CC BY
92
УДК 616.248-036.12-053.2: [612.111.7+612.398.133]
ИЗМЕНЕНИЯ СВОЙСТВ ТРОМБОЦИТОВ И ПОКАЗАТЕЛЕЙ ГЕМОСТАЗА ПРИ ПЕРСИСТИРУЮЩЕМ ТЕЧЕНИИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТЫ У ДЕТЕЙ
Татьяна Геннадьевна Глазова*, Аркадий Исаакович Рывкин, Раиса Матвеевна Ларюшкина,
Сергей Валерьевич Диндяев
Ивановская государственная медицинская академия
Реферат
Цель. Установление особенностей структурно-функциональных параметров тромбоцитов и коагуляционного звена гемостаза у детей с бронхиальной астмой.
Методы. Тромбоцитарные параметры исследовали на автоматическом гематологическом анализаторе «Cobas Vega», адгезивно-агрегационную активность тромбоцитов - экс-пресс-методом по Шитиковой, функциональные характеристики кровяных пластинок — по внутриклеточному уровню нитрит-ионов, содержанию общих фосфолипидов и холестерина методом тонкослойной хроматографии, интенсивности перекисного окисления липидов в их мембранах, концентрации в них биологически активных веществ методом Фальке — Хилларпа, коагулофибриноли-тическую систему — путем электрокоагулографии, функцию внешнего дыхания — по компьютерной спирометрии.
Результаты. При обострении бронхиальной астмы выявлена тенденция к увеличению среднего объема тромбоцитов и коэффициента вариации тромбоцитометрической кривой, уменьшению тромбокрита. В приступном периоде бронхиальной астмы пул кровяных пластинок находился в состоянии метаболической активации: окращалось время агрегации тромбоцитов, в них возрастал уровень малонового диальдегида, серотонина, катехоламинов и холестерина по сравнению с контролем. Зарегистрировано уменьшение продолжительности начальных этапов свертывания и времени образования фибринового сгустка в Ш фазе гемостаза в сравнении с контролем.
Выводы. Выраженность функциональных нарушений кровяных пластинок и гемостаза коррелирует с тяжестью бронхиальной астмы.
Ключевые слова: бронхиальная астма, дети, тромбоциты, гемостаз.
CHANGES OF THE PROPERTIES OF PLATELETS AND HEMOSTASIS INDICES DURING PERSISTENT COURSE OF BRONCHIAL ASTHMA IN CHILDREN T.G. Glazova, A.I. Rivkin, R.M. Laryushkina, S.V. Dindyaev. Ivanovo State Medical Academy. Aim. To establish the structural and functional characteristics of platelets and coagulation parameters of hemostasis in children with bronchial asthma. Methods. Platelet parameters were studied on an automated hematology analyzer «Cobas Vega», the adhesive and aggregation platelet activity - by the express method of Shitikova, the functional characteristics of platelets - by the intracellular levels of nitrite ions, total phosphorus and cholesterol content by the thin layer chromatography, the intensity of lipid peroxidation in their membranes, the concentration of biologically active substances by Falke-Hillarpa, coagulofibrinolytic system - by electro coagulography, external respiratory function - by computer spirometry. Results. During bronchial asthma exacerbations shown was a trend to an increase in the mean volume of platelets and the coefficient of variation of the thrombocytometric curve and a decrease of the thrombocrite. During the paroxysmal period of bronchial asthma the pool of platelets was in a state of metabolic activation: decreased was the platelet aggregation time, the levels of malondialdehyde, serotonin, catecholamines, and cholesterol in them increased, compared with controls. Registered was a decrease in the duration of the initial stages of clotting and the time of fibrin clot formation in phase Ш of hemostasis compared with the control. Conclusions. The severity of functional disorders of platelets and hemostasis correlates with the severity of bronchial asthma. Key words: bronchial asthma, children, platelets, hemostasis.
Бронхиальная астма (БА) является одной из актуальных проблем детской пульмонологии [4], тем не менее комплексных исследований гемостаза у детей при данном заболевании не проводилось.
Целью исследования было установление особенностей структурно-функциональных параметров тромбоцитов и коагуляционного звена гемостаза у детей с БА.
Было обследовано 137 детей с БА в возрасте от 4 до 15 лет, из них в приступном периоде — 72, во время клинической ремиссии — 66. Тяжелое течение БА наблюдалось у 29 пациентов, среднетяжелое — у 55, легкое — у 53. Контрольную группу составляли 20 здоровых детей. Параметры тромбоцитов исследовали на автоматическом гематологическом анализаторе “Cobas Vega” фирмы
*Автор для переписки: [email protected] 566
‘^оЛе-АБХ”. Регистрировали следующие характеристики: количество кровяных пластинок, средний объем (MPV), тромбокрит (РСТ), анизоцитоз (RDW). Адгезивно-агрегационную активность тромбоцитов изучали экспресс-методом на предметном стекле с ристомицином по методике А.С. Шитиковой (1984) [6]. Функциональные характеристики кровяных пластинок оценивали по внутриклеточному уровню нитрит-ионов [8], содержанию общих фосфолипидов (ОФЛ) и холестерина (ХС) методом тонкослойной хроматографии, по интенсивности перекис-ного окисления липидов в их мембранах, концентрации в них биологически активных веществ (серотонина и катехоламинов) методом Фальке — Хилларпа (1969). Коагу-лофибринолитическую систему исследовали методом электрокоагулографии [7], мукоцилиарный клиренс — по методике А.С. Вла-
совой (1991). Функцию внешнего дыхания изучали с помощью компьютерной спирометрии на приборе “Spirosift-3000” (Fucumed, Япония). Статистическая обработка производилась методом вариационной статистики с применением ^критерия Стьюдента, коэффициентов парной корреляции.
Зарегистрированы отклонения морфофункциональных свойств тромбоцитов. При обострении БА имелась тенденция к увеличению среднего объема тромбоцитов (8,32±0,3фл) и коэффициента вариации тромбоцитометрической кривой (0,22±0,04%), уменьшению тромбокрита (15,79±0,03%). В приступном периоде БА пул кровяных пластинок находился в состоянии метаболической активации, о чем свидетельствовало уменьшение времени агрегации тромбоцитов до 3,57±0,2 с, возрастание в них уровня малонового диальдегида до 2,67±0,04 нмоль/мл и нитрит ионов до 1,19±0,05 ммоль/л в сравнении с контролем (соответственно 6,3±0,04 с, 1,59± ±0,03 нмоль/мл и 0,3±0,2 ммоль/л). В кровяных пластинках (р<0,05) увеличивалось содержание серотонина до 3,2±0,06 усл. ед. и катехоламинов до 2,7±0,05 усл. ед., превышавшее контрольные значения почти в 3 раза (соответственно 1,0±0,04 и 1,27±0,04 ).
В острой фазе заболевания регистрировались отклонения и мембранной пластичности тромбоцитов, о чем косвенно свидетельствовало увеличение уровня холестерина (70,91±0,2%) и коэффициента ХС/ОФС, а также уменьшение ОФЛ (29,09±0,3%). Повышение ригидности мембран изучаемых клеток нарушает, по всей видимости, функционирование их ферментных систем, изменяет активность поверхностных рецепторов, способствует усилению адгезии тромбоцитов [4] и запуску коагуляционного каскада внутрисосудистого свертывания крови [2]. Обострение заболевания характеризовалось признаками гиперкоагуляции во всех трех фазах свертывания крови.
Констатировано уменьшение продолжительности начальных этапов свертывания (Т1 — 154,2±12,9 с) и времени образования фибринового сгустка в III фазе гемостаза (Т — 126,3±7,9 с) в сравнении с контролем (Т1 — 288,0±10,3, Т — 260,0±9,7). Наблюдалось удлинение времени стабильного сгустка Тф до 207,8±20,3 с, отражавшее активацию фибринстабилизирующих факторов (в т.ч. тромбоцитарных), участвовавших в формировании сгустка. Признаки «латентно текущего синдрома ДВС», согласно
критериям Д.М. Пучиньяна (1995) [7], зарегистрированы у 64% детей, что являлось, по всей видимости, следствием чрезмерной выраженности процессов внутрисосудистой коагуляции. Период обострения характеризовался повышением фибринолитической активности (22,3±2,0%), вероятно, компенсаторной реакции на развитие гиперкоагуляции, отражавшей состоятельность плазминовой системы, направленной на элиминацию тромбоцитарно-фибриновых агрегатов.
Выявленные отклонения функциональной активности тромбоцитов и коагулофиб-ринолитического звена гемостаза были детерминированы не только периодом, но и тяжестью БА. Наибольшая степень дезорганизации функциональных параметров тромбоцитов отмечалась при тяжелой БА (время агрегации — 2,5±0,2 с, NO3 — 1,7± ±0,3 ммоль/л, МДА — 3,38±0,2 нмоль/мл, серотонин — 3,9±0,02 усл. ед., катехоламины — 3,1±0,05 усл. ед.) в сравнении со среднетяжелой (соответственно 3,45±0,05 с, 1,1± ±0,4 ммоль/л, 2,51±0,0 нмоль/мл, 3,2± ±0,06 усл. ед., 3,24±0,03 усл. ед.) и легкой БА (4,75±0,3 с, 0,77±0,25 ммоль/л, 1,95± ±0,04 нмоль/мл, 2,52±0,1 усл. ед., 1,3± ±0,08 усл. ед.). Метаболическая активация кровяных пластинок обусловливает образование тромбоцитарных агрегатов, выделение биологически актив-ных веществ, приводя к нарушению эндотелиальной выстилки и усилению сосудистой проницаемости. В результате микроэмболи-зации сосудов агрегатами тромбоцитов и вазоспазма вследствие высвобождения из тромбоцитов серотонина и катехоламинов в участках легких со сниженным кровотоком возникает бронхоконстрикция с последующим ремоделированием бронхов [5].
Наиболее глубокие нарушения гемоста-тического баланса были выявлены нами также при обострении тяжелой БА. В этой группе больных имела место диссоциация между высокой коагуляционной (Т1 — 157,2±30,0, Т — 132,0±16,1 , Т2 — 324,0±15,0 с) и сниженной фибринолитической активностью крови (ФА — 8,6±0,9%), что отражало разбалансированность свертывающего и противосвертывающего потенциалов крови. Существенное укорочение начальных этапов коагуляционного каскада, свидетельствует, скорее всего, об ускорении образования протромбиназы и циркуляции в кровотоке активированных факторов свертывания, центральное место среди которых
занимают тромбоцитарно-пластинчатые субстанции.
У 18,6% пациентов с легкой БА был зарегистрирован «латентный синдром ДВС», свидетельствовавший о возможности развития микротромбообразования в сосудах малого круга кровообращения уже при минимальной активности воспалительного процесса. Выявленное повышение активности свертывающей системы крови, служит, по-видимому, для отграничения воспаления в бронхолегочной системе за счет ускоренного образования фибрина — неотъемлемого компонента воспаления. Активация противодействующих тромбообразованию систем представляет собой значительный антитромбогенный резерв, который может быть компенсаторной реакцией, предотвращающей возникновение внутрисосудистого свертывания крови [1].
В период ремиссии БА параллельно выравниванию адгезивно-агрегационных свойств тромбоцитов (увеличение времени агрегации до 6,48±0,2 с) сохранялись отклонения функциональных характеристик кровяных пластинок, о чем свидетельствовали стабильно высокий уровень продуктов липопероксидации (МДА — 2,23± ±0,02 нмоль/мл) и метаболита оксида азота (0,42±0,2 ммоль/л), изменение липидного бислоя клеток (ХС — 66,5±0,3%, ОФЛ — 33,5±0,4%). Гиперкоагуляция сохранялась преимущественно за счет конечного этапа образования фибрина (Т — 181,1±10,3 с) и увеличения времени стабильного сгустка (Тф — 186,4±46,2 с).
Тесные взаимосвязи между показателями прокоагулянтной активности крови, высокой метаболической активностью тромбоцитов и респираторной активностью легких свидетельствуют о том, что гипоксия, являющаяся результатом бронхиальной об-
струкции, наряду с компонентами иммунного воспаления, служит пусковым моментом активации кровяных пластинок. Они не только «запускают» фибринообразующий каскад, но и поддерживают воспалительные реакции в легких, повышая бронхиальное сопротивление посредством продукции бронхоконстрикторных агентов. Наряду с этим, продукты гемокоагуляции выступают мощными хемокинами, привлекая в зону тромбообразования лейкоциты и поддерживая воспаление в респираторном тракте. Корреляция тромбоцитарных и плазменных отклонений с активностью аллергического воспаления, показателями функции внешнего дыхания свидетельствует о том, что отклонения морфофункциональных параметров тромбоцитов и гемостаза являются, по всей вероятности, одним из механизмов хронического воспаления в бронхолегочной системе.
ЛИТЕРАТУРА
1. Балуда В.П., Балуда М.В., Деянов И.И. и др. Физиология системы гемостаза. — М.: Медицина, 1995. — 245 с.
2. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушения гемостаза. — М.: Медицина, 1999. — 323 с.
3. Бышевский А.Ш., Галян С.П., Дементьев Н.А., Не-лаева А.А. и др. Тромбоциты. — Тюмень, 1996. — 252 с.
4. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика. — М.: Издательский дом «Русский врач», 2006. — 100 с.
5. Петрищев Н.Н., Беркевич О.А., Власов Т.Д., Волкова Е.В. и др. Диагностическая ценность определения десквамированных эндотелиальных клеток в крови // Клин. лаб. диагн. — 2001. — №1. — С. 50.
6. Берковский А.Л., Васильев С.А. Жердеева Л.В. и др. Пособие по изучению адгезивно-агрегационной функции тромбоцитов . — М.: Медицина, 1999. — 29 с.
7. Пучиньян Д.М.Типы регулирования функционального состояния системы ге-мостаза //Физиол. чел. — 1995. — №2. — С. 99 — 103.
8. Сидоренко Б.А., Затейщиков Д.А. Дисфункция эндотелия в патогенезе атеросклероза и его осложнений. // Кремлевская медицина. Клин. вестн. — 1999. — №2. — С. 38 — 43.
