронной микроскопии, получены сопоставимые результаты и показано, что У1а-рецепторы локализованы в клубочке, стенке сосудов, в клетках проксимальных и дистальных отделов нефрона, собирательных трубок и интерстиция коркового вещества почки. Подобное распределение У1а не было выявлено аналогичными методами в исследованиях на интакт-ных образцах биопсийного материала, полученного из почек человека, удаленных вследствие опухолевого процесса [6]. Локализация У1а-рецепторов в клетках собирательных трубок коры и мозгово-
го вещества почки человека была описана ранее лишь с использованием молекулярно-генетических методов [9, 10]. Известно, что У1а-рецепторы, локализованы главным образом в клубочке, сосудах [6, 12] и собирательных трубках почек млекопитающих животных [1, 4, 6-8]. Экспрессия У1а-рецепторов в клетках проксимальных извитых и прямых канальцев, а также в клетках толстых восходящих петель Генле была на очень низком уровне по сравнению с клубочками и собирательными трубками, функциональное значение экспрессии рецепторов в этих отделах нефрона неясно [13]. Установлено, что при хроническом метаболическом ацидозе у крыс повышается экспрессия mRNA У1а-рецепторов в собирательных трубках, что позволяло предположить их роль в регуляции кислотно-основного равновесия [4].
Обнаруженная в нашей работе преимущественная локализация У2-рецепторов в клетках собирательных трубок почек у больных с гломерулонеф-ритом хорошо коррелирует с данными изучения почек здорового человека молекулярно-генетическими методами [9, 10]. Цитоплазматическое распределение метки к У2-рецепторам подтверждается исследованиями внутриклеточной локализации рецепторов возопрессина в почке животных [14, 15], однако, ранее не было установлено для человека. Выявленная нами локализация У2-рецепторов в клетках дистального сегмента нефрона ранее была установлена только молекулярно-генетическими методами [9, 10]. Иммуноположительный ответ на У2-рецепторы, обнаруженный в клетках проксимальных канальцев, может быть объяснен неспецифичностью иммунной реакции или захватом профильтровавшегося в клубочках вазопрессина и его рецепторов клетками проксимальных отделов не-фрона.
В регуляции осмотического концентрирования мочи почкой ведущую роль играет аргинин-ва-зопрессин и стимулируемые им рецепторы [16]. Функциональное значение различных типов рецепторов вазопрессина (У1а, У1Ъ и У2) неодинаково в пределах одного органа, а иногда - одного типа тканей или клеток. В частности, увеличение осмотической проницаемости зависит от стимуляции ва-зопрессином У2-рецепторов, которая запускает каскад реакций. Они включают активацию адени-латциклазы, образование внутриклеточного цАМФ, стимуляцию протеинкиназы А и встраивание в люминальную мембрану клеток собирательных трубок водных каналов (аквапорин 2) [17]. Одно из установленных значений У1а-рецепторов состоит в модуляции эффекта У2-рецепторов [18]. В частности, стимуляция этих рецепторов в клетках
начальной части дистального сегмента нефрона снижает ответ на активацию У2-рецепторов [19].
Результаты проведенного исследования согласуются с данными литературы о функциональной роли рецепторов вазопрессина в регуляции транспорта натрия и воды [4, 20-22]. Выявленное нами распределение рецепторов вазопрессина в почке детей с гломерулонефритом качественно не отличается от экспрессии У1а- и У2-рецепторов у млекопитающих животных по данным экспериментальных исследований [1, 2, 5, 15, 20, 23].
Таким образом, полученные результаты можно рассматривать как свидетельство сходства распределения рецепторов вазопрессина в почке у обследованных детей и млекопитающих животных. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что у здоровых детей, начиная со 2-го года жизни [24], а также при ряде форм патологии [25], в том числе при начальных стадиях гломерулонефрита, эффективно осуществляется функция почек, связанная с осмотическим концентрированием мочи. В то же время описаны наследственные заболевания, при которых почка становится резистентной к ва-зопрессину, в результате развивается несахарный диабет [26]. Следовательно, можно предполагать, что полученные данные отражают картину распределения рецепторов вазопрессина в почке у здорового человека и сохранение этой картины у обследованных детей, поскольку не найдено серьезных дефектов осморегулирующей функции на этой стадии заболевания.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В настоящем исследовании методами имму-ногисто- и иммуноцитохимии впервые показана четкая локализация У1а- и У2-рецепторов в структурах почки человека. У1а-рецепторы выявлены в клубочке, стенке сосудов, интерстиции, клетках дистальных сегментов нефрона и в частности, в толстом восходящем отделе петли Генле; У2-рецепторы обнаружены в клетках дистальных сегментов нефрона и собирательных трубок. Результаты демонстрируют достаточную эффективность осморегулирующей функции почек у обследованных детей. Это возможно только при адекватно работающих всех компонентах системы осморегулирующего рефлекса, секреции вазопрес-сина и нормальной реакции на него всех структур почки, включая У-рецепторы. Сказанное позволяет заключить, что выявленная нами локализация У1а- и У2-рецепторов в клетках различных отделов канальцев почек детей с гломерулонеф-ритом может свидетельствовать о сохранении у них функционирующих рецепторов, опосредующих
участие вазопрессина в осмотическом концентрировании мочи.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Ammar A, Roseau S, Butlen D. Pharmacological characterization of V1a vasopressin receptors in the rat cortical collecting duct. Am J Physiol 1992; 262 (4 Pt 2): F546-F553
2. Nonoguchi H, Owada A, Kobayashi N et al. Immunohistochemical localization of V2 vasopressin receptor along the nephron and functional role of luminal V2 receptor in terminal inner medullary collecting ducts. J Clin Invest 1995; 96 (4): 1768-1778
3. Zhuo JL. Renomedullary interstitial cells: a target for endocrine and paracrine actions of vasoactive peptides in the renal medulla. Clin Exp Pharmacol Physiol 2000; 27 (7): 465473
4. Tashima Y, Kohda Y, Nonoguchi H et al. Intranephron localization and regulation of the V1a vasopressin receptor during chronic metabolic acidosis and dehydration in rats. Pflugers Arch 2001; 442 (5): 652-661
5. Sarmiento JM, Ehrenfeld P, Aсazco CC et al. Differential distribution of the vasopressin V receptor along the rat nephron during renal ontogeny and maturation. Kidney Int 2005; 68 (2): 487-796
6. Arpin-Bott MP, Kaissling B, Waltisperger E et al. Historadioautographic localization of oxytocin and V1a vasopressin binding sites in the kidney of developing and adult rabbit, mouse and merione and of adult human. Exp Nephrol 2002; 10 (3): 196-208
7. Gonzalez CB, Figueroa CD, Reyes CE et al. Immunolocalization of V1 vasopressin receptors in the rat kidney using anti-receptor antibodies. Kidney Int 1997; 52 (5):1206-1215
8. Burnatowska-Hledin MA, Spielman WS. Vasopressin V1 receptors on the principal cells of the rabbit cortical collecting tubule. Stimulation of cytosolic free calcium and inositol phosphate production via coupling to a pertussis toxin substrate. J Clin Invest 1989; 83 (1): 84-89
9. Carmosino M, Brooks HL, Cai Q et al. Axial heterogeneity of vasopressin-receptor subtypes along the human and mouse collecting duct. Am J Physiol Renal Physiol 2006; 292 (1): F351-F360
10. Mutig K, Paliege A, Kahl T et al. Vasopressin V2 receptor expression along rat, mouse, and human renal epithelia with focus on TAL. Am J Physiol Renal Physiol 2007; 293 (4): F1166-F1177
11. Сыромятников ДБ. Биохимические нормы в педиатрии. Сотис, СПб., 1996, 94
12. Ostrowski NL, Young 3d WS, Knepper MA, Lolait SJ. Expression of vasopressin V1a and V2 receptor messenger ribonucleic acid in the liver and kidney of embryonic, developing, and adult rats. Endocrinology 1993; 133 (4), 18491859
13. Terada Y, Tomita K, Nonoguchi H, Yang T, Marumo F. Different localization and regulation of two types of vasopressin receptor messenger RNA in microdissected rat nephron segments using reverse transcription polymerase chain reaction. J Clin Invest 1993; 92 (5): 2339-2345
14. Robben JH, Knoers NVAM, Deen PMT. Regulation of the vasopressin V2 receptor by vasopressin in polarized renal collecting duct cells. Mol Biol Cell 2004; 15 (12): 5693-5699
15. Fenton RA, Brond L, Nielsen S, Praetorius J. Cellular and subcellular distribution of the type-2 vasopressin receptor in the kidney. Am J Physiol Renal Physiol 2007; 293 (3): F748-F760
16. Knepper M, Hoffert J, Packer R, Fenton R. Urine concentration and dilution. In: Brenner BM, ed. Brenner and Rector's. The Kidney. 9nd ed. WB Saunders, Philadelphia, 2008; 308-329
17. Morel F. Sites of hormone action in the mammalian nephron. Am J Physiol1981; 240 (3): F159-F164
18. Trinder D, Phillips PA, Stephenson JM et al. Vasopressin V1 and V2 receptors in diabetes mellitus. Am J Physiol Endocrinol Metab 1994; 266: E217-E223
19. Goncharevskaya OA, Shakhmatova EI, Natochin YV. Modulation of the effect of arginine-vasopressin on water and ion transport in the newt early distal tubule and frog urinary bladder by Vl-antagonists. Eur J Physiol 1995; 430: 1004-1011
20. Birnbaumer M, Antaramian A, Themmen AP, Gilbert S. Desensitization of the human V2 vasopressin receptor. Homologous effects in the absence of heterologous desensitization. J Biol Chem 1992; 267 (17): 11783-11788
21. Bankir L, Fernandes S, Bardoux P et al. Vasopressin-V2 receptor stimulation reduces sodium excretion in healthy humans. J Am Soc Nephrol 2005; 16 (7):1920-1928
22. Cowley AW Jr. Control of the renal medullary circulation by vasopressin V1a and V2 receptors in the rat. Exp Physiol 2000; 85: 223S-231S
23. Masilamani S, Knepper MA, Burg MB. Urine
concentration and delution. In Brenner BM, ed.: The kidney, 6th ed. Philadelphia, WB Saunders, 2000; 595-635
24. Наточин ЮВ Клиническая физиология почек у детей. В: Папаян АВ, Савенкова НД, ред. Клиническая нефрология детского возраста. Левша, СПб., 2008; 19-56
25. Кузнецова АА, Наточин ЮВ. Исследование развития функций почек и их регуляции у детей на фоне патологического процесса. Журн эвол биохим и физиол 1995; 41 (3): 277-284
26. Тареева ИЕ, Игнатова МС. Канальцевые дисфункции. В: Тареева ИЕ, ред. Нефрология: руководство для врачей. Медицина, М., 2000; 320-328
Поступила в редакцию 11.11.2009 г.
Принята в печать 23.11.2009 г.
