CC BY
25
оригинальные исследования
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
УДК 615.371:579.841.11].03:617-001-031.13].015.44
Борисов А.Г.1,2, Савченко А.А.1,2, Кудрявцев И.В.3'4, Тихонова Е.П.2, Кузьмина Т.Ю.2, Беленюк В.Д.1
изменение фенотипа клеток врожденного иммунитета у больных с политравмой в динамике использования вакцины для профилактики синегнойной палочки
1ФГБНУ «НИИ медицинских проблем Севера», 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 3 Г; 2ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России, 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1 А; 3ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины», 197376, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д. 12; 4ФГАОУ ВПО «Дальневосточный федеральный университет», 690950, г. Владивосток, ул. Суханова, д. 8
Целью исследования явилось изучение влияния поливалентной вакцины для профилактики и терапии синегнойной инфекции на фенотип клеток врожденного иммунитета больных с политравмой. Обследовано 60 больных. Методом простой рандомизации обследуемые разделены на 2 подгруппы: получавшие лечение по традиционной схеме и дополнительно получавшие вакцину "Псевдовак". Исследование фенотипического состава клеток врожденного иммунитета проводили методом проточной цитометрии при поступлении в стационар, на 10-й и 20-й день госпитализации. При использовании вакцины "Псевдовак"у больных с политравмой в крови повышается количество моноцитов с фенотипом CD14h'CD16+ и сохраняется уровень HLA-DR+ -моноцитов. Количество NKT-клеток (участвуют в иммуно-регуляторных процессах) у больных с политравмой повышается при лечении вакциной, тогда как содержание общих NK-клеток снижается, но при сохранении высокого уровня цитокин-продуцирующей фракции. Применение вакцины "Псевдовак"позволяет компенсировать иммунодефицит, возникающий при политравме, за счет формирования адаптивного иммунитета против одной из распространенных инфекций и активации врожденного иммунитета.
Ключевые слова: политравма; вакцина «Псевдовак»; нейтрофилы; моноциты; субпопуляции; NK-клетки; NKT-клетки.
Для цитирования: Борисов А.Г., Савченко А.А., КудрявцевИ.В., Тихонова Е.П., Кузьмина Т.Ю., Беленюк В.Д. ИЗМЕНЕНИЕ ФЕНОТИПА КЛЕТОК ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ С ПОЛИТРАВМОЙ В ДИНАМИКЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ СИНЕГНОЙНОЙ ПАЛОЧКИ. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2016; 21 (3): 124-129. DOI 10.18821/1560-9529-2016-21-3-124-129
BorisovA.G.1-2, SavchenkoA.A.12, KudryavtsevI.V.3-4, TikhonovaA.A.2, Kuzmina T.Yu.2, Belenyuk V.D.1
ALTERATIONS IN THE PHENOTYPE OF CELLS OF INNATE IMMUNITY IN PATIENTS WITH POLYTRAUMA IN THE DYNAMICS OF THE USE OF VACCINE TO PREVENT PSEUDOMONAS AERUGINOSA
'Institute of Medical Problems of the North, 3G, Partizana Zheleznyaka str., 1A, Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation; 2 Krasnoyarsk State Medical University named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky, Partizana Zheleznjaka street, Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation; 3Institute of Experimental Medicine, 12, Akademika Pavlova str., St. Petersburg, 197376, Russian Federation; 4Far Eastern Federal University, 8, Sukhanova street, 8, Vladivostok, 690950, Russian Federation
The aim of the study was to investigate the influence of multivalent vaccines for the prevention and treatment of Pseudomonas aeruginosa infection in the phenotype of innate immune cells in patients with polytrauma. There were observed 60 patients with verified diagnosis ofpolytrauma. The subjects were divided into 2 subgroups by means of the simple randomization method: the patients treated with the traditional scheme and cases who additionally received the vaccine «Pseudovac». Investigation of the phenotypic composition of innate immunity cells were performed by flow cytometry on admission to hospital, on the 10th and 20th day of hospitalization. In patients with polytrauma who additionally received the vaccine «Pseudovac» in the blood there was increased the number of monocytes with CD14hiCD16+ phenotype and HLA-DR+-monocytes level retained. The number of NKT-cells (involved in immunoregulatory processes) in patients with polytrauma increased after the vaccine treatment, whereas the content of total NK-cells reduced, but while a high level of cytokine-producing cell fraction maintained. The use of the vaccine «Pseudovac» permits to compensate immunodeficiency that occurs in polytrauma due to the formation of adaptive immunity against one of the most common infections and the activation of innate immunity. Keywords: polytrauma, «Pseudovac» vaccine, neutrophils, monocytes, subpopulation, NK-cells, NKT-cells.
For citation: Borisov A.G., Savchenko A.A., Tikhonova A.A., Kudryavtsev I.V., Kuzmina T.Yu., Belenyuk V.D. Alterations in the phenotype of cells of innate immunity in patients with polytrauma in the dynamics of the use of vaccine to prevent Pseudomonas aeruginosa. Epidemiologiya i Infektsionnye Bolezni. Epidemiology and Infectious Diseases, Russian Journal). 2016; 21(3):124-129. (In Russ.). DOI: 10.18821/1560-9529-2016-21-3-124-129
Для корреспонденции: Савченко Андрей Анатольевич, доктор мед. наук, проф., зав. лаб. молекулярно-клеточной физиологии и патологии, e-mail: immun@impn.ru
Epidemiology and Infectious Diseases. 2016; 21(3)
_doi 10.18821/1560-9529-2016-21-3-124-129
original investigations
For correspondence: SavchenkoA.A., e-mail: immun@impn.ru Information about authors:
BorisovA.G., http://orcid.org/0000-0002-9026-2615 Savchenko A.A., http://orcid.org/0000-0001-5829-672X Tikhonova E.P., http://orcid.org/0000-0001-6466-9609 KudryavcevI.V., http://orcid.org/0000-0002-4324-8001 Belenyuk V.D., http://orcid.org/0000-0003-2848-0846
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. The study had no sponsorship.
Received: 30.03.16 Accepted: 20.04.16
Введение
В настоящее время травматизм является одной из основных причин смертности трудоспособного населения в возрасте до 40 лет. Особенно это касается больных с тяжелыми множественными и сочетанными повреждениями - политравмой (ПТ). Больные с ПТ требуют длительного лечения, что объясняется множественностью травм скелета, сменой методов лечения, а также нередкими осложнениями в процессе лечения [1]. Часто развиваются гнойно-некротические осложнения, которые характеризуются особой тяжестью и распространенностью. В связи с большой крово-потерей и травматическим шоком возникает вторичный иммунодефицит [2, 3]. Все эти факторы, усугубляющие течение раневых осложнений при политравмах, заставляют использовать не только традиционные тактические схемы лечения и профилактические мероприятия, но и осуществлять разработку новых подходов к лечению этой категории больных.
Учитывая, что бактериальная инфекция считается ведущей причиной осложнений ПТ, своевременная антибактериальная терапия и оперативные санационные мероприятия позволяют значительно улучшить прогноз исхода заболевания. Однако не всегда такое лечение оказывается эффективным, особенно при развитии нозокомиальных инфекций, к которым относится и инфекция вызванная Pseudomonas aeruginosa. С целью профилактики и лечения данной инфекции нашла применение поливалентная вакцина «Псевдовак», состоящая из 7 иммунотипов, инактивированных штаммов P. aeruginosa. Она обеспечивает формирование активного иммунитета к синегнойным инфекциям, чем и обусловливают клинический эффект от ее применения. Доказана ее эффективность при ожогах, инфекциях дыхательных и мочевыводя-щих путей, уменьшении риска бактериемии и сепсиса при длительной госпитализации, интубации, искусственной вентиляции легких, осложнениях при катетеризации, рецидивирующих инфекциях, различных видах ран, в том числе послеоперационных [4, 5].
Однако помимо формирования адаптивного
иммунитета вакцину «Псевдовак» необходимо рассматривать и как иммуностимулятор микробного происхождения, за счет воздействия на образ-распознающие рецепторы (pattern-recognition receptors - PRR) макрофагов, NK-клеток, грану-лоцитов, эпителиальных и дендритных клеток, патоген-ассоциированными молекулярными образами (pathogen-associated molecular pattern -PAMP) структурных и внеклеточных антигенов, инактивированных штаммов P aeruginosa вакцины «Псевдовак». Определено, что РАМР синегнойной палочки активно воздействуют на Toll-подобные рецепторы 2, 4, 5 и 9 классов [6, 7], за счет чего мы вправе ожидать активацию этих клеток, усиления синтеза цитокинов, более активное поглощение патогена с последующим представлением антигенных детерминант и запуском адаптивного иммунитета.
Целью исследования явилось изучение влияния вакцины «Псевдовак» на фенотип клеток врожденного иммунитета больных с ПТ. Методика
В исследование включены 60 больных (43 мужчины и 17 женщин в возрасте 23-58 лет) с ПТ. Из исследования исключали больных с наличием тяжелых сопутствующих заболеваний. Все пациенты получали стандартное лечение. Методом простой рандомизации обследуемые были разделены на две группы. Группа 1 - 30 больных с ПТ (22 мужчины и 8 женщин), получающие лечения по традиционной схеме. Группа 2 - 30 больных с ПТ (21 мужчина и 9 женщин), получающие лечения по традиционной схеме и дополнительно с профилактической целью получающие вакцину «Псев-довак». Вакцина «Псевдовак» вводилась согласно Инструкции по применению лекарственного препарата (ЛП 001290-281111) в 1-4-6-8-10-й день по 0,2-0,4-0,6-0,8-1,0 мл в/м. Иммунологические исследования были проведены трижды: при поступлении в стационар, на 10-й и на 20-й день госпитализации. В качестве контроля обследовано 35 здоровых людей (25 мужчин и 10 женщин) аналогичного возрастного диапазона.
Исследование фенотипического состава клеток врожденного иммунитета проводили методом про-
оригинальные исследования
точной цитометрии с использованием монокло-нальных антител (Beckman Coulter, USA), меченных FITC (fluorescein isothiocyanate), PE или RD1 (phycoerythrin), ECD (phycoerythrin-TexasRed-X), PC5 (phycoerythrin-cyanin 5) и PC7 (phycoerythrin-cyanin 7) Пробоподготовку осуществляли по стандартной методике [8]. Лизис эритроцитов проводили по безотмывочной технологии с использованием реагента VersLyse (Beckman Coulter, США). Использовалось пятицветное иммунофенотипиро-вание. Панели тестирования лейкоцитов определены следующим образом: CD3/CD19/CD16+56/ CD45/CD38, CD3/CD16/CD56/CD8/CD11b, CD3/ CD16+56/CD28/CD57/CD45, CD14/CD64/CD16/ CD45/HLA-DR. Анализ окрашенных клеток проводили на проточном цитофлуориметре FC-500 (Beckman Coulter, USA), в каждой пробе анализировали не менее 50 000 клеток. Абсолютные значения были получены в двухплатформенной технологии с использованием результатов гематологического анализа.
Все исследования выполнены с информированного согласия испытуемых и в соответствии с Хельсинкской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266.
Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартильного размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому
критерию Манна-Уитни. Достоверность различий в динамике лечения определяли по критерию Вил-коксона (Wilcoxon matched pairs test). Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 8.0 (StatSoftlnc., 2007).
Результаты
При исследовании иммунологических показателей, характеризующих клетки врожденного звена иммунной системы, обнаружено, что изначально в развернутом анализе крови у больных с ПТ при сравнении с показателями контрольной группой определяется увеличение числа лейкоцитов за счет нейтрофилов при уменьшении общего числа лимфоцитов (табл. 1). У больных, получавших вакцину, на 10-й день увеличивается число нейтрофилов и лимфоцитов.
При проведении цитометрического анализа нейтрофилов у больных с ПТ обнаружено снижение содержания CD16+-нейтрофилов и увеличение количества клеток, экспрессирующих CD64 (табл. 2). В динамике число этих клеток стремится к уровню контрольного диапазона и без различий в группах, получавших и не получавших вакцину против синегнойной палочки.
Рассматривая исходные значения в содержании моноцитов, нами не установлены изменения в их количестве (табл. 3). Это связано с тем, что на первом этапе реакция моноцитов при ПТ не выражена (идет превалирование нейтрофильной активации). На 10-й день лечения наблюдается увеличение количества CD14hiCD16+-моноцитов. Число клеток с данным фенотипом у больных, получающих вакцину, выше, чем у не получающих препарат. Так-
Таблица 1
Показатели лейкоцитов крови у больных с ПТ при лечении вакциной «Псевдовак» (Ме, С25-С75)
Показатель Группа Контроль Исходные 10-й день 20-й день
Лейкоциты, • 109/л 1 5,80 10 57*** 7,88-11,68 11 07*** 8,39-12,18 8,79* 6,11-9,90
2 4,32-7,54 11,20*** 8,52-12,31 13,98*** 11,30-15,09 9,24* 6,55-10,35
Нейтрофилы, • 109/л 1 3,55 8 49*** 5,81-9,60 7 74*** 5,06-8,85 6,12** 3,44-7,23
2 3,15-4,52 8,96*** 6,28-10,07 9 79***° 7,11-10,90 6,45* 3,77-7,56
Лимфоциты, • 109/л 1 2,05 1,36* 0,85-1,77 1,99* 1,48-2,40 1,58 1,07-1,99
2 1,65-2,49 1,44* 0,93-1,85 2 51###*оо 1,99-2,92 1,67 1,16-2,08
Моноциты, • 109/л 1 0,34 0,30 0,10-0,38 0,33 0,13-0,41 0,35 0,15-0,43
2 0,12-0,41 0,34 0,14-0,42 0,30 0,09-0,39 0,37 0,16-0,45
Примечание. Здесь и в табл. 2-4: группа 1 - без применения в лечении «Псевдовака»; группа 2 - с применением в лечении «Псевдовака»; статистически значимые различия с показателями контрольной группы: * - р< 0,05, ** - р < 0,01, *** - р < 0,001; -//- с исходными показателями: * - р< 0,05, ## -р < 0,01, -р < 0,001; -//- при сравнении групп: ° -р< 0,05, °° -р < 0,01, °°° -р < 0,001.
original investigations
Таблица 2
Нейтрофилы крови у больных с ПТ при лечении вакциной «Псевдовак» (Ме, С25-С75)
Показатель
Группа
Контроль
Исходные
10-й день
20-й день
CD11b+, %
CD16+, %
CD64+, %
99,92
99,81-100,0
92,48
88,43-96,76
7,43 4,19-14,52
97,80 93,76-99,95
98,74 94,61-99,94
79,55** 71,48-85,11
76,13*** 69,83-85,49
22,81*** 14,1-31,5
23,63*** 12,9-33,25
98,25 95,92-99,87
99,11 94,58-99,84
81,43** 79,47-85,24
85,90* 82,19-90,54
15,90*** 11,32-17,90
16,39*** 11,75-18,12
99,54 96,54-99,91
99,80 96,84-99,93
88,25 85,86-95,45
90,19 88,27-95,74
12,07** 8,19-13,11
11,98*** 7,09-14-46
Таблица 3
Моноциты крови у больных с ПТ при лечении вакциной «Псевдовак» (Ме, С25-С75)
Показатель Группа Контроль Исходные 10-й день 20-й день
Моноциты CD14UCD16", % 1 84,21 85,70 84,46 84,43
78,54-89,25 77,30-88,01 75,27-87,98
2 73,19-96,10 86,35 80,95 81,90
79,18-89,90 73,79-84,50 74,75-85,45
Моноциты CD14UCD16+, % 1 4,60 4,53 8,30*** 4,80
2,57-6,50 6,34-10,28 2,84-6,78
2 3,65-10,50 4,87 13 25******°°° 6,35
2,91-6,84 11,29-15,22 4,39-8,32
Моноциты CD14dimCD16+, % 1 2,75 2,58 2,85 2,74
0,62-4,55 0,88-4,82 0,78-4,71
2 1,65-4,05 2,80 3,81 2,38
0,84-4,77 1,85-5,78 0,42-4,35
Моноциты HLA-DR+, % 1 85,80 81,32 73,65**** 88,60
74,16-85,87 66,49-77,20 81,44-92,15
2 82,48-89,09 82,18 86,35° 85,93
75,02-85,73 79,18-89,90 78,77-89,48
же на 10-й день лечения выявляется повышение уровня HLA-DR+-моноцитов на фоне применения вакцины.
В целом, как отмечалось выше количество лимфоцитов у больных с ПТ снижается (см. табл. 1). Однако число CD3-CD16/56+- и CD3+CD16/56+-
лимфоцитов при ПТ выше показателей контрольной группы (табл. 4). К 10-му дню лечения у больных, получавших вакцину против синегнойной палочки, число СВ3-СВ16/56+-клеток уменьшается по сравнению с исходным уровнем и к 20-му становится ниже контрольного диапазона. В то же
Таблица 4
Лимфоциты крови, характеризующие врожденный иммунитет у больных с ПТ при лечении вакциной «Псевдовак» (Ме, С25-С75)
Показатель Группа Контроль Исходные 10-й день 20-й день
CD3+CD16/56+, % 1 3,55 4,91* 5,79* 4,56
2,94-6,89 3,82-7,76 2,59-6,53
2 1,66-5,60 4,80* 8 75******°° 6 15***°°
2,83-6,78 6,78-10,72 4,19-8,14
CD3-CD19-CD16/56+, % 1 18,10 28,95*** 30,70*** 19,80**
21,79-32,50 23,35-34,25 12,64-23,35
2 13,49-22,01 27,11*** 20,47°°° 14 36****°°
19,95-30,66 13,31-24,02 7,20-17,91
CD16brishtCD56dim, % 1 1,08 1,89 1,45 0,93**
0,69-2,08 0,75-1,64 0,73-1,12
2 0,43-2,74 2,01 4 26****°°° 2,69*°°°
0,40-3,98 2,29-6,23 0,72-4,67
CD16lowCD56brisht, % 1 0,52 0,83* 0,61 0,51**
0,63-1,02 0,41-0,80 0,31-0,81
2 0,34-0,72 0,85* 2 85******°°° 1,09*°°°
0,65-1,04 2,65-3,04 0,89-1,28
оригинальные исследования
время, у больных данной категории содержание CD3+CD16/56+-лимфоцитов также повышается на 10-е сутки лечения и остается повышенным на 20-й день наблюдения. У лиц данной группы наблюдается увеличение количества CD16bгlshtCD56-и CD16lowCD56bгlsht-лимфоцитов.
Обсуждение
Учитывая, что бактериальные инфекции являются ведущей причиной осложнения ПТ, своевременная адекватная комплексная терапия позволяет значительно улучшить прогноз заболевания. Имму-ноактивная терапия одно из направлений позволяющие улучшить эффективность лечения больных с ПТ. В качестве иммуностимуляторов бактериального происхождения можно рассматривать и вакцину против синегнойной палочки - «Псевдовак». Врожденный иммунитет обеспечивается клетками мие-лоидного ряда: макрофагами и гранулоцитарными лейкоцитами, а также клетками лимфоидного ряда (например ККК- и ККТ-лимфоцитами). Это высоко реактивное звено в иммунной системе. Они первыми мобилизуются в очаг воспаления. От их фагоцитарной и цитотоксической активности во многом зависит эффективность противомикробной защиты организма [9, 10].
У больных с ПТ выявлены изменения параметров врожденного иммунитета, сопровождающиеся, прежде всего, увеличением числа нейтро-филов. Нейтрофильные гранулоциты занимают одну из наиболее активных позиций в системе иммунитета. Эти клетки составляют первую линию неспецифической противомикробной защиты. Они, обладая высокой реактивностью, способны быстро функционально перестраиваться в ответ на воздействие агентов различной природы [9]. Учитывая, что их функциональная активность отражается в экспрессии различных рецепторов, проведены исследования по изучению экспрессии CD11b, CD16 и CD64 на нейтрофилах. Обнаружено, что у больных с ПТ в 1-е сутки обследования в периферической крови снижается содержание нейтрофилов, экспрессирующих CD16-рецептор, к 20-му дню лечения - восстанавливается до уровня контрольного диапазона. Данная молекула представляет собой гликопротеин, являющийся низкоаффинным рецептором для IgG ^суЫПЬ), с помощью которого также осуществляется механизм антителозависимой клеточной цитоток-сичности [11]. Доказано, что уровень экспрессии CD16 также свидетельствует о зрелости нейтро-филов. Кроме того, у больных с ПТ в 1-е сутки обследования повышено количество нейтрофилов с экспрессией CD64, к 20-му дню лечения уровень CD64+-нейтрофилов нормализуется. CD64 ^суЫ) - является высокоаффиным рецептором к Fc-фрагментам иммуноглобулинов & Это един-
ственный тип Fcy-рецепторов, который связывает свободные антитела. Фагоцитириующие клетки при экспрессии данного рецептора могут удерживать на своей поверхности большое число молекул антител одной специфичности, что обеспечивает специфическое распознавание патогена клетками [12]. При использовании вакцины «Псевдовак» не установлено значимых изменений количества ней-трофилов в крови и их фенотипа.
Фенотипирование моноцитов позволило определить особенности их субпопуляционного состава при ПТ. Установлено, что если количество общих моноцитов крови у больных с ПТ не изменяется на всем протяжении обследования, то на 10-й день лечения у больных повышается уровень «неклассических» моноцитов (CD14hlCDl6+). Причем, у больных с ПТ, получавших вакцину «Псевдовак», количество «неклассических» моноцитов больше, чем у пациентов, не получавших вакцину. Активность этих клеток связана, в первую очередь с продукцией провоспалительных цитокинов, являющихся непременным атрибутом системного воспалительного ответа [13]. К 20-му дню лечения содержание «неклассических» моноцитов в крови нормализуется. Кроме того, у пациентов, не получавших вакцину «Псевдовак», на 10-й день лечения наблюдается снижение количества НЬА-ОК+-моноцитов. Учитывая, что Н^А^Я-рецептор является продуктом главного комплекса гистосовместимости II класса, который осуществляет презентацию антигенов клеткам адаптивного иммунитета [14], подобное снижение активированных моноцитов может привезти к недостаточной эффективности иммунных процессов в указанный период.
Среди популяций лимфоцитов, активно участвующих в системе врожденного иммунитета, нами исследованы содержание КККТ- (CD3+CD16/56+) и КК-клеток ^3^16/56+). ККТ-клетки играют важную роль в регуляции иммунного ответа, связывая механизмы врожденного и адаптивного иммунитета. Подобно нейтрофилам, ККТ-клетки одними из первых реагируют на проникновение в организм чужеродных агентов [15]. У больных с ПТ количество КККТ-клеток повышено уже с 1-го дня обследования и остается высоким весь период лечения. При использовании вакцины «Псевдовак» количество ККТ-клеток значительно повышается уже на 10-й день лечения и остается повышенным на 20-й день относительно уровня, выявленного у пациентов со стандартным лечением.
ККК-клетки являются активными эффекторами на ранних стадиях реакций врожденного и регуляции адаптивного иммунитета [15]. У больных с ПТ на 1 -й день выявляется высокий уровень КК-клеток в периферической крови. У пациентов на фоне стандартного лечения к 20-му дню наблюдения количество клеток данной популяции нормализуется. При
использовании вакцины «Псевдовак» в конце периода лечения обнаружено более низкое содержание ККК-клеток относительно и контрольных значений, и уровня, выявленного у больных, не получавших вакцинный препарат. Фенотипирование данной популяции лимфоцитов позволило охарактеризовать их субпопуляционный состав у больных с ПТ. Обнаружено, что уже на 1-й день обследования в периферической крови больных с ПТ повышается количество цитокинпродуцирующих КК-клеток ^161т^56Ьг«м). У больных на фоне стандартного лечения содержание данной субпопуляции нормализуется к 20-му дню, тогда как при использовании вакцины «Псевдовак» повышенный уровень регуляторной фракции ККК-клеток сохраняется весь период наблюдения. Только на фоне использования вакцины «Псевдовак» при ПТ на 10-й день лечения повышается уровень цитотоксических КК-клеток (CD16bгlghtCD561ow). Причем их повышенное количество сохраняется и на 20-й день лечения.
Таким образом, можно предположить, что механизм действия вакцины «Псевдовак» реализуется через воздействие на PRR клеток врожденного иммунитета, следствием чего является активация иммунной системы, сопровождающаяся увеличением числа КККТ-клеток, цитокинпродуцирующих и цитотоксических ККК-лимфоцитов и провоспа-лительных моноцитов. Целесообразность применения вакцины «Псевдовак» обусловлено тем, что реализуется двойной эффект: во-первых, формируется адаптивный иммунитет против одной из распространенных инфекций; во-вторых, за счет активации врожденного иммунитета преодолевается иммунодепрессия, возникающая при политравме.
Выводы
1. При использовании вакцины «Псевдовак» у больных с политравмой в периферической крови повышается количество моноцитов с фенотипом CD14hlCD16+ («неклассический»), принимающих участие в реализации системновоспалитель-ного ответа, и сохраняется уровень HLA-DR+-моноцитов, осуществляющих презентацию антигена и, соответственно, стимуляцию реакций адаптивного иммунитета.
2. Количество КККТ-клеток (участвуют в имму-норегуляторных процессах) у больных с политравмой повышается при лечении вакциной «Псев-довак», тогда как содержание общих КК-клеток - снижается, но при сохранении высокого уровня цитокин-продуцирующей фракции.
3. У больных с политравмой в 1-е сутки лечения наблюдается повышение содержания нейтрофи-лов в крови. К 20-му дню лечения их количество снижается как на фоне стандартного лечения, так и при использовании вакцины «Псевдовак».
original investigations
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Агаджанян В.В., Кравцов С.А., Шаталин А.В., Левченко Т.В. Политравма. 2015; 1: 6-15.
2. Агаджанян В.В., Устьянцева И.М., Пронских А.А. и др. Политравма. Септические осложнения. Новосибирск: Наука; 2005.
3. Левченко Т.В., Кравцов С.А., Корнев А.Н. и др. Политравма. 2014; 3: 24-32.
4. Борисов А.Г., Савченко А.А., Кудрявцев И.В. и др. Медицинская иммунология. 2015; 17 (5): 413-42.
5. Faezi S., Sattaria M., Mahdavi M., Roudkenarc M.H. Burns. 2011; 37 (5): 865-72.
6. Descamps D., Le Gars M., Balloy V. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012; 109: 1619-24.
7. Ramphal R., Balloy V, Jyot J. et al. J. Immunol. 2008; 181: 586-92.
8. Хайдуков С.В., Байдун Л.А., Зурочка А.В., Тотолян Арег А. Медицинская иммунология. 2012; 14 (3): 255-68.
9. Савченко А.А., Здзитовецкий Д.Э., Борисов А.Г., Лузан Н.А. Цитокины и воспаление. 2013; 12 (1-2): 115-9.
10. Aggarwal N.R., King L.S., D'Alessio F.R. Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2014; 306 (8): 709-25.
11. Fossati G., Moots R.J., Bucknall R.C., Edwards S.W. Arthritis Rheum. 2002; 46 (5): 1351-61.
12. Mancardi D.A., Albanesi M., Jönsson F. et al. Blood. 2013; 121 (9): 1563-73.
13. O'Hare F.M., Watson W., O'Neill A. et al. Pediatr. Res. 2015; 78 (1): 82-90.
14. Verschoor C.P., Loukov D., Naidoo A. et al. Mol. Immunol. 2015; 65 (1): 148-56.
15. Козлов В.А., Борисов А.Г., Смирнова С.В., Савченко А.А. Практические аспекты диагностики и лечения иммунных нарушений. Новосибирск: Наука; 2009.
REFERENCES
1. Agadzhanyan V.V., Kravtsov N.A., Shatalin A.V., Levchenko T.V. Politravma. 2015; 1: 6-15. (in Russian)
2. Agadzhanyan V.V., Ust'yantseva I.M., Pronskikh A.A. et al. Polytrauma. Septic complications. [Politravma. Septicheskie os-lozhneniya]. Novosibirsk: Nauka; 2005. (in Russian)
3. Levchenko T.V., Kravtsov S.A., Kornev A. et al. Politravma. 2014; 3: 24-32. (in Russian)
4. Borisov A.G., Savchenko A.A., Kudryavtsev I.V. et al. Meditsin-skaya immunologiya. 2015; 17 (5): 413-42. (in Russian)
5. Faezi S., Sattaria M., Mahdavi M., Roudkenarc M.H. Burns. 2011; 37 (5): 865-72.
6. Descamps D., Le Gars M., Balloy V. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012; 109: 1619-24.
7. Ramphal R., Balloy V, Jyot J. et al. J. Immunol. 2008; 181: 586-92.
8. Khaydukov S.V., Baydun L.A., Zurochka A.V., Totolyan Areg A. Meditsinskaya immunologiya. 2012; 14 (3): 255-68. (in Russian)
9. Savchenko A.A., Zdzitovetskiy D.E., Borisov A.G., Luzan N.A. Tsitokiny i vospalenie. 2013; 12 (1-2): 115-9. (in Russian)
10. Aggarwal N.R., King L.S., D'Alessio F.R. Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2014; 306 (8): 709-25.
11. Fossati G., Moots R.J., Bucknall R.C., Edwards S.W. Arthritis Rheum. 2002; 46 (5): 1351-61.
12. Mancardi D.A., Albanesi M., Jönsson F. et al. Blood. 2013; 121 (9): 1563-73.
13. O'Hare F.M., Watson W., O'Neill A. et al. Pediatr. Res. 2015; 78 (1): 82-90.
14. Verschoor C.P., Loukov D., Naidoo A. et al. Mol. Immunol. 2015; 65 (1): 148-56.
15. Kozlov V.A., Borisov A.G., Smirnova S.V., Savchenko A.A. Practical Aspects of Diagnosis and Treatment of Immune Disorders. [Prakticheskie aspekty diagnostiki i lecheniya immunnykh narusheniy]. Novosibirsk: Nauka; 2009. (in Russian)
Поступила 30.03.16
