CC BY
49
УДК 616.314.17-002.2-008.8 С.П. Ярова, А.А. Бессмертный
ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННЫМ ПАРОДОНТИТОМ
Донецкий национальна медицинский университет им. М. Горького
Хронический генерализованный пародонтит (ХГП) относится к наиболее актуальным проблемам современной стоматологии [1, 2]. Повышение эффективности диагностики и лечения данного заболевания считаются одними из главных задач стоматологической науки. Одним из направлений углубленного изучения патогенеза ХГП является определение активности протеолитических ферментов в слюне у этой категории пациентов [3].
Целью работы стало изучение активности в ротовой жидкости (РЖ) больных ХГП антиокси-дантных, про- и противовоспалительных ферментов, а также оценка их клинической значимости.
Материал и методы исследования
Под наблюдением находились 97 больных ХГП в возрасте от 24 до 78 лет, из них 44,3% мужчин и 55,7% женщин. В мужской группе длительность заболевания составляла 3,5±0,23 лет, а в женской - 3,7±0,31 лет. У 37 (38,1%) больных констатирована минимальная степень тяжести ХП (I ст.), еще у 37 (38,1%) - умеренная (II ст.) и у 23 (23,7%) - высокая (III ст.). При оценке тяжести заболевания учитывали пробы Шиллера-Писарева и Кулаженко, индексы кровоточивости десен, Рамфьерда, Федорова-Володкиной, Грина-Вермильона, Рассела и CPITN.
Сопутствующая патология у пациентов основной группы распределялась следующим образом: хронический гастродуоденит диагностирован у 32% больных, гипертоническая болезнь I-II стадии
- у 18%, хронический холецистит - у 11%, сахарный диабет - у 9%, ишемическая болезнь сердца
- у 7%, хронический вирусный гепатит - у 6%, язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки - у 2%, нейроциркуляторная дистония по кардиальному типу - у 2%, хронический пиелонефрит - у 1%, эутиреоидный зоб - у 1%, сахарный диабет 1 типа у 3%, 2 типа - у 6%.
Контрольная группа составила 23 практически здоровых человека (14 мужчин и 9 женщин) в возрасте от 18 до 54 лет.
Больным утром натощак предлагали прополоскать полость рта дистиллированной водой. Спустя 30 минут производили забор РЖ в объеме 6-7 мл в пробирки, которые помещали на ледяную баню, а затем центрифугировали в течение 10 минут при 1500 об/мин. Использовали для исследования надосадочную жидкость.
С помощью анализатора «Vitalab Flexor» (Гол-
ландия) в РЖ изучали активность лактатдегидро-геназы (ЛДГ), кислой (КФ) и щелочной фосфатаз (ЩФ), у-глутаминтранспептидазы (ГТП), амилазы, аланиновой (АЛТ) и аспарагиновой трансаминаз (АСТ). Интенсивность в РЖ мурамидазы (лизоци-ма), супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы оценивали спектрофотометрически. Для определения уровня мурамидазы использовали культуру Micrococcus lisodeioticus.
Статистическая обработка полученных результатов исследований проведена на комьютере с помощью вариационного, корреляционного, регрессионного, одно- и многофакторного дисперсионного анализа (программы “Microsoft Excel” и “Statistica”).
Результаты исследования и их обсуждение
Активность ферментов в РЖ больных и здоровых людей представлена в таблице 1. При ХГП отмечается уменьшение активности мурамидазы в 2,1 раза (p<0,001) и каталазы на 19% (p=0,049) на фоне повышения уровня ЩФ на 32% (p=0,002). В целом, при данном заболевании регистрируется снижение (<М-б здоровых) активности мурами-дазы во всех случаях, КФ - в 18% наблюдений, СОД - в 14%, каталазы - в 44%, увеличение (>М+б) активности ЛДГ - в 14%, ЩФ - в 62%, ГТП
- в 16%, амилазы - в 21%, АЛТ - в 12%, АСТ -17%. Можно сделать следующее заключение: уменьшение активности в РЖ мурамидазы <7 мг/мл (<M-3m здоровых) свидетельствует о наличии у человека ХГП.
На интегральную палитру ферментной активности в смывах из полости рта оказывают влияние пол больных (p=0,005), их возраст (p=0,006), длительность заболевания (p=0,005), но не наличие и характер сопутствующей патологии. Необходимо отметить, что по данным дисперсионного анализа от пола пациентов мало зависят параметры активности отдельных ферментов, хотя средние значения у мужчин активности ЛДГ ниже на 18% (p=0,012), а ЩФ и ГТП соответственно на 20% (p=0,010) и на 13% (p=0,046) выше.
Активность в РЖ мурамидазы прямо коррелирует с СОД (p=0,019), но обратно соотносится с ЛДГ (p=0,005), ЩФ (p=0,019) и АЛТ (p=0,025), ЛДГ позитивно связана с КФ (p=0,032), ГТП - с амилазой (p=0,047) и АСТ (p=0,003), амилаза - с АЛТ (p<0,001), АСТ - с каталазой (p=0,032). Кроме того, активность КФ обратнo связана с амилазой. (p=0,011).
На общую ферментную активность оказывает влияние тяжесть ХГП (р<0,001). Согласно возрастанию выраженности патологического процесса увеличивается активность ЩФ на фоне уменьшения содержания в РЖ мурамидазы. Если при I ст. тяжести заболевания по сравнению со здоровыми людьми изменяется лишь активность мурамидазы (р<0,001), то при II ст. уже и ЩФ (соответственно р<0,001), а при III ст. - мурамидазы (р<0,001), ЩФ (р<0,001) и ГТП (р=0,016) при параллельном уменьшении СОД (р<0,001) и каталазы (р=0,048)
- энзимов системы антиоксидантной защиты. Достоверные различия при II и III ст. касаются активностей мурамидазы (р=0,007), ЩФ (р=0,001) и СОД (р=0,024). Активность мурамидазы <3,4 мг/мл (<М-3т больных), СОД<2,3 Е/мг и ЩФ>102 МЕ/л (>М+3т) указывают на тяжелое течение ХГП.
По данным однофакторного дисперсионного анализа тяжесть ХГП влияет на активность мура-
мидазы (р<0,001), ЛДГ (р<0,001), КФ (р=0,032), ЩФ (р=0,001) и СОД (р=0,033), а регрессионный анализ свидетельствует о зависимости от выраженности клинико-рентгенологических признаков заболевания уровней в РЖ мурамидазы (р<0,001), каталазы (р=0,036) и ЩФ (р<0,001), причем с первыми двумя энзимами имеет место обратная связь. Полученные данные подтвержа-ют клиническую значимость мурамидазы и ЩФ при оценке степени тяжести ХГП.
Таким образом, у всех больных ХГП в РЖ отмечается уменьшение вдвое активности мурами-дазы и у 44% из них каталазы на фоне повышения в 62% случаев уровня ЩФ, показатели которых коррелируют между собой и с ЛДГ, КФ, амилазой, СОД, АЛТ и АСТ. Полученные результаты обосновывают целесообразность использования в комплексном лечении больных ХГП ингибиторов протеолитических ферментов и антиоксидантов.
Таблица 1
Показатели активности ферментов в РЖ больных ХГП и здоровых людей
Ферменты Группы обследованных S p
здоровые (n=23) больные (n=97)
Мурамидаза, мг/мл 7,8±0,20 3,8±0,14 12,65 <0,001
ЛДГ, МE/л 159,5±12,45 160,9±6,32 0,10 0,925
КФ, МE/л 1,9±0,18 1,8±0,08 0,60 0,551
ЩФ, МE/л 70,2±3,58 92,3±3,28 3,18 0,002
ГТП, МE/л 4,6±0,29 5,1±0,14 1,63 0,104
Амилаза, МE/л 9,5±0,33 10,0±0,18 1,22 0,224
СОД, E/мг 3,2±0,21 2,7±0,12 1,66 0,101
Каталаза, мкат/л 2,1 ±0,15 1,7±0,08 1,98 0,049
АЛТ, МE/л 6,6±0,29 6,8±0,14 0,61 0,544
АСТ, МE/л 8,8±0,26 8,9±0,13 0,20 0,839
Литература
1. Заболевания пародонта: учеб.пособие / А.В. Борисенко. - К.: вСи «Медицина», 2013. - 456 с. -(Секреты терапевтической стоматологи).
2. Мащенко И.С. Новые аспекты патогенеза и лечения генерализованного пародонтита / И.С. Маще-
нко, А.В. Самойленко // Вісн. стоматол. - 2002. -№1. - С.12-15.
Screening of periodontitis with salivary enzyme tests /[ Nomura Y., Tamaki Y., Tanaka T. et al.]. - J. Oral Sci. - 2006. - Vol.48. - №4. - P.177-183.
Стаття надійшла 11.09.2013 р.
Резюме
У больных хроническим генерализованным пародонтитом в ротовой жидкости отмечается уменьшение вдвое активности мурамидазы и у 44% из них каталазы на фоне повышения в 62% случаев уровня щелочной фосфатазы, показатели которых коррелируют между собой и с лактатдегидрогеназой, кислой фосфатазой, амилазой, супероксиддисмутазой, аланиновой и аспарагиновой трансаминазой, а интегральная ферментная палитра зависит от пола и возраста больных, длительности и степени тяжести заболевания, что, в первую очередь, касается активности мурамидазы и щелочной фосфатазы, имеющих диагностическую и прогностическую значимость.
Ключевые слова: хронический пародонтит, ротовая жидкость, ферменты.
Резюме
У хворих на хронічний генералізований пародонтит в ротовій рідині відзначається зменшення вдвічі активності мурамідази і у 44% з них каталази на тлі підвищення в 62% випадків рівня лужної фосфатази, показники яких корелюють між собою та з лактатдегідрогеназою, кислою фосфатазою, амілазою, суперо-ксиддисмутазою, аланіновою і аспарагіновою трансаміназою, а інтегральна ферментна палітра залежить від статі й віку хворих, тривалості та ступеня тяжкості захворювання, що, в першу чергу, стосується активності мурамідази і лужної фосфатази, котрі мають діагностичну та прогностичну значущість.
Ключові слова: хронічний пародонтит, ротова рідина, ферменти.
Summary
At sick chronic periodontitis in a mouth liquid is marked reduction twice of activity of muramidase and at 44% from them katalase on a background the increase in 62% of cases of level of alkaline fosfatazes, the indexes of which correlate between itself and with laktatdegidrogenases by sour fosfatase, by amilase, superoksiddismu-tase, alaninovoy and asparaginovoy transaminase, and an integral enzymic palette relies on a floor and age of patients, duration and degree of weight of disease, that, above all things, touches activity of muramidase and alkaline fosfatase having meaningfulness diagnostic.
Key words: chronic periodontitis, mouth liquid, enzymes.
