CC BY
115
УДК 616.992.282
Е.И. Иванова, С.М. Попкова, Е.Б. Ракова, У.М. Немченко, М.В. Савелькаева, Е.Л. Горбунова
ИЗУЧЕНИЕ АССОЦИАЦИЙ ГРИБОВ РОДА CANDIDA С НЕКОТОРЫМИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ У ЛИЦ С ФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ НАРУШЕНИЯМИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
Институт эпидемиологии и микробиологии НЦ ПЗСРЧ СО РАМН (Иркутск)
В работе изучена частота встречаемости грибов Candida spp. в монокультуре и в ассоциации с условно-патогенными, микроорганизмами, улиц с функциональными, нарушениями.желудочно-кишечного тракта. Улиц младших и. старшей возрастной группах ассоциации, встречаются, чаще, чем. в средней группе (10—18 лет).
Ключевые слова: ассоциации, кандида, условно-патогенная микрофлора, желудочно-кишечный тракт
STUDY OF THE GENUS CANDIDA FUNGI ASSOCIATIONS WITH SOME OPPORTUNISTIC MICROORGANISMS IN PERSONS WITH FUNCTIONAL DISORDERS OF THE GASTROINTESTINAL TRACT
E.I. Ivanova, S.M. Popkova, E.B. Rakova, U.M. Nemchenko, M.V. Savelkayeva, E.L. Gorbunova
Institute of Epidemiology and Microbiology, Scientific Centre of Family Health Problems and Human
Reproduction SB RAMS, Irkutsk
In the article frequency of Candida spp. occurrence in monoculture and in association, with the opportunistic microorganisms in persons with functional disorders of the gastro-intestinal tract are studied. In people younger and. older age groups associations are more often, than in the middle group (10—18 years).
Key words: association, Candida, opportunistic microorganisms, gastro-intestinal tract
Условно-патогенные грибы, являясь составной частью эндоэкологической среды человека, становятся причиной различных заболеваний, активируя свои патогенные свойства лишь при определенных условиях [2, 9]. Наиболее частыми представителем условно-патогенных грибов являются грибы рода Candida [10]. Согласно многочисленным исследованиям, Candida albicans выявляются не менее чем в 30 — 80 % на слизистой оболочки желудка [11]. Обитая на поверхности слизистых оболочек человека, грибы рода Candida вступают в различные взаимоотношения с другими микроорганизмами (представителями нормобиоты и условнопатогенными микроорганизмами). Известно, что в микробных ассоциациях между разными видами микроорганизмов могут возникнуть сложные и неоднозначные взаимоотношения, что может оказать существенное влияние, как на колонизацию слизистой, так и на течение инфекционного процесса [7].
В литературе описаны случаи симбиоза бактерий, имеющих важное медицинское значение. Так, установлено, что дрожжеподобные грибы рода Candida способны усиливать свои патогенные свойства в ассоциации с бактериями, приводя к отягощению состояния пациента вплоть до летального исхода [1].
В связи с увеличением распространенности микозов в последние десятилетия условно-патогенные грибы вызывают к себе пристальный интерес [4, 6, 8].
Цель исследования — выявление частоты встречаемости грибов рода Candida в монокультуре и в ассоциациях с условно-патогенными
микроорганизмами у лиц разных возрастов с функциональными нарушениями желудочно-кишечного тракта.
МЕТОДИКА
За период 2010 г. лабораторией микроэкологии института эпидемиологии и микробиологии НЦ ПЗСРЧ СО РАМН на дисбиоз толстой кишки было обследовано 833 человека с функциональными нарушениями желудочно-кишечного тракта. Возраст обследованных составлял от рождения до 73 лет. Все обследованные за период 2010 г. были разделены на 4 группы с учетом возраста и характеристикой социального и физиологического статуса человека: от рождения до 1 года (новорожденный и грудной период детского возраста), от 1,1 года до 9 лет (группа детсадовского возраста и школьники начальных классов), от 10 до 18 лет (подростки школьного возраста) и от 19 и старше (взрослая группа). При анализе копрологической пробы использовали общепринятый бактериологический метод [3], включающий в себя определение количественного, качественного состава и популяционной плотности выделенной симбионтной микрофлоры кишечника. Грибы рода Candida определяли на среде Сабуро. Количественную оценку содержания КОЕ/г фекалий и характеристику степени микробиологических нарушений при дисбиозе кишечника давали в соответствии с [5]. Статистический анализ полученного материала проводился на основе стандартных методов вариационной статистики с оценкой достоверности различий по t-критерию Стъюдента. Принимались во внимание
196
nilllllllllllllllin IIIIII 1111ГП □ I I I I I □ nil I I I I I
уровни значимости (р) 0,05, 0,01 и 0,001. Различия считали достоверными при р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Из всех обследованных лиц с функциональными нарушениями желудочно-кишечного тракта дрожжеподобные грибы рода Candida в целом высевались у 127 человек (15,2 %). Частота встречаемости Candida spp. по возрастным группам заметно не различалась между собой и составляла: в I группе (дети от рождения до 1 года) — 14,4 ± 2,3 %, во II группе (от 1,1 г. до 9 лет) — 15,6 ± 1,8 %, в III группе (от 10 до 18 лет) — 18,6 ± 4,5 % и в IV группе (от 19 и старше) — 13,6 ± 2,9 % (табл. 1).
Избыточный рост дрожжеподобных грибов рода Candida наблюдался, как правило, при дефиците бифидо- и лактофлоры (69,3 %), тогда как на фоне физиологической плотности популяций данных бактерий Candida обнаруживались только у трети обследованных лиц.
Кроме того, из данного биотопа выделяли следующие условно-патогенные микроорганизмы: Klebsiella spp., Enterobacter spp., Staphylococcus spp., Proteus spp., Pseudomonas spp. и Citrobacter spp. Частота встречаемости Klebsiella spp. имела тенденцию к увеличению с возрастом и составила
16,6 ± 6,4 %; 18,4 ± 5,0 %; 19,0 ± 10,8 % и 21,9 ± 9,7 %, соответственно по группам. Частота встречаемости Enterobacter spp., аналогично Klebsiella spp., увеличивалась с возрастом: I группа — 4,8 ± 3,6 %, II группа — 11,6 ± 4,1 %, IV группа — 15,6 ± 8,5 %, лишь в III группе наблюдалось полное отсутствие данного микроорганизма (рис. 1).
Далее был проведен анализ количества ассо-циантов в кишечном биотопе данных лиц. В целом
частота ассоциаций Candida с одним представителем условно-патогенной микрофлоры с возрастом увеличивалась (от 35,3 до 68,4 %); а с двумя представителями условно-патогенной микрофлоры — уменьшалась, вплоть до полного исчезновения в самой старшей группе.
У детей до 1 года (I группа) выделение грибов Candida в монокультуре встречалось редко (8,8 ± 4,8 % от числа всей группы) по сравнению с другими группами (II группа — 23,4 ± 5,4 %; III группа — 57,2 ± 13,7 %; IV группа — 31,6 ± 10,9 %). А бактериально-грибковые ассоциации в этой группе определялись от 2,9 ± 2,8 % до 11,8 ± 5,5 % случаев. Лишь встречаемость Candida spp. в ассоциации с Staphylococcus spp. и Klebsiella spp. составила 32,5 ± 8,0 %. А у лиц последующих возрастных групп наблюдалось снижение количества данной ассоциации. Так, на вторую группу приходилось таких ассоциаций 5,0 ± 2,8 %, на третью — 7,1 ± 7,1 %, и в четвертой группе данной ассоциации не наблюдалось.
У детей II группы, кроме ассоциации Candida spp. со Staphylococcus spp. и Klebsiella spp., доминирующими ассоциациями были Candida spp. с Klebsiella spp. (25,0 ± 5,5 %), Candida spp. с Enterobacter spp. (17,0 ± 1,5 %) и Candida spp. с Pseudomonas spp. (8,4 ± 3,5 %). Ассоциации кандида с другими условно-патогенными микроорганизмами выявлялись значительно реже и составляли от
1,6 ± 1,6 до 5,0 ± 2,8 %. Данная группа была наиболее ярко выражена по спектру ассоциантов.
В III и IV группах так же наблюдался рост встречаемости ассоциации Candida spp. с Klebsiella spp., которая достигала своего максимума в IV группе (36,8 ± 11,3 %). Кроме того, в III группе ассоциации
Таблица 1
Частота встречаемости Candida spp. у лиц, разных возрастов, обследованных на дисбиоз кишечника за 2010 г.
0-1 год > 1-9 лет 10-18 лет 19 лет и старше
n = 236 n = 383 n = 75 n = 139
абс. % от группы абс. % от группы абс. % от группы абс. % от группы
34 14,4 ± 2,3 60 15,6 ± 1,8 14 18,6 ± 4,5 19 13,6 ± 2,9
80
70
60
50
40
30
20
10
0
■ L I І]
V m 1 Я**! Ife 1 П
0-1 лет
> 1 -9 лет 10-18 лет
19 лет и старше
Candida spp. Enterobacter spp. Proteus spp. Citrobacter spp.
Возраст
■ Klebsiella spp.
□ Stafhylococcus spp. 5 Pseudomonas spp.
^100% °s- 90% g 80% § 70% £ 60% o 50% £ 40%
“ 30%
ra
£ 20% S3 10%
ra
□ Ассоциация Candida spp. с 2 видами УПМ
□ Ассоциация Candida spp. с 1 видом УПМ ■ Candida spp. (монокультура)
55,9 35,3 20 тг 35,7 68,4
56,7
57,2 31,6
23 4
■ 88 В
0-1 лет 1-9 лет 10-18 лет 19 лет и Возраст старше
Рис. 1. Частота выявления условно-патогенных микроор- Рис. 2. Встречаемость грибов рода Candida в монокультуре
ганизмов и Candida spp. у лиц разных возрастов. и в ассоциации с другими условно-патогенными
микроорганизмами.
піімміїмімімп мммммгп м 11 ї і г nil ї її 111
197
Candida spp. с Proteus spp. и Candida spp. с Staphylococcus spp. встречались в равном процентном соотношении (7,1 ± 7,1 %). В группе взрослых присутствовали следующие ассоциации: Candida spp. + Enterobacter spp. (26,3 ± 10,3 %) и Candida spp. + Pseudomonas spp. (5,3 ± 5,2 %) (рис. 2).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Данные результаты свидетельствуют о достаточно высокой встречаемости у лиц разных возрастов, имеющих функциональные нарушения желудочно-кишечного тракта, грибов рода Candida как в монокультуре, так и в ассоциациях с условно-патогенной микрофлорой. Необходимость изучения микроорганизмов как ассоциантов, а не как суммы монокультур, объясняется тем, что в ассоциациях микробные продукты действуют синергически, способствуя росту и размножению бактерий, экспрессии факторов патогенности. Наряду с синергизмом, среди микроорганизмов широко распространены антагонистические взаимодействия, которые зависят от принадлежности микроорганизма к какому-либо семейству или биовару. Кроме того, известно, что бактерии и грибы, находясь в ассоциации, обоюдно изменяют факторы патогенности: у бактерий происходит увеличение гемолитической и ДНКазной активности, а у грибов — снижение липолитической активности.
Наши исследования подтвердили, что дисбиоз, обусловленный дефицитом облигатных бифидо- и лактобактерий, создает условия для предпочтительной адгезии на слизистых кишечника не только дрожжеподобных грибов, но и условно-патогенной микробиоты. Частое выявление ассоциаций Candida spp. с Klebsiella spp., Enterobacter spp., вероятно, объясняется дисбиотическими нарушениями, связанными с предшествующей колонизацией биотопа данными микроорганизмами, создающими условия для последующего заселения грибами, что свидетельствует о необходимости изучения этих межмикробных взаимодействий в ассоциативных симбиозах. Высокая встречаемость Candida spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. в I группе, возможно, свидетельствует о приобретении данных ассоциантов еще в роддоме. Рост носительства Candida spp. (практически в 3 раза по сравнению с I группой) и других условно-патогенных микроорганизмов у детей II группы, вероятно, обусловлен
увеличением контактов в дошкольных учреждениях и изменениями в ежедневном питании. Однако наличие Candida spp. у детей этой возрастной группы, может быть связано и с кандидозом, приобретенным во время пребывания их в роддоме.
ЛИТЕРАТУРА
1. Валышев А.В., Перунова Н.Б., Бухарин О.В. Механизмы формирования бактериально-грибковых ассоциаций в кишечнике человека // Проблемы медицинской микологии. — 2004. — № 6 (2). — С. 65-69.
2. Веселов А.В. Ведение пациентов с канди-дозом: обзор новых рекомендаций IDSA // Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. - 2004. - Т. 6, № 2. - С. 168-185.
3. Диагностика, профилактика и лечение дисбактериозов кишечника. Метод. реком. МЗ СССР. 10-11/4. - М., 1991.
4. Лесовой В.С., Липницкий А.В., Очкуро-ва О.М. Микозы пищеварительного тракта (Обзор) // Пробл. мед. микологии. - 2004. - Т. 6, № 2. -С. 19-21.
5. Отраслевой стандарт ОСТ 91500.11.00042003. Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». Утв. 09.06.03.
6. Хмельницкий О.К. О кандидозе слизистых оболочек // Арх. патол. - 2000. - № 6. - С. 3-10.
7. Хомич Ю.С. и др. Изучение характера взаимоотношений Candida albicans и Lactobacillus plan-tarum при совместном культивировании на поверхности плотной питательной среды // Совр. проблемы науки и образ. - 2006. - № 2 - С. 60-61.
8. Шевяков М.А. Диагностика и лечение канди-доза желудка // Пробл. мед. микологии. - 2002. -Т. 4, № 2. - С. 50.
9. Maraki S. Prospective evaluation of the impact of amoxicillin, clarithromycin and their combination on human gastrointestinal colonization by Candida species // Chemotherapy. - 2001. - Vol. 47. -P. 215-218.
10. Minoli G. A prospective study on Candida as a gastric opportunistic germ // Digestion. - 1982. -Vol. 25. - Р. 230-235.
11. Wu C., Wu S., Chen P. A prospective study of fungal infection of gastric ulcers: clinical significance and correlation with medical treatment // Gastrointest. Endosc. - 1995. - Vol. 42. - P. 56-58.
Сведения об авторах
Иванова Елена Иннокентьевна - лаборант лаборатории микроэкологии ИЭМ НЦ ПЗСиРЧ СО РАМН (664025, г. Иркутск, ул. К. Маркса, 3. Тел. (39-52)24-03-52; e-mail: niiem_irkutsk@mail.ru)
Попкова София Марковна - доктор биологических наук, руководитель лаборатории микроэкологии ИЭМ НЦ ПЗСиРЧ СО РАМН (664025, г Иркутск, ул. К. Маркса, 3. Тел. (39-52)24-03-52; e-mail: niiem_irkutsk@mail.ru)
Ракова Елена Борисовна - научный сотрудник лаборатории микроэкологии ИЭМ НЦ ПЗСиРЧ СО РАМН (664025, г. Иркутск, ул. К. Маркса, 3. Тел. (39-52)24-03-52; e-mail: niiem_irkutsk@mail.ru)
Немченко Ульяна Михайловна - м.н.с. лаборатории микроэкологии ИЭМ НЦ ПЗСиРЧ СО РАМН (664025, г Иркутск, ул. К. Маркса, 3. Тел. (39-52)24-03-52; e-mail: niiem_irkutsk@mail.ru)
198
nilllllllllllllllin II IIIIII П1ГП □ I I II I □ nil II I II
