CC BY
51
очага с характерными концентрическими образованиями Ввиду сказанного представляетсяперспективным дальней-
в его центральной части. При этом отмечалось отсутствие шее исследование возможностейиспользованиякристаллогра-
убедительного сходства с кристаллограммами ликвора, опи- фического метода в процессе дифференциальной диагностики
санными в имеющихся источниках литературы [4,5,7]. случаев смерти от АКМП и от ишемической болезни сердца.
Литература
1. Мороз Л. А., Каликштейн Д. Б. Кристаллографический метод исследования различных биологических субстратов: метод. рекомендации. -М., 1986.
2. Солохин А. А., Гайворонская В. И., Орлов С. В. Способ диагностики черепно-мозговой травмы. Патент на изобретение № 2124724. М., 1998. - 8 с.
3. Солохин А. А., Гайворонская В. И., Кандауров Р. В. Способ определения наличия этилового алкоголя в организме человека. Патент на изобретение № 2198401. М., 2003. - 4 с.
4. Солохин А. А., Гайворонская В. И., Майновская О. А., Орлов С. В., Гокинаев С. Г. Диагностика черепно-мозговой травмы и определение степени ее тяжести методом кристаллографического исследования спинномозговой жидкости в судебно-медицинской практике // В сб. Материалы XIII Пленума Всероссийского общества судебных медиков ( 21-22 мая 1998г. ). М., 1998. -С. 28-29.
5. Солохин А. А., Гайворонская В. И., Кандауров Р. В. Кристаллизация спинно-мозговой жидкости в случаях смерти от ишемической болезни сердца и отравления этиловым алкоголем. // Судебно-медицинская экспертиза. - 2002. - № 1. - С. 3-4.
6. Пермяков А. В., Витер В. И. Патоморфология и танатогенез алкогольной интоксикации. - Ижевск: Экспертиза, 2002. - С. 40-42.
7. Тахер Асаад М. А. Судебно-медицинская диагностика прижизненности повешения по кристаллографической структуре биологических жидкостей. Автореф. Диссерт. канд. мед. наук. - Киев, 1996.
© Д.В. Богомолов, А.Х. Аманмурадов, 2004
УДК 340.624
Д.В. Богомолов, А.Х. Аманмурадов ИЗУЧЕНИЕДИНАМИКИ МИКОБИОТЫ ОСТАНКОВ ТРУПА ПРИ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОМ УСТАНОВЛЕНИИ ДАВНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ СМЕРТИ И МЕСТА ЗАХОРОНЕНИЯ
Российский центр судебно-медицинской экспертизы М3 РФ (директор - проф. Ю.И.Пиголкин), Москва
В статье приведены данные о ранних этапах заселения останков трупа почвенными и иными грибами. Показано, что уже к 2-м неделям захоронения наблюдается прорастание почвенными грибами одежды и кожных покровов трупа, причем видовой состав представителей микобиоты останков в целом соответствует месту захоронения.
Это может играть роль при установлении факта и маршрута перемещения трупа и его останков даже при наличии поздних трупных изменений.
Ключевые слова: судебно-медицинская микология, установление давности смерти, идентификация личности.
D.V.Bogomolov, A.Kh.Amanmuradov MYCOBIOTIC STUDYING OF HUMAN REMAINS FOR FORENSIC-LEGAL DEFINITION OF DEATH AGE AND BURIAL PLACE
Moskow
Data of early stages colonization of human remains by soil and other fungus are devoted in the article. It is shown that in 2 weeks after burial soil fungus begin to grow on skin and clothes. In whole, specific mycobiotic structure of remains conforms to mycobiotic structure of burial place. These can help to estimate the fact of corpse and remains displacement eve in the cases of late postmortem changes.
Key words: legal mycology, death age definition, person identification.
Настоящим сообщением мы продолжаем знакомить Материалы и методы исследования. Материалом ис-
читателей журнала с результатами практической разработ- следования послужили фрагменты останков двух трупов
ки относительно новой отрасли судебной медицины, - су- с известной давностью и причиной смерти (женщины 45
дебно-медицинской микологии, в основании которой один и 65 лет). Использовали биоманенкены в виде фрагмен-
из авторов представленной статьи [3]. Эта отрасль судеб- тов кожного покрова, подлежащих мягкихтканей, которы-
ной медицины является пограничной с иными биологи- ми обшивали фрагменты ребер и грудины. Далее манеке-
ческими дисциплинами, и разработка её немыслима без ны заворачивали в прокипяченную хлопчатобумажную
привлечения ученых-микологов и почвоведов, т.к. заселе- ткань и производили захоронение на полигоне в подзо-
ние трупа грибами как правило происходит в условиях листые почвы (г. Москва). Образцы из кожи и мягких
тех или иных биоценозов, причем преимущественно из тканей манекенов предварительно подвергали микологи-
почвы. В данной статье мы приводим экспериментальные ческому исследованию (см. ниже). Также проанализиро-
данные о ранних этапах заселения останков трупа почвен- вана почва, взятая с опушки соснового леса в одном из под-
ными и иными грибами, а также результаты сравнительного московных хозяйств северо-западного направления.
анализа почв городского и сельского ландшафта на примере Из всех образцов с помощью стерильного скальпеля
г. Москвы и сельской местности неподалеку от неё. были извлечены пробы и помещены в микологические
Целью нашей работы явилась разработка критериев пробирки, причем изымались образцы как почвы, так и
этапности заселения останков трупа представителями мико- кожи, а также мягких тканей.
биоты, а также выяснение роли в этом заселении места захо- Далее производен посев материала на специальные
ронения, мы сделали попытку также дать полученным ре- микологические среды с добавлением антибиотиков. Ме-
зультатам судебно-медицинскую интерпретацию, учитывая тод основан на следующих операциях: посев взвесей, при-
роль анализа некрофагов и некротрофных грибов в частно- готовленных путем последовательных десятикратных раз-
сти при проведении идентификационных исследований [3]. ведений пробы, на питательную среду в чашки Петри; куль-
тивирование грибов; подсчет выросших колоний грибов (предварительно идентифицированных до рода) для определения общего числа грибов (ОЧГ), выражаемого количеством колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 г исследуемого материала.
Оптимальной средой для выделения грибов считается сусловый агар [6], который и был применен нами. Для сокращения скорости роста грибов и предотвращения срастания колоний в питательную среду добавляли медицинскую консервированную желчь, а для подавления роста бактерий -антибиотики.
Для приготовления последовательных разведений пробы предварительно готовили 0,1% раствор поверхностноактивного вещества в дистиллированной или питьевой воде. Полученный раствор, являющийся разбавителем для получения взвесей, разливали по 100 см3 в колбы вместимостью 500 см3 ипо9 см3 в пробирки, после чего стерилизовали.
Навеску помещали в колбу вместимостью 500 см3, содержащую 100 см3 стерильного разбавителя, получали при этом первичную взвесь 1 (разведение 10-1). Затем из взвеси 1 готовили последующие разведения, используя стерильные разбавители, разлитые по 9 см3 в пробирки.
Для посева каждой пробы использовали 16 чашек Петри с агаром. В каждую из чашек вносили по 1 см3 тщательно перемешанной взвеси, не давая ей отстояться. В первые четыре чашки вносили взвесь 4 (разведение 10-4), в четыре другие - взвесь 3 (разведение 10-3), в следующие - взвесь 2 (разведение 10-2), в оставшиеся - взвесь 1 (разведение 10-1).
Учитывая, что среди некротрофных и почвенных грибов могут быть как мезофилы, для которых оптимальная температура роста 22-25°С, так и термотолерантные грибы, с температурным оптимумом около 37°С, культивирование грибов проводили при 2-х температурных режимах: 22-25°С и при 37°С в течение 7-10 суток [5].
После окончания инкубации проводили идентификацию грибов, используя микологические ключи в пособиях по определению микромицетов [7,10], а также учитывали количественный учет выросших колоний грибов (в посевах тех разведений, где число колоний на каждой из четырех чашек не превышает 150).
Прибегали также к микроскопическому исследованию первичного материала и культивируемых проб. Для этой цели частицы мицелия помещали на предметное стекло в каплю фиксирующей жидкости, покрывали покровным стеклом и рассматривали с помощью малого и среднего увеличений микроскопа.
Результаты исследования.
При анализе образцов почвы с места захоронения обнаружено следующее (обозначения - КОЕ колониеобразующие единицы).
Учет мезофильных грибов (25°С) - разведение 10-4
1. Absidia spp. 20000 КОЕ/г
2. Cladosporium spp. 13335 КОЕ/г
3. Cephalosporiopsis sp. 36670 КОЕ/г
4. Pénicillium spp. 306665 КОЕ/г
5. Aspergillus spp. 30000 КОЕ/г
6. Fusarium sp. 3330 КОЕ/г
7. Gliocladium sp. 46670 КОЕ/г
Дрожжи sp. 6665 КОЕ/г
Всего: 463335 КОЕ/г
Учет термотолерантных грибов (37°С) - разведение 10-2
1. Acremonium sp. 300 КОЕ/г
2. Aspergillus fumigatus 200 КОЕ/г
3. Penicillium spp. 800 КОЕ/г
4. Fusarium sp. 1600 КОЕ/г
5. Trichoderma sp. 100 КОЕ/г
Всего: 3000 КОЕ/г
Результаты исследования почвы из сельской местности.
Учет мезофильных грибов (25°С) - разведение 10-4
1. Mucorsp. 3330 КОЕ/г
2. Cladosporium spp. 330000
3. Penicillium spp. 246670
4. Aspergillus spp. 33330
5. Fusarium spp. 13335
6. Gliocladium sp. 3330
7. Acremonium sp. 6665
8. Trichoderma spp. 6665
9. Humicolasp. 26670
Дрожжи 163330
Всего: 833295 КОЕ/г
Учет термотолерантных грибов (37°С) - разведение 10-3
1. Cladosporium spp. 5000 КОЕ/г
2. Penicill ium spp. 10000
3. Acremonium spp. 9000
4. Scopulariopsis sp. 9000
Дрожжи 10000
Всего: 43000 КОЕ/г
Т.о. очевидно, что в городском грунте из места захоронения наблюдается меньшее разнообразие видов, а также общее количество представителей Царства грибов.
При культивировании первичной пробы с кожи одного из манекенов при 25°С был выявлен рост грибов рода Penicillium. Другой образец оказался стерилен.
При извлечении манекенов из земли спустя две недели после захоронения отмечено увеличение их объёма, просачивание зловонной серовато-красной жидкости сквозь текстильную ткань, по раскрытии которой обнаружены вздутые манекены грязно-желтого цвета. По рассечении кожи открылась дряблая крепитирующая ткань, которая легко поддавалась препаровке. С кожи манекенов и из подлежащих мягких тканей получали стерильным шпателем пробы для микологического исследования.
При посеве проб с кожи и мягких тканей манекенов через 2 недели после захоронения при культивировании материала при 25°С на всех кусочках был выявлен рост плеснеобразующих грибов. Дальнейшая идентификация показалапринадлежность их к родам: PenicilliumMucor, Absidia. При культивировании в режиме 37°С был обнаружен рост гриба Aspergillus fumigatus.
Т.о. уже на второй неделе захоронения отмечалась инвазия трупного материала почвенными грибами из родов Mucor, Absidia, Aspergillus. Сохранилось высевание видов родаPenicill ium.
Обсуждение результатов исследования. Весьма неожиданным оказался факт обнаружения грибов на трупном материале в столь ранние сроки как две недели. Ведь по данным литературы появление тех или иныхгрибов на останках отмечено либо в более поздние сроки, либо при особыхусловиях [4,9].
Обнаружение при первичном посеве видов рода Penicillium объясняется,очевидно,вообще широким распространением представителей этого рода в природе и значительными трофическими возможностями, удовлетворяющих грибов этого рода.
Несколько неожиданным является появление при культивировании трупного материала роста представителей рода Mucor, который не высевался из почвы. Эта осо-
бенность находит свое объяснение на наш взгляд в том, что для представителей этого рода характерным являются более высокие пищевые потребности, которые как раз и могут удовлетворены предложенным субстратом в виде останков трупа [7].
Эти же соображения касаются заселения трупных тканей грибом Aspergillus fumigatus, споры которого содержались в почве, а в экспериментальном материале обнаружен рост в виде мицелия с соответсвующими спороно-шениями. Этот гриб является главным возбудителем ас-пергиллеза человека и животных и, очевидно, охотно развивается на свежем биологическим субстрате [2]. Он несомненно термотолерантен и в его росте велика роль эндогенного тепла, которое закономерно образуется при разложении тканей [5] (особенно, если учесть, что наш эксперимент был поставлен в летнее время).
Сравнивая микобиоту почв города и сельской местности можно заметить гораздо большее видовое и количественное разнообразие и богатство второй. Например, обильный рост видов рода Мucor свидетельствует о большем богатстве органическими остатками почвы сельской местности, в городе рост грибов этого рода получен нами лишь на трупном материале, который богат питательными веществами, микроэлементами и витаминами. С другой стороны именно в городской почве отмечен рост условнопатогенного вида Aspergillus fumigatus, который охот-
Литература
1. Бедрин Л.М., Загрядская А.П. Судебно-медицинские возможности исследования эксгумированного трупа.-Горький.-Изд-во Горьковского мед. ин-та.-1978.-52с.
2. Билай В.В., Курбацкая З.А. "Определитель токсинообразующих микромицетов".-Киев.- "Наукова думка".-1990.-сс.152-155.
3. Богомолов Д.В., Богомолова И.Н. Прикладная микология - terra incognita судебной медицины. "Проблемы экспертизы в медицине ".Ижевск. - 2002-Том.2 - №2. - сс.22-27.
4. Гофман Э. Учебник судебной медицины. - СПБ. - Издательство К.Л.Риккера.-1891.- С. 688.
5. Марченко М.И., Кононенко В.И. "Практическоеруководство по судебной энтомологии". Харьков.- Изд. УИУВ.-1991-с.19-29.
6. Методы экспериментальной микологии.- Киев.- Наукова думка. - 1982г. - Сс. 287-315.
7. Милько А.А. Определитель мукоральных грибов. - Киев. - "Наукова думка". - 1974.- с.23-27.
8. Мюллер Э, Лёффлер В. Микология.- "Мир".-1995.-с.236-237.
9. Попов Н.В. Основы судебной медицины: Пособие для студентов медицинских институтов. - М.-Медгиз.-1938. - СС.67-68.
10.Sutton D.A.,Forthergill A.W.,Rinaldi M. Guide to clinically significant fungi.- NY,London.- 1997.- pр.122-123,130-133.
© АЮ.Вавилов, В.Е.Чирков, А.Р.Поздеев, Н.П.Плешакова, 2004
УДК 340.624
АЮ.Вавилов, В.Е.Чирков, А.Р.Поздеев, Н.П.Плешакова О ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДА ИЗМЕРЕНИЯ ЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СОПРОТИВЛЕНИЯ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕД (Предварительное сообщение)
Кафедра судебной медицины (зав. кафедрой - проф. В.И.Витер) Ижевской государственной медицинской академии ГУ3 «Бюро судебно-медицинской экспертизы» (начальник - В.И. Жихорев), Ижевск
В статье приведены результаты оригинального исследования, заключающегося в изучении электрического сопротивления жидкой кровиживыхлиц и трупов в раннем посмертном периоде. Показаны различия электрических сопротивлений изученных объектов. Сделан вывод о возможности практического применения использованного метода для дифференциальной диагностики трупной крови и крови, принадлежавшей живому лицу.
Ключевые слова: электрическое сопротивление, кровь, труп, живой человек.
A.Ju.Vavilov, V.E.Chirkov, A.R.Pozdeev, N.P.Pleshakova ABOUT OPPORTUNITY OF USAGE OF ELECTRICAL RESISTANCE MEASUREMENT METHOD IN BIOLOGICAL INVESTIGATIONS (PRELIMINARY REPORT)
Izhevsk
There are devoted the results of original investigation of electrical resistance ofl iquid blood from al ive body and corpses in early postmortem period. The differences of electrical resistance between studying objects are shown, which can be used for differential diagnostic.
Keywords: electrical resistance,blood,corpse,alive body.
На современном этапе развития судебно-медицинс- объективизации результатов исследования широко ис-кой науки и практики, при производстве экспертиз для пользуются различные инструментальные методы.
но продолжил свое развитие на тканях трупа. Это связано с наличием в городе нездоровой экологической ситуации, - множество больных животных (в том числе микозами), извращенный температурный режим, недостаток естественных органических удобрений и проч.
Т.о. показано, что заселение тканей трупа грибами происходит достаточно рано и интенсивно в условиях захоронения в почве. Почвы значительно отливаются по составу представителей микобиоты, что диктует необходимость проведения детального стадийного микологического исследования микобиоты трупных тканей при захоронении в различных условиях, а также открывает возможности установления места первичного захоронения и дальнейшего перемещения трупа. Последнее важно для идентификации останков и установления давности наступления смерти [1].
Представленные данные подтверждают перспективность проведения судебно-микологических исследований для разработки дополнительных критериев установления давности смерти, маршрута перемещения трупа и условий первичного и последующих захоронений [2].
Благодарности. Авторы приносят свою благодарность сотрудникам ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (г. Москва) гг. Е.А. Пирязевой и О.С. Кисляко-вой за помощь в проведении микологических исследований и руководству РЦСМЭ за помощь в организации и финансировании исследований.
