CC BY
11Abstracts Nationwide scientific forum of students with international participation «STUDENT SCIENCE - 2020»
Затем тканевой материал промывали под проточной водой и проводили по схеме: изопропанол (И), с повышением концентрации спирта от 75% до 100% — промежуточная среда (И + М) — минеральное масло (М). Заливали материал в расплавленный парафин с добавлением 8% пчелиного воска и 1% диметилсульфоксида. Нарезку материала осуществляли на ротационном микротоме МПС-2.
Депарафинирование срезов производили по схеме: уайт спирит — изопропанол — вода. Окрашивание препаратов проводилось с помощью красителей: гематоксилин-эозин [2], альциа-новый синий [3], по Маллори[3], по Ван-Гизону[3]. При заключении препаратов использовали ал-кидно-уретановый лак.
Результаты: при соблюдении всех условий приготовления препаратов [1] трудностей с нарезкой материала не возникло. Метод требует дальнейшей модификации.
Выводы: метод проводки материала с использованием изопропанола и минерального масла не вызывает его переуплотнение. Преимуществом так же является отсутствие необходимости использования патогенных веществ (ксилол, хлороформ). Однако требуется длительная проводка материала. Данный метод может быть рекомендован для его реализации в гистологических лабораториях. Литература
1. Buesa René J., & Peshkov M.V. Histology without xylene, 2009. Annals of diagnostic Pathology 13, 246-256.
2. Пирс Э. Теоретическая и прикладная гистохимии, 1962. Издательство иностранной литературы, Москва.
3. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Гилерович Е.Г. Морфологическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии, 2013. СпецЛит, Санкт-Петербург.
изменения в цитоАРХитЕктоникЕ и распределении гамкергических нейронов в неокортексе после воздействия острой перинатальной гипоксии в ранний постнатальный период и возможность их фармакологической коррекции
Сагомонов А. В.
Научный руководитель: д.б.н. доцент Хожай Л.И.2, преподаватель Миронов Т.И.1 Кафедра гистологии и эмбриологии имени профессора А.Г. Кнорре Лаборатория онтогенеза нервной системы
Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН
Контактная информация: Сагомонов Антон Витальевич — студент 2 курса, педиатрический факультет. E-mail: anton.sag.lon@gmail.com
Ключевые слова: неокортекс, гипоксия, ГАМК
Актуальность: неокортекс является важной структурой конечного мозга, который осуществляет многочисленные физиологические функции: сенсорные, моторные, когнитивные, зрительные, слуховые и т.д. [1] Эти функции контролируются разными нейротрансмиттерами, из которых основным тормозным является ГАМК (гамма-аминомасляная кислота). Кортикальные ГАмКергические нейроны отвечают за тормозную трансмиссию в неокортексе и играют ключевую роль в регуляции кортикальных входов. [2] Нарушения в неокортикальной ГАМКер-гической сети приводят у человека к тяжелым нейрогенным расстройствам: шизофрении, эпилепсии, аутизму.
FORCIPE
VOL. 3 SUPPLEMENT 2020
ISSN 2658-4174
Материалы всероссийского научного форума студентов с международным участием «СТУДЕНЧЕСКАЯ НАУКА - 2020» 181
Цель исследования: изучить структурные изменения и изменения в распределении ГАМ-Кергических нейронов в неокортексе в постнатальный период после воздействия перинатальной гипоксии, а также оценить возможность их коррекции.
Материалы и методы: работа выполнена на крысах линии Wistar. Воздействие гипоксии на головной мозг осуществлялось на 2 постнатальные сутки в течение 1 часа в барокамере, содержащей 7,6-7,8% кислорода. Работа проведена на 3 группах животных: 1. крысята, подвергавшиеся воздействию гипоксии; 2. крысята, подвергавшиеся воздействию гипоксии и получавшие фенибут (препарат, производный ГАМК) в терапевтической дозе в течение 5-10 дней; и 3. (контрольная группа) интактные животные того же возраста. Исследовали сенсомоторную область неокортекса на 5, 10, 20 и 40 постнатальные сутки (П5, П10, П20, П40). В работе использовали метод иммуногистохимии на выявление ГАмКергических нейронов с применением поликло-нальных антител к глутаматдекарбоксилазе (Abcam), и метод окраски по Нисслю. Анализ материала проводился при помощи светового микроскопа Leica DME (Германия) и цифровой камеры Leica EC3 (Германия). Для статистической обработки данных использовали прикладные компьютерные программы Statistica 8.0, One-way ANOVA, t-критерий Стъюдента.
Результаты: показано, что на ранних постнатальных сроках (П5, П10) после воздействия перинатальной гипоксии в сенсомоторной области неокортекса имеют место значительные изменения: истончение всех слоев, уменьшение размеров тел нейронов, места выпадения нейронов, клетки с признаками хроматолиза и апоптоза, клетки-тени. В верхних слоях II-III обнаружены нейроны с вакуолизированной цитоплазмой и деформированными ядрами. После применения фенибута структурные нарушения в неокортексе почти не выявлялись. Иммуногистохимическое исследование показало, что перинатальная гипоксия вызывает сокращение популяции ГАмКер-гических интернейронов в неокортексе. Однако применение фенибута в терапевтической дозе ведет к восстановлению численности популяции тормозных интернейронов в коре.
Выводы: перинатальная гипоксия вызывает нарушение цитоархитектоники в неокортексе и оказывает повреждающее действие на его тормозную систему, вызывая сокращение популяции ГАМКергических нейронов. [3] Применение фенибута оказывает нейропротекторное действие. Литература
1. Miguel Marín-Padilla The Human Brain: Prenatal Development and Structure. Springer, 2010.
2. Tremblay R., Lee S., Rudy B. GABAergic interneurons in the neocortex: from cellular properties to circuits //Neuron. — 2016. — T. 91. — № . 2. — С. 260-292.
3. Fowke T. M. et al. Loss of interneurons and disruption of perineuronal nets in the cerebral cortex following hypoxia-ischaemia in near-term fetal sheep //Scientific reports. — 2018. — T. 8. — № . 1. — С. 1-13.
РОЛЬ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПАРАВЕРТЕБРАЛЬНЫХ МЫШЦ В ОПРЕДЕЛЕНИИ ЭТИОЛОГИИ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА
Сапрыкина Ю. О.
Научный руководитель: преподаватель Миронов T. И.
Кафедра гистологии и эмбриологии имени профессора А.Г. Кнорре
Санкт-Петербургский" государственный" педиатрический" медицинский" университет
Контактная информация: Сапрыкина Юлия Олеговна — студентка 2 курса Педиатрического факультета. E-mail: saprykinajulja@gmail.com
Ключевые слова: идиопатический сколиоз, паравертебральные мышцы, иммуногистохимия
Актуальность: идиопатический сколиоз (ИС) развивается в детском возрасте, в период активного формирования скелета и всех прилегающих к нему структур. Паравертебральные мышцы, являясь основной поддерживающей структурой позвоночника, играют первостепенную роль в реализации процессов ротации позвонков при патологии.
FORCIPE
ТОМ 3 СПЕЦВЫПУСК 2020
eISSN 2658-4182
