CC BY
84
№ 2 - 2014 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 611.428:616.5-006.81
РЕГИОНАРНЫЕ ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ ПРИ МЕТАСТАЗИРОВАНИИ МЕЛАНОМЫ КОЖИ
А. И. ЛомакинЮ. И. Бородин3. Н. П. Бгатова3. С. А. ФурсовН. Б. Исакова1. И. В. Качесов1. С. А. Чепко1. В. И. Коненков3
1ГБУЗ НСО Новосибирский областной онкологический диспансер (г. Новосибирск) 2ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава
России (г. Новосибирск) 3ФГБУ «Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной
лимфологии» СО РАМН (г. Новосибирск)
Изучали структуру регионарных к локализации меланомы кожи лимфатических узлов, удаленных при оперативных вмешательствах при прогрессии опухоли. Методом световой микроскопии с применением иммуногистохимии отмечали процессы замещения паренхимы и стромы узлов жировой и опухолевой тканями, развитие фиброза. В жировой ткани, инфильтрирующей мозговые синусы и капсулу лимфатических узлов, обнаруживали Podoplanin+-лимфатические сосуды. В соединительнотканных тяжах, пронизывающих лимфатические узлы в большом количестве, наблюдали CD34±кровеносные сосуды. В опухолевой ткани, замещающей лимфоидную паренхиму, отмечали Ю-67±опухолеые клетки. Полученные данные отражают сходный, но различающийся по степени выраженности характер ответа регионарных лимфатических узлов при метастазировании меланомы кожи.
Ключевые слова: меланома кожи, регионарные лимфатические узлы, Ю-67-клетки, CD34+, Podoplanin+-сосуды.
Ломакин Алексей Игоревич — ординатор хирургического отделения № 1 ГБУЗ НСО «Новосибирский областной онкологический диспансер», заочный аспирант кафедры онкологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», e-mail: lomakin@rocketmail.com
Бородин Юрий Иванович — доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН, главный научный сотрудник ФГБУ «НИИ клинической и экспериментальной лимфологии», г. Новосибирск, рабочий телефон: 8 (383)335-93-53, e-mail: lympha@soramn.ru
Бгатова Наталия Петровна — доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией ультраструктурных исследований ФГБУ «НИИ клинической и экспериментальной лимфологии», г. Новосибирск, рабочий телефон: 8 (383)333-47-43, e-mail: n_bgatova@ngs.ru
Фурсов Сергей Александрович — доктор медицинских наук, профессор кафедры онкологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», хирург высшей категории, заведующий хирургическим отделением ГБУЗ НСО «Новосибирский областной онкологический диспансер», e-mail: fursov.serega2011@yandex.ru
Исакова Надежда Борисовна — врач-патологоанатом патоморфологического отделения ГБУЗ НСО «Новосибирский областной онкологический диспансер», e-mail: nadin-isakova@mail.ru
Качесов Игорь Викторович — главный патологоанатом, заведующий патологоанатомическим отделением ГБУЗ НСО «Новосибирский областной онкологический диспансер», e-mail: kachesov@mail.ru
Чепко Сергей Александрович — врач-патологоанатом патоморфологического отделения ГБУЗ НСО «Новосибирский областной онкологический диспансер», e-mail: kachesov@mail.ru
Коненков Владимир Иосифович — доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН, директор ФГБУ «НИИ клинической и экспериментальной лимфологии», г. Новосибирск, рабочий телефон: 8 (383)333-64-09, e-mail: konenkov@soramn.ru
Введение. Меланома кожи является одним из наиболее агрессивно протекающих злокачественных новообразований человека, обладающим высоким метастатическим потенциалом [4]. Диагностическое значение для определения интенсивности злокачественного роста является статус регионарного лимфатического узла, так как метастазирование опухоли к регионарным лимфатическим узлам представляет собой первый шаг распространения опухоли большинства раковых образований [1, 6].
Целью данного исследования было изучение структуры регионарных к локализации меланомы кожи лимфатических узлов, удаленных при оперативных вмешательствах при прогрессии меланомы кожи.
Материалы и методы. В исследование были включены регионарные к локализации меланомы кожи лимфатические узлы, удаленные при оперативных вмешательствах при меланоме кожи 3-й стадии злокачественности. Лимфатические узлы фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина, обрабатывали по стандартной гистологической методике и заливали в парафин. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином с использованием антител. Все этапы иммуногистохимической реакции (депарафинизация, демаскировка, инкубация с первичными антителами и т.д.) проводили в автоматическом режиме на аппарате BENCHMARK/XT (Ventana). Использовали моноклональные антитела к Ki-67 и CD34 («Novocastra»), Podoplanin («Monosan»). Полученные препараты лимфатических узлов изучали в световом микроскопе «Le^a DM», фотографировали с помощью компьютерной программы «^vigion».
Результаты исследований. В структуре исследованных лимфатических узлов отмечали признаки деструктивных изменений различной степени выраженности. Среди причин нарушения структуры и опустошения лимфатических узлов наблюдали их жировое перерождение и фиброз. Жировую ткань обнаруживали в мозговых синусах и капсуле лимфатических узлов. Признаки фиброза обнаруживали во всех исследованных лимфатических узлах, и степень этого процесса была различной. Отмечали
фиброзирование в виде толстых фибрилл, которые ветвились и распространялись по периваскулярным пространствам в коре лимфатических узлов (рис. 1а, б).
Рис. 1. Структура регионарных лимфатических узлов при метастазировании меланомы кожи: а — вторичный лимфоидный фолликул, окраска гематоксилином и эозином, увеличение 10x10; б — вторичный лимфоидный фолликул, иммуногистохимическое окрашивание на маркер пролиферации Ю-67; в — опухолевые клетки в лимфоидной паренхиме, окраска гематоксилином и эозином, увеличение 10x10; г — локализация кровеносных сосудов в соединительнотканных трабекулах, иммуногистохимическое окрашивание на маркер эндотелиоцитов кровеносных сосудов CD34; д — фиброз и замещение лимфоидной паренхимы опухолевыми клетками, окраска гематоксилином и эозином, увеличение 10x10; е — делящиеся опухолевые клетки в лимфатическом узле, иммуногистохимическое окрашивание на маркер пролиферации Ю-67
В других лимфатических узлах имели место структурные признаки обширного фиброза, который составлял 20-30 % от размера узла (рис. 2в). При этом 15-20 % занимала лимфоидная паренхима, а остальную часть узла составляла опухолевая ткань (рис. 2в). При окрашивании лимфатических узлов на маркер пролиферации Ю-67 были выявлены пролиферирующие клетки опухолевой ткани в лимфатических узлах (рис. 2г). В сохранившихся участках лимфоидной паренхимы наблюдали наличие вторичных фолликулов с пролиферацией В-лимфоцитов (рис. 2д, е). Иммуногистохимическое окрашивание на маркер лимфатических сосудов выявило наличие Podoplanin+-лимфатических сосудов в жировой ткани узла, расположенной на месте
мозговых синусов и капсулы лимфатических узлов (рис. 2а). Иммуногистохимическое окрашивание на маркер кровеносных сосудов позволило выявить CD34±кровеносные сосуды в соединительно-тканных трабекулах, расположенных в лимфоидной паренхиме (рис. 2б).
Рис. 2. Локализация Podoplanin+-лимфатических и СВ34±кровеносных сосудов в регионарных лимфатических узлах при метастазировании меланомы кожи: а — Podoplanin+-лимфатические сосуды в жировой ткани узла, увеличение 10x40; б — СD34±кровеносные сосуды в соединительнотканных тяжах лимфоидной паренхимы
лимфатического узла, увеличение 10x40
Обсуждение результатов. Имеющиеся в литературе описания морфологических перестроек в регионарных лимфатических узлах в процессе злокачественного роста носят сходный характер и различаются по степени выраженности изменений в зависимости от вида опухоли, локализации и времени развития [2]. Подобное описанному нами жировое замещение лимфатических узлов при различных онкологических заболеваниях было показано и другими авторами [5]. При исследовании взятых интраоперационно подвздошных лимфатических узлов у больных раком шейки матки было показано, что структура 25-41 % узлов сильно изменена [3]. Отмечали жировое перерождение большей части лимфоидной паренхимы и склерозирование. По мнению авторов, это было следствием выраженной антигенной стимуляции и преждевременного старения организма, наблюдаемого у онкологических больных [3]. Наблюдали большое содержание первичных и вторичных лимфоидных узелков. Среди вторичных лимфоидных узелков преобладали лимфоидные узелки с герминативными центрами III и VI — заключительных стадий развития. Паракортикальная зона, играющая ключевую роль в противоопухолевом иммунном ответе, была атрофирована и определялась виде узкой полосы между лимфоидными узелками и мозговыми тяжами. Посткапиллярные венулы встречались редко, как правило, имели плоский эндотелий и не обнаруживали признаки активной
миграции лимфоцитов через их стенку. Морфофункциональное состояние лимфатических узлов соответствовало морфологической картине иммунодефицитного состояния [3].
Выводы. В структуре регионарных к локализации меланомы кожи лимфатических узлов, удаленных при оперативных вмешательствах при прогрессии опухоли, отмечали процессы замещения паренхимы и стромы органов жировой и опухолевой тканями и развитие фиброза. Несмотря на значительные деструктивные изменения, в сохранившихся участках лимфоидной паренхимы выявляли вторичные лимфоидные фолликулы с пролиферирующими В-клетками. В жировой ткани, инфильтрирующей мозговые синусы и капсулу лимфатических узлов, обнаруживали Podoplanin+-лимфатические сосуды. В соединительнотканных тяжах, пронизывающих лимфатические узлы в большом количестве, наблюдали CD34±кровеносные сосуды. В опухолевой ткани, замещающей лимфоидную паренхиму, отмечали Ю-67±опухолеые клетки. Полученные данные отражают сходный, но различающийся по степени выраженности характер ответа лимфатических узлов на метастазирование опухолевых клеток.
Список литературы
1. Бгатова Н. П. Лимфатический узел при опухолевом росте / Н. П. Бгатова // Лимфология.
- Новосибирск, 2012. —Гл 5.4. - С. 412-423.
2. Имянитов Е. Н. Фундаментальная онкология: наиболее примечательные события 2004 года / Е. Н. Имянитов, Х. П. Хансон // Практическая онкология. — 2005. — Т. 6, № 1. — С. 1-5.
3. Морфологические изменения в регионарных лимфатических узлах у больных раком шейки матки после введения ридостина / С. Э. Красильников [и др.] // Проблемы лимфологии и интерстициального переноса : труды ГУ НИИ КиЭЛ СО РАМН.
— Новосибирск, 2004. — Т. 10, ч. 1. — С. 209-210.
4. Способ повышения эффективности лечения меланомы / Р. Г. Никитина [и др.] // Бюл. эксперим. биол. мед. — 2009. — Т. 148, № 8. — С. 209-212.
5. Murakami G. Histologie Heterogeneity and Intranodal Shunt Flow in Lymph Nodes from Elderly Subjects : A Cadaveric Study / G. Murakami, I. Izumi, I. Taniguchi // Annals
of Surgical Oncology. — 2004. — Vol. 11. — P. 279S—284.
6. Wissmann C. Pathways targeting tumor lymphangiogenesis / C. Wissmann, M. Detmar // Clin. Cancer Res. — 2006. — Vol. 12, N 23. — P. 6865-6868.
REGIONAL LYMPH NODES AT METASTASING OF SKIN MELANOMA
A. I. Lomakin12. Y. I. Borodin3. N. P. Bgatova3. S. A. Fursov12, N. B. Isakova1.1. V. Kachesov1. S.
A. Chepko1. V. I. Konenkov3
NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic» (Novosibirsk c.) 2SBEIHPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health» (Novosibirsk c.) 3FSBE «Novosibirsk scientific research institute of clinical and experimental lymphology»
SB RAMS (Novosibirsk c.)
The structure of lymph nodes that are regional to localization of skin melanoma removed at surgeries at progression of a tumor was studied. Processes of replacement of parenchyma and stroma of nodes with fatty and tumoral tissues, fibrosis development are studied by method of light microscopy with application of immunohistochemistry. Podoplanin +-lymphatic vessels were found In fatty tissue, infiltrative cerebral sines and capsule of lymph nodes. In the connective-tissue cords, penetrating lymph nodes in a large number, CD34 +-blood vessels were observed. In the tumoral fabric replacing lymphoid parenchyma, Ki-67 +-tumoral celles were registered. The obtained data reflect similar, but differing on expressiveness degree character of the answer of regional lymph nodes at metastasing of skin melanoma.
Keywords: skin melanoma, regional lymph nodes, Ki-67-cells, CD34+, Podoplanin+-vessels.
About authors:
Lomakin Alexey Igorevich — intern of surgical department № 1 at NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic», correspondence post-graduate student of oncology chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», e-mail lomakin@rocketmail.com
Borodin Yury Ivanovich — doctor of medical science, professor, academician of the RAMS, chief researcher at FSBE «Novosibirsk scientific research institute of clinical and experimental lymphology» SB RAMS, office phone: 8 (383)335-93-53, e-mail: lympha@soramn.ru
Bgatova Natalia Petrovna — doctor of biological science, professor, head of laboratory of ultrastructural researches at FSBE «Novosibirsk scientific research institute of clinical and experimental lymphology» SB RAMS, office phone: 8 (383)333-47-43, e-mail: n_bgatova@ngs.ru
Isakova Nadezhda Borisovna — pathologist of pathomorphological department at NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic», e-mail: nadin-isakova@mail.ru
Kachesov Igor Viktorovich — chief pathologist, head of pathoanatomical office of NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic», e-mail: kachesov@mail.ru
Chepko Sergey Aleksandrovich — pathologist of pathomorphological department at NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic», e-mail: kachesov@mail.ru
Konenkov Vladimir Iosifovich — doctor of medical science, professor, academician of the RAMS, director of FSBE «Novosibirsk scientific research institute of clinical and experimental
lymphology» SB RAMS, office phone: 8 (383)333-64-09, e-mail: konenkov@soramn.ru
Fursov Sergey Aleksandrovich — doctor of medical science, professor of oncology chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», surgeon of the highest category, head of surgical department at NRSBHE «Novosibirsk Regional Oncological Clinic», e-mail: fursov.serega2011@yandex.ru
List of the Literature:
1. Bgatova N. P. Lymph node with tumoral growth / N. P. Bgatov // Lymphology. — Novosibirsk, 2012. — Ch. 5.4. — P. 412-423.
2. Imyanitov E. N. Fundamental oncology: the most remarkable events of 2004 / E. N. Imyanitov, H. P. Hansson // Practical oncology. — 2005. — V. 6, № 1. — P. 1-5.
3. Morphological changes in the regional lymph nodes at patients with cervical cancer after ridostin introduction / S. E. Krasilnikov [etc.] // Problems of Lymphology and interstitial transfer: works of SE scientific research institute of K&EL SB RAMS. — Novosibirsk, 2004. — V. 10, P.1. — P. 209-210.
4. Way of increase of efficiency of treatment of melanoma / R. G. Nikitin [etc.] // Bulletin of exper. biol. med — 2009. — V. 148, № 8. — P. 209-212.
5. Murakami G. Histologic Heterogeneity and Intranodal Shunt Flow in Lymph Nodes from Elderly Subjects : A Cadaveric Study / G. Murakami, I. Izumi, I. Taniguchi // Annals
of Surgical Oncology. — 2004. — Vol. 11. — P. 279S—284.
6. Wissmann C. Pathways targeting tumor lymphangiogenesis / C. Wissmann, M. Detmar // Clin. Cancer Res. — 2006. — Vol. 12, N 23. — P. 6865-6868
