CC BY
25
УДК 579.66:661.8
ошрмсжого шрам *
Е.Г. Плотникова, Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН О.В. Ястребова, Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН Е С. Корсакова, Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН А.А. Пьянкова, Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН Л.Н. Ананьина, Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН
Для цитирования:
Плотникова Е.Г., Ястребова О.В., Корсакова Е.С., Пьянкова А.А., Ананьина Л.Н. Изучение бактерий-деструкторов моно(поли)ароматических соединений семейства Micrococcaceae, перспективных для разработки биотехнологий очистки промышленных территорий Пермского края // Вестник Пермского федерального исследовательского центра. - 2022. - № 2. - С. 47-55. https://doi.org/10.7242/2658-705X/2022.2.5
Исследование направлено на решение актуальной проблемы микробиологии - изучение процессов бактериальной деструкции устойчивых загрязнителей окружающей среды, к которым относятся полициклические углеводороды, фталаты. Исследована способность бактерий семейства Micrococcaceae, выделенных с техногеннозагрязненных территорий Пермского края, осуществлять деструкцию фталатов: эфиров орто-фталевой кислоты, терефталата (ТФК) и диоктилтерефталата. Выявлено 11 штаммов родов Arthrobacter, Glutamicibacter, Pseudoarthrobacter, Paenarthrobacter, Kocuria, Micrococcus, Rothia, способных к росту на орто-фталевой кислоте (ОФК) и производных ОФК (дибутилфталате, ДБФ; диметилфталате, ДМФ; диэтилфталате, ДЭФ), при использовании их в качестве единственного источника углерода и энергии. Активными деструкторами фталатов являются штаммы Kocuria spp. WD25, ML17, Pseudoarthrobacter sp. SA101 и Glutamicibacter sp. PB8-1. Показано, что штаммы-деструкторы Glutamicibacter spp. BO25 и PB8-1 растут на ТФК в условиях высокой солености среды (до 60 г/л NaCl). Выявлена корреляция между ростовыми показателями штаммов и снижением количества ТФК в среде культивирования. Впервые установлена
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ и Министерства образования и науки Пермского края в рамках научного проекта № 19-44-590011 р_а.
способность разложения ТФК бактериями в условиях засоления. На основании ростовых характеристик и анализа метаболитов показано, что разложение ОФК, сложных эфиров ОФК (ДМФ, ДБФ, ДЭФ) и ТФК исследуемыми штаммами сем. М1огососсаоеае осуществляется через образование протокатеховой кислоты. Таким образом, в результате проведенных исследований выявлены и охарактеризованы активные бактерии-деструкторы фталатов и ароматических углеводородов, в том числе способные осуществлять разложение фталатов в условиях засоления, которые перспективны для использования их в биотехнологиях очистки сточных вод и восстановления засоленных/загрязненных почв Пермского края.
Ключевые слова: аэробные бактерии, Micrococcaceae, фталаты, терефталевая кислота, деструкция, засоление.
Очистка окружающей среды от устойчивых, токсичных органических соединений, имеющих тенденцию к накоплению в экосистемах и представляющих опасность для здоровья человека, является одной из приоритетных проблем современной экологии. К наиболее распространенным пол-лютантам промышленно развитых регионов, в число которых входит Пермский край, относятся моно(поли)ароматические соединения (АС), в частности, полициклические ароматические углеводороды (ПАУ), фталаты. Перспективными способами детоксикации (ремедиации) загрязненных территорий от таких соединений являются биотехнологии, основанные на способности природных бактерий разлагать многие ароматические соединения.
Бактерии семейства М1стососсасеае (класс ЛсИпоЪаМепа) широко распространены в микробиоценозах природных и техногенных экосистем. Известна способность бактерий семейства М1стососсасеае к разложению ряда природных ароматических, алифатических соединений и ксенобиотиков, поступающих в почву в результате промышленной деятельности человека. Описаны бактерии рода Лт1кгоЪас1ег, участвующие в разложении АС - компонентов нефти, пестицидов, ряда моноароматических соединений (фенолов, фталатов), а также гетероциклических углеводородов [5, 7, 16]. Среди бактерий семейства обнаружены штаммы-деструкторы различных АС. Установлено, что деструкцию фталатов осуществляют
представители родов Micrococcus, Paenarthrobacter, Glutamicibacter,
Arthrobacter [3, 13, 15, 17, 19]. Деструкцию ПАУ, в частности нафталина и фенантрена, осуществляют бактерии родов Arthrobacter, Micrococcus [8, 9]. В то же время молекулярные механизмы деструкции АС (ПАУ, фталатов) у этой группы бактерий остаются практически не изученными [14].
Известно, что на бактериальную деградацию АС существенно влияют условия культивирования (рН, минерализация среды, температура). Показано, что увеличение засоления среды приводит к ухудшению деструкционных и ростовых характеристик бактерий [2, 18]. Однако влияние уровня минерализации среды на эффективность биодеструкции ПАУ и фталатов бактериями сем. Micrococcaceae изучено недостаточно. Имеются единичные публикации о представителях сем. Micrococcaceae, способных разлагать ароматические углеводороды в условиях повышенного содержания солей. Описан штамм Arthrobacter sp. W1, выделенный из активного ила, способный к деструкции ряда АС, включая нафталин и фенол, и к росту в присутствии до 10% NaCl в среде [18]. Галотолерантный штамм Micrococcus luteus DE2008 растет на нитробензоле в присутствии 5% NaCl [21].
Цель исследований - изучение особенностей деструкции ароматических соединений (ПАУ, фталатов) у бактерий семейства Micrococcaceae, изолированных
из промышленных районов Пермского края (в том числе, из района солеразработок г. Березники и г. Соликамск).
Методы исследования
В работе были использованы бактерии-деструкторы ароматических соединений (31 штамм) из рабочей коллекции микроорганизмов лаборатории микробиологии техногенных экосистем «ИЭГМ УрО РАН», представители семейства Micrococcaceae, которые были выделены из техногенно загрязненных экотопов Пермского края (г. Березники, г. Соликамск, г. Оса). Скрининг штаммов бактерий-деструкторов на способность к росту на ароматических соединениях проводили в жидкой и на агари-зованной среде Раймонда следующего состава (г/л): NH4NO3 - 2,0; MgSO4x7H2O -2,0; KH2PO4 - 2,0; N2HPO4 - 3,0; CaChx6H2O - 0,01; Ш2Ш3 - 0,1; дополненной 1% раствором MnSO4x2H2O -2 мл/л и 1% раствором FeSO4x7H2O -1 мл/л [12]. В качестве субстратов использовали ТФК, ОФК, дибутилфталат (ДБФ), диметилфталат (ДМФ), диэтилфталат (ДЭФ), бензоат, протокатеховую кислоту (ПКК) и нафталин в концентрации 1 г/л. Оценка способности бактерий-деструкторов разлагать ТФК в условиях засоления проводилась при выращивании культур в жидкой среде Раймонда с добавлением NaCl в концентрации 30-100 г/л.
Идентификацию отобранных из рабочей коллекции активных штаммов-деструкторов проводили на основе морфологического описания колоний и клеток бактерий, а также анализа нуклеотидных последовательностей гена 16S рРНК. Амплификацию фрагмента гена 16S рРНК осуществляли с использованием бактериальных праймеров 27F и 1492R на ампли-фикаторе «My Cycler» («Bio-Rad Laboratories», США), как описано в [20]. Определение нуклеотидных последовательностей осуществляли с применением набора реактивов Big Dye Terminator Cycle Sequencing Kit на автоматическом секвенаторе Genetic Analyser 3500XL («Applied Biosystems», США), приборная
база кафедры ботаники и генетики растений Пермского национального исследовательского университета.
Утилизацию ТФК и наличие ПКК в среде культивирования определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием хроматографа LC-20AD Prominance («Shimadzu», Япония) с колонкой (с-18 150 х 4,6 мм; «Shima-Aldrich», США) и УФ-детектором SPD-20A (при 205 нм) в системе ацетонитрил -0,1%-ная H3PO4 (70 : 30). В качестве подвижной фазы использовали 80% раствор ацетонитрила при скорости потока 1 мл/мин и температуре 40°С. Идентификацию проводили при сравнении времени выхода пиков экстрактов со стандартными растворами искомых веществ (ТФК и ПКК) в концентрациях 50 и 100 мг/л. Количественное содержание рассчитывали с помощью пакета программ «LCsolution» («Shimadzu», Япония).
Все эксперименты выполнены в трехкратных повторностях. Полученные данные обрабатывали с использованием программы Microsoft Excel 2007.
Результаты и их обсуждение
В результате исследований было установлено, что большинство штаммов сем. Micrococcaceae проявляют способность к росту на ОФК, как единственном источнике углерода и энергии. Фталаты, производные ОФК, - диметилфталат (ДМФ), диэтилфталат (ДЭФ), дибутилфталат (ДБФ) - были обнаружены в загрязненных почвах, грунтах, отходах производства калийного производства в районе г. Березники, г. Соликамска [1], откуда было выделено большинство исследуемых штаммов сем. Micrococcaceae. В связи с тем, что фталаты, в том числе ДМФ, ДБФ, ДЭФ, являются токсичными, трудно разлагаемыми загрязнителями окружающий среды [11], был исследован потенциал бактерий сем. Micrococcaceae разлагать эти поллютанты. Установлено, что большинство исследуемых штаммов, в частности родов Arthrobacter,
Pseudoarthrobacter, Paenarthrobacter,
Glutamicibacter, могут использовать ДБФ в качестве единственного субстрата при росте в жидкой минеральной среде К1 (табл. 1). В результате проведенного скрининга показано, что наиболее активными деструкторами фталатов являлись штаммы: Kocuria sp. WD25, ML17, Paenarthrobacter sp. SA101 и Glutamicibacter PB8-1, способ-
ные к росту на ОФК и сложных эфирах ОФК. Все штаммы-деструкторы сем. Micrococcaceae эффективно использовали ПКК в качестве единственного источника углерода и энергии (см. табл. 1). Этот факт позволяет предположить, что разложение ОФК и ее производных (ДМФ, ДБФ, ДЭФ) исследуемыми бактериями осуществляется через образование проме-
Таблица 1
Рост бактерий сем. Micrococcaceae на фталатах и протокатеховой кислоте_
Штаммы Субстраты
ОФК ТФК ДБФ | ДМФ ДЭФ ДОТФ ПКК
Род Arthrobacter
SF27 ++ - + - - - ++
DF14 + - +/- - +/- - ++
B905 ± - +/- - - - ++
SMB11 ± - + - - - ++
SMB145 ± - + - +/- - ++
PD13-12 ++ + + - + - ++
M56-102 + - + - - - +
Род Glutamicibacter
SN17 ++ - + - + - ++
BO25 + + + - - - ++
BR3-22(1) ± - +/- - - - ++
BR3-22(2) ± - +/- - - - ++
BR4-2 + - + - - - ++
PB8-1 + + + +/- + - ++
NDT18 ± - - +/- - - -
EDT13 ± - - - - - -
Род Pseudoarthrobacter
BO34-1 ++ - - - - - ++
BO19 ++ - - - - - ++
Род Paenarthrobacter
SA101 + + + + + + +
Род Kocuria
ML17 ± + + + ++ +/- +
WD25 + + + + + - +
М87-1 ± - - - - - -
М46-10 ± - - - - - -
M45-1N - - + - +/- - -
72-2 - - - - - - -
69-4 + + - - +/- - +
Род Micrococcus
YKS63t-1 + - + - - - +
38-1 + - + - - - +
43-1 + + - - - - -
G120 + + + - +/- +/- -
72-1 + + - - - - -
72-2 +/- - - - - - -
Род Rothia
SA7 + - - - - - -
Примечание: «++» - хороший рост (значение OП600 = 0,5 о.е. и выше); «+» - наличие роста (OП600 = 0,35 - 0,5 о.е.); «±» -слабый рост (OП600 = 0,2 - 0,35 о.е.); «-» - отсутствие роста, ОФК - орто-фталевая кислота, ТФК - терефталевая кислота, ДБФ -дибутилфталат; ДЭФ - диэтилфталат; ДМФ - диметилфталат; ДОТФ - диоктилтерефталат; ПКК - протокатеховая кислота.
жуточного метаболита - ПКК. Такой путь деструкции этих соединений описан для грамположительных бактерий (представителей сем. Micrococcaceae) (рис. 1).
Среди бактерий семейства Micrococcaceae выявлены бактерии, способные осуществлять деструкцию терефталевой кислоты (ТФК). Бактерии-деструкторы ТФК были отнесены к представителям родов Kocuria, Micro-coccus, Paenarthrobacter, Glutamicibacter, Arthrobacter (см. табл. 1).
Исследованы эколого-физиологиче-ские характеристики активных бактерий-деструкторов рода Kocuria. Штаммы способны к росту в среде как без добавления NaCl, так и при повышенной концентрации соли (до 60 г/л NaCl), и в диапазоне значений pH среды 6,0 - 9,0. Оптимальная температура роста штаммов 28°С, все штаммы росли при температуре от 10 до 40°С, штамм 72 способен к росту при 5°С. Уточнено таксономическое положение штаммов рода Kocuria. На основании анализа гена 16S рРНК установлено, что штамм 69-4, деструктор ОФК и ТФК,
наиболее филогенетически близок штам-
т
му Kocuria rosea DSM 20447Т (уровень сходства 100%). На рис. 2 представлено филогенетическое положение исследуемых штаммов рода Kocuria.
Из образцов активного ила биологической очистки сточных вод АО «Сибур-Химпром» (г. Пермь) выделены штаммы семейства Micrococcaceae, которые идентифицированы как представители рода Rothia (штаммы SA7, SA14, SA16) и рода Paenarthrobacter (штамм SA101). Показано, что штамм Paenarthrobacter sp. SA101 является активным деструктором
ТФК, ДОТФ, а также других фталатов (ОФК, ДМФ, ДБФ, ДЭФ), бензойной, протокатеховой кислот, нафталина, фенантрена (см. табл. 1).
Активные штаммы-деструкторы
ТФК - Косыпа sp. МЬ17 и Косыпа sp. WD25, были использованы для разработки технологии обогащения активного ила на БОС предприятия АО «Сибур-Химпром» (г. Пермь). Получена устойчивая ассоциация бактерий (селектированная из активного ила БОС и штаммов ML17 и WD25), активно утилизирующая ТФК. Установлено, что утилизация ТФК (1 г/л) в лабораторном ферментере объемом 20 л созданной ассоциацией составляла 88,8% в течение трое суток культивирования.
Исследованы два активных штамма-деструктора (штаммы В025, РВ8-1) рода О1Шат1с1Ъас1ет, выделенных из образцов, отобранных на территории солеразработок предприятия ОАО «Уралкалий» (г. Березники, Пермский край) (см. табл. 1). Анализ генов 16S рРНК показал, что штамм В025 имеет наибольший уровень сходства (99,51%) со штаммом О. Иа1орИу^со1а KLBMP 5180"1 (1X993762), а штамм РВ8-1 - 100% сходство с О. агИаНепыз Re117 (N^074608). Нуклеотидные последовательности были размещены в базе данных GenBank: штамм В025 - номер ОК178956; штамм РВ8-1 - номер OK178957.
Штаммы В025, РВ8-1 являются галото-лерантными бактериями, способны к росту на полноценной среде Раймонда [12] без соли и при содержании 90 г/л №С1 в среде культивирования. Установлено, что штаммы обладали широкой субстратной специфичностью и были способны к росту на моно- и полиароматических углеводородах
Дибутилфталат Монобутилфталат орто-Фталевая Протокатеховая
Рис. 1. Путь бактериальной деструкции дибутилфталата в аэробных условиях (Jin, Liang, 2010)
57
78
65
72
Kocuria rosea DSM 204471 (MN840035) M4i-10 69-4
— Kocuria himachaknsis JCM 13326 '(LC113906) M45-1N
5ЭI Kocuria polaris CMS 76or' (KX959605)
-Kocuria salina Hvl4b'(NR 159199)
-Kocuria aegyptia YIM 700031 (NR 043511)
-Kocuria dechangensis NEAU-ST5-33 1 (NR 137239)
-Kocuria oceani FXJ8.095 :(NR 156033)
— Kocuria fiava HO-90411 (CPO13254)
f
-Kocuria sediminis FC3-11 1 (NR 118222)
- Kocuria lurfansnsis HO-9042 (MN82646?) 7E I— Kocuria turfanensis HO-90421 (CP0144S0) - Kocuria subfiava YIM 13062 1 (NR 1445S6)
-SoSaa amarae J18 1 (NR 029045)
■| до I ¡¡¿curia assamensis S9-65 1 (KT989850) \ Kocuria palustris TAGA27 1 (NR 026451)
98
ЭЭ
- Kocuria halotolerans YIM 90716 1 (NR 044025)
100
9öl
— Kamria кoreensis P31 1 (NR 116745) Ко curia uropygioeca 257 1 (NR 157676)
67
IWKocuria urcpygialis 36 1 (NR 157675) - Kocuria marina KMM 3905 1 (NR 025723) -Kbcuria indicn N10-1021 1 (NR 133767)
-Kocuria pelophila RS-2-3 1 (NR 151938)
с
82
MB7-1
Kocuria tyfonicola 4S9 1 (MG 547560) Sc| Kocuria carniphila CCM 132 1 (NR 027193) I Kocuria afrinae P30 1 (KT9S9S56)
-Kocuria gwangalliensis SJ2 1 (NR 116266)
76 |-Kocuria sahicia 1041 (NR 117299)
hz
- Kocuria varians ATCC 15306 1 (NR 114674)
ML17F
Kocuria arsenatis CM1E1 :(NR 148610) -WD25
Kocuria rhisophüa DSM 11926 1 (KJ476722)
Рис. 2. Дендрограмма сходства нуклеотидных последовательностей гена 16SрРНК, показывающая филогенетические отношения между исследуемыми штаммами и типовыми штаммами рода Квсыпа. В скобках указаны номера в GenBank
при культивировании в среде без соли (см. табл. 1), а также в присутствии 30 г/л №С1 в минеральной среде Раймонда. Показана способность штаммов ОШашШЪаМег spp. В025 и РВ8-1 использовать ТФК в качестве ростового субстрата, в том числе в условиях высокой солености среды. Так, на агаризованной минеральной среде Раймонда с ТФК (1 г/л) штаммы росли при концентрации до 60 г/л №С1 в среде культивирования.
Изучено влияние различных концентраций соли на рост штаммов РВ8-1 и В025 в жидкой минеральной среде Раймонда с ТФК (1 г/л). Активный рост штаммов наблюдался в присутствии до 60 г/л №С1 в среде (табл. 2).
Высокие ростовые показатели штаммов зафиксированы при культивировании без добавления №С1, а также и в присутствии 3% №С1. Повышение концентрации №С1 в среде до 6% приводило к увеличению лаг-фазы роста и к небольшому
Таблица 2
Ростовые параметры штаммов вЫат1с1Ьас(ег эрр. РВ8-1, В025 на ТФК и ПКК_
Субстрат ТФК ПКК
Штамм / N80! РВ8-1 В025 РВ8-1 В025
без N80! 30 60 без N80! 30 60 без N80!
Максимальная удельная скорость роста (ч-1) 0,018 ±0,002 0,020 ±0,001 0,018 ±0,003 0,021 ±0,004 0,017 ±0,003 0,016 ±0,002 0,020 ±0,002 0,030 ±0,006
Максимальное значение ОПбоо 0,79 0,80 0,72 0,78 0,77 0,65 0,73 0,91
Лаг-фаза роста (ч) 24 24 78 24 70 93 24 24
снижению оптической плотности культур, однако максимальная удельная скорость роста снижалась незначительно (см. табл. 2). В присутствии 7% №С1 в среде культивирования рост штаммов на ТФК не был зафиксирован. Отмечается корреляция между ростовыми показателями штаммов и снижением концентрации ТФК в среде культивирования. Деструкция терефталата штаммами РВ8-1 и ВО25 составляла 84,5% и 83,5%, соответственно, в среде без добавления соли. С повышением содержания №С1 в среде до 6% отмечалось снижение уровня деструкции субстрата штаммами РВ8-1 и ВО25 до 69,7% и 62,8%, соответственно.
Известно, что деструкция ТФК аэробными бактериями осуществляется через стадию образования цис-1,2-дигидрок-си-1,2-дигидротерефталата, который трансформируется до ПКК с последующим ее разложением до основных продуктов жизнедеятельности микробной клетки [4, 6, 10]. Показана способность исследуемых штаммов В025 и РВ8-1 расти в минеральной среде Раймонда в присутствии 3% №С1 на ПКК в качестве субстрата. Штамм ВО25 имел более высокие параметры роста на ПКК (максимальное значение ОП600, удельную скорость роста), чем штамм РВ8-1 (см. табл. 2). Анализ продуктов утилизации ТФК в культу-ральной среде при росте штамма ВО25 на данном субстрате с использованием метода ВЭЖХ показал присутствие ПКК в концентрации 0,3 и 0,1 г/л через 48 и
70 часов культивирования, соответственно. На основании полученных данных можно предположить, что деструкция ТФК штаммами 01Шат1с1Ъас1вт spp. В025 и РВ8 1 осуществляется с образованием ПКК. Дальнейшее расщепление бензольного кольца протокатехата, вероятно, осуществляется по мета-пути, как было показано ранее для представителя семейства М1стососсасеав штамма Ат1кгоЪас1ег кеузеп 12B [5].
Заключение
Полученные результаты показывают, что бактерии семейства М1стососсасеае широко распространены в техногеннозаг-рязненных экотопах Пермского края, они характеризуются способностью разлагать ароматические поллютанты (ПАУ, фталаты), в том числе при экологически неблагоприятных условиях (повышенной солености и различных рН среды, высоких и низких температурах). Впервые охарактеризованы галотолерантные деструкторы ТФК рода GlutamiciЪacter. Штаммы GlutamiciЪacter spp. BO25 и РВ8-1 способны к эффективной деструкции тере-фталевой кислоты при повышенном засолении среды (до 6% №С1). Максимальная утилизация ТФК штаммами В025 и РВ8-1 зарегистрирована на уровне выше 80%. Охарактеризованные бактерии-деструкторы семейства Мшгососсасеае являются перспективными для разработки эффективных биотехнологий очистки загрязненных/засоленных почв и промышленных стоков.
Библиографический список
1. Бачурин Б.А., Одинцова Т.А. Стойкие органические загрязнители в отходах горного производства // Современные экологические проблемы Севера. Апатиты: Изд-во НЦ РАН,
2006. - Ч. 2. - С. 7-9.
2. Плотникова Е.Г., Алтынцева О.В., Кошелева И.А., Пунтус И.Ф., Филонов А.Е., Гавриш Е.Ю., Демаков В.А., Боронин А.МБактерии-деструкторы полициклических ароматических углеводородов, выделенные из почв и донных отложений района солеразработок // Микробиология. - 2001. - № 1. - С. 61-69.
3. Akita K., Naitou C., Maruyama K. Purification and characterization of an esterase from Micrococcus sp. YGJ1 hydrolyzing phthalate esters // Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. - 2001. -Vol. 65(7). - P. 1680-1683.
4. Bhatt P., Huang Y., Zhan H., Chen S. Insight into microbial applications for the biodegradation of pyrethroid insecticides // Frontiers in Microbiology - 2019 - Vol. 10. - Article 1778 - P. 1-19.
5. Eaton R. W. Plasmid-encoded phthalate catabolic pathway in Arthrobacter keyseri 12B // J. Bacteriol. -2001. - Vol. 183. - № 12. - P. 3689-3703.
6. Hara H., Eltis L.D., Davies J.E., Mohn W.W. Transcriptomic analysis reveals a bifurcated terephthalate degradation pathway in Rhodococcus sp. strain RHA1 // Journal of Bacteriology. -
2007. - Vol. - 189. - № 5. - P. 1641-1647.
7. Hayatsu M., Hirano M., Nagata T. Involvement of two plasmids in the degradation of carbaryl by Arthrobacter sp. strain RC100 // Appl. Environ. Microbiol. - 1999. - Vol. 65. - № 3. - P. 1015-1019.
8. Jegan J., Vijayaraghavan K., Senthilkumar R., Velan M. Naphthalene degradation kinetics of Micrococcus sp., isolated from activated sludge // Clean - Soil, Air, Water. - 2010. - Vol. 38 (9). - P. 837-842.
9. Kallimanis A., Kavakiotis K., Perisynakis A., Sproer C., Pukall R., Drainas C., Koukkou A.I. Arthrobacter phenanthrenivorans sp. nov., to accommodate the phenanthrene-degrading bacterium Arthrobacter sp. strain Sphe3. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. - 2009. - Vol. 59. (Pt 2). - P. 275-279.
10. Liang D.W., Zhang T., Fang H. Phthalates biodegradation in the environment // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2008. - Vol. 80. - P. 183-198.
11. Przybylinka P.A., Wyszkowski E. Environmental contamination with phthalates and its impact on living organisms // Ecol. Chem. and Enginer. - 2016. - Vol. 23(2). - P. 347-356.
12. Raymond R.L. Microbial oxidation of n-paraffinic hydrocarbons // Developments in Industrial Microbiology. - 1961. - Vol. 2. - № 1. - P. 23-32.
13. Shariati S., Ebenau-Jehle C., Pourbabaee A. A., Alikhani H. A., Rodriguez-Franco M., Agne M., Jacoby M., Geiger R., Shariati F., Boll M. Degradation of dibutyl phthalate by Paenarthrobacter sp. Shss isolated from Saravan landfill, Hyrcanian Forests, Iran // Biodegradation. - 2022. - Vol. 33. - P. 59-70.
14. Seo J.-S., Keum Y.-S., Li Q.X. Bacterial degradation of aromatic compounds // Int. J. Environ. Res. Public Health. - 2009. - Vol. 6. - P. 278-309.
15. Stanislauskiene R. , Rudenkov M., Karvelis L., Gasparaviciute R., Meskiene R., Casaite V., Meskys R. Analysis of phthalate degradation operon from Arthrobacter sp. 68B // Biologija. - 2011. -Vol. 57. - № 3. - P. 45-54.
16. Unell M., Nordin K., Jernberg C., Stenstrom J., Jansson J.K. Degradation of mixtures of phenolic compounds by Arthrobacter chlorophenolicus A6 // Biodegradation. - 2008. - Vol. 19(4) - P. 495-505.
17. Vandera E., Samiotaki M., Parapouli M., Panayotou G., Koukkou A.I. Comparative proteomic analysis of Arthrobacter phenanthrenivorans Sphe3 on phenanthrene, phthalate and glucose // J. Proteomics. - 2015. - Vol. 113. - P. 73-89.
18. Wang P., Qu Y., Zhou J. Biodegradation of mixed phenolic compounds under high salt conditions and salinity fluctuations by Arthrobacter sp. W1 // Appl. Biochem. Biotechnol. - 2009. -Vol. 159. - P. 623-633.
19. Wang X., Shen S., Wu H., Wang H., Wang L. Acinetobacter tandoii ZM06 assists Glutamicibacter nicotianae ZM05 in resisting cadmium pressure to preserve dipropyl phthalate biodegradation // Microorganisms. - 2021. - Vol. 9. - P. 1417-1428.
20. Weisburg W.G., Barns S.M., Pelletier D.A., Lane D.J. 16S ribosomal DNA amplification for phylogenetic study // Journal of Bacteriology. - 1991. - Vol. 173. - P. 697-703.
21. Zheng C., Qu B., Wang J., Zhou J., Wang J., Lu H. Isolation and characterization of a novel nitrobenzene-degrading bacterium with high salinity tolerance: Micrococcus luteus // J. Hazard Mater. -2009. - Vol. 165(1-3). - P. 1152-1158.
