CC BY
33
Экспериментальная эндокринология
/Experimental Endocrinology/
ЧЕРНЯШОВА В.В.1, ГНАТЮКМ.С.1, ОЛЕЩУК О.М.1, НИКОЛАЕВ В.Г.2, КЛИЩ И.Н.1
1Тернопольский государственный медицинский университет им. И.Я. Горбачевского
2Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАНУ, г. Киев
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭНТЕРОСОРБЕНТА ЭНТЕРОСГЕЛЬ В ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ
ПАСТА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ НА МОДЕЛИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО СТРЕПТОЗОТОЦИНОВОГО ДИАБЕТА
Введение
Стремительный рост заболеваемости сахарным диабетом, по определению ВОЗ, приобрел характер эпидемии. Макро- и микроангиопатии, характерные для данного заболевания и в значительной мере связанные с эндоте-лиальной дисфункцией, приводят к существенным нарушениям функций внутренних органов, усугублению вызванного диабетом «метаболического хаоса» и, в конечном счете, становятся частой причиной гибели этой категории больных [1—5, 7, 9, 10, 13—18].
Открытие в 1922 г. инсулина, пригодного для лечения инсулинозависимого сахарного диабета, знаменовало собой настоящий прорыв в изучении и лечении сахарного диабета. В то время казалось, что проблема сахарного диабета решена. Продолжительность жизни больных диабетом возросла во много раз, а смертность от острых его осложнений не превышает в настоящее время 1 %. Однако одновременно с увеличением продолжительности жизни больных диабетом возникла новая проблема — проблема поздних сосудистых осложнений, таких как диабетическая нефропатия, церебропатия, ретинопатия и другие [7]. Очевидно, что стоящий за всеми этими феноменами мощный синдром эндогенной интоксикации требует тщательного изучения и разработки методов эффективной терапии с использованием, в частности, современных энтеросорбентов [8, 11—12, 19—23].
Цель исследования: исходя из вышеизложенного, целью нашего исследования было изучение эффективности
энтеросорбента Энтеросгель на модели экспериментального стрептозотоцинового диабета.
Материалы и методы исследования
Опыты проведены на 18 половозрелых белых крысах массой 200—250 г. Распределение животных по сериям, количество и пол животных, а также вводимые им вещества представлены в табл. 1.
Препарат Энтеросгель в лекарственной форме паста вводили внутрижелудочно в 9 часов утра в дозе 650 мг/кг. Утреннее применение препарата использовали с целью предупреждения адсорбции Энтеросгелем компонентов пищи животных, которую давали в 12 часов. Препарат Энтеросгель вводили в течение 14 дней, начиная с дня введения стрептозоцина.
Для изучения эффективности препарата Энтеросгель проводили биохимические исследования крови (количество ТБК-активных продуктов, мочевины, глюкозы, активность каталазы) и гомогенатов печени (количество ТБК-активных продуктов, гидроперекисей липидов, восстановленного глутатиона, активность каталазы, су-пероксиддисмутазы, сукцинатдегидрогеназы, цитохром-оксидазы) в соответствии с общепринятыми методиками.
Результаты исследования и их обсуждение
Как видно из результатов исследования, представленных в табл. 2, у животных в серии II (стрептозотоциновый диабет) отмечено статистически достоверное увеличение
Таблица 1. Распределение по сериям, количеству, полу подопытных животных и вводимым веществам
Номер и название серии Вводимые вещества Количество животных Пол животных
I серия,интактные Вода дистиллированная — 2 мл, внутри-брюшинно 6 Самцы
II серия, контрольная патология (сахарный диабет) Стрептозотоцин — 50 мг/кг, однократно, внутрибрюшинно 6 Самцы
III серия, контрольная патология (сахарный диабет + Энтеросгель) Стрептозотоцин — 50 мг/кг, однократно, внутрибрюшинно; Энтеросгель паста перорально по 650 мг/кг 6 Самцы
концентрации в сыворотке крови глюкозы (в 4,1 раза) и гликозилированного гемоглобина (в 1,5 раза). Значительные изменения претерпели показатели липидограммы, в частности уровень общего холестерина возрос на 53 %, триглицеридов — на 16 %, ЛПНП — на 77 %, ЛПОНП — на 24 %; одновременно уровень ЛПВП снизился на 29,9 %. Нами установлено также увеличение у этих животных содержания ТБК-активных продуктов (на 18 %), мочевины (на 42 %), снижение активности каталазы (на 35 %).
Одновременно с изменениями биохимических показателей в сыворотке крови у животных данной серии в гомогенатах печени отмечалось (табл. 3) статистически достоверное увеличение ТБК-активных продуктов (на 43 %), гидроперекисей липидов (на 34 %), уменьшение активности каталазы (на 35 %), супероксиддисмутазы (на 30 %), сукцинатдегидрогеназы (на 19 %), цитохромоксидазы (на 15 %) и количества восстановленного глутатиона (на 29 %).
В сравнении с биохимическими показателями животных II серии введение препарата Энтеросгель в дозе 650 мг/кг (III серия) способствовало снижению в крови уровня глюкозы на 11,9 %, гликозилированного гемоглобина — на 18,4 %, общего холестерина — на 20,5 %, триглицеридов — на 27 %, ЛПНП — на 24,3 %, ЛПОНП — на 15,8 %, с одновременным повышением ЛПВП на 45,5 %. Отмечено также снижение концентрации ТБК-активных продуктов (на 17 %), мочевины (на 12 %). При этом активность каталазы возрастала на 25 % по сравнению с контрольной группой животных. В гомогенатах печени препарат также вызывал уменьшение ТБК-активных продуктов (на 16 %) и гидроперекисей липидов (на 21 %) по сравнению с контрольной патологией и предотвращал активацию процессов перекисного окисления липидов. Активность каталазы и супероксиддисмутазы при этом соответственно увеличивалась на 13 и 22 %, возрастала
Таблица 2. Влияние препарата на биохимические показатели крови крыс со стрептозотоциновым диабетом (М ± m)
Показатели Контроль (интакт-ные животные), П = 6 Контрольная патология (сахарный диабет), п = 6 Контрольная патология + Энтеросгель, п = 6
Глюкоза, ммоль/л 5,2 ± 0,2 21,1 ± 1,5* 18,6 ± 1,1
Гликозилированный гемоглобин, мкмоль фруктозы/г Hb 7,57 ± 1,20 11,30 ± 1,50* 9,23 ± 0,09**
Общий холестерин, ммоль/л 2,55 ± 0,11 3,91 ± 0,16* 3,11 ± 0,19**
Триглицериды, ммоль/л 0,91 ± 0,06 1,97 ± 0,09* 1,44 ± 0,07
ЛПНП, ммоль/л 3,36 ± 0,15 5,97 ± 0,28* 4,52 ± 0,13**
ЛПОНП, ммоль/л 0,72 ± 0,04 0,89 ± 0,04 0,75 ± 0,03
ЛПВП, ммоль/л 1,57 ± 0,07 1,12 ± 0,05* 1,63 ± 0,05**
Мочевина, ммоль/л 4,87 ± 0,07 6,92 ± 0,26* 6,09 ± 0,02**
ТБК-активные продукты, мкмоль/л 0,78 ± 0,06 0,92 ± 0,03* 0,76 ± 0,02**
Каталаза, мкат/л 6,04 ± 0,19 4,48 ± 0,21* 5,60 ± 0,16**
Примечания: * — изменения достоверны по сравнению с интактными животными; ** — изменения достоверны по сравнению с животными со стрептозотоциновым диабетом.
Таблица 3. Показатели функционального состояния печени животных при стрептозотоциновом диабете и введении препарата Энтеросгель (M ± m)
Показатели Контроль (интактные животные) Контрольная патология (сахарный диабет) Контрольная патология + Энтеросгель
ТБК-активные продукты, мкмоль/кг 2,47 ± 0,05 3,53 ± 0,08* 4,24 ± 0,05*
ГПЛ, усл.ед./г 4,10 ± 0,09 5,50 ± 0,09* 4,33 ± 0,09**
Каталаза, мкат/кг 13,76 ± 0,45 8,46 ± 0,26* 9,53 ± 0,17**
СОД, усл.ед./кг 2,67 ± 0,05 1,87 ± 0,13* 2,27 ± 0,06**
Г^^ ммоль/кг 6,05 ± 0,22 4,29 ± 0,06* 4,96 ± 0,03
ЦХО, ммоль/(мин-кг) 6,75 ± 0,09 5,72 ± 0,13* 6,19 ± 0,08
СДГ, ммоль/(мин-кг) 8,79 ± 0,24 7,04 ± 0,20* 10,13 ± 0,25**
Примечания: *— изменения достоверны по сравнению с интактными животными; ** — изменения достоверны по сравнению с животными со стрептозотоциновым диабетом.
Рисунок 1. Гистологическая структура печени при стрептозотоциновом диабете. Окраска гематоксилином и эозином, х 280
Рисунок 2. Гистологическая структура печени при стрептозотоциновом диабете и введении Энтеросгеля. Окраска гематоксилином и эозином, х 280
активность цитохромоксидазы (на 8,2 %) и сукцинатде-гидрогеназы (на 43,8 %), что, в свою очередь, свидетельствовало об увеличении активности ферментов митохондрий в печени при введении сорбента.
Таким образом, назначение Энтеросгеля животным со стрептозотоциновым диабетом оказывает системное метаболическое действие, смягчая нарушения в проокси-дантно-антиоксидантной системе и способствуя поддержанию гомеостаза в организме.
При гистологическом исследовании печени крыс с стреп-тозотоциновым диабетом наблюдалась диффузная лимфо-гистиоцитарная инфильтрация, отмечались существенные морфологические нарушения со стороны центральных вен, а именно значительное их расширение, полнокровие, что сопровождалось появлением дистрофических и некротических изменений центролобулярных гепатоцитов (рис. 1).
Выводы
Учитывая вышеизложенные результаты биохимических и морфологических исследований, можно констатировать, что препарат Энтеросгель в лекарственной форме паста для перорального применения эффективно корри-
гирует изменения, вызванные стрептозотоциновым диабетом, а именно способствует снижению уровня сахара и гликозилированного гемоглобина в крови, устранению липидного дистресс-синдрома, включая диабетическую дислипидемию, улучшает энергетические процессы в тканях печени, нормализирует соотношение компонентов системы ПОЛ/АОС, а также смягчает морфологические нарушения в тканях печени, характерные для данной экспериментальной модели.
Список литературы
1. Бiронm Н, Бурда В., Великий М. Вмкт npodyKmie пере-кисного окислення лiniдiв i активтсть ферментiв антиок-сидантного захисту кровi та шсткового мозку rn^ypie за умов експериментального стрептозотоцинового дiабетy i введен-ня нiкотинамiдy // Вкник Львiв. ун-ту. Сер. бюл. — 2000. — Вип. 25. — С. 11-17.
2. Бipонт Н.В., Бурда В.А., Великий М.М. Антиоксидантна система захисту шсткового мозку при стрептозотоциновому дiабетiу щypiв// Тез. докл. конф. «Международные дни диабета в Украине». — Днепропетровск. — 1998. — Вып. 3. — С. 87-88.
3. Бipонт Н.В., Бурда В.А., Сибipна Н.О. Система анти-оксидантного захисту в еритроцитах i шстковому мозку щypiв при стрептозотоциновому дiабетi // Тези доп. VII Укр. бiохiм. зЧзду. — Кшв. — 1997. — Ч. III. — С. 9-10.
4. Бipонm Н.В., Бурда В.А., Федорович А.М. Тлюкозо-6-фосфаmдегiдpогеназна активтсть за стрептозотоцинового дiабеmy // Маmеpiали VIII Укр. бiохiм. з!зду. — Чертвщ. — 2002. — С. 113.
5. Вплив нiкоmинамiдy на активтсть феpменmiв антиок-сидантного захисту при експериментальному дiабеmi / Великий М.М, Бурда В.А, Бipонm Н.В., Олiяpник О.Д, Великий А.М. // Укр. бшхш. журн. — 1996. — Т. 68, № 2. — С. 109-114.
6. Доклтчт до^дження лкарськихзасобiв: Методичтреко-мендацй'/ За ред. О.В. Стефанова. — К.. : Авщенна, 2001. — 528с.
7. Ефимов А., Зуева Н, Скорбонская Н. Диабетические ангиопатии: этиология и патогенез // Лекарства. — 2004. — № 11. — С. 36-38.
8. Земсков В.С., Шор-Чудновский М.Е., Картель Н.Т. О возможном механизме лечебного эффекта энтеросорбции // Клин. хир. — 1988. — № 3. — С. 61-62.
9. Корригирующий эффект никотинамида на процессы гли-козилирования гемоглобина при стрептозотоциновом диабете у крыс / Великий H.H., Бурда В.А., Обросова И.Г., Биронт Н.В, Федык М.Я. //Вопр. мед. химии. — 1995. — Т. 41, № 1. — С. 36-38.
10. Креатин як шдикатор ефекmивносmi еритропоезу за умов експериментального стрептозотоцинового дiабеmy / Н.В. Бi-ронт, В.М. Коробов, В.А. Бурда, G.M. Голубш // Маmеpiали VI з7зду ендокpинологiв Украши. — Кию. — 2001. — С. 19.
11. Николаев В.Г., Михайловский С.В., Турина Н.М. Современные энтеросорбенты и механизмы их действия// Эфферентная терапия. — 2005. — № 4. — С. 3-17.
12. Николаев В.Т, Стрелко В.В., Коровин Ю.Ф. и др. Теоретические основы и практическое применение метода энте-
росорбции// Сорбционные методы детоксикации и иммунокор-рекции в медицине: Тез. докл. — Харьков, 1982. — С. 112-114.
13. Никотинамид в регуляции антиоксидантной системы организма/В.А. Бурда, Н.Н. Великий, Н.В. Биронт, М.Л. Барская, Н.А. Сибирная // V Междунар. конф. «Биоантиокси-дант». — Москва, 1998. — С. 116.
14. Перекисне окислення лiniдiв i фiзико-хiмiчний стан плазматичних мембран еритроцитiв при цукровому дiабетi / В.А. Бурда, Т.Р. Махневич, Н.О. Сибiрна, Н.В. Бiронm // Тези доп. VII Укр. бiохiмiч. зИзду. — Кшв, 1997. — Ч. I. — С. 56.
15. Псевдоферменmаmивнi акmивносmi гемоглобну хворих на 1ЗЦД /Н.В. Бiронm, В.М. Коробов, М.М. Великий, В.А. Бурда // Тез. докл. науч.-практ. конф. «Диабет — проблема общечеловеческая». — Днепропетровск, — Вып. 5. — С. 58-59.
16. Роль циклоспорина А и никотинамида в коррекции иммунных и метаболических нарушений при инсулинзависимом сахарном диабете (ИЗСД) / Е.Д. Олиярнык, Н.В. Биронт, Л.И. Солтыс, Н.Н. Великий //Рос. конф., посв. 100-летию со дня рожд. акад. СССР В.Г. Баранова. — Санкт-Петербург, 2000. — С. 83.
17. Спектральные свойства нитрозогемоглобина крыс с экспериментальным стрептозотоциновым диабетом / В.Н. Коробов, Н.В. Биронт, А.Н. Федорович, В.А. Бурда // 6-я Пущинская школа-конф. молодых ученых. — Пущино (Россия), 2002. — Т. 1. — С. 97-98.
18. Характеристика динамiчного стану еритрону за умов експериментального стрептозотоцинового дiабету / Бурда В.А., Бiронт Н.В., Великий М.М., Сибiрна Н.О., Клевета Г.Я., Федорович А.М. // Труды научной конф. «Научное наследие академика И.Н. Буланкина и его развитие в современной биохимии». — Харьков: Харьков. нац. ун-т, 2001. — С. 24-25.
19. Шевченко Ю.Н. Кремнийорганические сорбенты. Свойства и область применения. Энтеросгель и комплексные препараты на его основе // Сборник работ по применению препарата «Энтеросгель» в медицине. — М, 2002. — С. 3-12.
20. Энтеросорбция / Под ред. Н.А. Белякова. — Л.: Центр сорбционных технологий, 1991. — 329 с.
21. Effect of nicotinamide's treatment on ascorbate/ dehydroascorbate pools and lipid peroxidation in tissues of streptozotocine diabetic rats / O.D. Oliyarnyk, N.V. Biront, T.L. Vygnan, M.M. Velyky // 17th Intern. Diab. Feder. Congr. — Mexico, 2000. — P. S154.
22. Nikolaev V.G. Enterosorption // Proceedings of the Fifth Int. Symp. on Hemoperfusion and Artificial Organs / Eds. T.M.S. Chang, H. Bing-Lin. — Tianjin: China Academic Publishers, 1984. — P. 87-99.
23. Nikolaev V.G. Peroral Application of synthetic activated charcoal in USSR // Biomat., Art. Cells, Art. Org. — 1990. — Vol. 18, №4. — P. 555-568.
Получено 03.02.11 □
