CC BY
20
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
чество НГ с фенотипом CD64+CD32+CD11b+ составляет лишь 1,63±0,68%, при этом у доношенных новорожденных с врожденной пневмонией бактериальной этиологии имеет место значительное, — в 12,9 раза повышение количества НГ с фенотипом CD64+CD32+CD11b+ — до 21,07±0,88% (р < 0,001). Использование многоцветного цитофлуорометрического исследования позволило получить информацию об особенностях одномоментной экспрессии нескольких мембранных рецепторов НГ (FcyRI, FcyRII, C3b), имеющих большое значение для реализации фагоцитарной функции НГ, у здоровых доношенных новорожденных и у новорожденных с врожденной пневмонией бактериальной этиологии. Установлено, что у доношенных новорожденных с врожденной пневмонией имеет место значительное повышение количества НГ периферической крови с фенотипом CD64+CD32+CD11b+ — в 12,9 раза достоверно превышающее количество НГ с подобным фенотипом у здоровых доношенных новорожденных. Исследование количества НГ периферической крови с фенотипом CD64+CD32+CD11b+ может быть использовано с диагностической целью: в качестве раннего биомаркера врожденной пневмонии бактериальной этиологии, что позволит своевременно оптимизировать лечебную тактику и подтвердить необходимость проведения антибактериальной терапии.
АКТИВНОСТЬ СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА У ДЕТЕЙ С ОСТРЫМ ГЕМАТОГЕННЫМ ОСТЕОМИЕЛИТОМ
Трофимов В.В., Гаврилюк В.П., Костин С.В., Конопля А.И., Ефременков А.М.
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Курская областная детская больница № 2, Курск, Россия Детская областная клиническая больница, Белгород, Россия
Введение. Среди нозологических форм острой хирургической инфекции у детей по тяжести течения, трудностям диагностики и неблагоприятным исходам доминирующее место принадлежит острому гематогенному остеомиелиту. Частое поражение суставов, деформации и патологические переломы, метастазы гнойной инфекции, значительная частота множественных поражений скелета, наличие фатальных осложнений дополняют характеристику тяжести и создают предпосылки к разнообразию клинических проявлений остеомиелитов. Важная роль в патогенезе острого гематогенного остеомиелита отводится факторам иммунной защиты, для этого необходимо определение изменений в иммунной системе, для разработки схем их коррекции и методов поддержки иммунной системы.
Цель и задачи. Установить уровень в плазме крови компонентов системы комплемента при остром гематогенном остеомиелите у детей.
Материалы и методы. Под постоянным наблюдением на базе ОБУЗ «Курская областная детская больница № 2» находилось 16 детей в возрасте от 8 до 15 лет (средний возраст 9,6±0,7 лет) с острым гематогенным остеомиелитом, местно-очаговой формы, которым выполнялось экстренное оперативное вмешательство. Лабораторные методы исследования крови проводились на 1 и 30 сутки с момента поступления в стационар по общепринятым методикам. Количественная оценка уровней С3, С4, С3а, С5, С5а-компонентов системы комплемента, фактора Н и С1-ингибитора проводилась с помощью тест-систем (ООО «Цитокин», Санкт-Петербург) методом твердо-
фазного иммуноферментного анализа. Группа контроля состояла из 12 здоровых доноров-добровольцев того же возраста.
Результаты. У детей с острым гематогенным остеомиелитом в плазме крови выявлено повышение уровня компонентов системы комплемента — С3, С3а, С4, С5, С5а и регуляторов — фактора Н и С1-инг. Сразу после оперативного лечения (остеоперфорации) в плазме крови выявлено еще большее повышение концентрации С3а и С5а, фактора Н и С1-инг. К моменту выписки из стационара после стандартного комплексного лечения нормализуется концентрация С3 и С5а-компонента комплемента и фактора Н, тогда как концентрация С3а и С4 остается на прежнем уровне, а уровень С1-инг. повышается больше, чем до лечения.
Заключение. Из вышесказанного можно сделать вывод, что при остром гематогенном остеомиелите у детей система комплемента находится в активном состоянии (происходит повышение общей активности комплемента, об этом можно судить по концентрации С3а, С5 и С5а). Мощная стимуляция системы комплемента, реализуется как по классическому пути, так и по альтернативному путям (об этом свидетельствует повышение С4—компонента и СЗ-компонента соответственно). Несмотря на активное состояние системы комплемента, компенсаторно происходит повышение концентрации ингибиторов классического и альтернативного путей активации (повышение концентрации С1-инг. и фактора Н).
ИЗМЕНЕНИЯ В ИММУННОЙ СИСТЕМЕ ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ БРОНХИТОМ, В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЭТИОЛОГИЧЕСКОГО ФАКТОРА
Файзуллаева Н.Я., Азизова З.Ш., Джумаева Д.Н.
Республиканский научный центр иммунологии Министерства здравоохранения РУз, Ташкент, Узбекистан
Несмотря на сложную организацию и совершенство защитных механизмов слизистых оболочек, бактериальные и вирусные патогены нередко успешно преодолевают все барьеры, проникают во внутреннюю среду организма и вызывают заболевание. Целью исследования явилось изучение состояния иммунной системы детей с хроническим бронхитом. Были обследованы 53 ребенка в возрасте от 4 до 7 лет, находившиеся в отделении пульмонологии научно-практического медицинского центра педиатрии МЗ РУз с диагнозом хронический бронхит. В зависимости от этиологического фактора дети были разделены на 4 группы: 9 детей с острым бронхитом, 16 — с хроническим обструктивным бронхитом легких, 15 — с хроническим бронхитом на фоне паразитарной инвазии и 9 детей с ас-моидным бронхитом. 35 практически здоровых детей того же возраста составили контрольную группу. Был применен комплекс тестов, включающий: иммунофенотипиро-вание ^3, CD4, CD8, CD16, CD20), определение уровня цитокинов (ГЬ-1, ^-8), иммуноглобулинов IgА, ^М, IgG, СЗ компонента комплемента и лактоферрин.
Результаты исследования показали, что при ОБ и ХОБ наблюдаются изменения, сопровождающиеся лей-ко- и лимфоцитозом (Р < 0,05), снижением общего пула Т-лимфоцитов и Т-хелперов (Р < 0,05). И как результат дисбаланса субпопуляционного состава Т-лимфоцитов у детей с острым бронхитом, иммунорегуляторный индекс (CD4+/ CD8+) смещен в сторону подавления хелперной активности. При ОБ и ХОБ резко снижен уровень CD25+ (Р < 0,05)
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунологические проблемы в педиатрии Immunological problems in pediatrics
и повышен CD95+ (Р < 0,01). Число CD16+, CD20+ и CD23+ в периферической крови повышено (Р < 0,05). Концентрация IgG и IgА снижена (Р < 0,05), а ^М и ^Е — повышена (Р < 0,5). Уровень С3 компонента комплемента выше контрольных значений (Р < 0,01), а уровень лактоферина выше значений контрольной группы (Р < 0,01) при ОБ и ниже у детей с ХОБ (Р < 0,05). При ОБ и ХОБ уровень Ш-1р, Ш-6, Ш-8 был выше значений контрольной группы, а уровень ниже (Р < 0,01). У детей с хроническим бронхитом на фоне паразитарной инвазии снижен уровень Т-лимфоцитов и субпопуляций (CD4+ и CD8+). На фоне сниженного содержания Т-лимфоцитов и его субпопуляций уровень киллерной активности, содержание В-лимфоцитов, CD23+ клеток и лимфоцитов с маркером апаптоза (CD95+) достоверно снижены (Р < 0,01). При этом наблюдалось сниженное содержание лимфоцитов с маркером ранней активации (CD25+) (Р < 0,05). Уровень IgG в 1,5 раза, а уровень IgA — в 1,4 раза был ниже контрольных значений (Р < 0,01). Концентрация ^М была в пределах контрольных значений, наблюдалась гиперпродукция общего ^Е (Р < 0,001). Повышенный уровень С3 компонента комплемента и лактофер-рина характерно для паразитарной инвазии. У детей с ХБ на фоне паразитарной инвазии уровень изученных цитокинов достоверно повышен, как провоспалительных (ГЬ-1р, ГЬ-6, Ш-8) так и противовоспалительного — Ш-4, (Р < 0,05-0,01). При этом наблюдается повышенный уровень ШЫу.
Астматический бронхит — инфекционно-аллергиче-ское заболевание нижних дыхательных путей, характеризующееся гиперсекрецией слизистой, отеком стенок, спазмом крупных и средний бронхов. При астматическом бронхите, в отличие от бронхиальной астмы, обычно не возникает приступов выраженного удушья. Тем не менее, в пульмонологии астматический бронхит расценивается как состояние предастмы.
Астматический бронхит имеет полиэтиологическую природу. При этом непосредственными аллергенами могут выступать как неинфекционные агенты, так и инфекционные факторы (вирусные, грибковые, бактериальные, паразитарные).
В состоянии иммунной системы детей с асматическим бронхитом наблюдаются изменения, сопровождающиеся снижением общего пула CD3+, CD4+ и CD8+ (Р < 0,010,05). Киллерная активность (CD16+) и лимфоциты ранней активации (CD25+) достоверно снижены (Р < 0,01). Наблюдается повышение уровней CD20+-, CD23+ и CD95+ лимфоцитов (Р < 0,01-0,05). При изучении гуморального звена были выявлены нарушения в синтезе иммуноглобулинов, которые выражались сниженным уровнем IgG и гиперпродукцией IgA, ^Е (Р < 0,01-0,05). Выявлен сниженный синтез СЗ-компонента комплемента и лактоферрина (Р < 0,05). Наблюдалась гиперсекреция всех изученных цитокинов.
Таким образом, механизм формирования воспаления при бронхитах напрямую связан с дисбалансом и изменением функциональной активности параметров иммунной системы. Слизистые респираторного тракта постоянно подвергаются воздействию разнообразных чужеродных веществ, аллергенов и микроорганизмов. Барьерная функция слизистых, заключающаяся в предотвращении фиксации и проникновения патогенных микроорганизмов во внутреннюю среду организма, осуществляется комплексом защитных механизмов: барьерной механической функцией слизистых, рецепторами врожденного и адаптивного иммунитета
В целом снижение иммунокомпетентности при брон-холегочных заболеваниях, связанных с сочетанным действием патогенов обусловлено следующими основными механизмами:
— перераспределением иммунокомпетентных клеток с опустошением зон, обеспечивающих наиболее благоприятные условия для развития оптимального иммунного ответа (например селезенка, лимфотические узлы);
— активацией различных органных систем (генов, ре-цепторного аппарата клеток, сигнальных путей), сопровождающихся изменением функциональной активности иммунокомпетентных клеток;
— усилением запрограммированной гибели клеток (апоптоз) под действием различных факторов.
АНАЛИЗ ЧАСТЫХ МУТАЦИЙ В ГЕНЕ СПВ В УЗБЕКИСТАНЕ
Файзуллаева Н.Я., Хегай Т.Р.
Республиканский научный центр иммунологии Министерства здравоохранения РУз, Ташкент, Узбекистан
Муковисцидоз (МВ, СБ) — аутосомно-рецессивное заболевание, обусловленное мутациями в гене CFTR, му-ковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости. Ген CFTR расположен на длинном плече хромосомы 7 в области q31, имеет протяженность около 250 т.п.н. и включает 27 экзонов. К настоящему времени выявлено более 1800 мутаций и около 250 полиморфизмов в гене CFTR. Распределение и частота CFTR-мутаций значительно различаются в разных странах и этнических группах. Наиболее распространенной из CFTR-мутаций, приводящих к МВ, у европейцев является мутация F508del.
Цель. Анализ распределения частот наиболее распространенных мутаций в гене CFTR в Узбекистане.
Молекулярно-генетический анализ проведен у 58 больных МВ детей из неродственных семей в возрасте от 1,5 месяцев до 16 лет. Контрольную группу составили 60 здоровых детей. Генотипирование мутаций (CFTR dele2,3(21kb), СБТК_Б508ас1, CFTR_G542X, W1282X, CFTR_N1303K, CFTR_2143delT, CFTR_2184insA, CFTR_3849+10kbC > ^ осуществлялось методом RT-PCR с использованием реагентов «НПО ДНК-Технология» и «Синтол» (г.Москва, РФ), анализ кривых плавления и по «конечной точке», качественный анализ. Материал для исследования: Периферическая кровь. Выделение ДНК из лейкоцитов венозной крови человека проводилось модифицированным спиртово-солевым методом.
Статистический анализ данных проводили при помощи программы R и Statgraphics Р1ш 5,0. Были изучены 8 наиболее частых мутаций гена CFTR ассоциированных с муковисцидозом. Анализ генетической ассоциации гена CFTR на модели «случай—контроль» показал, что среди детей с муковисцидозом наиболее частой и достоверной была мутация CFTR_F508del, с показателем OR = 13,73 при р = 0,001. Другой рисковой мутацией была установлена CFTR_N1303K: OR = 14,18 при р = 0,01. Остальные шесть мутаций выявлены не были ни в одном случае. Таким образом, показана достоверная роль 2-х мутаций гена CFTR в развитии муковисцидоза.
