Изменения структуры регионарных лимфатических узлов и субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови при плоскоклеточном раке шейки матки в условиях введения цитостатиков и индуктора интерфероногенеза ридостина Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК - 618.146-006.04:616.428]-085.277.3-091.8

С.Э. Красильников, Л.А. Обухова, А.В. Тархов, Н.В. Юкляева

ИЗМЕНЕНИЯ СТРУКТУРЫ РЕГИОНАРНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ И СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОМ РАКЕ ШЕЙКИ МАТКИ В УСЛОВИЯХ ВВЕДЕНИЯ ЦИТОСТАТИКОВ И ИНДУКТОРА ИНТЕРФЕРОНОГЕНЕЗА РИДОСТИНА

ГУЗ Новосибирский областной онкологический диспансер

ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, Новосибирск

Проведено морфологическое и морфометрическое исследование подвздошных лимфатических узлов, взятых во время операции, и субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у 50 больных раком шейки матки в условиях проведения разных вариантов противоопухолевой терапии в сочетании с иммунотерапией. Показано, что иммунотерапия ридостином в монорежиме приводит к достоверному увеличению паракор-тикальной зоны регионарных лимфатических узлов, стимулирует образование герминативных центров, в том числе в эктопических лимфоидных узелках — паракортикальных и мозговых. Позитивные изменения структуры лимфатических узлов менее выражены при сочетании иммунотерапии ридостином со специальными методами лечения. Сочетание химиотерапии с иммунотерапией ридостином не сопровождается снижением лимфоцитоза крови.

Ключевые слова: рак шейки матки, лимфатические узлы, лимфоциты периферической крови, химиотерапия, иммунотерапия

Рак шейки матки занимает седьмое место в структуре онкологической заболеваемости и смертности. Повышенный интерес к данной проблеме обусловлен наметившимся в последнее десятилетие ростом заболеваемости среди женщин молодого и среднего возраста [3, 6]. Исследования взаимоотношений опухоли и организма свидетельствуют о том, что ведущую роль в реакции на злокачественный рост играет иммунный ответ; основные события при этом происходят в регионарных лимфатических узлах и в опухолевой ткани [10, 11]. Изменения в лимфоидной системе появляются задолго до клинического проявления опухоли и усугубляются по мере прогрессирова-ния неопластического процесса. У онкогинеколо-гических больных имеют место нарушения структуры и функции лимфатических узлов, угнетение Т-системы иммунитета, дисбаланс субпопуляций лимфоцитов и нарушение их функциональной активности [2, 3].

Обоснование вирусной концепции этиологии рака шейки матки привело к разработке нового метода лечения этого заболевания — иммунотерапии. По мнению Я.В. Бохмана [2], вирус папилломы человека 16 и 18 серотипов может быть отнесен к инициирующим факторам канцерогенеза. С целью противовирусной терапии исполь-

зуют препараты на основе интерферонов, а также индукторы эндогенного интерфероногенеза [6, 9]. Проведение химиотерапии у онкологических больных усугубляет иммунные нарушения в организме, что также требует разработки методов иммуностимуляции. Анализ литературы показал, что влияние иммунотерапии в сочетании со специальными методами лечения на структурно-функциональное состояние регионарных лимфатических узлов и субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови изучено недостаточно, что и послужило поводом для настоящего исследования.

Методика

Объектом исследования служили регионарные для матки внутренние подвздошные лимфатические узлы и лимфоциты периферической крови больных раком шейки матки, находившихся на лечении в гинекологическом и радиологическом отделениях Новосибирского областного онкологического диспансера с 1999 по 2004 год включительно. Средний возраст пациенток составил 37±4,5 лет. При поступлении всем пациенткам проводили клиническое и гинекологическое обследования, ультразвуковое сканирование органов малого таза. До проведения лечения выполняли прицельную ножевую биопсию шейки

матки и проводили патоморфологическое исследование кусочков шейки матки. По гистологической структуре опухоли в 100% случаев установлен диагноз плоскоклеточного рака шейки матки.

По методам лечения все больные были разделены на 3 группы. В первую группу вошли 10 больных, которым на первом этапе лечения внутримышечно вводили индуктор интерфероноге-неза ридостин (НПО «Вектор») в дозе 8 мг трехкратно, с интервалами в 2 дня. Во вторую группу вошли 30 больных раком шейки матки, которым на первом этапе лечения проводили эндолимфа-тическую полихимиотерапию по методике, предложенной Б.Я. Лукьянченко [5], в сочетании с введением ридостина по схеме, описанной выше. В состав полихимиотерапии входили: алкилиру-ющий препарат циклофосфан, антиметаболиты метотрексат и 5-фторурацил. Средние дозы хи-миопрепаратов, вводимых однократно, составляли: циклофосфана — 2000±200 мг, 5-фторурацила — 1000±250 мг, метотрексата — 50±10 мг. В третью группу вошли 10 больных, которым на первом этапе лечения проводили системную монохимиотерапию препаратом платины (платидиам) в дозе 100 мг/м2 внутривенно однократно в сочетании с введением ридостина по описанной выше схеме.

На втором этапе лечения больным всех трех групп при резектабельности процесса проводили расширенную экстирпацию матки по Вертгейму [4]. Операцию выполняли на 7-9 сутки после курса химиотерапии и/или иммунотерапии. К этому времени наступала максимальная реализация клинического эффекта вводимых препаратов, улучшалось состояние больных, восстанавливались гематологические показатели.

К контрольной группе были отнесены 30 больных, которым после установления диагноза на первом этапе было проведено оперативное лечение в объеме расширенной экстирпации матки по Вертгейму. В предоперационном периоде химиотерапию и иммунотерапию не проводили.

Подвздошные лимфатические узлы, взятые для морфологического исследования во время операции, фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации, заливали в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван Гизону, азуром и эозином. Проводили обзорную светооптическую микроскопию и морфометрию структурных компонентов. Для морфометрического исследования использовали стандартизированные срезы, проведенные вдоль длинной оси органа на уровне ворот, толщиной 7 мкм, окрашенные гематоксилином и эозином. Морфометрию проводили методом точечного счета [1] с помощью стандартной сетки (256 точек),

вмонтированной в окуляр микроскопа МБС-10. Сетку предварительно откалибровали с помощью объект-микрометра в абсолютных размерах и определили площадь, представленную одной точкой (в мм2). Срезы лимфатических узлов морфо-метрировали при увеличении в 32 раза. Согласно Международной гистологической номенклатуре [7] выделяли следующие структурно-функциональные зоны: капсулу и трабекулы, краевой синус, корковое вещество, мозговое вещество, в корковом веществе — первичные и вторичные лимфоидные узелки с выделением в последних герминативного центра и короны, межузелковую зону (корковое плато), паракортикальную зону, в мозговом веществе — мозговые тяжи и мозговые синусы. Учитывали количество точек, приходящихся на каждую структурно-функциональную зону, и вычисляли ее долю в общей площади среза в процентах.

Проводили дифференцированный подсчет количества вторичных лимфоидных узелков с герминативными центрами, находящимися на разных стадиях развития (I-IV). Стадии развития герминативных центров определяли по Е. Конвей с учетом данных P. Nieuwenhuis, D. Opstelten [13], A.K. Szakal, M.H. Kosco, J.G. Tew [14]. Отдельно считали количество вторичных лимфоидных узелков аттенуированного типа [2].

Объектом иммунологического исследования служила периферическая гепаринизированная (25 ЕД/мл) кровь, из которой выделяли моно-нуклеарные клетки (МНК) методом центрифугирования в градиенте плотности фиколл-верогра-фин. 5,0 мл крови наслаивали на 3,0 мл раствора фиколла-верографина (в=1,08 см) в пробирках и центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об./мин. МНК собирали на границе интерфаз и дважды отмывали при 4-6°C забуференным физиологическим раствором (рН=7,4) с 0,5% желатина и однократно — средой RPMI-1640 (НПО «Вектор», Новосибирск). Количество выделенных клеток подсчитывали в камере Горяева с использованием светового микроскопа.

Общее количество лимфоцитов (CD3+), хел-перных Т-лимфоцитов (CD4+), супрессорных/ киллерных Т-лимфоцитов (CD8+), естественных киллерных клеток (CD16+), В-лимфоци-тов (CD20+) определяли в лимфоцитотоксичес-ком тесте с помощью моноклональных антител («Сорбент», Москва). Тестирование проводили в круглодонном планшете для иммунологических исследований. Выделенные и отмытые мононук-леарные клетки ресуспендировали в среде 199, дополненной 2,0% раствором фетальной сыворотки теленка (FCS), в концентрации 2*106 кл/ мл. В лунку вносили по 20,0 мкл суспензии МНК

и добавляли 5,0 мкл раствора моноклональных антител в рабочей концентрации (моноклональ-ные антитела к CD3+, CD4+, CD8+, ОТ16+,СД20+ антигенам). Инкубацию осуществляли при комнатной температуре в течение 40 минут. После этого планшет центрифугировали в течение 5 минут при 1500 об./мин., сливали надосадок и ре-суспендировали клетки встряхиванием. К осадку добавляли 25,0 мкл свежей сыворотки кролика (источник комплемента) в разведении 1:2, встряхивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 90 минут. Затем в каждую лунку с пробой добавляли 10,0 мкл 2,0% раствора эозина на изотоническом растворе NaCl, инкубировали 10 минут при комнатной температуре. По окончании реакции планшет ставили на холод (для остановки реакции). Подсчет CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD20+ клеток осуществляли под микроскопом при 10-кратном увеличении. Окрашенные клетки в лунке с определенными МАТ являлись лимфоцитами, экспрессирующими данный маркер. Подсчет проводили на 100 клеток.

В качестве показателя нормы использовали величины, полученные на здоровых донорах в ГУ ИКИ СО РАМН (г. Новосибирск).

Цифровые данные подвергали статистической обработке на AMD Duron 650 с помощью пакета программ MICROSOFT EXCEL через WINDOWS МЕ. Вычисляли средние арифметические величины (М) и ошибки их репрезентативности (m). Различия сравниваемых средних величин принимали за достоверные при Р<0,05.

Результаты и обсуждение

Ранее нами было показано [8], что для подвздошных лимфатических узлов у пациенток контрольной группы характерны атрофия пара-кортикальной зоны, угасающая реакция герминативных центров, гистиоцитоз синусов с признаками лимфостаза и склерозирования, жировое перерождение лимфоидной паренхимы. Эти данные свидетельствуют о снижении функциональной активности регионарных для матки лимфатических узлов на стадии клинического проявления опухоли.

Результаты морфологического и морфометри-ческого исследования подвздошных лимфатических узлов у больных, получавших курс иммунотерапии ридостином, показали, что площадь среза лимфатических узлов достоверно увеличилась по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе (таблица 1). В структуре лимфатических узлов также произошли выраженные изменения. Относительный объем коркового вещества достоверно увеличился по сравнению с контрольными цифрами, относительный объем мозгового вещества имел тенденцию к снижению.

Достоверно увеличилось абсолютное количество лимфоидных узелков, как первичных, так и вторичных (таблица 1), однако вследствие увеличения общей площади среза в 1,96 раза численная плотность лимфоидных узелков на одном квадратном миллиметре площади имела тенденцию к снижению по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе. Обращало на себя внимание необычное расположение части лимфоидных узелков по периферии паракорти-кальной зоны и в мозговых тяжах.

Анализ распределения лимфоидных узелков по типам и стадиям развития (таблица 2) показал, что под влиянием иммунотерапии достоверно увеличились доли вторичных лимфоидных узелков с герминативными центрами на ранних (I и II) стадиях развития, доля герминативных центров на III стадии развития имела тенденцию к уменьшению, а на IV стадии — достоверно снижалась по сравнению с контролем. Достоверно снизилась также доля лимфоидных узелков ат-тенуированного типа. Вторичные лимфоидные узелки с «молодыми» герминативными центрами имели небольшие размеры, с чем, возможно, связана тенденция к снижению их суммарного относительного объема.

Выраженные структурные изменения у больных, получавших ридостин, зарегистрированы в паракортикальной зоне лимфатических узлов — достоверно увеличился ее относительный объем по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе, в периферических участках паракортикальной зоны наблюдали большое количество посткапиллярных венул с высоким эндотелием и мигрирующими лимфоцитами в стенке. Плотность расположения лимфоцитов вблизи венул была повышена. Характерным морфологическим изменением в лимфатических узлах было наличие посткапиллярных венул с высоким эндотелием в зоне мозговых тяжей и замена плазмоци-тарной популяции на лимфоцитарную. Мозговые синусы были плотно заполнены клеточными элементами — ретикулярными клетками, макрофагами, большим количеством малых лимфоцитов, часто встречались эозинофильные гранулоциты. В некоторых участках мозговых синусов наблюдали образование коллагеновых волокон, проявления лимфостаза.

В подвздошных лимфатических узлах больных, получавших ридостин, так же, как и у больных контрольной группы, наблюдали очаговый склероз и жировое перерождение лимфоидной паренхимы, однако эти изменения не доминировали, на первый план выходила морфологическая картина стимулированного лимфатического узла.

У больных, получавших курс эндолимфатичес-кой полихимиотерапии в сочетании с ридостином, площадь среза лимфатических узлов имела тенденцию к увеличению за счет лимфоидных узелков, паракортикальной зоны и мозговых синусов (таблица 1). Изменилось соотношение между лимфо-идными узелками с герминативными центрами, находящимися на разных стадиях развития (таблица 2). Как и в предыдущей группе наблюдения, часть лимфоидных узелков имела эктопическое расположение — в паракортикальной зоне и мозговых тяжах. В паракортикальной зоне также наблюдали посткапиллярные венулы с высоким эндотелием и мигрирующими лимфоцитами в стенке.

У больных, получавших курс системной монохимиотерапии в сочетании с ридостином, площадь среза лимфатических узлов практически не изменялась по сравнению с соответствующим показателем в контроле. Изменения относительных объемов коркового и мозгового вещества были статистически недостоверными, однако можно принять во внимание выраженную тенденцию к увеличению относительного объема коркового вещества за счет его паракортикальной зоны и тенденцию к уменьшению относительного объема мозгового вещества за счет зоны мозговых тяжей (таблица 1). Увеличилась доля первичных лимфоидных узелков и вторичных узелков

Таблица 1

Результаты морфометрического исследования подвздошных лимфатических узлов у больных, получавших курс иммунотерапии в сочетании со специальными методами противоопухолевой терапии (M±m)

Показатели Группы больных Р

Контрольная Ридостин ЭПХТ+ридостин СХТ+ридостин

1 2 3 4

Общая площадь лимфоузла S мм2 9,86±1,72 19,41±3,81 12,84±1,06 9,61±2,72 1-2<0,05

Корковое вещество Уу % 27,31±4,12 38,48±2,39 32,21±4,2 42,7±6,93 1-2<0,05

Мозговое вещество Уу % 54,52±13,98 51,57±4,54 58,82±4,6 41,65±5,93 —

Капсула и трабекулы Уу % 11,9±2,35 7,31±2,19 5,77±0,73 11,9±1,45 1-3<0,05

Краевой синус Уу % 3,49±0,92 2,64±0,24 3,24±0,61 3,71±0,76 —

Первичные лимфоидные узелки

^срез 2,26±0,4 4,6±0,4 4,88±0,95 3,43±0,65 1-2<0,01

^мм2 0,3±0,05 0,21±0,04 0,43±0,13 0,5±0,07 2-4<0,01

Vv % 3,13±0,96 3,91±0,9 1,77±0,59 0,75±0,34 1,2-4<0,05;

Вторичные лимфоидные узелки

^срез 19,78±2,48 36,4±2,0 32,0±4,96 18,0±3,9 1-2<0,001; 2-4<0,01

^мм2 1,87±0,15 1,75±0,4 2,78±0,42 2,65±0,32 —

Vv % 10,93±1,9 8,95±1,86 11,56±1,72 7,86±3,51 —

Герминативные центры Уу % 6,29±1,31 4,29±0,91 6,87±0,89 4,84±2,15 —

Межузелковая зона Vv % 3,9±0,48 4,54±0,79 2,24±0,49 2,56±1,14 —

Паракортикальная зона Уу % 12,21±3,14 12,78±1,75 16,61±2,11 21,89±4,3 1-2<0,05

Мозговые тяжи Vv % 31,52±2,63 31,92±3,5 31,8±3,39 21,35±1,94 1,2-4<0,05; 3-4<0,05

Мозговые синусы Vv % 23,05±3,3 24,94±2,39 27,02±2,04 20,30±4,03 —

Примечание: ЭПХТ — эндолимфатическая полихимиотерапия; СХТ — системная химиотерапия

с герминативными центрами, находящимися на ранних стадиях развития, доля узелков с герминативными центрами, находящимися на заключительной (IV) стадии развития, достоверно снизилась. «Молодые» вторичные узелки имели хорошо развитую корону из малых лимфоцитов и небольшие герминативные центры с компактным расположением клеток. Как и в лимфатических узлах больных предыдущих групп, наблюдали эктопические лимфоидные узелки. В паракорти-кальной зоне также обращало на себя внимание большое количество посткапиллярных венул с высоким эндотелием.

Таким образом, у больных, получавших им-

мунотерапию ридостином как в монорежиме, так и в сочетании с химиотерапией, в регионарных к опухоли лимфатических узлах происходили структурные преобразования, свидетельствующие о повышении их функциональной активности; прежде всего это касается паракортикальной зоны и вторичных лимфоидных узелков. Эти изменения, возможно, связаны с прямым стимулирующим действием ридостина на эффекторные Т-клетки и эндотелий посткапиллярных венул, являющихся специфическим местом миграции Т-лимфоцитов в тимус-зависимую зону лимфатических узлов [12]. С другой стороны, активация лимфатических узлов может быть обусловле-

Таблица 2

Распределение лимфоиднъх узелков по типам и стадиям развития герминативного центра

(% от общего количества, М±т)

Показатели Группы больных Р

Контрольная Ридостин ЭПХТ+ридостин СХТ+ридостин

1 2 3 4

Первичные лимфоидные узелки 11,29±1,85 11,45±1,49 13,53±1,96 18,18±2,65

Стадии развития герминативных центров

I 1,07±0,4 8,12±1,36 3,21±0,59 2,56±1,24 1-2,3<0,01; 2-3,4<0,05

II 4,14±1,34 31,67±2,54 16,28±3,86 13,35±3,15 1-3,4<0,05; 1-2<0,001; 2-3,4<0,01

III 41,92±4,62 32,17±1,99 46,0±2,1 39,32±6,74 2-3<0,01

IV 28,73±3,91 9,8±1,45 8,11±1,1 12,1±2,34 1-2,3,4<0,01

Лимфоидные узелки аттенуированного типа 12,86±2,22 6,8±1,1 10,24±1,97 14,5±4,41 1-2<0,05

Таблица 3

Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови у больных раком шейки матки до и после проведения иммунотерапии сочетании с эндолимфатической полихимиотерапией (М±м)

Показатели Доноры До лечения После лечения ЭПХТ+ридостин

Лимфоцитоз / мм3 1120-3210 1686,8±33 2225±20*

СD3+% 58-83 62,2±0,5 66±0,2

СD 4+% 29-59 38±1,76 41±0,2

СD 8+% 17-40 24±2,24 23±0,3

ИРИ (СD4/СD8)%/% 0,9-2,8 1,57±0,05 1,7±0,02

СD 20+% 8-17 6,7±0,05 19,5±2,5*

СD 16+% 6-24 19,2±0,25 11,7±0,42*

Примечание: * — достоверное различие по сравнению с данными группы контроля при Р<0,05

на лечебным патоморфозом опухоли в результате проводимого лечения. Менее выраженные сдвиги в структуре лимфатических узлов в группах больных, получавших иммунотерапию в сочетании со специальными методами лечения, по-видимому, связаны с влиянием химиотерапии. Известно, что действие противоопухолевых препаратов не является избирательным, цитостатики повреждают все делящиеся клетки, в том числе лимфоциты, вступившие в иммунный ответ [9, 10]. С этим связан ряд побочных эффектов химиотерапии, таких, как нарушение обновления тканей, опустошение лимфоидных органов, снижение всех форм иммунного ответа.

С результатами морфологического исследования лимфатических узлов согласуются данные об изменениях субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови в группе больных, получавших иммунотерапию ридостином в сочетании с эндолимфатической полихимиотерапией.

Из таблицы 3 видно, что сочетание эндолим-фатической полихимиотерапии с ридостином не только не сопровождалось лимфопенией, а, наоборот, привело к достоверному увеличению общего количества лимфоцитов и доли В-лим-фоцитов (CD 20+). Количественные изменения субпопуляций Т-лимфоцитов статистически не достоверны, однако следует отметить позитивные тенденции — к повышению общего количества Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD4+) и соотношения CD4+/CD8+. Более выраженное повышение количества В-лимфоцитов по сравнению с Т-лимфоцитами может быть результатом миграции последних в опухолевый очаг, поскольку именно там эти клетки выполняют свои функции.

Анализ клинических данных свидетельствует о выраженных лечебных эффектах иммунотерапии в сочетании со специальными методами лечения. У всех пациенток зарегистрировано уменьшение параметральных инфильтратов, прекращение кровотечения, снижение выраженности или исчезновение болевого синдрома, уменьшение объема опухоли, что в ряде случаев позволяло перевести процесс в резектабельный и выполнить оперативное лечение. Процент рецидивов в основной группе снизился с 29 до 14%.

Заключение

Морфологическое исследование регионарных к опухоли лимфатических узлов у больных раком шейки матки показало, что применение иммунотерапии ридостином в предоперационном периоде приводит к увеличению размеров лимфатических узлов; возрастает относительный объем паракор-тикальной зоны, появляется большое количество

посткапиллярных венул с высоким эндотелием и мигрирующими лимфоцитами в стенке, увеличивается доля лимфоидных узелков с герминативными центрами, находящимися на ранних стадиях развития, снижается процент лимфоидных узелков аттенуированного типа. Обращает на себя внимание большое количество эктопических лимфоидных узелков в паракортикальной зоне и мозговых тяжах. Полученные данные свидетельствуют о повышении функциональной активности лимфатических узлов. Структурные изменения в лимфатических узлах менее выражены у больных, получавших иммунотерапию ридостином в сочетании с химиотерапией. После проведения курса иммунотерапии в сочетании с химиотерапией у больных отмечено достоверное увеличение общего количества лимфоцитов в периферической крови и процента В-лимфоцитов по сравнению с соответствующими показателями до лечения.

Lymphocytes subsets in patients

with squamosus cervical cancer

under the conditions of cytostatic therapy

and application of interferonogenesis inductor

Ridostin

S.E. Krasilnikov, L.A. Obuchova, A.V. Tarchov, N.V. Yuklayeva

We have been observed 50 patients with uterine cervix cancer under the conditions of different methods of special therapy combined with immunotherapy. Morphological and morphometrical examination of the iliac lymphatic nodes taken during the surgical operation have been conducted and the blood lymphocyte subsets have been studied. It has been shown that immunotherapy by means of Ridostin results in expansion of the paracortex size of the regional lymphatic nodes. Stimulates the formation of germinal centers as well as in ectopic lymphoid follicles — paracortical and medullar. Positive changes in the structure of the lymphatic nodes are less expressed when immunotherapy is combined with the special methods of treatment. Combination of chemiotherapy with immunotherapy (Ridostin) doesn't result in the reduction of lymphocyte number.

Литература

1. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии / Г.Г. Автандилов. — М., 2002. — 238 с.

2. Белянин В.Л. Диагностика реактивных ги-перплазий лимфатических узлов / В.Л. Белянин, Д.Э. Цыплаков. — СПб.-Казань, 1999. — 328 с.

3. Бохман Я.В. Руководство по онкогинеколо-гии / Я.В.Бохман. — СПб., 2002. — 540 с.

4. Красильников С.Э. Современная тактика ведения и лечения больных с генитальной инфекцией при фоновых, предраковых заболеваниях и преинвазивном раке шейки матки: Автореф. дис.

... канд. мед. наук / С.Э. Красильников. — Омск, 1999. — 23 с.

5. Лукьянченко Б.Я. Лимфография /Б.Я. Лукь-янченко. — М., 1966. — 219 с.

6. Максимов С.Я. Комбинированное лечение рака шейки матки /С.Я. Максимов, К.Д. Гусейнов // Практическая онкология, 2002. — Т. 3. — № 3. — С. 200-211.

7. Международная гистологическая номенклатура (на латинском, русском и английском языках) / В.В. Семченко, Р.П. Самусев, М.В. Моисеев, З.Л. Колосова. — Омск, 1999. — 156 с.

8. Патоморфологическая характеристика регионарных лимфатических узлов при плоскоклеточном раке шейки матки в условиях эндолимфати-ческого введения некоторых цитостатиков / Ю.И. Бородин, С.Э. Красильников, В.А. Головнев и др. // Бюлл. СО РАМН, 2004. — № 1. — С. 45-49.

9. Потапов Ю.Н. Морфологические изменения опухоли и лимфоидной ткани при моно- и соче-танной химиотерапии иммунномодуляторами и

цитостатиками: Автореф. дис. ... д-ра мед наук / Ю.Н. Потапов. — М., 1993. — 31 с.

10. Ярилин А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. — М., 1999. — 608 с.

11. Alberthy J. Histomorphologk reaction patterns in cervical lymph nodes of different neck sites / J. Alberthy, E. Wardelmann // Lymphology, 2001.

— Vol. 34. — № 2. — P. 77-83.

12. Bajenoff M. The strategy of T cell antigen-presenting cell encounter in antigen-draining lymph nodes revealed by imaging of initial T cell activation / M. Bajenoff, S. Granjeaund, S. Guerder // J. Exp. Med., 2003. — Vol. 198. — № 5. — P. 715-724.

13. Nieuwenhuis P. Functional anatomy of germinal centers / P. Nieuwenhuis, D. Opstelten // Amer. J. Anat., 1984. — Vol. 170. — № 3. — P. 421-435.

14. Szakal A.K. A novel in vivo follicular dendritic cell-dependent iccosome-mediated mechanism for delivery of antigen to antigen-processing cells / A.K. Szakal, M.H. Kosco, J.G. Tew // J. Immunol., 1988.

— Vol. 140. — № 2. — P. 341-353.