CC BY
27
Изучение экспрессии Толл-подобных рецепторов при герпесвирусных инфекциях у детей грудного возраста
С.Г.Магеррамова
Институт Генетических ресурсов НАНА, г.Баку
Индивидуальная восприимчивость организма к инфекциям определяется патогенностью микроорганизмов, факторами окружающей среды и состоянием иммунной системы.
В- и Т-лимфоциты, осуществляющие адаптивный иммунный ответ, распознают патогенны, используя высокоаффинные рецепторы. Однако, развитие адаптивного иммунитета обычно происходит достаточно медленно, так как предполагает активацию, пролиферацию лимфоцитов и синтез ими белков: цитокинов и иммуноглобулинов. Более быстрое развитие иммунных реакций обеспечивается врожденным иммунным ответом, который распознает патогенны при помощи специальных рецепторов более широкой специфичности, чем рецепторы лимфоцитов [1].
Эти рецепторы распознают молекулярные структуры, общие для целых групп инфекционных возбудителей, в первую очередь, к ним относятся Толл-подобные рецепторы (ТЬЯ). ТЬЯ взаимодействуют с молекулярными структурами, которые не существуют у человека, но присутствуют на патогенах [2]. ТЬЯ широко распространены в клетках макроорганизма. Они индуцируют активацию и экспрессию специфических генов, экспрессия которых контролирует механизмы, обеспечивающие деструкцию внедряющихся патогенов. В результате активации через ТЬЯ возникает широкий спектр биологических реакций - от индукции синтеза провоспали-тельных цитокинов и интерферонов (обеспечивающих реализацию реакций врожденного иммунитета) до экспрессии молекул, которые способствуют активации Т-лимфоцитов и стимулируют развитие адаптивного иммунитета [3].
Широкий спектр лигандов ТЬЯ и представленность этих рецепторов на многих клетках способствует вовлечению ТЬЯ в патогенез многих заболеваний. Дефекты в системе ТЬЯ, такие, как нарушения распознавания лигандов, экспрессии ТЬЯ, трансдукции сигнала, выработки эффекторных молекул, а также полиморфизм генов ТЬЯ могут приводить к развитию тяжелых инфекционных заболеваний (сепсис, локально-инфекционно-воспалительные
заболевания (ЛИВЗ), бронхолегочные патологии, аллергии и т.д.) [4].
Дефекты молекул, участвующих в трансдук-ции сигнала от ТЬЯ, лежат в основе повышенной чувствительности к инфекциям. Так, дети с мутацией в гене, кодирующем 1ЯАК-4-киназу, с раннего возраста страдают тяжелыми пиогенными инфекциями, вызванными грамм-положительными микроорганизмами. В то же время, чрезмерная активация сигнального каскада от ТЬЯ ассоциирована с развитием сепсиса. В связи с этим, необходимы надежные методы оценки компонентов системы ТЬЯ для выявления иммунодефицитных состояний, связанных с нарушениями функциональной активности ТЬЯ, которые могут быть воспроизведены в условиях стандартной клинической лаборатории.
В настоящее время в структуре врожденной инфекционной патологии возросла роль герпе-свирусных инфекций, ведущими из которых являются цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) и инфекция, вызванная вирусом простого герпеса 1,2 типа (ВПГИ).
Учитывая, что в реализации инфекционного процесса ведущая роль отводится состоянию защитных сил организма, изучению иммунного статуса новорожденных при ЦМВИ и ВПГИ посвящено большое количество исследований, касающихся преимущественно адаптивного иммунитета.
В последние годы накапливаются сведения, свидетельствующие о том, что дефекты в системе ТЬЯ- снижение их экспрессии и функции в силу мутаций/полиморфизмов или эпигенетических нарушений регуляции ТЬЯ лежит в основе развития иммунодефицитных состояний, реализации и генерализации инфекции [5].
В этой связи, актуальным является изучение ключевых механизмов иммунопатогенеза врожденной ЦМВИ и ВПГИ, обуславливающих супрессию иммунного ответа и, следовательно, приводящих к генерализации и
неблагоприятному исходу этих заболеваний.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ. Под наблюдением находи-
лось 95 новорожденных. Врожденная генерализованная герпесвирусная инфекция (69 детей):
Врожденная генерализованная цитомегалови-русная инфекция (ЦМВИ) I группа (47 детей). Врожденная генерализованная герпетическая инфекция (ВПГИ) II группа (22 ребенка); Врожденная генерализованная ЦМВИ с полной клинической симптоматикой подгруппа 1.1 (29 детей); Врожденная генерализованная ЦМВИ с неполной клинической симптоматикой подгруппа 1.2 (18 детей); Группа контроля (26 здоровых новорожденных).
Наблюдаемые дети были распределены на 3 группы. I группа- дети с врожденной генерализованной ЦМВИ были разделены на две подгруппы: подгруппа 1.1- с типичной генерализованной формой с полной клинической симптоматикой и подгруппу 1.2- с типичной генерализованной формой с неполной клинической симптоматикой; II группа- дети с врожденной ВПГИ; контрольная группа -здоровые новорожденные.
Диагноз ЦМВИ и ВПГИ ставился при выявлении ДНК вирусов в крови и в моче методом ПЦР в режиме реального времени с использованием программируемого амплификатора с флуоресцентной системой детекции «Rotor-Gene» 6000 («Corbet Researc», Австралия) и наборов «Ампли-Сенс» для флуоресцентной детекции, а также при выявлении специфических антител класса IgM в сыворотке крови у ребенка к ЦМВ и ВПГ 1,2 типа и при нарастании титров IgG в динамике, определяемых методом ИФА с использованием стандартных наборов реактивов фирмы «Вектор-Бест» (г.Новосибирск).
Определение популяционного и субпопуляци-онного состава лимфоцитов и моноцитов периферической крови: FITC (изотиоцианат флуоресце-ина)- меченые CD3+, CD4+, CD8+, CD 16+, CD19+, CD282+, CD284+, CD286+ и PE (фико-эритрин)-меченые CD95+, CD25+, CD69+, CD14+ проводили методом одно- и двухпараметриче-ского фенотипирования с использованием реагентов фирмы Immunotex (Франция), Caltag (США), HyCultbiotechnology (Нидерланды); количества лимфоцитов, вступивших в апоптоз- с использованием диагностического набора, включающего Аннексин-V, меченый FITC и пропидий йодид (PI) (Catlag, США) по прилагаемому протоколу. Концентрацию IL-4, IL-6, IFN-y, IFN-a в сыворотке крови определяли методом ИФА с помощью набора реагентов «Протеиновый контур» (г.Санкт-Петербург), IL-8- с использованием тест-систем «Bender Medsistems» (Австрия), IL-12- с помощью тест-
систем «Biosource» (США). Определение содержания MCP-1- с использованием тест-систем «Bender Medsistems» (Австрия).
Определение альтернативных вариантов генов TLR проводили методом ПЦР с последующим рестрикционным анализом тест-системами ГосНИИ Генетика (Москва) по программе, рекомендованной производителем набора.
Для формирования базы данных и при проведении статистического исследования эмпирических данных использовались возможности табличного процессора Excel 2003 и пакетов прикладных программ («Мегастат» и Statistica 6.0). При определении статистической обоснованности различия исследуемых групп применялся критерий Манна-Уитни для независимых групп и критерий Вилкоксона для зависимых групп. Показатели описательной статистики представлены в виде выборочной средней и стандартного отклонения. Для анализа различия частот в двух независимых группах применялся точный критерий Фишера-Ирвина. Для оценки тесноты связи отдельных показателей использовался коэффициент корреляции по Спирмену (Реброва О.Ю., 2002).
Для выявления значимых признаков соответствующих клиническим группам был применен метод «деревьев решений», позволяющий выявить следственную связь между признаками и получить точки раздела клинических групп (CutOff). Для формирования диагностических правил проводился расчет точек.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. Анализ лабораторных данных выявил, что большинство наблюдаемых детей родились доношенными (I группа - 63%, II группа -86,4%), недоношенными при сроке гестации 3537 недель родились 37% новорожденных в I группе и 13,6% - во II группе. У всех матерей наблюдаемых детей с врожденной генерализованной цитомегаловирусной и герпетической инфекцией отмечался
отягощенный акушерско-гинекологический
анамнез с одинаковой частотой во всех группах: у 78,3% матерей выявлялись гинекологические заболевания (преимущественно эндоцервицит, аднексит), у 71% женщин имели место неблагоприятные исходы предыдущих беременностей: преждевременные роды, самопроизвольные аборты в ранние сроки, неразвивающаяся беременность, у 94,2% матерей наблюдаемых детей отмечалось отягощенное течение беременности (угроза прерывания беременности, внутриутробная гипоксия плода).
Оценка клинических данных в раннем неона-
тальном периоде показала, что у новорожденных детей с генерализованной ЦМВИ, протекающей с полной клинической симптоматикой чаще, по сравнению с детьми с неполной клинической симптоматикой, выявлялся гепатит, пневмония, геморрагический синдром, патологическая убыль массы тела (р<0,05), менингоэнцефалит и миокардит диагностировались только у новорожденных с полной клинической симптоматикой (6,9% и 10,3%, соответственно). С высокой частотой встречались синдром дыхательных расстройств (62,1% и 22,2%, соответственно) и геморрагический синдром (44,8% и 11,1%, соответственно). При ВПГИ выявлялись пневмония (31,8%), миокардит (18,2%), гепатит (13,6%), менингоэнцефалит (4,6%). У всех новорожденных с ЦМВИ и ВПГИ отмечались перинатальные поражения ЦНС.
Наблюдение в динамике позволило установить, что к концу острого периода заболевания (к трем месяцам жизни) клиническая симптоматика сохранялась у 23,4% детей с ЦМВИ, преимущественно у больных с полной клинической симптоматикой, и 27,3% детей с ВПГИ.
При изучении механизмов врожденного иммунитета, представляющих первую линию защиты организма от различных патогенов, установлено, что у новорожденных с генерализованной ЦМВИ в подгруппе 1.1 в раннем неонатальном периоде имело место достоверное снижение экспрессии ТЬЯ - 2 (СБ282) на моноцитах периферической крови, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2 (45,4±8,9%, 76,2±5,6% и 65,1±6,1%, соответственно). Выявлена обратная корреляционная зависимость с уровнем вирусной нагрузки (г=0,81 р<0,05). Аналогичные изменения были характерны и для ТЬЯ- 6 (СБ14+СБ286+) (44,6±5,9%, 61,1±1,4% и 57,8±2,2%, соответственно), что объясняет высокую чувствительность ТЬЯ- 2 и ТЬЯ- 6 к цитомегаловирусу. Во II группе у новорожденных с ВПГИ также выявлено достоверное снижение экспрессии ТЬЯ- 2 (СБ282+), по сравнению с контрольной группой (43,8±8,3% и 76,2±5,6%, соответственно), что согласуется с данными Х.Б.Уао, К.Ь.Яо8еп1Ьа1 (2011) об ингибировании ВПГ 1,2 ТЬЯ- 2 и снижении провивовирусного иммунного ответа. Выявлена прямая корреляционная зависимость между уровнем экспрессии ТЬЯ- 2 и продукцией 1Ь-12 (г=0,60, р<0,05) и обратная с СБ16+СБ95+ (г=-0,71, р<0,05), а также с 1ЕЧ-у (г=-0,60, р<0,05).
Общее количество Т-лимфоцитов в раннем неонатальном периоде в подгруппе 1.1 было достоверно ниже показателей контрольной группы
и подгруппы 1.2 (45,9±7,1%, 69,3±7,5% и 64,6±10,7, соответственно) (р<0,05).
Аналогичные сдвиги были выявлены и у новорожденных II группы относительно контрольной группы (52,4±2,1% и 69,3±7,5%, соответственно). Выявленное в подгруппе 1.1, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2 снижение количества СБ4+ сопровождалось редукцией имму-норегуляторного коэффициента (р<0,05).
Сравнение средних значений натуральных киллеров СБ16+ у новорожденных с ЦМВИ в подгруппе 1.1 обнаружило достоверное снижение их количества, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2 (1,9±0,3%, 3,4±0,8% и 4,4±0,3%, соответственно, р<0,05). При этом, выявлена прямая корреляция между количеством СБ16+ и экспрессией ТЬЯ - 2 (г=0,88, р<0,05) и обратная корреляционная зависимость с уровнем вирусной нагрузки (г=-0,63, р<0,05), что связано со снижением синтеза !КК-а и прямым повреждающим действием вируса на клетки иммунной системы (ТХАгпоп, 2005).
При изучении функциональной активности лимфоцитов периферической крови у новорожденных II группы с ВПГИ отмечено достоверное снижение СБ16+СБ25+, по сравнению с контрольной группой (0,1±0,06% и 0,4±0,07%, соответственно, р<0,05), что приводит к редукции ци-тотоксической активности натуральных киллеров и снижению синтеза ШК-у и ШК-а. Для подгруппы с неполной клинической симптоматикой ЦМВИ было характерно повышение СБ25+ на поверхности СБ 16+ относительно контроля (1,1±0,4% и 0,4±0,07%, соответственно, р<0,05), что подтверждает мнение 8.8иуа8 (2011) о том, что тяжесть заболевания связана с выраженностью иммунного ответа.
Анализ количества Т-регуляторных клеток обнаружил их достоверное повышение у новорожденных детей с генерализованной ЦМВИ в подгруппе 1.1, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2 (3,4±0,6%, 1,9±0,3% и 2,2±0.1%, соответственно, р<0,05). У детей с генерализованной ВПГИ (II группа) также было обнаружено их достоверное повышение, по сравнению с контрольной группой (3,3±0,4% и 1,9±0,3%, соответственно). Выявлена обратная корреляционная зависимость содержания Т-регуляторных клеток и СБ4+ лимфоцитов (г=-0,82, р<0,05). Эти данные подтверждают мнение 8.8иуа8 (2004) о подавлении иммунного ответа на ВПГ 1,2 и ЦМВ у новорожденных Т-регуляторными клетками.
Средние значения содержания про- и противовоспалительных цитокинов в раннем неонаталь-ном периоде представлены в таблице 1.
Примечание: *- достоверность различий по сравнению с контролем (р<0,05); достоверность различий по сравнению с подгруппой 1.2 (р<0,05)
Таблица 1. Средние значения содержания про- и противовоспалительных цитокинов
в раннем неонатальном периоде
Пг/мл I группа II группа Контроль
1.1 1.2
!Ш-а 8,3±0,9* 10,7+1,1* 9,1+6,2* 15,9+2,1
¡Ь-12 1,5±0,9 2,0+0,8 0,7+0,01* 1,1+0,3
МСР-1 1083,2±258,4* 783,5+223,1 1187,2+342,4* 600,5+53,9
¡Ь-6 25,8±5,2* 18,3+4,2* 33,6+10,8* 9,0+1,6
¡Ь-8 71,3±5,8*| 40,7+11,3 30,1+8,2 26,3+7,7
№N-7 42,1±9,7*| 86,5+21,9 44,9+9,5* 100,8+27,4
!Ь-4 264,9+24,2*1 138,9+41,1 298,4+51,8* 74,1+24,8
Изучение процессов поздней активации лимфоцитов в раннем неонатальном периоде выявило, что при ЦМВИ в подгруппе 1.1, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2, отмечены статистически значимые различия экспрессии СБ95+ на поверхности СБ 16+ (4,8±0,4%, 3,0±0,4% и 3,2±0,3%, соответственно, р<0,05). Кроме того, в подгруппе 1.1, по сравнению с контрольной группой и подгруппой 1.2, выявлено усиление ранних (9,6±1,4%, 5,8±0,9% и 5,2±0,6%, соответственно, р<0,05) и поздних маркеров апоптоза (1,0±0.2%, 0,1±0,03% и 0.1±0,03%, соответственно, р<0,05). У новорожденных при ВПГИ (II группа) также выявлено достоверное повышение относительно контроля ранних (8,4±1,3% и 5,8±0,9%, соответственно) и поздних маркеров апоптоза (0,9±0,5% и 0,1±0,03%, соответственно) (р<0,05). Наши результаты подтверждают данные А.1аппе11о (2011) о стимулирующем влиянии гер-песвирусов на процессы апоптоза иммунокомпе-тентных клеток.
Анализ результатов исследования уровня 1КК-а в сыворотке крови показал, что в раннем неонатальном периоде у детей с ЦМВИ в подгруппе 1.1 и 1.2 отмечено достоверное снижение его уровня по сравнению с контрольной группой (р<0,05). У детей с ВПГИ уровень 1КК-а был в 1,7 раз ниже по сравнению с контрольной группой (р<0,05), что может быть следствием установленного нами значительно более низкого уровня экспрессии ТЬЯ - 2.
Анализ уровня №N-7 показал, что у детей с ЦМВИ подгруппы 1.1 его концентрация в раннем неонатальном периоде была в 2,4 раза ниже по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Выявлена прямая корреляционная зависимость содержания и СБ16+ (г=0,80,
р<0,05), что подтверждает снижение функциональной активности натуральных киллеров. У детей II группы с генерализованной ВПГИ уровень ^N-7 был в 2,2 раза ниже по сравнению с контрольной группой (р<0,01).
В нашем исследовании как при ЦМВИ в подгруппе 1.1 и 1.2, так и при ВПГ по II группе содержание !Ь-6 достоверно превысило показатели контрольной группы (р<0,05). Данные изменения могут приводить к сдвигу диффе-ренцировки Т-хелперов в направлении ТЪ2, не обеспечивающих формирование эффективного противовирусного иммунного ответа.
У детей подгруппы 1.1 уровень !Ь-8 был в 2,7 раз выше по сравнению с контрольной группой (р<0,05) и в 1,8 раз выше, чем в подгруппе 1.2 (р<0,05). Выявлена прямая корреляционная зависимость содержания !Ь-8 и уровнем вирусной нагрузки (г=0,81, р<0,05). Наши данные согласуются с исследованиями N.Saederup (2002) об усилении синтеза !Ь-8 под воздействием цитомегаловируса.
Содержание МСР-1 в сыворотке крови у новорожденных подгруппы 1.1 достоверно превысило показатели контрольной группы (р<0,05). Во II группе его содержание также было достоверно выше показателей контрольной группы, что согласуется с данными C.Papadopou1ou (2008) о том, что ЦМВ и ВПГ могут использовать хемокиновые рецепторы для контроля репликации вирусов.
Снижение уровня !Ь-12 у новорожденных во II группе относительно контроля (р<0,05) приводит к нарушению формирования связи между механизмами неспецифической защиты и специфического иммунитета.
Уровень !Ь-4 у детей подгруппы 1.1 и II группы был выше по сравнению с контрольной
группой в 3,6 и 4,0 раз, соответственно (р<0,05), что отражает доминирование противовоспалительных цитокинов и ведет к снижению противоинфекционной защиты.
В динамике заболевания у детей с ЦМВИ в подгруппе 1.1 к 1 месяцу жизни по сравнению с ранним неонатальным периодом произошло достоверное повышение Т-лимфоцитов (р<0,05), снижение !Ь-8 (р<0,05). Только к 3 месяцам жизни повысился уровень СБ4+, СБ16+, ТЬЯ-2, ШК-а, (р<0,05). Произошло снижение уровня !Ь-4, !Ь-6, Т-регуляторных клеток, СБ95+СБ16+, АппехтУ+, Аппех1пУ+ PI+, (р<0,05). В подгруппе 1.2 уже к 1 мес. показатели IFN-а достоверно превышали его уровень по сравнению с ранним неонатальным периодом (р<0,05), произошло снижение продукции !Ь-8, !Ь-6. Показатели IFN-y прогрессивно нарастали к 3 месяцам.
У детей с ВПГИ во II группе к 1 мес. жизни по сравнению с ранним неонатальным периодом отмечено достоверное снижение СБ16+СБ95+, усиление экспрессии ТЬЯ-2 (р<0,05). К 3 мес. жизни произошло повышение СБ3, ШК-а, !Ь-12 (р<0,05), снижение Т-регуляторных клеток, снижение AnnexinV+PI+, IL-6, ^-4 (р<0,05).
При анализе частот полиморфизмов генов TLR (рис.2) при генерализованной ЦМВИ в зависимости от тяжести состояния было обнаружено, что в подгруппе детей с полной клинической симптоматикой ЦМВИ (подгруппа 1.1) по сравнению с подгруппой детей с
неполной клиникой (подгруппа 1.2) частота генотипа Ser/Pro гена TLR-6 встречалась достоверно чаще (68,4% и 12,5%, соответственно, p<0,05), а генотипа Pro/Pro гена TLR-6 достоверно реже (26,3% и 81,3%, соответственно, p<0,05).
Таким образом, у носителей аллеля Ser гена TLR-6 риск развития более тяжелого течения ЦМВИ выше, а генотип Pro/Pro является протек-тивным в отношении тяжести протекания ЦМВИ
В группе детей с ВПГИ (II группа) получено достоверное различие в распределении генотипа Arg753Gln гена TLR-2 по сравнению с контрольной группой (26,3% и 3,8%, соответственно), (p<0,05).
Таким образом, аллельные варианты гена TLR-2 в точках полиморфизма Arg753Gln могут являться генетическими маркерами риска развития тяжелой генерализованной формы ВПГИ у новорожденных детей.
С учетом выявленных патогенетических механизмов развития генерализованной ЦМВИ и ВПГИ на основании анализа диагностической и прогностической значимости тестов нами разработаны критерии формирования генерализованной ЦМВИ с полной клинической симптоматикой (повышение уровней CD16+CD95+, AnnexinV+PI+, T-регуляторных клеток, IL-8) и развития генерализованной ВПГИ (снижение экспрессии TLR-2, снижение CD16+CD25+, повышение уровня IL-6).
Таблица 2. Измерение уровней CD16+cd95+, Annexin V+PI+, IL-8, Т-рег. Клетки
Периферическая кровь
CutOff Se Sp
CD16+CD95+ 3,7% 98,4% 96,3%
Annexin V+PI+ 2,7% 96,2% 80,1%
Т-рег. клетки 2,5% 99% 86,8%
IL-8 51,2 пг/мл 91% 81%
Таблица 3. Измерение уровней TLR-2, CD16+CD95+, IL-6
Периферическая кровь
CutOff Se Sp
TLR-2
(CD14+CD282+) 64,3% 96,7% 85,3%
CD16+CD25+ 3,5% 90,9% 82,3%
IL-6 32,6 пг/мл 99,1% 92,4%
ЛИТЕРАТУРА медицинской практике, 2004
1. Пузырев В.П. Геномная медицина - 3.Bjorksten B. The environment and sensisation настоящее и будущее. 2003 to allergens in early childhood // Allergy. Immunol.,
2. Молекулярно-биологические технологии в 1997
4.Кубанов А.А. Распознающие рецепторы врожденного иммунитета (TLR) // Цитокины и воспаление, 2015, т.14, №1
5. Маркелова Е.В., Гельцер Б.И. Состояние системы цитокинов при пневмониях // Цитокины и воспаление, 2003.
SUMMARY
Study of the expression of Toll-like receptors in herpesvirus infections in infants
S.G.Maherramova
Institute of Genetic Resources of ANAS, Baku
It is important to study the key mechanisms of immunopathogenesis of congenital CMVI and WBCS, which cause suppression of the immune response and, consequently, lead to generalization
and an unfavorable outcome of these diseases. 95 babies were under observation. Congenital generalized herpesvirus infection (69 children): Congenital generalized cytomegalovirus infection (CMVI) Group I (47 children) Congenital generalized herpetic infection (VPGI) group II (22 children); Congenital generalized CMVI with complete clinical symptomatology subgroup 1.1 (29 children); Congenital generalized CMV with incomplete clinical symptoms subgroup 1.2 (18 children); Control group (26 healthy newborns). Thus, allelic variants of the TLR-2 gene at the points of polymorphism Arg753Gln can be genetic markers of the risk of developing a severe generalized form of HPHI in newborn children.
_Поступила: 06.09.2016
О степени адаптации зубочелюстной системы к выполнению тяжелых физических упражнений у спортсменов в контактных видах спорта
Д.Н. Гаджиев, Н.А. Гурская, А.М.Архмамедов, А.В.Оруджев
Азербайджанский медицинский университет кафедра ортопедической стоматологии, г.Баку
Как известно, интенсивные и длительные физические нагрузки приводят к определенным функциональным нарушениям в различных органах и системах организма, в том числе, инвалидизации, а иногда и к гибели лиц, занятых в профессиональном спорте или в спорте высших достижений [2,4].
На некоторых этапах тренировочного процесса, например в период подготовки к ответственным международным соревнованиям и непосредственно после завершения этих соревнований атлеты часто жалуются на резкое ухудшение общего состояния и стоматологического здоровья, что связано с невозможностью получения своевременной и высококвалифицированной помощи в месте временного проживания, а также резкого ухудшения гигиенического состояния полости рта в связи с отсутствием врача-стоматолога и соответствующего мате-
риально-технического оснащения для проведения профессиональной гигиены, сложностью транспортировки спортсмена до места оказания необходимой стоматологической помощи.
В связи с вышеизложенным, а также со спецификой профессиональной деятельности в некоторых контактных видах спорта, например в боксе, высококвалифицированные атлеты, несмотря на применение спортивных каппы, фиксирующих положения нижней челюсти и в некоторой степени защищающих органы и ткани ротовой полости, часто получают травмы челюстно-лицевой области при спарринге на тренировках и во время соревнований [1,3,5,6]. Поэтому для профилактики таких травм и воспалительных заболеваний паро-донта, обусловленных систематическими чрезмерными физическими и психоэмо-
