Научная статья на тему 'Изменения индексов активности регенерации мезотелия при использовании иммунологических препаратов для профилактики спаечного процесса брюшной полости'

Изменения индексов активности регенерации мезотелия при использовании иммунологических препаратов для профилактики спаечного процесса брюшной полости Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
68
21
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Innova
Область наук
Ключевые слова
БРЮШИНА / МЕЗОТЕЛИЙ / ЭКСПЕРИМЕНТ / СПАЙКИ / ИММУНОЛОГИЯ

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Гомон М. С., Конопля А. И., Липатов В. А., Локтионов А. Л., Новиков А. С.

В статье приведены данные, полученные в ходе экспериментального исследования на лабораторных животных, которым производилось моделирование спаечного процесса брюшной полости и введение препаратов с доказанным иммуномодулирующим эффектом. Авторы показывают позитивный эффект на процесс регенерации утраченной брюшины и ускорение регенерации мезотелия вентральной стенки.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Гомон М. С., Конопля А. И., Липатов В. А., Локтионов А. Л., Новиков А. С.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Изменения индексов активности регенерации мезотелия при использовании иммунологических препаратов для профилактики спаечного процесса брюшной полости»

SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 3 (8) 2017

ИЗМЕНЕНИЯ ИНДЕКСОВ АКТИВНОСТИ РЕГЕНЕРАЦИИ МЕЗОТЕЛИЯ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ СПАЕЧНОГО ПРОЦЕССА БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ

CHANGES IN THE ACTIVITY INDICES OF REGENERATION OF THE MESOTHELIUM WHEN USING IMMUNOLOGICAL DRUGS FOR THE PREVENTION OF THE ABDOMINAL CAVITY IMPLEMENTATION

| Гомон М.С., Конопля А.И., Липатов В.А., Локтионов А.Л., Новиков А.С., I Вербицкий Д.А., I Жуковский В.А.

| Курский государственный медицинский университет; | Санкт-Петербургская государственная медицинская академия имени И.И. Мечникова; | ООО «Линтекс», г. Санкт-Петербург

E-mail: [email protected]

Резюме

В статье приведены данные, полученные в ходе экспериментального исследования на лабораторных животных, которым производилось моделирование спаечного процесса брюшной полости и введение препаратов с доказанным иммуномодулирующим эффектом. Авторы показывают позитивный эффект на процесс регенерации утраченной брюшины и ускорение регенерации мезотелия вентральной стенки.

Ключевые слова: брюшина, мезотелий, эксперимент, спайки, иммунология

Библиографическая ссылка на статью

Гомон М.С., Конопля А.И., Липатов В.А., Локтионов А.Л., Новиков А.С., Вербицкий Д.А., Жуковский В.А. Изменения индексов активности регенерации мезотелия при использовании иммунологических препаратов для профилактики спаечного

процесса брюшной полости // Innova. - 2017. - №3 (8). - С.9-13.

DOI: 10.21626/innova/2017.3/02

I Gomon M.S., Hemp A.I., Lipatov V.A., Loktionov A.L., Novikov A.S., | Verbitsky D.A., | Zhukovsky V.A.

| Kursk State Medical University; | St. Petersburg State Medical Academy named after I. Mechnikov; | LLC "Linteks", St. Petersburg

Травма брюшины является одной из этологических причин спаечной болезни. Полное своевременное восстановление брюшины после ее интраоперационного повреждения - залог снижения риска возникновения спаек. Лекарственные средства, предложенные в качестве стимуляторов восстановительных процессов, как показали данные наших предыдущих исследований, не только не

снижают, но и способны увеличить выраженность спаечного процесса у животных с моделируемой травмой (как при внутрибрюшном, так и при парентеральном введении). Это объясняется отсутствием действия, избирательно стимулирующего процессы регенерации. В условиях послеоперационной ситуации в брюшной полости (парез, выпадение из перитонеального выпота фибрина и т.п.),

SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 3 (8) 2017

применение данной группы веществ закономерно стимулирует работу всех клеток-участников воспалительного процесса, тем самым ускоряя пролиферацию фибробластических элементов, интенсифицируя коллагеногенез.

Разрабатываемые в нашем университете, совместно с ООО «Линтекс» (г. Санкт-Петербург) методики профилактики послеоперационной адгезии с применением рассасыающихся полимерных гелей позволяет регулировать восстановительные процессы в эпителиях, выстилающих стенки полостей, придавать им регенераторный вектор.

Методы изучения темпов и закономерностей регенерации брюшины, предложенные ранее: изоляция

десерозированного участка вентральной стенки полимерным устройством (Нетяга А.А. и соавт., 2003), формирование перитонеального кармана (Липатов В.А. и соавт., 2004) не позволяют объективно оценить процессы ремезотелизации в силу комплекса причин. Перспективным направлением является использование гелей на основе полимеров целлюлозы, так как неоспоримы их высокие антиадгезивные свойства и билогическая инертность (Вербицкий Д.А., 2005).

Цель работы: на экспериментальной модели в сравнительном аспекте изучить влияние иммуномодулятора Дерината на

ремезотелизацию париетальной брюшины.

В качестве изучаемого средства нами использовалась смесь геля противоспаечного рассасывающегося, «Линтекс-Мезогель»,

стерильного и иммуномодулятора - Дерината, в дозе 1,5 мг на 1 кг веса (согласно инструкции к препарату).

«Линтекс-Мезогель» - это 4% водный раствор натриевой соли

карбоксиметилцеллюлозы производства фирмы ООО «Линтекс» (г. Санкт-Петербург), нетоксичен, стерилен, предназначен для профилактики спайкообразования после операций на органах и тканях, имеющих серозное покрытие (регистрационное удостоверение № ФС 01262006/3224-06 от 25.04.2006 г. до 25.04.2011 г.; сертификат соответствия N РОСС RU.ИМО9.В01505 с 17.05.2006 г. по 17.05.2009 г.).

Деринат - натрия дезоксирибонуклеат, прозрачная бесцветная жидкость - вытяжка из молок осетровых рыб. Фармакологическое действие: иммуномодулирующее, стимуляция регенерации и гемопоэза, ранозаживляющее, противовоспалительное, противоопухолевое (инструкция к препарату). Гель и препарат смешивали в стерильной емкости в соотношении необходимом для достижения эффективной концентрации Дерината в основе (на 2 мл геля 0,02 мл раствора Дерината).

Эксперименты проводили на здоровых половозрелых крысах-самцах линии Вистар,

массой 250-300 г. Исследования выполняли с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (Страсбург, Франция, 1986). Восстановление брюшины изучали на собственной модели спаечного процесса брюшной полости (СПБП) (Липатов В.А. и соавт., 2004): после срединного лапаротомного разреза выполнялось гидравлическое препарирование брюшины вентральной стенки с последующим ее иссечением на площади 1х1 см, отступя 1 см от края срединной раны, слепая кишка подвергалась скарификации на всей поверхности до появления «кровавой росы».

Животные были разделены на четыре серии, по 15 особей в каждой. Первая серия была контрольной - только модель СПБП, второй серии после моделирования СПБП поврежденные участки брюшины обрабатывались

противоспаечным гелем «Линтекс-Мезогель», третьей серии - раствором Дерината, четвертой -противоспаечным гелем «Линтекс-Мезогель» с депонированным в нем Деринатом. Животные выводились из эксперимента на 14-е сутки путем передозировки эфирного наркоза. Крысы подвергались аутопсии, тщательному изучению органов брюшной полости, с оценкой выраженности спаечного процесса визуально и с помощью методики семантического

дифференциала (балльная система, состоящая в интегральной оценке распространенности спаечного процесса, деформации органов брюшной полости и выраженности отдельных видов спаек с учетом коэффициента значимости каждого показателя). Париетальная брюшина и органы брюшной полости подвергались гистологическому исследованию по

общепринятой методике с фиксацией в нейтральном формалине, заливкой в парафин, окраской срезов гематоксилин-эозином, импрегнацией серебром по Футу и окраской с помощью ШИК-реакции. Цитологические исследования - мазки брюшины окрашивали по Романовскому. Микропрепараты изучали посредством световой микроскопии.

Производилось микрофотографирование с последующим определением регенераторных показателей (кариоцитоплазматический индекс (соотношение диаметров и объемов ядра и цитоплазмы), число митозов и т.п.). Результаты макро- и микроморфологических исследований отражены в таблицах 1 и 2.

Полученные в ходе экспериментов данные были обработаны с применением методов вариационной статистики с определением равномерности распределения выборочной совокупности по критерию Колмогорова, а в зависимости от типа распределения, достоверность различий оценивалась либо по критериям Вилкоксона и с помощью

SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 3 (8) 2017

однофакторного дисперсионного анализа либо с применением критерия Манна-Уитни. Производился расчет средних величин (средняя арифметическая, мода, медиана, средняя ошибка средней), определение достоверности их различий - р (существенными считали, если этот показатель был меньше или равен 0,05). Также использовался стандартный корреляционный анализ.

В контрольной серии спайки имели место у всех животных, выраженность спаечного процесса методом семантического

дифференциала составила 1,87±0,16 балла. В серии 2 у 4 животных спаечного процесса выявлено не было, его выраженность методом семантического дифференциала составила 0,65±0,19 балла. В третьей серии спайки определялись у всех животных, выраженность СПБП - 1,54±0,17 балла. В четвертой серии у 10 животных спаечного процесса не отмечено, его выраженность составила 0,45±0,29 балла.

При гистологическом исследовании у животных со СПБП морфологическая организация спаек соответствовала сроку выведения животного из эксперимента. Основу ткани составляют зреющие коллагеновые волокна с тенденцией к ориентации. Клеточный состав скуден, представлен фибробластами, фиброцитами, единичными клетками

лейкоцитарного ряда. Отмечаются явления неоангиогенеза.

При цитологическом исследовании мазков изучали соотношение зрелых и юных мезотелиоцитов. Преобладание юных форм отмечалось в четвертой серии. Также мы определяли кариоцитоплазматический индекс (отношение характеристик (размера и объема) ядра к характеристикам цитоплазмы). Максимальные результаты получены в четвертой серии.

Таблица 1

ВЫРАЖЕННОСТЬ СПАЕЧНОГО ПРОЦЕССА БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ У ЖИВОТНЫХ НА 14-е СУТКИ

ПОСЛЕ МОДЕЛИРОВАНИЯ СПБП

Серия Кол-во жив-х Кол-во жив-х со СПБП, абс. Кол-во жив-х со СПБП, % Выраженность СПБП, m Р

1. Модель (контроль) 15 15 100 1,87±0,16 -

2. Модель СПБП + гель 15 11 73,3 0,65±0,19 <0,05*

3. Модель СПБП + Деринат 15 15 100 1,54±0,17 >0,05*

4. Модель СПБП +гель+Деринат 15 5 33,3 0,45±0,29 <0,05* <0,01**

Примечание: * - достоверность различий по сравнению с контролем

** - достоверность различий по сравнению с сериями сравнения - 2 и 3

Таблица 2

ИЗМЕНЕНИЯ РЕГЕНЕРАТОРНОЙ АКТИВНОСТИ МЕЗОТЕЛИОЦИТОВ У ЖИВОТНЫХ НА 14-е

СУТКИ ПОСЛЕ МОДЕЛИРОВАНИЯ СПБП

Серия % зрелых клеток % юных клеток Кариоциотоплазматический индекс

Отношение диаметров Отношение объемов

1. Модель (контроль) 87,8 12,2 0,186 0,390

2. Модель СПБП + гель 87,3 12,7 0,187 0,391

3. Модель СПБП + Деринат 85,3 14,7 0,197 0,406

4. Модель СПБП +гель+Деринат 64 36 0,324 0,518

SCIENTIFIC ELECTRONIC JOURNAL INNOVA № 3 (8) 2017

На основании полученных результатов сделаны следующие выводы:

• При введении геля с депонированным в нем Деринатом в брюшную полость выраженность спаечного процесса достоверно снижается в 3 раза по сравнению с контрольной серией и серией с Деринатом, и в 2,2 раза по сравнению с введением только геля.

• Регенераторная активность наиболее выражена в четвертой серии - введение геля с депонированным в нем Деринатом (увеличение доли юных мезотелиоцитов в мазках-отпечатках в 3 раза, увеличение кариоцитоплазматического индекса на 70% (по диаметру) и на 30% (по объему)).

Таким образом, при введении в брюшную полость геля с депонированным в нем иммуномодулятором у животных уменьшается вероятность формирования внутрибрюшных спаек, а также снижается выраженность послеоперационного СПБП. Это объясняется тем, что гель обладает «барьерным» свойством и способен посредством гидрофлотации десерозированных поверхностей препятствовать их консолидации, склеиванию выпавшим из перитонеального выпота фибрином и формированию соединительнотканных

сращений, а иммуномодулятор активирует процессы клеточного и гуморального иммунитета, повышает устойчивость к инфекции, обладает высокими репаративными и регенераторными свойствами.

Литература

1. Лазаренко В.А., Бежин А.И., Липатов В.А., Гомон М.С., Локтионов А.Л., Жуковский В.А. Коррекция нарушений иммунитета при экспериментальном спаечном процессе брюшной полости с использованием дерината и лонгидазы // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье», - Курск, -2010, издание 3,- С 37-43.

2. Липатов В.А., Яковлева Е.Ю., Кукушкин А.Г. Экспериментальное обоснование локального применения «Дерината», депонированного в «Мезо-гель», для профилактики посттравматической компрессии нервного ствола // Материалы 79-й Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и Современность», посвященная 79-летию КГМУ, 16-17 апреля 2014 года, часть II, - Курск. - 2014. - С. 235.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.