CC BY
199
УДК 615.27:615.015.11
ИЗУЧЕНИЕ IN VIVO-IN VITRO КОРРЕЛЯЦИИ ДЛЯ ПРОЛОНГИРОВАННОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ТРИМЕТАЗИДИНА
Г.В. Раменская12, И.Е. Шохин12, К.С. Давыдова3, В.С. Шлыков1, А.А. Литвин14, С.В. Гусейнова1,
1ГОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздравсоцразвития России, 2ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России, г. Москва,
3Филиал «Клиническая фармакология» НЦ БМТ РАМН, г. Москва,
4ГУ «Научно-исследовательский институт фармакологии им. В.В. Закусова РАМН», г. Москва
Раменская Галина Владиславовна - e-mail: ramenskaia@maii.ru
Статья посвящена актуальному вопросу современной фармации - изучению in vivo-in vitro корреляции пролонгированного лекарственного триметазидина. Изучена его кинетика растворения и фармакокинетические свойства. Установлена корреляция уровня В для изучаемого препарата.
Ключевые слова: IVIVC, биофармация, биоэквивалентность, растворение.
The paper is devoted to actual topic of modern pharmacy - IVIVC evaluation for extended release solid oral dosage form of trimethazidine. Its pharmacokinetic properties and dissolution profile were studied. Level B IVIVC was established for evaluated drug.
Key words: IVIVC, biopharmacy, bioequivalence, dissolution.
Введение
В настоящее время установление in vivo-in vitro корреляции (IVIVC) для твердых дозированных лекарственных форм стало одним из ключевых трендов современной биофармации. Выявления достоверной in vivo-in vitro корреляции может позволить полностью или частично заменить фармакокинетические исследования на здоровых добровольцах по изучению кинетики растворения препарата in vitro [1].
Существует несколько определений IVIVC. В общей фармакопейной статье 1088 «Оценка лекарственных форм in vivo и in vitro» Фармакопеи США (USP 32-NF 27) приводится определение: «IVIVC - это установление количественной взаимосвязи между биологическим (Cmax или AUC) и физико-химическим свойством (профиль растворения) лекарственной формы» [2]. В документах FDA дано сходное определение: «IVIVC - это математическая модель,
описывающая взаимосвязь между каким-либо параметром in vitro твердой дозированной лекарственной формы для внутреннего применения (обычно скоростью или степенью высвобождения) и соответствующим параметром in vivo (обычно концентрацией вещества в плазме крови)» [3].
Исследования IVIVC преимущественно применяются для лекарственных форм с модифицированным высвобождением, поскольку при этом обеспечивается точность исследований и получение более предсказуемых и достоверных результатов. Это связано с тем, что высокая вероятность установления IVIVC существует в том случае, если процессы высвобождения действующего вещества из лекарственной формы и его растворения являются лимитирующей стадией его попадания в системный кровоток [4]. Помимо лекарственной формы на возможность выявления IVIVC влияют биофармацевтические свойства действующего вещества согласно биофармацевтической классификационной системе (БКС). Лекарственные вещества в БКС подразделяются на 4 класса: 1 («высокая» растворимость, «высокая» проницаемость), 2 («низкая» растворимость, «высокая» проницаемость), 3 («высокая» растворимость, «низкая» проницаемость), 4 («низкая» растворимость, «низкая» проницаемость) [5]. Вероятность установления IVIVC для каждого из классов БКС приведена в таблице 1.
ТАБЛИЦА 1.
Вероятность установления IVIVC для лекарственных форм, содержащих ЛВ из различных классов БКС
Класс БКС ВероятностьIVIVC
1 IVIVC нехарактерна
2 IVIVC возможна
3 IVIVC нехарактерна
4 Небольшая вероятность IVIVC
Обычно выделяют 3 уровня IVIVC - А, В, С [3]. Уровень корреляции А является самым высоким и отражает взаимосвязь вида «точка-к-точке» между параметрами скорости высвобождения в условиях in vitro и скоростью всасывания действующего вещества из твердых дозированных лекарственных форм in vivo. При установлении корреляции типа В выявляется взаимосвязь между суммарными параметрами in vitro и in vivo - средним временем высвобождения (MDT) и средним временем удерживания (MRT). Данный инструмент также достаточно эффективно отражает связь между абсорбцией лекарственного вещества в ЖКТ и высвобождением из лекарственной формы в условиях in vitro. Корреляция уровня С - это взаимосвязь между одной точкой профиля растворения (T50%, T90%) и одним фармакокинетическим параметром (Cmax, Tmax, AUC). Такая корреляция является слабой, поэтому ее применение в прогнозировании поведения лекарственного средства в условиях in vivo ограничено. Выделяют также множественную С-корреляцию, которая представляет собою корреляцию уровня С, установленную по нескольким временным точкам профиля высвобождения и фармакокинетической кривой. Однако в случае ее выявле-
ния существует высокая вероятность корреляции уровня А, имеющей большую практическую значимость.
Материалы и методы
В качестве объекта исследования было выбрано оригинальное лекарственное средство триметазидина -«Предуктал МВ» («Сервье», Франция), таблетки с модифицированным высвобождением, покрытые оболочкой, 35 мг. Структурная формула триметазидина приведена на рисунке 1.
РИС. 1.
Структурная формула триметазидина.
время, час
РИС. 2.
Профили растворения препарата «Предуктал МВ».
1 - фосфатный буферный раствор рН 6,8; 2 - 0,01 М раствор кислоты хлороводородной; 3 - ацетатный буферный раствор рН 4,3.
Кинетику растворения препарата изучали согласно методическим рекомендациям «Оценка биоэквивалентности лекарственных средств» МЗиСР РФ (2008 г.) [6]. Испытание «Растворение» проводили на аппарате «Sotax AT7 smart» (Швейцария), прибор «Лопастная мешалка» при 50 об./мин. Среды растворения - 0,01 М раствор хлороводородной кислоты, ацетатный буферный раствор рН 4,3, фосфатный буферный раствор рН 6,8, объем среды растворения - 500 мл, температура - 37оС. Последовательный отбор проб проводили спустя 1, 2, 3, 4 и 6 ч по 20 мл, причем такой же объем соответствующего буферного раствора добавляли в среду растворения для сохранения объема. Поученные пробы охлаждали при комнатной температуре в течение 20-30 мин., затем фильтровали через мембранные пластины «Миллипор» с диаметром пор 0,45 мкм. Количественный анализ проводили методом УФ-спектрофотометрии, измеряя оптическую плотность проб на спектрофотометре «Lambda
25 Perkin Elmer» (США) при максимуме поглощения при длине волны 270 нм для фосфатного буферного раствора рН 6,8, и 268 нм для двух других сред растворения. Для получения статистически достоверных результатов испытание проводили 12 раз для каждого препарата. Достоверность результатов испытания определяли путем расчета относительных стандартных отклонений (RSD) для каждой временной точки, которые не превышали 10%. По данным кинетики растворения исследуемого препарата была проведена линеаризация профиля высвобождения с помощью уравнения кинетики 1-го порядка, на основании которого был рассчитан параметр MDTm vitro- Профили растворения препарата «Предуктал МВ» приведены на рисунке 2.
Фармакокинетические свойства лекарственного средства изучали при проведении исследований биоэквивалентности препаратов триметазидина, в которых «Предуктал МВ» использовался в качестве препарата сравнения. Исследование получило разрешение в соответствии с установленной законом процедурой. Биоэквивалентность изучали на 18 здоровых добровольцах. Дизайн-испытания - рандомизированное, открытое, перекрестное исследование. Отбор проб крови у добровольцев производили спустя 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 8, 12 и 24 ч после приема препарата. Количественное определение триметазидина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ с УФ-спектрофотометрическим детектором при длине волны 270 нм. В ходе исследования были рассчитаны следующие фармакокинетические параметры: AUC0-t, Cmax, Tmax, MRTin vivo, а также соотношение Cmax/AUC0-t. Достоверность результатов испытания определяли путем расчета коэффициентов вариации (CV) для каждого среднего значения соответствующего параметра.
Результаты и их обсуждение
Действующее вещество препарата (триметазидин) относится к 1-му классу БКС («высокая» растворимость, «высокая» проницаемость). IVIVC для препаратов, содержащих ЛВ из 1-го класса БКС, характерна в том случае, если скорость опорожнения желудка превышает скорость растворения в испытаниях in vitro [4]. Для установления IVIVC оценивали взаимосвязь между суммарным фармакокинетическим параметром MRTin vivo и соответствующим параметром высвобождения MDTin vitro, то есть в ходе исследования проводили выявление корреляции уровня В. Фармакокинетические параметры и среднее время высвобождения препарата «Предуктал МВ» приведены в таблице 2. Корреляционная зависимость между изучаемыми параметрами приведена на рисунке 3.
ТАБЛИЦА 2.
Фармакокинетические параметры и среднее время высвобождения препарата «Предуктал МВ»
C '“•max' нг/мл T ч max AUC0-t, нг*ч/мл Cmax/ AUC0-t, ч-1 MRTin vivo, ч MDTin vitro, мин.
64,2 2,9 743,7 0,087 10,198 6,721
7,5-,
7,0-
6,5-
6,0-
ТГ0“
Т00 ' Щ”
MRT(4ac) in vivo
РИС. 3.
Корреляционная зависимость между параметрами MRT,„ vivo и MDT,„ vitro для препарата «Предуктал МВ».
ТАБЛИЦА 3.
Параметры уравнения корреляционной зависимости
Коррелируемые параметры Параметры уравнения
a b r n p
In vivo MRTin vivo, ч
In virto MDTin vit^ мин. 1,089 0,766 0,967 18 0,0001
Основные параметры уравнения корреляционной зависимости приведены в таблице 3.
Рассчитанный коэффициент корреляции r составил 0,97, при этом критерий приемлемости для установления IVIVC составляет 0,85. Таким образом, в результате проделанной работы установлены математические зависимости между параметрами экспериментальной фармакокинетики исследуемого препарата и скоростью его высвобождения in vitro.
Заключение
Таким образом, на основании комплексной научной оценки полученных экспериментальных данных сделано обоснованное заключение о наличии IVIVC уровня В для пролонгированных лекарственных средств триметазидина. Коэффициент корреляции r составил 0,97. Поскольку данная корреляция была установлена для оригинального лекарственного средства «Предуктал МВ», полученные данные могут использоваться для рекомендации отказа от фармакокинетических исследований биоэквивалентности и замены их на изучение сравнительной кинетики растворения для лекарственных средств триметазидина в лекарственной форме «таблетки с модифицированным высвобождением».
ЕЗ
ЛИТЕРАТУРА
1. Cardot J.M., Beyssac E., Alric M. In Vitro-In Vivo Correlation: Importance of Dissolution in IVIVC. //Dissolution Technologies. Hockessin DE. USA. 2007. V. 14. № 1. Р. 15-19.
2. In Vitro and In Vivo Evaluation of Dosage Forms <1088>. United States Pharmacopeia and National Formulary USP 32-NF 27; United States Pharmacopeia! Convention. Inc.: Rockville MD. 2008.
3. Extended Release Oral Dosage Forms: Development, Evaluation, and Application of In Vitro/In Vivo Correlations; Guidance for Industry; U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), U.S. Government Printing office: Washington DC. September. 1997.
4. Chilukuri D.M., Sunkara M., Young D. Pharmaceutical product development. In vitro-in vivo correlation / Informa Healthcare. USA NY. 2007. 205 р.
5. Lindenberg M., Kopp S., Dressman JB. Classification of orally administered drugs on the World Health Organization Model list of Essential Medicines according to the biopharmaceutics classification system. // Eur J Pharm Biopharm. 2004. № 58. Р. 265-278.
6. Оценка биоэквивалентности лекарственных средств. Методические указания. Под ред. В.Г. Кукеса, Фисенко В.П. Москва. 2008.
