CC BY
0УДК 612.014.482 DOI: 10.29039/2224-6444-2023-13-3-44-50
ИЗМЕНЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ
Харченко В. З., Алиев Л. Л., Скоромная Н. Н.
Институт «Медицинская академия имени С. И. Георгиевского» ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского», 295051, бульвар Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для переписки: Скоромная Наталья Николаевна, к.м.н., доцент кафедры общей и клинической патофизиологии, Институт «Медицинская академия имени С. И. Георгиевского» ФГАОУ ВО «КФУ им. В.И. Вернадского», е-mail: skoronmaya_n@mail.ru
For correspondence: Skoromnaya N., PhD, associate professor of the Department of General and Clnical Pathophysiology, Medical Academy named after S.I. Georgievsky of Vernadsky CFU, e-mail: skoronmaya_n@ mail.ru
Information about authors:
Kharchenko V. Z., https://orcid.org/0000-0001-5092-4672 Aliev L. L., https://orcid.org/0000-0001-9401-4398 Skoromnaya N. N., https://orcid.org/0000-0001-7524-9415
РЕЗЮМЕ
Целью проведенного исследования явилось установить динамику показателей в сыворотке крови протеиназ-ингибиторной системы и антиоксидантной защиты при действии на организм крыс однократного тотального воздействия ионизирующего излучения в дозе 6 Гр. Материал и методы. Экспериментальные исследования проведены на белых лабораторных крысах-самцах линии «Вистар» массой 170-200 г. Кровь для исследований получали путём декапитации животных под лёгким эфирным наркозом. Экспериментальное действие ионизирующего излучения осуществляли путём воздействия на животных однократного тотального облучения с использованием гамма-терапевтического аппарата «АГАТ-Р1» (60Со). Результаты. Изучено влияние ионизирующего излучения на состояние протеиназ-ингибиторной системы и антиоксидантную защиту организма. В ходе проведенных исследований было установлено, что активность СОД в сыворотке крови претерпевала существенные изменения в зависимости от временного фактора. В течение всего периода исследований в сыворотке крови животных после воздействия ионизирующего облучения, отмечалась высокая ферментативная активность каталазы и пероксидазы. Существенные изменения были отмечены при изучении активности неспецифических протеиназ. Обсуждение. Полученные данные свидетельствовали о фазной динамике активности неспецифических протеиназ в сыворотке крови крыс, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения, с максимальным повышением их активности к 3-м и 7-м суткам исследования. Заключение. Экспериментальное воздействие ионизирующего излучения сопровождается повышением активности внутриклеточных антиоксидантных ферментов, как основного механизма защиты клеток от повреждающего действия свободных радикалов. Динамика изменений показателей протеиназ-ингибиторной системы характеризовалась фазным повышением активности неспецифических протеиназ в сыворотке крови на фоне прогрессивного снижения ингибиторного потенциала.
Ключевые слова: протеолитические ферменты, протеиназ-ингибиторная система, антиоксидантная система, ионизирующее облучение.
CHANGES IN PROTEOLYTIC AND ANTIOXIDANT ACTIVITY IN BLOOD SERUM UNDER INFLUENCE OF IONIZING RADIATION
Kharchenko V. Z., Aliev L. L., Skoromnaya N. N.
Medical Academy named after S.I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
The study aims at investigating the dynamics of parameters of the protease-inhibitory system and antioxidant defensive mechanisms in the blood serum under the influence of a single total exposure of rats to ionizing radiation at a dose of 6 Gy. Material and Methods. The study was carried out on white laboratory male Wistar rats weighing 170-200 g. Blood for research was obtained by decapitation of animals under light ether anesthesia. The experimental effect of ionizing radiation was carried out by exposing animals to a single total irradiation using the gamma-therapeutic device "AGAT-R1" (60Co). Results. The impact of ionizing radiation the protease-inhibitory system and the antioxidant protective mechanisms was studied. It has been shown that the activity of superoxide dismutase in blood serum significantly changed depending on the time factor. During the entire period of research, high enzymatic activity of catalase and peroxidase was observed in the blood serum after exposure to ionizing radiation. Discussion. The results of investigation revealed the phase dynamics of the activity of nonspecific proteases in the blood serum of rats exposed to ionizing radiation, with a maximal peaks by the 3rd and 7th days of the study. Conclusion: experimental exposure to ionizing radiation is accompanied by an increase of the activity of intracellular antioxidant enzymes, as the main protective
mechanism from the cellular damage caused by free radicals. The dynamics of changes in the parameters of the protease-inhibitory system is characterized by a phase increase of the activity of nonspecific proteases in the blood serum on the background of a progressive decrease of the inhibitory potential.
Key words: proteolytic enzymes, proteinase inhibitor system, antioxidant system, ionizing radiation.
В процессе своей жизнедеятельности человек подвергается воздействию ионизирующего излучения, как от естественных, так и от искусственных (техногенных) источников. Особенностью действия ионизирующего излучения является его способность проникать в биологические ткани, клетки, субклеточные структуры, повреждать их, вызывая ионизацию атомов и молекул за счёт физических взаимодействий и радиационно-хи-мических реакций, протекающих в момент облучения организма. [1; 2]. При этом особое значение приобретает изучение изменений клеточного метаболизма, поскольку радиационное повреждение клеток зависит не только от условий облучения (вид излучения, мощность дозы), но и от метаболических особенностей клеток (интенсивность биохимических реакций, надёжность эндогенных систем энергообеспечения, защиты, репарации и внутриклеточной регуляции) [3].
Воздействие ионизирующего излучения на биологические объекты влечет за собой поглощение его энергии во всех тканях организма с развитием процессов радиолиза воды (гидроксильных радикалов, супероксид-анион-радикалов и пере-кисных радикалов). Эти ионы являются сильными окислителями, способствуют инициации и появлению свободнорадикальных реакций. Биологический эффект радиационно-индуцирован-ных свободнорадикальных процессов во многом зависят от надёжности антиоксидантной защиты клеток [4; 5].
Известно, что в организме существует динамическое равновесие между системами протеи-наз и их ингибиторами, а при патологии оно изменяется в сторону угнетения или активации [6]. Данные о влиянии ионизирующего излучения на состояние системы протеолиза в научной литературе немногочисленны и отражают тенденцию изменений общей протеолитической активности без комплексного подхода к изучению особенностей изменений баланса протеиназ-ингибиторной системы и системы антиоксидантной защиты. В то же время хорошо известно о том, что процессы неспецифического протеолиза являются универсальным механизмом неспецифической альтерации. Активация протеолитических ферментов, обладающих высокой биологической активностью, приводят к локальной деструкции белковых структур в органах и тканях, а также они способны вызвать системные расстройства функций регуляторных плазменных систем [7; 8].
В современных условиях риски техногенных катастроф, в том числе на атомных объектах остаются высокими. В этой связи поиск современных эффективных подходов к коррекции различных форм лучевой патологии остается актуальной задачей, выполнение которой требует глубокого понимания всех аспектов ее патогенеза на молекулярном и клеточном уровнях.
Целью исследования явилось установить динамику показателей в сыворотке крови протеи-наз-ингибиторной системы и антиоксидантной защиты при действии на организм крыс однократного тотального воздействия ионизирующего излучения в дозе 6 Гр.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Экспериментальные исследования проведены на 106 белых лабораторных крысах-самцах линии «Вистар» массой 170-200 г. Для проведения экспериментального исследования лабораторные животные были разделены на 2 группы: 1 - контрольная группа животных, находившихся в обычных условиях вивария - 30 особи; 2 - животные, подвергавшиеся однократному тотальному действию ионизирующего излучения в дозе 6 Гр с последующей декапитацией через 24 часа, 3, 7, 14 и 30 дней после воздействия, соответственно - 76 особей.
Кровь для исследований получали путём дека-питации животных под лёгким эфирным наркозом. Сыворотку крови получали путем её центрифугирования в течение 15 минут при 3000 об/мин.
Экспериментальное действие ионизирующего излучения осуществляли путём воздействия на животных однократного тотального облучения с использованием гамма-терапевтического аппарата «АГАТ-Р1» (60Со) при следующих условиях: очаговая доза 6 Гр, поле 24х24 см, РИК=90 см, глубина=3 см (89,6%), Р=1,155 сГр/с, длительность экспозиции 580с. Во время облучения животные находились в изготовленных клетках-фиксаторах из органического стекла с отверстиями для свободного поступления воздуха.
Для оценки состояния окислительно-антиок-сидантного гомеостаза определяли активность супероксиддисмутазы (СОД) [9], каталазы (КА) [10], пероксидазы (ПА) [11] с применением спек-трофотометрических методов.
Исследование уровня активности эластазо-подобных (ЭПА), трипсиноподобных (ТПА) протеиназ и ингибиторов протеиназ (альфа-1
ингибитора протеиназ (а-1ИП) проводились с применением спектрофотометрических методов, основанных на регистрации скорости прироста оптической плотности в ходе ферментативного гидролиза синтетических субстратов [12 ].
Полученные в процессе исследования данные обрабатывались методом математической статистики с использованием компьютерного пакета обработки данных «STATISTICA-13» для работы в среде Windows.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Известно, что основным механизмом, ограничивающим деструктивное воздействие сво-боднорадикальных процессов в клетке, является система внутриклеточных антиоксидантных ферментов [13].
В результате проведенных исследований было установлено, что активность СОД в сыворотке крови претерпевала существенные изменения в зависимости от временного фактора (рис.1). В течение первых трёх суток после облучения было зафиксировано снижение активности СОД: спустя 24 часа - на 9,1 % (р>0,05), а через 3 дня - на 38,7 % (р<0,001) относительно показателей контрольной группы. Спустя 7 дней после действия ионизирующего излучения отмечалось повышение активности СОД на 173,1 % (р<0,001) и максимальное увеличение содержания фермента в сыворотке крови было зафиксировано через 14 дней после облучения животных на 298,9 % (р<0,001) выше по сравнению с контрольными значениями.
Изменены* лктивногти гуперокгиддисрптл^ы и сыворогь* крови 1фыс после inпмзмруннцего oaiy'iiniinlMinii
** * л.
Ч<?|Гф0ЛЬ- 24 чаи Здня 7Д1ГС-Й ■ £С Д (уел ^д/ып) 14 дней ■ЗОдмс-fi
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (p) по отношению к контролю: *- p<0,05; **- p<0,01; ***- p<0,001.
Рис. 1. Изменение активности супероксиддисмутазы в сыворотке крови крыс после ионизирующего
облучения
Fig. 1. Change in the activity of superoxide dismutase in the blood serum of rats after ionizing
На 30 сутки эксперимента было выявлено снижение активности СОД, и её содержание в крови приближалось к контрольным значениям.
В результате проведенного исследования установлено резкое повышение активности каталазы в сыворотке крови крыс через 24 часа после действия ионизирующего облучения и она была на 300,5 % (р<0,001) выше контрольных показателей (рис.2).
Через 3 и 7 дней наблюдений после однократного тотального облучения животных активность фермента заметно снижалась, однако она продолжала превышать контрольные значения на 158,5 % (р<0,001) и на 146,4 % (р<0,001) соответственно. Наиболее выраженная активность каталазы отмечена на 14 день эксперимента, они были на 365,7 % (р<0,001) выше показателей контрольной группы. Через 30 дней после воз-
действия ионизирующего облучения каталазная активность заметно снижалась, но сохраняла достоверное превышение контрольных значений на 87,4 % (р<0,001).
Изменение активности пероксидазы в сыворотке крови крыс спустя 24 часа после воздействия ионизирующего облучения в дозе 6 Гр характеризовалось незначительным недостоверным снижением (рис.3).
В последующие 3 дня отмечалось нарастание ферментативной активности, и её показатели превысили контрольные значения на 63,8 % (р<0,001). На 7 сутки эксперимента зафиксировано дальнейшее увеличение уровня пероксидазы в сыворотке крови, зарегистрированные показатели были на 195,7 % (р<0,001) выше контрольных. На 14 сутки после облучения появилась тенденция к снижению активности пероксидазы, но
Изменение jktiibhoctii клтл.пл ¡ы и сыворотке к|1оби крыс после но шгш|> уницега облучения i М=ин
дао зоо
+ » + *ф г
200 1<Ю
МЩ ль*
0
КЗНТ|МПЬ 24 часа 3 дня ?ДНРр1 ■ нЛЛЛЛЫ |мКМ0Ль/С*Л^ 14 дней ЗОДНРЙ
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (р) по отношению к контролю: ***-р<0,001
Рис. 2. Изменение активности каталазы в сыворотке крови крыс после ионизирующего облучения Fig.2. Changes in catalase activity in rat blood serum after ionizing radiation
Ничененне лктнвнестн перомспдли.! в сыворотке криви крыс ни еле шнпифующею ош'кння i .М=ш)
од
нонтроль Id дней JOflHii
■ пфосгцдазл (нмель/мл'мнн!
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (р) по отношению к контролю: ***-р<0,001.
Рис. 3. Изменение активности пероксидазы в сыворотке крови крыс после ионизирующего облучения Fig. 3. Changes in peroxidase activity in rat blood serum after ionizing radiation
при этом сохранялось достоверное увеличение показателей относительно контрольной группы на 71,8 % (р<0,001). Через 30 дней уровень пе-роксидазной активности был максимально высоким и превышал контрольные значения на 219,5 % (р<0,001). Существенные изменения были отмечены при изучении трипсиноподобной активности (ТПА) сыворотки крови крыс. Так, через 24 часа после воздействия ионизирующего излучения она увеличивалась на 7,3 % (р>0,05) относительно контрольных значений (рис.4). Наиболее выраженные изменения ТПА наблюдались на третий и седьмой день после облучения, было отмечено достоверное увеличение Т ПА активности на 75,7 % (р<0,001) и на 49,8 % (р<0,001) соответственно по сравнению с контрольной группой. Минимальные значения ТПА в сыворотке крови наблюдались на 14 день эксперимента, показатели снижались на 27,5 % (р<0,001) относительно контрольных значений. К 30 суткам
эксперимента, уровень ТПА в сыворотке крови увеличивался и достигал значений контрольной группы, но полученные данные не носили достоверного характера.
В результате исследования, к 24 часу после тотального облучения, установлено повышение эластазоподобной активности (ЭПА) в сыворотке крови опытной группы животных и эта величина была на 25,7 % по сравнению с данными контрольной группы (р<0,01) (рис.5). Максимальное достоверное увеличение показателей ЭПА было зафиксировано на 3 сутки исследования, и эта величина превышала контрольные значения на 26,3 % (р<0,05). На 7 день эксперимента имело место снижение активности ЭПА и её значения приближались к показателям контрольной группы.
Максимально низкие значения ЭПА были зафиксированы на 14 сутки после облучения животных и были на 31,2 % (р<0,001) ниже относительно группы сравнения. К 30 суткам эксперимента,
Иаменения трипсинопоцобнон ймтиеностн {ыеорстни кроен
крыс при воэдей^еинионизир^ющего изучения|М±п)
аз 0,2
0,1
I
I I I ■ I
Контроль Через24чаи 'lepesïani Через7дней Через 1<5дней Через30дней ■ "ПА [мкмрль/мл глин!
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (p) по отношению к контролю: ***■ p<0,001
Рис. 4. Изменения трипсиноподобной активности сыворотки крови крыс при воздействии ионизирующего излучения
Fig. 4 Change in trypsin-like activity of rat blood serum when exposed to ionizing radiation
Изменении ^л-астээоподобной эктиечостн сыеореткн криви крыс г ри воэ дейс теи и ион и э и pv » го и злучен и r ( M±m>
Ч®
■ ■
I I I I I I
Контроль чор«24чэсэ через з л»« ч«р«тцней черелд чермэо
Д1 |СН
■ ЭП AIWftMD.n ь/г.ип nil
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (р) по отношению к контролю: *- р<0,05; **- р<0,01; ***- р<0,001.
Рис. 5. Изменения эластазоподобной активности сыворотки крови крыс при воздействии ионизирующего излучения
Fig. 5. Changes in elastase-like activity of rat blood serum when exposed to ionizing radiation
» « 40 Лзгленян КРОВИ КО г (Иг 1С ктиннпсти «1- ИНГИ»! 10И воздействии И ОН И m h эи Ю njiiiTellH^ I В С1а1нпрптке чшщята излучения (Mim)
• 1
■
Контроль 24 часа Через ï дч? чорез7днеА Череп 14 дней Иорг-з 30 дней ■ al-и П | ИЕ/гел )
Примечание. Звёздочками показана достоверность различий (р) по отношению к контролю: *- р<0,05.
Рис. 6. Изменения активности al- ингибитора протеиназ в сыворотке крови крыс при воздействии
ионизирующего излучения Fig. 6. Changes in the activity of al- proteinase inhibitor in rat blood serum when exposed to ionizing
radiation
отмечалась тенденция к росту активности ЭПА в сыворотке крови, однако значений контрольной группы не достигали. При этом было установлено уменьшение антипротеиназной активности в
опытной группы животных на протяжении всего периода исследования с максимально низкими достоверными значениями через 3 дня после действия ионизирующего излучения (рис.6).
Уровень альфа-1-ингибитора протеиназ (а1-ИП) снизился на 16,0 % (р<0,05) относительно контрольных значений. Спустя 24 часа после облучения в сыворотке крови отмечалось повышение активности протеолитических ферментов: значительная активация эластазоподоб-ных протеиназ и менее выраженное увеличение трипсиноподобной активности. При этом было зафиксировано снижение уровня активности ингибиторно-протеиназной системы. Наиболее выраженные изменения наблюдались на 3 сутки после действия ионизирующего излучения, что свидетельствовало о снижении ингибиторной активности сыворотки крови и недостаточном сдерживании протеолитических ферментов, что в итоге приводит к развитию деструктивных изменений [14].
ОБСУЖДЕНИЕ
Таким образом, в ходе проведенного исследования было установлено, что активность СОД в начале эксперимента снижалась, затем нарастала с максимальными значениями на 14 день после облучения и к 30 дню приближалась к показателям контрольной группы. Это может свидетельствовать о включении СОД в механизмы антиок-сидантной защиты и осуществлении дисмутации супероксидных радикалов. В течение всего периода исследований воздействия ионизирующего облучения отмечалась высокая ферментативная активность каталазы и пероксидазы в сыворотке крови животных. Однако динамика их изменений носила несколько асинхронный характер. Так в первые дни проводимого эксперимента наибольшая активность наблюдалась у каталазы, а активность пероксидазы достигала максимальных значений к 30 дню эксперимента. Полученные данные указывают на то, что после повреждающего воздействия ионизирующего излучения в дозе 6 Гр, активность каталазы повышалась в более ранние сроки после облучения, а перокси-дазная интенсивность нарастала постепенно. Это можно объяснить сохраняющимися интенсивными окислительными процессами, протекающими в организме крыс на протяжении всего периода наблюдений. При этом, однократное тотальное воздействие гамма-излучения в дозе 6 Гр не приводило к выраженному истощению внутриклеточных антиоксидантных резервов. Полученные данные свидетельствовали о фазной динамике активности неспецифических протеиназ в сыворотке крови крыс, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения, с максимальным повышением их активности к 3-м и 7-м суткам исследования. Активность а1-ингибитора проте-иназ сыворотки крови имела тенденцию к снижению на всех этапах исследования. При этом
достоверный минимум активности наблюдался также к 3 м суткам, что позволяет предположить, что плазменный гиперпротеолиз обусловлен не только развитием биохимической альтерации на системном уровне, но и истощением ингибитор-ного потенциала.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, экспериментальное воздействие ионизирующего излучения сопровождается повышением активности внутриклеточных антиоксидантных ферментов, как основного механизма защиты клеток от повреждающего действия свободных радикалов. Динамика изменений показателей протеиназ-ингибиторной системы характеризовалась фазным повышением активности неспецифических протеиназ в сыворотке крови на фоне прогрессивного снижения ингибитор-ного потенциала. Это позволяет сделать вывод о большом значении неспецифического протеолиза в развитии биохимической альтерации при воздействии ионизирующего излучения на ряду с активацией свободнорадикальных процессов.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflicts of interest to declare.
Финансирование. Исследование выполнено при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, программа «Приоритет-2030»
Funding. This study was financially supported by the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation, Priority-2030 programm.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дмитриевский И. М., Юров С. С., Кожо-кару А. Ф. Механизмы действия ионизирующих излучений при возникновении локальных изменений биологических клеточных структур в условиях космического полета. Современные проблемы науки и образования. 2008;5;1-8.
2. Пестовский Ю. С. Биологическое действие ионизирующих излучений. Всероссийский журнал научных публикаций. 2013;5(20);8-11.
3. Бебешко В. Г., Базыка Д. А. , Логанов-ский К. Н. Биологические маркеры ионизирующих излучений. Украшський медичний часопис. 2004;1;85-104.
4. Васин М. В., Ушаков И. Б. Радиомодуляторы как средства биологической защиты от окислительного стресса при воздействии ионизирующей радиации. Успехи современной биологии. 2020;140(1); 3-18. doi:10.1134/ s2079086420040106.
5. Чуян Е. Н., Тимурьянц Н. А. Нейроим-муноэндокринные механизмы действия низкоин-
тенсивного электромагнитного излучения крайне высокой частоты (часть 2). Миллиметровые волны в биологии и медицине. 2005;3(39);17-31.
6. Харченко В. З., Кубышкин А. В., Фомоч-кина И. И, Алиев Л. Л., Харченко С. В. Молекулярные механизмы развития экстремальных состояний и их коррекция. Симферополь: Доля; 2011.
7. Яровая Г. А. Биорегулирующие функции и патогенетическая роль протеолиза. Лабораторная медицина. 2005;7;81-89.
8. Schmaier A. H. The contact activation and kallikrein/kinin systems: pathophysiologic and physiologic activities. J Thromb Haemost. 2016;1;28-39. doi:10.1111/jth.13194.
9. Дубинина Е. Е., Сальникова Л. А., Ефимова Л. Ф. Активность и изоферментный спектр су-пероксиддисмутазы эритроцитов и плазмы крови человека. Лабораторное дело. 1983;10;30-33.
10. Королюк М. А., Иванова Л. И., Майорова И. Б. Метод определения активности каталазы. Лабораторное дело. 1988;1;16-19.
11. Попов Т., Нейковская Л. Метод определения пероксидазной активности крови. Гигиена и санитария. 1971;10;89-91.
12. Кубышкин А. В., Харченко В. З., Семе-нец П. Ф., Алиев Л. Л., Фомочкина И. И. Методы определения активности неспецифических про-теиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и биологических жидкостях. Киев; 2010.
13. Чиркин А. А., Балаева-Тихомирова О. М. Молекулярно-структурная гомология протеоли-тических ферментов. Чебоксары: Издательский дом «Среда»; 2022. doi:10.31483/a-10363.
REFERENCES
1. Dmitrievsky I. M., Yurov S. S., Kozhokaru A. F. Mechanisms of action of ionizing radiation in the occurrence of local changes in biological cellular structures under space flight conditions. Modern problems of science and education. 2008;5;1-8. (In Russ).
2. Pestovsky Yu. S. Biological effect of ionizing radiation. All-Russian Journal of Scientific Publications. 2013;5(20);8-11. (In Russ.).
3. Bebeshko V. G., Bazyka D. A., Loganovsky K. N. Biological markers of ionizing radiation. Ukrainian medical chapel. 2004;1;85-104.
4. Vasin M. V., Ushakov I. B. Radio modulators as a means of biological protection against oxidative stress when exposed to ionizing radiation. Advances in modern biology. 2020;140(1);3-18. (In Russ.). doi: 10.1134/s2079086420040106.
5. Chuyan E. N., Timuryants N. A. Neuroimmunoendocrine mechanisms of action of low-intensity electromagnetic radiation of extremely high frequency (part 2). Millimeter waves in biology and medicine. 2005;3(39);17-31. (In Russ.).
6. Kharchenko V. Z., Kubyshkin A. V., Fomochkina I. I., Aliev L.L., Kharchenko S. V. Molecular mechanisms of the development of extreme states and their correction. Simferopol: Dolya; 2011. (In Russ.).
7. Yarovaya G. A. Bioregulatory functions and the pathogenetic role of proteolysis. Laboratory medicine. 2005;7;81-89. (In Russ.).
8. Schmaier A. H. The contact activation and kallikrein/kinin systems: pathophysiologic and physiologic activities. J Thromb Haemost. 2016;1;28-39. doi:10.1111/jth.13194.
9. Dubinina E. E., Salnikova L. A., Efimova L. F. Activity and isoenzyme spectrum of superoxide dismutase in human erythrocytes and blood plasma. Laboratory work. 1983;10;30-33. (In Russ.).
10. Korolyuk M. A., Ivanova L. I., Mayorova I. B. Method for determining catalase activity. Laboratory work. 1988;1;16-19. (In Russ.).
11. Popov T., Neykovskaya L. Method for determining blood peroxidase activity. Hygiene and sanitation. 1971;10;89-91. (In Russ.).
12. Kubyshkin A. V., Kharchenko V. Z., Semenets P. F., Aliev L. L., Fomochkina I. I. Methods for determining the activity of nonspecific proteinases and their inhibitors in blood serum and biological fluids. Kyiv; 2010.
13. Chirkin A. A., Balaeva-Tikhomirova O. M. Molecular structural homology of proteolytic enzymes. Cheboksary, Sreda Publishing House. 2022. (In Russ.). doi:10.31483/a-10363.
