CC BY
18
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитов Immunology of HIV and viral hepatitis
ИЗМЕНЕНИЯ СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ Т-КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ КОИНФЕКЦИИ ВИЧ И MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Кудрявцев И.В.1, 2, Васильева Е.В.4 5, Максимов Г.В.3, Вербов В.Н.4, Серебрякова М.К.2, Тотолян Арег АЛ 4
1ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Минздрава РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБНУ«Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург, Россия
3 СПбГУЗ «Городской противотуберкулезный диспансер», Санкт-Петербург, Россия
4 ФБУН«Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург, Россия
5 Bostongene, Москва
ВИЧ-инфекция традиционно ассоциируется с уменьшением как относительного, так и абсолютного содержания общего пула CD4+ лимфоцитов в периферической крови. Однако изменения в составе Т-хелперов, обладающих широким спектром регуляторных функций, оказывают влияние на эффективность реакций врожденного и приобретенного иммунитета в целом, в том числе и цито-токсических Т-клеток, играющих ведущую роль в защите от внутриклеточных патогенов. Целью данной работы был анализ субпопуляционного состава и оценка уровня диф-ференцировки CD3+CD8+ клеток, а также поиск новых перспективных маркеров, позволяющих отличить больных с ВИЧ от больных с коинфекцией ВИЧ-ТБ в условиях клинико-диагностической лаборатории. Объектом исследования служила венозная кровь, полученная от условно здоровых добровольцев (n = 37) и больных трех указанных групп. Для исследования особенностей дифференциров-ки цитотоксических Т-клеток у больных ВИЧ (n = 23), ТБ (n = 28) и при коинфекции ВИЧ-ТБ (n = 30) была использована тактика поэтапного «гейтирования», основанная на первоначальной оценке экспрессии CD45RA и CD62L с последующим анализом ко-экспрессии CD27 и CD28 клетками с фенотипами CD45RACD62L- (клетки эф-фекторной памяти, ЕМ) и CD45RA+CD62L- («терминально-дифференцированных» клетки эффекторной памяти, экспрессирующие CD45RA, TEMRA). Было определено относительное и абсолютное содержания CD3+CD8+ лимфоцитов с фенотипами CD45RA+CD62L+ («наивные» клетки), CD45RA+CD62L-,клеток эффекторной памяти и их основных субпопуляций (ЕМ1, ЕМ2, ЕМ3 и ЕМ4), а также клеток TEMRA, котрые подразделялись на «пре-эффекторы» 1 типа (рЕ1), «пре-эффекторы» 2 типа (рЕ2) и эффекторные (Е) клетки. На всех упомянутых выше типах цитотоксических Т-клеток определяли уровень молекулы CD57, уровень экспрессии которой тесно связан с накоплением перфорина и гранзима В в составе цито-литических гранул. Относительное и абсолютное содержание CD3+CD8+ у здоровых доноров и больных ТБ не отличались, тогда как наличие ВИЧ приводило к увеличению данных показателей в два и полтора раза соответственно (в обоих случаях р < 0,001). В случае коинфекции относительное содержания CD3+CD8+ превосходило все указанные группы и достигало 60,94% (45,88; 72,03), а абсолютное содержание — 890 (538; 1159) кл/1 мкл. Столь же существенные изменения касались и субпопуляционного
состава CD3+CD8+ клеток. Так, наличие ВИЧ приводило к резкому снижению числа «наивных» клеток и увеличению в циркуляции субпопуляций более «зрелых» фенотипов — ЕМ и TEMRA. При сопоставлении групп больных только ВИЧ-инфекцией и на фоне туберкулеза, наиболее информативным являлся анализ субпопуляционного состава клеток ЕМ. Так, относительное содержание клеток EM3 (CD45RA-CD62L-CD27-CD28-) при ВИЧ-инфекции составляло 5,66% (3,63; 7,84) или 82 (46; 102) клеток в 1 мкл крови, а при коинфекции ВИЧ-ТБ эти значения составили 12,05% (8,48; 23,17) и 180 (90,65; 294) кл/мкл соответственно (р < 0,001 в обоих случаях). При анализе групп сравнения - условно здоровые добровольцы и больные ТБ - эти значения были значимо ниже (2,11% (0,75; 3,95) и 42 (14; 76) кл/мкл, а также 3,06% (1,68; 5,69) и 47 (24; 100) кл/мкл соответственно). Более того, отмечено снижение относительного числа ЕМ3 клеток, экспрессирующих CD57, в исследованных группах. Так, у здоровых добровольцев и больных ТБ CD57 обнаруживался на поверхности 79,83% (71,05; 88,20) и 76,75% (66,55; 83,64) клеток, соответственно, тогда как при ВИЧ-инфекции - лишь на 62,26% (51,30; 72,71) клеток, а при ВИЧ-ТБ - на 52,43% (34,73; 63,02) клеток. Полученные результаты позволяют предположить, что на основании анализа уровня диффе-ренцировки CD3+CD8+ клеток при помощи многоцветной проточной цитометрии возможно разработать новые перспективные способы мониторинга течения ВИЧ и ТБ.
ИЗУЧЕНИЕ ЧАСТОТЫ АЛЛЕЛЕЙ ГЕНА CCR5 У ПОПУЛЯЦИИ САНКТ-ПЕТЕРБУРГА
Любимова Н.Е.1, Семёнов А.В.1, 2
1 ФБУН «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия
2 ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Ген хемокинового рецептора CCR5 локализован на коротком плече 3 хромосомы. Лиганды CCR5, такие как хемокины CCL3, CCL4, CCL5 и CCL8, играют главную роль в хемотаксисе и активации лимфоцитов во вторичных лимфоидных органах. Аллель delta32 гена CCR5 представляет собой делецию 32 пар оснований этого гена. Эта мутация приводит к нарушению адгезивных свойств кодируемого ею белка CCR5 Т-лифоцитов.
Гомозиготы по делеции CCR5del32 резистентны к некоторым заболеваниям, например к ВИЧ. Аллель CCR5del32 преимущественно распространён в европейских популяциях, тогда как частота аллеля в большинстве азиатских популяциях ниже 3-5%. Этот аллель практически полностью отсутствует в аборигенных популяциях Америки и Океании. Его частота самая высокая в Северной Европе, в областях, прилегающих к Балтийскому и Белому морям (15-18%).
Определение пациентов с аллелью CCR5del32 важно для прогноза течения ВИЧ-инфекции у инфицированных пациентов, а также для оценки риска передачи ВИЧ в дискор-дантных парах, где только один из партнеров инфицирован.
Цель. Изучение частоты встречаемости аллелей CCR5del32 в Санкт-Петербурге.
Методы. Обследовали группу, состоящую из 423 условно здоровых доноров возрастом от 0 до 95 лет, про-
