CC BY
0крымский журнал экспериментальной и клинической медицины
УДК: 612.3:612.821.44: 577.114.7 DOI: 10.29039/2224-6444-2023-13-4-52-57
ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОБМЕНА ФУКОГЛИКОПРОТЕИНОВ В ТКАНЯХ ПЕЧЕНИ, ЖЕЛУДКА И ТОНКОЙ КИШКИ АЛКОГОЛИЗИРОВАННЫХ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ S-АДЕНОЗИЛМЕТИОНИНА
Оксузян А. В., Бутолин Е. Г., Дровосекова А. А.
ФГБОУ ВО «Ижевская государственная медицинская академия» Минздрава России, 426034, ул. Коммунаров д. 281, Ижевск, Россия.
Для корреспонденции: Оксузян Артур Валериевич, доцент, кандидат медицинских наук, доцент кафедры медицины катастроф и безопасности жизнедеятельности Ижевской государственной медицинской академии, e-mail: artur30st@mail.ru
For correspondens: Oksuzyan Artur Valerievich, Associate Professor, Candidate of Medical Sciences, Associate Professor of the Department of Disaster Medicine and Life Safety, Izhevsk State Medical Academy, e-mail: artur30st@mail.ru
Information about authors:
Oksuzyan A. V., https://orcid.org/0000-0002-5901-615X Butolin E. G., https://orcid.org/0000-0002-3312-4689 Drovosekova A. А., https://orcid.org/0009-0007-7656-5808
РЕЗЮМЕ
В данной рукописи изучены метаболические изменения в обмене фукогликопротеинов в гомогенатах печени, желудка и тонкой кишки хронически алкоголизированных крыс при введении гепатопротектора. Обмен фукогликопротеинов анализировали на 21, 35, 60, 90 дни наблюдения по показателям: общая фукоза, фукозидазная активность. Для подтверждения модели экспериментов были проведены гистологические исследования микропрепаратов печени и биохимический анализ показателей липидного спектра и трансаминаз. При этом на срезах печени опытных животных с длительной алкоголизацией выявились признаки жировой дистрофии. В опытной группе грызунов, которым вводили S-аденозилметионин, большая часть клеток печени морфологически не изменялась, но в некоторых из них визуализировался алкогольный гиалин. Одновременно с этим в сыворотке крови повышался уровень трансаминаз и выявлялся метаболический оборот в липидном обмене. При этом данные изменения были менее выражены в группе крыс, которым проводилось интрагастральное введение этанола с внутримышечным введением гепатопротектора как корректора метаболических нарушений в печени. В обмене фукогликопротеинов в сыворотке крови и в тканях печени, желудка и тонкой кишки экспериментальных животных выявилась тенденция в сторону катаболизма, подтверждаемая ростом фукозы и фукозидазной активности особенно в стенке желудка, наблюдаемая в группе крыс, которым проводилось длительное интрагастральное введение этанола, что может быть связано с высвобождением свободных радикалов, полученных в результате перекисного окисления липидов, индуцированного этанолом. При введении препарата, содержащего S-аденозилметионин, на фоне длительной алкоголизации в первой декаде опытов выявлялось преобладание анаболизма фукогликопротеинов, а вышеописанные изменения наблюдались ближе к концу эксперимента в гомогенатах желудка и тонкой кишки, что может быть обусловлено адаптационно-приспособительной защитой от оксидативного стресса.
Ключевые слова: фукогликопротеины, S-аденозилметионин, липидный спектр, алкогольная жировая болезнь печени.
CHANGES IN THE INDICATORS OF FUCOGLYCOPROTEIN METABOLISM IN TISSUES OF LIVER, STOMACH AND SMALL INTESTINE OF ALCOHOLIZED RATS IN INTRODUCING S-ADENOSYLMETHIONINE
Oksuzyan A. V., Butolin E. G., Drovosekova A. А.
Izhevsk State Medical Academy, Izhevsk, Russia
SUMMARY
In this manuscript metabolic changes in the metabolism of fucoglycoproteins in homogenates of liver, stomach and small intestine of chronically alcoholized rats during administration of hepatoprotector were studied. The exchange of fucoglycoproteins was analyzed on 21, 35, 60, 90 days of observation by indicators: total fucose, fucosidase activity. To confirm the experimental model, histological studies of liver micropreparations and biochemical analysis of lipid spectrum and transaminases were performed. At the same time, the liver sections of experimental animals with prolonged alcoholization showed signs of fatty dystrophy. In the experimental group of rodents administered S-adenosylmethi-onine, most of the liver cells did not morphologically change, but alcoholic hyaline was visualized in some of them. Meanwhile, the level of transaminases increased in serum and metabolic turnover in lipid metabolism was detected. At the same time, these changes were less pronounced in the group of rats, which underwent intragastric administration of ethanol with intramuscular injection of hepatoprotector as a corrector of metabolic disorders in the liver. In the metabolism of fucoglycoproteins in blood serum and in tissues of the liver, stomach and small intestine of experimental
animals a tendency towards catabolism was revealed, confirmed by an increase in fucose and fucosidase activity especially in the stomach wall, observed in the group of rats, which underwent prolonged intragastric administration of ethanol, which may be associated with the release of free radicals resulting from lipid peroxidation induced by ethanol. When the preparation containing S-adenosylmethionine was administered against the background of prolonged alcoholization, the predominance of fucoglycoprotein anabolism was revealed in the first decade of experiments, and the above changes were observed closer to the end of the experiment in gastric and small intestine homogenates, which may be due to adaptive protection against oxidative stress.
Key words: fucoglycoproteins, S-adenosylmethionine, lipid spectrum, alcoholic fatty liver disease.
В настоящее время отмечено, что хроническое злоупотребление алкогольными напитками, основным компонентом которых является этиловый спирт. На сегодняшний день выявлена взаимосвязь между наличием обменных заболеваний у пациентов и вероятностью встречаемости у них заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) [1; 2]. Одной из основных функций органов пищеварительной системы является роль защитного барьера на пути поступления этанола в организм. Он представляет собой слой слизи, гликокаликс и собственно эпителиальную выстилку. При этом данные ткани первыми испытывают пагубное воздействие алкоголя, что препятствует повреждению подлежащих им клеток [3; 4]. Учеными установлено, что введение S-аденозилметионина, входящего в их состав, животным, у которых вызывалась экспериментальная модель хронического алкоголизма, оказывает выраженное положительное действие на репарацию в гепатоцитах [5-7]. Исходя из этого, данное исследование является актуальным, раскрывающим особенности обмена биополимеров фукогликопротеинов в печени, тканях желудка и тонкой кишки у алкоголизированных животных и позволяющим понять причины развития и про-грессирования нарушений обмена биополимеров соединительной ткани при жировом гепатозе.
Целью исследования явилось выявление изменений показателей обмена фукогликопроте-инов в тканях печени, желудка и тонкой кишки алкоголизированных крыс при введении S-аденозилметионина.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование проведено на 64 взрослых белых беспородных крысах-самцах с массой от 180 до 230 грамм. Все крысы находились на стандартном рационе вивария со свободным доступом к воде в соответствии с положениями Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1996 г.) о гуманном обращении с животными (одобрительная форма комитета по биомедицинской этике от 01 марта 2023 г., аппликационный № 751/1). Для формирования экспериментальной модели алкогольной жировой болезни печени крыс 64 опытным грызунам вводили этанол методом ежедневного интрагастрального введения
40% этилового спирта через 3 часа после еды в течение 70 дней. Одновременно с этим другим 32 крысам проводили внутримышечные инъекции препаратом, содержащим S-аденозилметионин в дозе 20 мг/кг веса тела, начиная с 21-го дня эксперимента. В качестве контрольной группы использовали 16 лабораторных крыс, которым ежедневно внутрижелудочно вводили 0,9% раствор натрия хлорида через 3 часа после еды. Для изучения показателей метаболизма фукоглико-протеинов использовались образцы сыворотки крови, гомогенаты печени, слизи желудка и тонкой кишки у крыс на 21-й, 35-й, 60-й и 90-й день опытов. В вышеуказанной динамике дней животных декапитировали под кратковременным эфирным наркозом. Подтверждающими маркерами алкогольного жирового гепатоза печени являлось гистологическое исследование печени. Для получения срезов использовался микротом фирмы Leica, а для их последующего исследования -гистопроцессор карусельного типа Leica TP1020. Обработку микропрепаратов осуществлял программный комплекс «Видео Тест Морфология 5,0». В сыворотке крови крыс проводился анализ таких показателей, как фукоза (ФК), фукозидаза (ФА). Кроме этого, вычисляли индекс атероген-ности (ИА) по формуле: (ОХС - ЛПВП) / ЛПВП. В сыворотке крови и в слизистом секрете и стенке желудка и тонкой кишки, а также гомогенатах печени крыс определялись: общее количество фукозы (ОФ) с использованием 3% раствора солянокислого цистеина [8]. Полученные в ходе исследования показатели были подвергнуты анализу с использованием непараметрических методов количественной оценки, таких как критерий Манна-Уитни с достоверностью p <0,05 и коэффициент корреляции, который оценивался по методике Спирмена с достоверностью p <0,05. Эти методы позволяют провести статистическую оценку полученных результатов и определить наличие связей и корреляций между различными показателями.
РЕЗУЛЬТАТЫ
При микроскопии срезов печени опытных крыс, подвергшихся длительной алкоголизации, в цитоплазме гепатоцитов были обнаружены тельца Маллори (алкогольный гиалин), который
крымскии журнал экспериментальном и клиническои медицины
2023, т. 13, № 4
свидетельствует о процессах паренхиматозной дистрофии в этих клетках (рис.1). В динамике наблюдения отмечается увеличение количества
поврежденных клеток и макрофагов печени (купферовские клетки), а к 90 дню в гепатоцитах определялись некротические очаги.
А)
Б)
Рис.1. Морфологическая характеристика печени алкоголизированных крыс (А) и на фоне введения S-аденозилметионина (Б). А: 35, 90 дни - выраженная дистрофия. Инфильтрация стромы органа. Архитектоника печеночных балок нарушена. 21, 60 дни - расширение синусоид. Мелкокапельная умеренная дистрофия. Б: 21,35,60,90 дни - центральная вена расширена, структура печеночных балок сохранена, гепатоциты без изменений, но в отдельных присутствует жировая дистрофия. Портальный тракт инфильтрирован, сосуды расширены. Окраска гематоксилин-эозином. Увелич. х400. Fig.1. Morphological characteristics of the liver of alcoholized rats (А) and against the background of S-adenosylmethionine administration (B). A: 35, 90 days - marked dystrophy. Infiltration of the organ stroma.
Architectonics of hepatic beams is broken. 21, 60 days - dilation of sinusoids. Fine moderate dystrophy. B: 21,35,60,90 days - the central vein is dilated, the structure of hepatic bars is preserved, hepatocytes are unchanged, but in some there is fatty dystrophy. The portal tract is infiltrated, vessels are dilated.
Hematoxylin-eosin staining. Magnification x400.
При изучении гистологических срезов печени крыс, которым помимо интрагастрального введения этанола, вводили S-аденозилметионин, вышеуказанные изменения клеточных структур не наблюдались, но в некоторых из клеток имеются признаки жировой дистрофии (рис.1).
При расчете индекса атерогенности у опытных животных, который составил 1,6, что на 58% (р=0,023) превышает контрольное значение, отмечено его увеличение только на 21 день. На 60 и 90 дни ИА снизился на 38,4% (р=0,004) и 29% (р=0,007) от контрольного показателя.
Индекс атерогенности значительно повышался на 156,2% ф=0,0009) к 35 дню и на 176,2% ф=0,0009) к 60 дню по сравнению с контрольным значением, равным 0,7.
У группы крыс с вызванной алкогольной болезнью в сыворотке крови были выявлены следующие изменения: максимальный рост фукозы на 35 день на 35,2% ф=0,0009) и снижение ее количества на 90 день с минимальным показателем наблюдения 11,9 (10,7; 13,1) мг/л, при этом концентрация фукозидазы возрастала с 35 суток на 43% ф=0,0009), и на 90 день эксперимента энзимная активность уже возросла на 92,1%
ф=0,0009) в сравнении с показателями контрольной группы. В гомогенатах печени исследуемых животных содержание фукозы увеличивалось со статистически значимым уровнем только на 60 сутки на 33,2% ф=0,003). Показатель активности фукозидазы к этому дню приближался к контролю, а к 90 дню существенно вырос на 41,7% ф=0,005). Одновременно с этим в слизистой оболочке желудка крыс содержание фукозы на протяжении всего опыта приближалось к контролю и только на 35 сутки стало выше показателя интактных крыс на 53,3%, а фукозидазная активность значимо не изменялась. В гастраль-ной стенке с 21 по 60 сутки наблюдения уровень фукозы повышался, при этом активность фуко-зидазы приближалась к контролю в течение всей динамики наблюдения. В мукозном слое тонкой кишки количество фукозы увеличилось к 90 дню динамики опытов на 41,6% ф=0,04), по отношению к контролю фукозидазная активность статистически не изменялась на протяжении периода наблюдения. В интестинальной стенке уровень фукозы максимально возрастал на 21, 60 сутки на 212,1% (р=0,0006) и 417,8% (р=0,0003) соответственно, но на 90 день уменьшился на 29,1%
(р=0,004) по сравнению с контрольным значением. Однако показатель фукозидазы, также как в стенке желудка, практически не изменялся.
При интрагастральном введении этанола в комбинации с внутримышечным введением препарата, содержащего S-аденозилметионин, в сыворотке крови отмечалось снижение уровня фу-козы в течение всего эксперимента с максимумом на 21 сутки на 31,3% (р=0,0009) от контроля. В то же время активность фукозидазы возрастала на протяжении всей динамики наблюдения с наибольшим значением на 60 день, соответственно на 231,3% (р=0,0009). Аналогично значениям изучаемого вещества в сыворотке крови, в гомогенатах печени содержание фукозы также снижалось с 21 по 90 сутки с параллельным уменьшением фукозидазной активности с 21 по 60 сутки опытов. В мукозном слое желудка крыс достоверно снижалось количество фукозы и ФА в первой декаде эксперимента, а именно на 21 и 35 сутки воздействия, соответственно на 66,8% (р=0,0009), 48,4% (р=0,0007) и 67% (р=0,002), 54,3% (р=0,02) от контроля. Аналогичная динамика вышеописанных показателей выявлялась и в стенке желудка. В слизи тонкой кишки лабораторных животных количество фукозы и фу-козидазной активности снижалось в период вну-трижелудочного введения этанола с коррекцией гепатопротектора с 21 по 35 сутки, а именно на 71,6% (р=0,0007) и на 33,4% (р=0,0007) соответственно от контроля. В гомогенате стенки тонкой кишки крыс уровень фукозы увеличивался с 35 до 90 дня. При этом фермент ФА значимо не изменялся от активности фукозидазы у интактных грызунов.
ОБСУЖДЕНИЕ
Баллонная дистрофия в клетках печени возникла в результате действия на них как самого этанола, который способен образовывать соединение с гидроксильным радикалом и индуцировать образование супероксида, так и его метаболитов, в частности ацетальдегида [9]. Вышеописанные метаболиты активируют процессы перекисного окисления липидов мембран, что приводит к повышению проницаемости, разрушению рецепторного аппарата клетки и нарушению транспорта между клеткой и межклеточным веществом.
Изменения липидного спектра отражают влияние этанола при хронической интоксикации на обменные процессы экспериментальных животных. При введении одной из экспериментальных групп гепатопротектора, в состав которого входит S-аденозилметионин, наблюдались более низкая активность трансаминаз и менее выраженные признаки жирового гепатоза. Это связано с ак-
тивацией действующего вещества на процессы трансметилирования, транссульфурации и аминопропилирования, а также с повышением уровня глутатиона, который является важным компонентом антиоксидантной системы. Кроме этого, данный препарат нормализует синтез фосфолипидов, способствуя стабилизации биомембран, из-за чего в кровь практически не выходят ферменты трансаминазы [10]. Этанол и его метаболиты вызывают развитие цитолитического и холестазного синдромов, из-за чего в крови растет активность трансаминаз, что подтверждают исследования и других авторов [11].
Итак, результатом длительной алкоголизации животных являются значительные перестройки белкового состава сыворотки крови с одновременным изменением белково-синтетической функции печени в метаболизме гликопротеи-нов, что может быть следствием воспалительных процессов. Совокупность представленных данных позволяет обозначить интенсификацию процессов перекисного окисления липидов как результат повышения содержания гликопротеи-нов и гликозаминогликанов в крови. Пусковым механизмом данных биохимических реакций является избирательное воздействие этанола на гепатобилиарную систему, в ходе которого выявляется альтерация гепатоцитов, связанная с воздействием на клеточную мембрану продуктов ок-сидативного стресса, вызванного гидрофобными желчными кислотами и приводящего к гибели указанных клеток [1; 2].
Исходя из вышеописанных результатов опытов, посвященных введению гепатопротектора на фоне длительной алкоголизации крыс, было выявлено преобладание процессов анаболизма фукогликопротеинов, что доказывается низкой активностью фукозидазы и снижением уровня фукозы как концевой молекулы олигосахаридно-го фрагмента данных биополимеров. Это может быть связано с восстановлением клеток печени, основанном на том, что S-аденозилметионин выступает донором метильной группы для биополимеров в метаболических реакциях, таких как трансметилирование, транссульфирование и ами-нопропилирование.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, из вышеописанных данных показателей фукозы и фукозидазной активности выявилась тенденция в сторону катаболизма в обмене фукогликопротеинов тканей ЖКТ, особенно в стенке желудка, наблюдаемая в группе крыс, которым проводилось длительное интра-гастральное введение этанола. При введении препарата, содержащего S-аденозилметионин. на фоне длительной алкоголизации в первой
крымский журнал экспериментальной и клинической медицины
декаде опытов выявлялось преобладание анаболизма фукогликопротеинов, а вышеописанные изменения наблюдались ближе к концу эксперимента в гомогенатах желудка и тонкой кишки. Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение гепатопротектора, содержащего S-аденозилметионин, на фоне длительной алкоголизации животных, приводит к адаптационно-приспособительной защите от оксидатив-ного стресса, проявляющегося высвобождением свободных радикалов, полученных в результате перекисного окисления липидов, индуцированного этанолом.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interests.
ЛИТЕРАТУРА
1. Тимашева Г. В., Каримов Д. О., Репина Э. Ф., Смолянкин Д. А., Хуснутдинова Н. Ю., Мухаммадиева Г. Ф., Байгильдин С. С. Характер метаболических изменений у экспериментальных животных при острой алкогольной интоксикации и ее коррекции препаратами. Медицина труда и экология человека. 2020;3 (23):114-121. doi:10.24411/2411-3794-2020-10315.
2. Borisova M. A., Achasova K. M., Morozova K. N., et al. Mucin-2 knockout is a model of intercellular junction defects, mitochondrial damage and ATP depletion in the intestinal epithelium. Sci. Rep. 2020;10(1):21135. doi: 10.1038/s41598-020-78141-4.
3. Кривова Н. А., Заева О. Б., Павленко О. А. Недооцененная барьерная функция слизистого слоя. Вестник Евразийского национального университета имени Л.Н. Гумилева. Серия Биологические науки. 2022;138(1):94-113. doi:10.32523/2616-7034-2022-138-1-94-113
4. Ефременко Е. С., Жукова О. Ю., Титов Д. С. и др. Глутатион-зависимые механизмы анти-оксидантной защиты при алкоголизме. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2019;(4):105-108.
5. Оксузян А. В., Бутолин Е. Г., Соловьев М. Д. Изменение показателей обмена сиалогли-копротеинов в тканях печени, желудка и тонкой кишки алкоголизированных крыс при введении S-аденозилметионина. Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2021;11(4):33-43.
6. Ивашкин В. Т., Барановский А. Ю., Рай-хельсон К. Л., Пальгова Л. К., Маевская М. В., Кондрашина Э. А., Марченко Н. В., Некрасова Т. П., Никитин И. Г. Лекарственные поражения печени (клинические рекомендации для врачей). Российский журнал гастроэнтерологии, гепа-
тологии, колопроктологии. 2019;29(1):101-131. doi:10.22416/13824376-2019-29-1-101-131
7. Dische Z., Shettles L. B. A specific color reaction of methylpentoses and a spectrophotometric micromethod for their determination. J. Biol Chem. 1948;175(2):595-603.
8. Мязин Р. Г., Емельянов Д. Н. Особенности терапии алкогольной болезни печени у лиц молодого возраста. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2020;174(2):80-85. doi: 10.31146/1682-8658-ecg-174-2-80-85
9. Тимашева Г. В., Бакиров А. Б., Мухаммадиева Г. Ф., Смолянкин Д. А., Хуснутдинова Н. Ю., Каримов Д. Д. Оценка эффективности применения гепатопротектора при остром повреждении печени различными токсикантами в эксперименте. Гигиена и санитария. 2021;100(11):1292-1297. doi: 10.47470/0016-9900-2021-100-11-1292-1297
10. Тимашева Г. В., Каримов Д. О., Репина Э. Ф., Смолянкин Д. А., Хуснутдинова Н. Ю., Мухаммадиева Г. Ф., и Байгильдин С. С. Характер метаболических изменений у экспериментальных животных при острой алкогольной интоксикации и ее коррекции препаратами. Медицина труда и экология человека. 2020;3(23):114-121. doi:10.24412/2411-3794-2020-10315
REFERENSES
1. Timasheva G. V., Karimov D. O., Repina E. F., Smolyankin D. A., Khusnutdinova N. Y., Mukhammadieva G. F., Baigildin S. S. Character of metabolic changes in experimental animals exposed to acute alcoholic intoxication and its correction with drugs. Occupational health and human ecology. 2020; 3:114-121. (In Russ.). doi:10.24411/2411-3794-2020-10315.
2. Borisova M. A., Achasova K. M., Morozova K. N., et al. Mucin-2 knockout is a model of intercellular junction defects, mitochondrial damage and ATP depletion in the intestinal epithelium. Sci. Rep. 2020;10(1):21135. doi: 10.1038/s41598-020-78141-4.
3. Krivova N. A., Zaeva O. B., Pavlenko O. A. The under-researched barrier function of the mucus layer. Bulletin of L. N. Gumilyov Eurasian National University. Bioscience Series. 2022;138(1):94-113. (In Russ.). doi:10.32523/2616-7034-2022-138-1-94-113
4. Efremenko E. S., Zhukova O. Yu., Titov D. S., Nikonov D. A., Sidorov G. G., Andreev K. А. Glutathione-dependent antioxidant defense mechanisms in alcoholism. International journal of applied and fundamental research. 2019;(4): 105108. (In Russ.).
5. Oksuzyan A. V., Butolin E. G., Solovyov M. D. Changes in the metabolism of sialoglycoproteins in liver, stomach, and small intestine tissues
in alcoholized rats upon administration of s-adenosylmethionine. Crimean journal of experimental and clinical medicine. 2021;11(4):33-43. (In Russ.).
6. Ivashkin V. T., Baranovsky A. Yu., Raikhelson K. L., Palgova L. K., Maevskaya M. V., Kondrashina E. A., Marchenko N. V., Nekrasova T. P., Nikitin I. G. Drug-Induced Liver Injuries (Clinical Guidelines for Physicians). Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology. 2019;29(1):85-115. (In Russ.). doi: 10.22416/13824376-2019-29-1-101-131
7. Dische Z., Shettles L. B. A specific color reaction of methylpentoses and a spectrophotometric micromethod for their determination. J. Biol Chem. 1948;175(2):595-603.
8. Myazin R. G., Emel'yanov D. N. Features of therapy of alcoholic liver disease in persons of young age. Experimental and Clinical Gastroenterology.
2020;174(2): 80-85. (In Russ.) doi: 10.31146/1682-8658-ecg-174-2-80-85
9. Timasheva G. V., Bakirov A. B., Mukhammadieva G. F., Smolyankin D. A., Khusnutdinova N. Yu., Karimov D. D. Evaluation of the effectiveness of the use of hepatoprotector in acute liver damage by various toxicants in the experiment. Hygiene and Sanitation. 2021;100(11):1292-1297. (In Russ.). doi: 10.47470/0016-9900-2021-100-111292-1297
10. Timasheva G. V., Karimov D. O, Repina E. F., Smolyankin D. A, Khusnutdinova N. Y Mukhammadieva G. F., Baigildin S. S. Character of metabolic changes in experimental animals exposed to acute alcoholic intoxication and its correction with drugs. Occupational health and human ecology. 2020;3(23):114-121. (In Russ.). doi:10.24412/2411-3794-2020-10315
