CC BY
31
20. Kalogeropoulos A. S., Tsiodras S., Rigopoulos A. G., Sakadakis E. A., Triantafyllis A., Kremastinos D. T., Rizos I. Novel association patterns of cardiac remodeling markers in patients with essential hypertension and atrial fibrillation. BMC Cardiovasc. Disord., 2011, vol. 30, pp. 11-77.
21. Lopez B., Querejeta R., Gonzalez A., Sanchez E., Larman M., Diez J. Effects of loop diuretics on myocardial fibrosis and collagen type I turnover in chronic heart failure. J. Amer. Coll. Cardiol., 2004, vol. 43, no.ll, pp. 2028-2035.
22. Macías B., Fatela-Cantillo D., Jiménez J. L., López A. R., Moreno-Luna R., Doblas D. A., Stiefel P. Left ventricular mass, diastolic function and collagen metabolism biomarkers in essential hypertension. Med. Clin. (Bare.), 2012, vol. 138, no. 4, pp. 139-144.
УДК 612. 115. 12 14.03.00 - Медико-биологические науки
© H.H. Тризно, X.M. Галимзянов, Д.М. Никулина,
В.А. Спиридонова, Е.В. Голубкина, О.С. Дюкарева, М.Н. Тризно, 2017
ИЗМЕНЕНИЯ ГЕМОСТАЗИОЛОГИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ СЕРОВОДОРОДСОДЕРЖАЩЕГО ГАЗА
И ВОЗМОЖНОСТИ ИХ КОРРЕКЦИИ
Тризно Николай Николаевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической физиологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: trizno.n@mail.ru.
Галимзянов Хал ил Мингалиевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Никулина Дина Максимовна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой биологической химии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-20, e-mail: agma@astranet.ru.
Спиридонова Вера Алексеевна, доктор биологических наук, старший научный сотрудник отдела хроматографического анализа, Научно-исследовательский институт физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского, ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова», Россия, 119992, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 40, тел.: (495) 939-31-49, e-mail: spiridon@belozersky.msu.ru.
Голубкина Екатерина Валерьевна, ассистент кафедры патологической физиологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-927-575-08-75, e-mail: neiron-2010@mail.ru.
Дюкарева Оксана Сергеевна, аспирант кафедры нормальной физиологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-927-280-77-07, e-mail: oksana.dyukareva2011@yandex.ru.
Тризно Матвей Николаевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры анатомии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-927-552-59-84; e-mail: pakotmnt@gmail.com.
Изучены изменения в системе гемостаза и фибринолиза в условиях хронической интоксикации серово-дородсодержащим газом и исследованы возможности коррекции изменений аптамером — ингибитором тромбина. Эксперимент проводили на беспородных белых крысах. Хроническую интоксикацию сероводородсодержа-щим газом моделировали путем помещения крыс в камеры с искусственно созданным составом воздуха и газа с концентрацией 80,0 ± 2,3 мг/м3 по сероводороду. Затравка осуществлялась 5 дней в неделю в течение 4 месяцев. По завершению периода воздействия газа крысам внутримышечно вводили ДНК-аптамер — ингибитор тромбина. Установлено, что аптамер устраняет гиперкоагуляционные нарушения в системе гемостаза крыс после хронического воздействия газа. На фоне применения тромбинсвязывающего аптамера отмечена также активация фибринолитической системы и гипоагрегационный эффект.
Ключевые слова: сероводородсодержащий газ, гемостаз, фибринолиз, тромбоциты, тромбин, аптамер, ингибитор тромбина.
CHANGES IN HEMOSTASIOLOGICAL PROFILE OF RATS AT CHRONIC EXPOSURE TO SULFUROUS GAS AND POSSIBILITIES OF THEIR CORRECTION
Trizno NikolayN., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: trizno.n@mail.ru.
Galimzyanov Khalil M., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Nikulina Dina M., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-53-20, e-mail: agma@astranet.ru.
Spiridonova Vera A., Dr. Sci (Bio.), Senior researcher, Belozersky Research Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State University, 1/40 Leninskie gory, Moscow, 119992, Russia, tel.: (495) 939-31-49, e-mail: spiridon@belozersky.msu.ru.
Golubkina Ekaterina K, Assistant, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: neiron-2010@mail.ru.
Dyukareva Oksana S., post-graduate student, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: oksana.dyukareva2011@yandex.ru.
Trizno Matvey N., Cand. Sci. (Med.), Associate Professor, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: pakotmnt@gmail.com.
Changes in the system of hemostasis and fibrinolysis under conditions of chronic intoxication with sulfurous gas have been studied, and possibilities of correction of the changes by the aptamer-thrombin inhibitor have been investigated. For the experiment we used white inbred rats. Chronic intoxication with sulfurous gas was simulated by placing rats in chambers with artificially created air and gas composition with a concentration of 80.0 ± 2.3 mg / m3 for hydrogen sulfide. The exposure had been carried out 5 days a week for 4 months. At the end of the gas exposure period, the rats were injected intramuscularly with a DNA aptamer - thrombin inhibitor. Against the background of the use of thrombin-binding aptamer, activation of the fibrinolytic system and hypoaggregation effect were also noted. It has been revealed that the aptamer eliminates hypercoagulable disorders in the rat hemostasis system after chronic exposure to the gas. After the injection of the thrombin-binding aptamer, activation of the fibrinolytic system and hypoaggregation effect were also noted.
Keywords: sulfurous gas, hemostasis, fibrinolysis, platelets, thrombin, aptamer, thrombin inhibitor.
Введение. Состояние параметров системы гемостаза и фибринолиза отражается на адаптивных возможностях единой системы регуляции агрегатного состояния крови. Дисбаланс физиологических констант в динамической системе гемостаза приводит к повышению или понижению коагулоактив-ности плазмы вплоть до тромбозов и геморрагий [7, 9]. Высокочувствительная система гемостаза одной из первых реагирует на климатическо-экологические изменения, изменяя параметры своего функционирования [6, 14].
В связи с интенсификацией газоперерабатывающего производства по всему миру становятся актуальными исследования механизма воздействия сероводородсодержащего газа на живые системы [2, 8]. В основном подобные исследования проводятся in vitro [18, 19, 20]. Известна корреляция изменений гематологических показателей у работников газоперерабатывающего комплекса и стажа работы [16]. Хроническое воздействие газовых поллютантов может быть малозаметным и трудноконтро-лируемым процессом. Противоречивые данные имеются в литературе в отношении действия газа на систему гемостаза, ведущего к формированию изменений на уровне кардиоваскулярной системы. Изменения в системе крови создают предпосылки для формирования неспецифических преобразований в системе гемостаза и возникновения распространенной патологии, такой как тромбозы или геморрагии [17, 18, 19].
Основу базисной терапии нарушений реологических свойств крови составляет широкий спектр антикоагулянтных препаратов, требующих тщательного клинико-лабораторного мониторинга при назначении ввиду имеющихся побочных эффектов [13]. Востребованными становятся биотехнологические продукты с фармацевтическими свойствами, способные целенаправленно взаимодействовать с определенными белками в организме, определяя возможность контроля за лечением. Такие активные молекулы - аптамеры - были созданы на основе участков ДНК по методике SELEX для применения в различных областях медицины [11, 21]. Важнейшим представителем данного класса соединений является ДНК-аптамер - ингибитор тромбина, направленность действия которого позволяет в перспективе назначать его пациентам с повышенным риском тромбообразования. Строго специфи-
ческое взаимодействие с ключевой пептидазой в реакциях гемокоагуляции - тромбином - исключает побочные эффекты в виде перекрестного взаимодействия с другими белками системы. Возможность строгого дозирования, наличие антидота и исключение аллергических реакций дает аптамерам преимущество перед существующими антикоагулянтами [3, 4, 15]. С учетом отсутствия исследований возможностей аптамеров - ингибиторов тромбина воздействовать на параметры системы гемостаза в условиях хронического воздействия сероводородсодержащего газа in vivo была определена цель данной работы.
Цель: определить специфику нарушений в функционировании системы гемостаза и фибрино-лиза у крыс после хронического воздействия сероводородсодержащего газа с последующей возможной коррекцией изменений с помощью ДНК-аптамера - ингибитора тромбина.
Материалы и методы исследования. Эксперимент проведен на 37 белых нелинейных крысах-самцах массой 230 ± 22 г (возраст - 180 ± 7 суток). Условия содержания крыс в виварии кафедры и проведение эксперимента соответствовали регламентам [5, 10, 12]. Было сформировано три группы животных: контрольная (10 особей), опытная № 1 (12 особей), опытная № 2 (15 особей), которые помещались в затравочные камеры с составом воздушно-газовой смеси концентрацией 80,0 ± 2,3 мг/м3 по сероводороду на одинаковый период времени: ежедневно на 4 часа в течение 4 месяцев. В последние 14 дней эксперимента ежедневно животным опытной группы № 2 внутримышечно вводили ДНК-аптамер - ингибитор тромбина 31 ТВА [11] в дозе 1,0 мМ. Под общим наркозом (тиопентал Na: 40 мг/кг) из нижней полой вены забирали кровь в объеме 4,5 мл в стерильные инсулиновые шприцы с оксалатом аммония (1 : 9). Исследование крови осуществляли согласно рекомендациям З.С. Баркага-на и А.П. Момота (2008) [1]. В работе использованы наборы фирмы «Технология-стандарт» (Россия), с помощью которых исследовали тромбоцитарный и коагуляционный звенья системы гемостаза и параметры фибринолитической системы. Подсчет тромбоцитов производили в камере Горяе-ва. Определение активности ингибитора тканевого активатора плазминогена-1 (ИТАП-1) проводили на спектрофотометре ПЭ-5400в (ООО «ПромЭкоЛаб», Россия) на длине волны 405 нм.
Полученные данные представлены в виде M ± s, где M - среднее в выборке, s - стандартное отклонение. Учитывая численное соответствие животных в экспериментальных группах нормальному распределению, при определении значимости различий использовали таблицы Стьюдента для нормально распределенных выборок при р < 0,05.
Статистическую обработку полученных результатов производили с помощью программ математической статистики (Open Office Cale (Apache Software Foundation, США) в составе пакета Open Office, Ver. 3.0 (Oracle, США)).
Результаты исследования и их обсуждение. По данным, представленным в таблице, видны изменения показателей системы гемостаза по истечении 4 месяцев затравки сероводородсодержащим газом. Отмечено уменьшение числа тромбоцитов на 17,7 % (р < 0,05) по сравнению с контрольными величинами. Показатель индуцированной агрегации тромбоцитов (ИАТ) возрос на 19,4 % (р < 0,05), что указывает на ускорение по времени начала агрегации кровяных пластинок. Увеличилась степень агрегации данных клеток на 19,8 % (р < 0,05) по сравнению с контрольной группой.
Сероводородсодержащий газ спровоцировал изменения и на коагуляционном уровне гемоста-тической системы. Преобразования компонентов контактного пути активации отражены в показателях активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ) и каолинового времени (KB). Время первого показателя уменьшилось на 17,4 %, второго - на 10,7 % (р < 0,05). Показатель про-тромбинового времени (ПВ), отражающий активность протромбинового комплекса, сократился на 11,2 % (р < 0,05). Тромбиновое время (ТВ), показывающее состояние конечного этапа свертывающей системы, сократилось на 10,9 % (р < 0,05). Эхитоксовое время (ЭВ), указывающее на состояние более активной формы тромбина (после активации его ядом эфы), уменьшилось на 11,8 % (р < 0,05).
Состояние противосвертывающих компонентов плазмы оценивали по активности протеина С (ПС), которая снизилась на 11,4 % (р < 0,05).
Количество продуктов активации систем гемостаза и фибринолиза увеличилось по окончании хронической интоксикации сероводородсодержащим газом. Так, содержание растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) возросло на 27,3 % (р < 0,05). Увеличилось количество животных с превышающим пороговое значение D-Димером в 500 нг/мл, которое достигло 8 (66,7 %).
Отмечено замедление ХПа-зависимого эуглобулинового лизиса (XIIa-ЗЭЛ) на 18,7 % (р < 0,05). Активность ингибитора тканевого активатора плазминогена (ИТАП-1), отражающего активность тромбина и тромбоцитов, возросла на 55,6 % (р < 0,01).
Таблица
Изменение параметров гемостаза и фибринолиза при хроническом воздействии
сероводородсодержащего газа в концентрации 80 мг/м и при последующем п рименении ДНК-А, М±$
Показатели Контроль Опыт № 1 Опыт № 2
гемостаза (п = 10) (п = 12) (п = 15)
РЬТ X Ю7ь 760,00 ±21,52 617,00 ±14,25, р1 < 0,05 616,00 ± 14,51, р2> 0,05
ИАТ, с 18,00 ±0,45 14,5 ± 0,38, р! < 0,05 18,3 ± 0,39, р2< 0,05
САТ, % 100,00 ±2,69 119,8 ± 2,66, р! < 0,05 97,1 ±2,38, р2< 0,05
КВ, с 72,10 ±1,48 64,4 ± 1,82, р!< 0,05 77,5 ± 1,98, р2< 0,05
АЧТВ, с 24,20 ± 0,64 20,0 ± 0,57, р! < 0,05 33,3 ± 0,76, р2 < 0,001
ПВ, с 13,60 ±0,36 11,9 ± 0,24, р!< 0,05 18,7 ± 0,56, р2< 0,001
ТВ, с 23,20 ± 0,66 20,4 ± 0,41, р!< 0,05 32,8 ± 0,94, р2 < 0,001
ЭВ, с 24,10 ±0,58 21,1 ±0,49, р!< 0,05 30,1 ±0,77, р2< 0,01
ПС, НО 0,70 ± 0,01 0,62 ± 0,01, р!< 0,05 0,62 ± 0,01, р2> 0,05
РФМК, мг/100 мл 3,30 ±0,11 4,2 ± 0,11, рх < 0,05 3,3 ± 0,08, р2 < 0,05
Б-димер, особи аЬв 8 (66,7 %) 4 (26,7 %)
ХПа-ЗЭЛ, мин 7,6 ± 0,22 8,9 ± 0,21, р!< 0,05 7,4 ± 0,19, р2< 0,05
ИТАП-1, Ед/мл 2,7 ± 0,07 4,2 ± 0,09, р! < 0,01 3,0 ± 0,08, р2 < 0,05
Примечание: М - среднее в выборке, я — стандартное отклонение; р1~ достоверность по сравнению с группой контроля (р < 0,05); р2 - достоверность по сравнению с опытной группой № 1 (р < 0,05); РЬТ х /О9/Ь - число тромбоцитов; ИАТ - индуцированная агрегация тромбоцитов; САТ - степень агрегации тромбоцитов; КВ - каолиновое время; АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время; ПВ - протромбиновое время; ТВ - тромбиновое время; ЭВ - эхитоксовое время; ПС - протеин С; НО - нормализованное отношение; РФМК — растворимые фибрин - мономерные комплексы; Х11а - ЗЭЛ - ХПа - зависимый эуглобулиновый лизис; ИТАП-1 - ингибитор тканевого активатора плазминогена-1
По данным, представленным в таблице, видно, что применение аптамера (ингибитора тромбина) повлияло на большинство параметров систем гемостаза и фибринолиза. На уровне тромбоцитар-ного звена изменения затронули ИАТ, которое увеличилось на 26,2 % (р < 0,05), а также степень агрегации тромбоцитов, которая уменьшилась на 18,9 % (р < 0,05) (рис.). Число тромбоцитов не подвергалось статистически значимым изменениям.
Рис. Параметры системы гемостаза крыс после применения ДНК-аптамера - ингибитора тромбина в группе, находившейся 4 месяца в условиях воздействия сероводородсодержащего газа
Примечание: на рисунке представлены данные, выраженные в % относительно опытной группы № 1. Статистическая значимость различий между первой и второй опытными группами: *-р< 0,05; **-р < 0,01; ***-р < 0,001
На уровне плазменного звена произошли выраженные гипокоагуляционные сдвиги на фоне применения 31 ТВА. Показатель АЧТВ увеличился на 64,9 % (р < 0,001). КВ возросло на 20,3 % (р < 0,05). ПВ, отражающее работу компонентов пути тканевого фактора, стало длительнее на 57,1 % (р < 0,001). Показатели конечного этапа свертывания - ТВ и ЭВ - увеличились: ТВ возросло на 60,8 % (р < 0,001), а ЭВ - на 42,7 % (р < 0,01). Активность протеина С на фоне воздействия ДНК-A не изменилась статистически значимо по отношению к контролю (р > 0,05) (табл., рис.).
Содержание растворимых фибрин-мономерных комплексов под воздействием аптамера снизилось на 21,4 % (р < 0,05) по сравнению с контролем. Применение 31 ТВА привело к сокращению числа животных с регистрируемым у них D-Димером, превышающим пороговое значение 500 нг/мл, составив 4 (26,7 %) особей в данной группе (рис.).
На фоне применения 31 ТВА наметилась положительная динамика и в системе фибринолиза. ХПа-зависимый эуглобулиновый лизис ускорился на 16,9 % (р < 0,05). Активность ИТАП-1 понизилась на 28,6 % (р < 0,05) (рис.).
Выводы:
1. Хроническое воздействие сероводородсодержащего газа в дозе 80 мг/м3 смещает гемоста-тический баланс в прокоагулянтную сторону. На клеточном уровне увеличивается агрегационная активность тромбоцитов. Понижение числа данных клеток указывает на возросшие потребности в их функционировании со стороны системы крови.
2. Сокращение по времени параметров плазменного уровня говорит об активировании работы компонентов гемостатической системы после инициирующего токсического воздействия газа на сосудистую стенку и высвобождения тканевого фактора. Рост активности тромбина создает предпосылки для увеличения коагулемии, снижения активности компонентов фибринолитической системы, а также - о вторичной активизации тромбоцитарного звена системы гемостаза [9, 17].
3. ДНК-аптамер - ингибитор тромбина в силу ингибирующего влияния на тромбин, в первую очередь, блокирует прямые реакции, следующие после синтеза данной сериновой протеазы - образование фибрина из фибриногена. Подавление активации тромбоцитов происходит вторично, после выключения активирующего влияния со стороны тромбина. В результате подавления многогранных функций тромбина, в том числе снижения активации ингибиторов лизиса, наблюдается оптимизация функционирования компонентов фибринолитической системы.
Список литературы
1. Баркаган, 3. С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза / 3. С. Баркаган, А. П. Момог. - М.: Ньюдиамед-АО, 2008. - 292 с.
2. Беднов, И. А. Показатели гемической гипоксии и структурной организации сыворотки крови при хроническом воздействии серосодержащего газа / И. А. Беднов, А. Д. Стемпковский // Астраханский медицинский журнал. - 2007. - Т. 2, № 2. - С. 31-32.
3. Добровольский, А. Б. Ингибирование активности тромбина ДНК-аптамерами / А. Б. Добровольский, Е. В. Титаева, С. Г. Хаспекова, В. А. Спиридонова, А. М. Копылов, А. В. Мазуров // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - Т. 147, № 7. - С. 41—46.
4. Завьялова, Е. Г. Исследование антикоагулянтной активности ДНК-аптамеров in vitro и in vivo / Е. Г. Завьялова, Р. В. Решетников, А. В. Головин, Д. Ю. Пантелеев, Н. Н. Мудрик, Г. В. Павлова, А. М. Копылов //Ломоносов-2011. Биофизика, биоинженерия и нанобиотехнологии : мат-лы XVIII Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (Москва, 11—15 апреля 2011 г.) / отв. ред. А. И. Андреев,
A. В. Андриянов, Е. А. Антипов, М. В. Чистякова. - М.: МАКС Пресс, 2011. - С. 35-36.
5. Использование лабораторных животных в токсикологическом эксперименте : методические рекомендации / под ред. проф., акад. РАМН П. И. Сидорова. — Архангельск : Архангельский государственный технический университет, 2002. — 15 с.
6. Киричук, В. Ф. Вазомоторная функция эндотелия у здоровых лиц : связь с типами характера /
B. Ф. Киричук, Е. С. Оленко, А. И. Кодочигова, Ю. Б. Барыльник, М. А. Деева, В. А. Баженов // Физиология человека. - 2015. - Т. 41, № 3. - С. 106-111.
7. К узник, Б. И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии : монография / Б. И. Кузник. - Чита : Экспресс-издательство, 2010. - 832 с.
8. Мажитова, М. В. Свободнорадикальные процессы и антиоксидантная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / М. В. Мажитова. — Астрахань, 2012. — 44 с.
9. Пантелеев, М. А. Практическая коагулология / М. А. Пантелеев, С. А. Васильев, Е. И. Синауридзе, А. И. Воробьев, Ф. И. Атауллаханов; под ред. А. И. Воробьева. - М.: Практическая медицина, 2011. - 192 с.
10. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях / под ред. Н. Н. Каркшценко, С. В. Грачева. - М.: Профиль-2С, 2010. - 358 с.
11. Спиридонова, В. А. Структура аптамерных ДНК/РНК как основа для создания лекарственных препаратов и регуляторных элементов : автореф. дис.... д-ра биол. наук / В.А. Спиридонова. — М., 2011. — 50 с.
12. Токсикометрия химических веществ, загрязняющих окружающую среду : программа ООН по окружающей среде (ЮНЕП). Международный регистр потенциально токсичных химических веществ (МРПТХВ) / под общ. ред. А. А. Каспарова. - М.: Центр международных проектов ГКНТ, 1986. - 428 с.
13. Хабриев, Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р. У. Хабриев. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.
14. Шахматов, И. И. Состояние системы гемостаза при различных видах гипоксического воздействия / И. И. Шахматов, В. М. Вдовин, В. И. Киселев // Бюллетень СО РАМН. - 2010. - Т. 30, № 2. - С. 131-137.
15. Шишкина, Т. А. Действие ДНК-аптамеров (ингибиторов) тромбина на микроциркуляторное русло легких при экспериментальной гипоксии / Т. А. Шишкина, Л. И. Наумова, Д. М. Никулина // Морфология. — 2012.-Т. 141, №3,-С. 180.
16. Эсаулова, Т. А. Гематологический показатель интоксикации как маркер интоксикоза и критерий эффективности проводимых лечебно-оздоровительных мероприятий у работников Астраханского газового комплекса / Т. А. Эсаулова // Кубанский научный медицинский вестник. - 2009. - № 2. - С. 141-143.
17. Coughlin, S. R. Protease-activated receptors in hemostasis, thrombosis and vascular biology / S. R. Coughlin // J. Thromb. Haemost. - 2005. - Vol. 3, № 8. - P. 1800-1814.
18. D'Emmanuele di Villa Bianca, R. Hydrogen sulphide pathway contributes to the enhanced human platelet aggregation in hyperhomocysteinemia / R. D'Emmanuele di Villa Bianca, E. Mitidieri, M. N. Di Minno, N. S. Kirkby, T. D. Warner, G. Di Minno, G. Cirino, R. Sorrentino // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2013. - Vol. 110, № 39. -P. 15812-15817.
19. Kimura, H. Hydrogen sulfide : Its production, release and functions / H. Kimura // Amino Acids. - 2011. -Vol. 41, №1,-P. 113-121.
20. Predmore, B. L. Hydrogen sulfide in biochemistry and medicine / B. L. Predmore, D. J. Lefer, G. Gojon // Antioxid Redox Signal. - 2012. - Vol. 17, № 1. - P. 119-140.
21. Wang, K. Y. A DNA aptamer which binds to and inhibits thrombin exhibits a new structural motif for DNA / K. Y. Wang, S. McCurdy, R G. Shea, S. Swaminathan, P. H Bolton // Biochemistry. - 1993. - Vol. 32, № 8. -P. 1899-1904.
References
1. Barkagan Z. S., Momot A. P. Diagnostika i kontroliruemaya terapiya narusheniy gemostaza. [Diagnosis and controlled therapy of hemostasis disorders]. Moscow, Newdiamed Publ., 2008,292 p.
2. Bednov I. A., Stempkovskiy A. D. Pokazateli gemicheskoy gipoksii i strukturnoy organizatsii syvorotki krovi pri khronicheskom vozdeystvii serosoderzhashchego gaza [Indicators of hemic hypoxia and structural organization of blood serum at chronic exposure to sulfur-containing gas]. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal [Astrakhan Medical Journal], 2007, vol. 2, no. 2, pp. 31-32.
3. Dobrovol'skiy А. В., Titaeva E. V., Khaspekova S. G., Spiridonova V. A., Kopylov A. M., Mazurov A. V. Ingibirovanie aktivnosti trombina DNK-aptamerami [Inhibition of thrombin activity by DNA-aptamers]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2009, vol. 147, no. 7, pp. 41-46.
4. Zav'yalova E. G., Reshetnikov R. V., Golovin A. V., Panteleev D. Yu., Mudrik N. N., Pavlova G. V., Kopylov A. M. Issledovanie antikoagulyantnoy aktivnosti DNK-aptamerov in vitro i in vivo [The study of DNA-aptamers anticoagulant activity in vitro and in vivo]. Materialy XVIII Mezhdunarodnoy nauchnoy konferentsii studen-tov, aspirantov i molodykh uchenykh "Lomonosov-2011". Biofizika, bioinzheneriya i nanobiotekhnologii: (Moskva, 11-15 aprelya 2011 g.) [Materials of the 18th International Scientific Conference of Students, Graduate Students and Young Scientists "Lomonosov-2011". Biophysics, Bioengineering, and Nanobiotechnology]. Ed. A. I. Andreev, A. V. Andriyanov, E. A. Antipov, M. V. Chistyakova. Moscow, MAKS Press, 2011, pp. 35-36.
5. Ispol'zovanie laboratornykh zhivotnykh v toksikologicheskom eksperimente: metodicheskie rekomendatsii [The use of laboratory animals in a toxicological experiment (methodological recommendations)]. Edited by P. I. Sidorov. Arkhangelsk, Arkhangelsk State Technical University, 2002,15 p.
6. Kirichuk V. F., Olenko E. S., Kodochigova A. I., Baryl'nik Yu. В., Deeva M. A., Bazhenov V. A. Vazomotor-naya funktsiya endoteliya u zdorovykh lits: svyaz's tipami kharaktera [Vasomotor endothelial function in healthy individuals: association with the types of character], Fiziologiya cheloveka [Human Physiology], 2015, vol. 41, no. 3, pp. 106-111.
7. Kuznik В. I. Kletochnye i molekulyarnye mekhanizmy regulyatsii sistemy gemostaza v norme i patologii: monografiya [Cellular and molecular mechanisms of regulation of the hemostatic system in health and disease: monograph], Chita, Express Publishing, 2010, 832 p.
8. Mazhitova M. V. Svobodnoradikal'nye protsessy i antioksidantnaya zashchita raznykh otdelov tsentral'noy nervnoy sistemy na etapakh postnatal'nogo ontogeneza belykh krys v norme i pri deystvii promyshlennykh serosoderz-hashchikh pollyutantov. Avtoreferat dissertatsii doktora biologicheskikh nauk [Free radical processes and antioxidant protection of various parts of the central nervous system at the stages of postnatal ontogenesis of white rats in normal conditions and under the action of industrial sulfur-containing pollutants. Abstract of the thesis of Doctor of Biological Sciences]. Astrakhan, 2012,44 p.
9. Panteleev M. A., Vasil'ev S. A., Sinauridze E. I., Vorob'ev A. I., Ataullakhanov F. I. Prakticheskaya koagu-lologiya [Practical coagulology]. Ed. A. I. Vorob'ev. Moscow, Prakticheskaya meditsina [Practical Medicine], 2011, 192 p.
10. Rukovodstvo po laboratornym zhivotnym i al'ternativnym modelyam v biomeditsinskikh issledovaniyakh [Guide to laboratory animals and alternative models in biomedical research], Ed. by N. N. Karkishchenko, S. V. Grachev. Moscow: Profil'-2S, 2010, 358 p.
11. Spiridonova V. A. Struktura aptamernykh DNK/RNK kak osnova dlya sozdaniya lekarstvennykh preparatov i regulyatornykh elementov. Avtoreferat dissertatsii doktora biologicheskikh nauk [The structure of aptameric DNA / RNA as the basis for the development of drugs and regulatory elements. Abstract of thesis of Doctor of Biological Sciences], Moscow, 2011, 50 p.
12. Toksikometriya khimicheskikh veshchestv, zagryaznyayushchikh okruzhayushchuyu sredu : programma OON po okruzhayushchey srede (YuNEP). Mezhdunarodnyy registr potentsial'no toksichnykh khimicheskikh veshchestv (MRPTKhV) [Toxicometry of environmental pollutants: United Nations Environment Program (UNEP). International Register of Potentially Toxic Chemicals (IRPTC)]. Ed. by A. Kasparov. Moscow, Center for International SCS & T projects, 1986,428 p.
13. Khabriev R. U. Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novykh farmako-logicheskikh veshchestv [Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances]. Moscow, Meditsina [Medicine], 2005, 832 p.
14. Shakhmatov 1.1., Vdovin V. M., Kiselev V. I. Sostoyanie sistemy gemostaza pri razlichnykh vidakh gipok-sicheskogo vozdeystviya [The state of the hemostasis system after application of different types of hypoxia]. Byulleten' SO RAMN [The Bulletin of Siberian Branch of Academy of Medical Sciences], 2011, vol. 30, no. 2, pp. 131-137.
15. Shishkina T. A., Naumova L. I., Nikulina D. M. Deystvie DNK-aptamerov (ingibitorov) trombina na mik-rotsirkulyatornoe ruslo legkikh pri eksperimental'noy gipoksii [Action of DNA-aptamers (inhibitors) of thrombin on a microcirculatory bed of lungs in experimental hypoxia]. Morfologiya [Morphology], 2012, vol. 141, no. 3, pp. 180.
16. Esaulova T. A. Gematologicheskiy pokazatel' intoksikatsii kak marker intoksikoza i kriteriy effektivnosti provodimykh lechebno-ozdorovitel'nykh meropriyatiy u rabotnikov Astrakhanskogo gazovogo kompleksa [The hematological index of intoxication as marker of chronicle intoxication and effectiveness criterion of health- and treatment procedures done for the staff of gas complex in Astrakhan], Kubanskiy nauchnyy meditsinskiy vestnik [Kuban Scientific Medical Bulletin], 2009, no. 2, pp. 141-143.
17. Coughlin S. R. Protease-activated receptors in hemostasis, thrombosis and vascular biology. J. Thromb. Haemost, 2005, vol. 3, no. 8, pp. 1800-1814.
18. D'Emmanuele di Villa Bianca R., Mitidieri E., Di Minno M. N., Kirkby N. S., Warner T. D., Di Minno G., Cirino G., Sorrentino R. Hydrogen sulphide pathway contributes to the enhanced human platelet aggregation in hyper-homocysteinemia. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2013, vol. 110, no. 39, pp. 15812-15817.
19. Kimura H Hydrogen sulfide: Its production, release and functions. Amino Acids. 2011, vol. 41, no. l,pp. 113-121.
20. Predmore B. L., Lefer D. J., Gojon G.. Hydrogen sulfide in biochemistry and medicine. Antioxid Redox Signal, 2012, vol. 17, no. l,pp. 119-140.
21. Wang K. Y., McCurdy S., Shea R. G., Swaminathan S., Bolton P. H. A DNA aptamer which binds to and inhibits thrombin exhibits a new structural motif for DNA. Biochemistry, 1993, vol. 32, no. 8, pp. 1899-1904.
УДК 547.853.3:615.015 14.03.00 - Медико-биологические науки
О И.Н. Тюренков, A.A. Цибизова, М.А. Самотруева, A.A. Озеров, 2017
ИММУНОТРОПНЫЕ СВОЙСТВА КАРБОНИЛЬНОГО ПРОИЗВОДНОГО ХИНАЗОЛИНА
Тюренков Иван Николаевич, доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент Российской академии наук, заведующий кафедрой фармакологии и биофармации, ФУВ, ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, д. 1, тел.: (8442) 97-81-80, e-mail: fibfuv@mail.ru.
Цибизова Александра Александровна, старший преподаватель кафедры фармакогнозии, фармацевтической технологии и биотехнологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-908-619-88-54, e-mail: sasha3633@yandex.ru.
