УДК 617.53:616.133]-001-005.1-089-039.74
ИЗМЕНЕНИЕ АДГЕЗИВНЫХ СВОЙСТВ ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДИСТОЙ СТЕНКИ
ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РАНЕНИЯХ ШЕИ
© 2018 В.В. Масляков, В.Г. Барсуков, А.В. Усков
Филиал частного учреждения образовательной организации высшего образования «Медицинский университет «Реавиз» в г. Саратове, Саратов
В статье представлен анализ изменений адгезивных свойств эндотелия сосудистой стенки, ближайший послеоперационный период при различных ранениях шеи. Для этого проведено изучение данных показателей у 30 раненых, из них раненых 15 поступили с огнестрельными ранениями шеи и 15 раненых с колото-резаными ранениями шеи, исследования проводились на 1, 3, 5, 7, 10 и 18 послеоперационные сутки.
В результате проведенного исследования установлено, что изменения растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови при ранениях шеи зависят от характера ранения, наиболее выражены при огнестрельных ранениях. При огнестрельных ранениях шеи увеличение растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови происходит с первых послеоперационных суток, а восстановление на восемнадцатые послеоперационные сутки.
Ключевые слова: ранения шеи, адгезивные свойства эндотелия сосудистой стенки, ближайший послеоперационный период.
Введение. Ранения шеи относятся к числу наиболее тяжелых и непредсказуемых по течению, что связано с большой вариабельностью раневого канала, близким расположением жизненно важных органов [1]. Тяжесть травмы, кровопотеря приводят к развитию различных нарушений гомеостаза, характер которых зависит от различных и многих факторов [2, 3]. Доказано, что характер ранения (огнестрельное или колото-резанные) оказывает влияние на изменения этих показателей, что отражается на течении ближайшего послеоперационного периода [4, 5, 7]. Несмотря на достаточно большое количество публикаций, посвященных этому вопросу, остается множество нерешенных вопросов. Вызывает определенный интерес вопрос, связанный с влиянием характера ранения на изменения некоторых показателей растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови при ранениях шеи.
Цель исследования: изучить изменения адгезивных свойств эндотелия сосудистой стенки при различных ранениях шеи в ближайшем послеоперационном периоде.
Материалы и методы. Для достижения поставленной цели нами было проведено изучение растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, а также концентрацию провоспалительных цитокинов у 30 раненых. Из общего количества раненых 15 поступили с огнестрельными ранениями шеи (основная группа) и 15 раненых с колото-резаными ранениями шеи (группа сравнения). Все раненые были мужского пола, сопоставимы по возрасту, средний возраст составил 26 ± 2 лет, по объему кровопотери в обеих группах была зарегистрирована средняя степень кровопотери, в момент поступления имели среднюю степень тяжести, во всех наблюдениях были зарегистрированы повреждения мягких тканей. Раненые обеих групп не получали специфическую терапию, направленную на изменения адгезивных свойств эндотелия сосудистой стенки. Вторую группу сравнения составили 15 относительно здоровых мужчин того же возраста.
Для оценки экспрессии адгезивных молекул на поверхности эндотелия определялась концентрация их растворимых форм в сыворотке крови, проводилось определение следующих форм: растворимой формы межклеточной адгезивной молекулы 1 типа - sICAM-1; растворимой формы сосудистой адгезивной молекулы - sVCAM-1; растворимой формы тромо-цитарно-адгезивной молекулы - sPECAM-1; растворимой формы тромбоцитано-эндотелиальной адгезивной молекулы - sP- и sE-селектинов. Кроме того, осуществлялась оценка уровней некоторых провоспалительных цитокинов, которую оценивали по уровню интерлейкина-1-P (ИЛ-1-Р) и фактора некроза опухоли-а (ФНО-а). Забор крови проводился в асептических условиях из кубитальной вены, объем забранной крови составлял 5 мл, в дальнейшем путем центрифугирования цельной крови из нее получали сыворотку. Кровь для исследования у относительно здоровых людей проводилась однократно, а при ранениях шеи на первые, третьи, пятые, седьмые, десятые и восемнадцатые послеоперационные сутки. Определение концентрации sICAM-1, sVCAM-1, sPECAM-1, sP- и sE-селектинов, ИЛ-1-Р и ФНО-а проводилось при помощи иммуноферментного анализа. Определение концентрации растворимых форм адгезивных молекул эндотелия сосудистой стенки проводилось с использованием наборов реактивов Human sICAM-1 ELISA BMS201, Human sVCAM-1 ELISA BMS232, Human sPECAM-1 ELISA BMS229, Human sP-selectin ELISA BMS219/4 и Human sE-selectin ELISA BMS205 производитель Bender MedSystems GmbH (Австрия). При проведении оценки изменений статуса цитокинов использовался набор реактивов фирмы «Вектор-Бест» Интерлейкин-1-Р-ИФА-БЕСТ и а-ФНО-ИФА-БЕСТ. Оптическую плотность измеряли при длине волны 450 нм, для этого использовался анализатор Stat Fax 2100 (Awareness Technology Inc., США) по разработанной ранее методике [6].
Статистический анализ количественных и качественных результатов исследования проводился с использованием статистической программы «Statistica 6». Статистически достоверным считали различие между сравниваемыми величинами при значении р меньше 0,05.
Результаты и их обсуждение. Полученные данные анализа результатов провоспали-тельных цитокинов, растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови при различных ранениях шеи представлены в табл. 1.
Как видно из данных, представленных в табл. 1, в группе с огнестрельными ранениями шеи, начиная с первых послеоперационных суток, было зарегистрировано увеличение всех анализируемых показателей как провоспалительных цитокинов, так и растворимых форм адгезивных молекул эндотелия. При этом в группе с колото-резаными ранениями шеи исследуемые показатели практически не отличались от данных, полученных в группе относительно здоровых людей.
Следует отметить такой факт, что между увеличением концентрации адгезивных молекул эндотелия и увеличением концентрации провоспалительных цитокинов отмечена сильная обратная корреляционная взаимосвязь. Это может быть объяснено тем, что на поверхности эндотелиоцитов ФНО-а и ИЛ-1-Р находятся регуляторы экспрессии данных молекул.
К третьим послеоперационным суткам послеоперационные сутки в обеих анализируемых группах происходило увеличение всех исследуемых показателей (табл. 2). При этом в группе пациентов с огнестрельными ранениями шеи исследуемые показатели были значительно выше, чем в группе с колото-резаными ранениями.
Таблица 1
Показатели растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, провоспалительных цитокинов с различными ранениями шеи в первые послеоперационные сутки
Результаты в группах
Показатели Колото-резаные ранения Огнестрельные ранения Группа сравнения
(п = 15) (п = 15) (п = 15)
sP-селектин, нг/мг 117 ± 0,3 211 ± 0,1* 118 ± 0,4
sE-селектин, нг/мл 33 ± 0,3 43 ± 0,2* 34 ± 0,2
sICAM-1, нг/мл 324 ± 0,2 453 ± 0,4* 326 ± 0,2
sVCAM-1, нг/мл 738 ± 0,3 961 ± 0,1* 741 ± 0,3
8РЕСЛМ-1, нг/мл 62 ± 0,3 78 ± 0,2* 63 ± 0,3
ФНО-а, пг/мл 1,38 ± 0,3 2,34 ± 0,1* 1,37 ± 0,2
ИЛ-1-Р, пг/мл 6,7 ± 0,2 8,1 ± 0,3* 6,8 ± 0,1
Примечание: здесь и далее * - знак статистической достоверности (р < 0,05) по сравнению с данными группы сравнения.
Таблица 2
Показатели растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, провоспалительных цитокинов с различными ранениями шеи на третьи послеоперационные сутки
Результаты в группах
Показатели Колото-резаные ранения Огнестрельные ранения Группа сравнения
(п = 15) (п = 15) (п = 15)
sP-селектин, нг/мг 219 ± 0,3* 421 ± 0,1* 118 ± 0,4
sE-селектин, нг/мл 47 ± 0,3* 56 ± 0,2* 34 ± 0,2
sICЛM-1, нг/мл 454 ± 0,2* 613 ± 0,4* 326 ± 0,2
sVCAM-1, нг/мл 871 ± 0,3* 1221 ± 0,1* 741 ± 0,3
sPECAM-1, нг/мл 79 ± 0,3* 91 ± 0,2* 63 ± 0,3
ФНО-а, пг/мл 3,38 ± 0,3* 6,23 ± 0,1* 1,37 ± 0,2
ИЛ-1-Р, пг/мл 10,3 ± 0,2* 16,2 ± 0,3* 6,8 ± 0,1
К пятым послеоперационным суткам в группе раненых с колото-резаными ранениями шеи изменений в анализируемых показателях отмечено не было, все показатели существенно не отличались от данных, полученных на третьи послеоперационные сутки. В группе с огнестрельными ранениями шеи зарегистрировано дальнейшее увеличение всех исследуемых показателей (табл. 3).
Таблица 3
Показатели растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, провоспалительных цитокинов с различными ранениями шеи на пятые послеоперационные сутки
Результаты в группах
Показатели Колото-резаные ранения Огнестрельные ранения Группа сравнения
(п = 15) (п = 15) (п = 15)
sP-селектин, нг/мг 218 ± 0,3* 457 ± 0,1* 118 ± 0,4
sE-селектин, нг/мл 46 ± 0,3* 59 ± 0,2* 34 ± 0,2
sICAM-1, нг/мл 453 ± 0,2* 659 ± 0,4* 326 ± 0,2
sVCAM-1, нг/мл 872 ± 0,3* 1345 ± 0,1* 741 ± 0,3
sPECAM-1, нг/мл 78 ± 0,3* 101 ± 0,2* 63 ± 0,3
ФНО-а, пг/мл 3,37 ± 0,3* 8,14 ± 0,1* 1,37 ± 0,2
ИЛ-1-Р, пг/мл 10,4 ± 0,2* 18,4 ± 0,3* 6,8 ± 0,1
К седьмым послеоперационным суткам в группе раненых с огнестрельными ранениями шеи изменений в анализируемых показателях выявлено не было, все показатели существенно не отличались от данных пятых послеоперационных суток. В то же время, в группе раненых с колото-резанными ранениями шеи было зарегистрировано снижение всех анализируемых показателей по сравнению с данными, полученными на третьи послеоперационные сутки. Вместе с тем они оставались повышенными по сравнению с данными относительно здоровых людей (табл. 4).
Таблица 4
Показатели растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, провоспалительных цитокинов с различными ранениями шеи на седьмые послеоперационные сутки
Результаты в группах
Показатели Колото-резаные ранения Огнестрельные ранения Группа сравнения
(п = 15) (п = 15) (п = 15)
sP-селектин, нг/мг 200 ± 0,3* 457 ± 0,1* 118 ± 0,4
sE-селектин, нг/мл 40 ± 0,3* 58 ± 0,2* 34 ± 0,2
sICAM-1, нг/мл 419 ± 0,2* 658 ± 0,4* 326 ± 0,2
sVCAM-1, нг/мл 801 ± 0,3* 1343 ± 0,1* 741 ± 0,3
8РЕСЛМ-1, нг/мл 69 ± 0,3* 101 ± 0,2* 63 ± 0,3
ФНО-а, пг/мл 2,17 ± 0,3* 8,13 ± 0,1* 1,37 ± 0,2
ИЛ-1-Р, пг/мл 8,2 ± 0,2* 18,3 ± 0,3* 6,8 ± 0,1
К десятым послеоперационным суткам в группе раненых с колото-резанными ранениями шеи все исследуемые показатели восстанавливались и соответствовали данным, полученным показателям группы сравнения из относительно здоровых людей. В группе раненых с огнестрельными ранениями шеи происходило частичное уменьшение всех исследуемых показателей, однако они оставались повышенными по сравнению как с данными раненых с колото-резаными ранениями, так и с данными группы сравнения из относительно здоровых людей (табл. 5).
Таблица 5
Показатели растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови, провоспалительных цитокинов с различными ранениями шеи на десятые послеоперационные сутки
Результаты в группах
Показатели Колото-резаные ранения Огнестрельные ранения Группа сравнения
(п = 15) (п = 15) (п = 15)
sP-селектин, нг/мг 119 ± 0,3 347 ± 0,1* 118 ± 0,4
sE-селектин, нг/мл 35 ± 0,3 45 ± 0,2* 34 ± 0,2
sICЛM-1, нг/мл 329 ± 0,2 448 ± 0,4* 326 ± 0,2
sVCAM-1, нг/мл 751 ± 0,3 823 ± 0,1* 741 ± 0,3
sPECAM-1, нг/мл 65 ± 0,3 81 ± 0,2* 63 ± 0,3
ФНО-а, пг/мл 3,29 ± 0,3 6,43 ± 0,1* 1,37 ± 0,2
ИЛ-1-Р, пг/мл 6,9 ± 0,2 9,9 ± 0,3* 6,8 ± 0,1
Полное восстановление исследуемых показателей в группе раненых с огнестрельными ранениями шеи отмечалась на восемнадцатые послеоперационные сутки, когда все исследуемые показатели стали соответствовать результатам группы сравнения из относительно здоровых людей.
Таким образом, проведенное исследование показывает, что характер ранения шеи оказывает существенное влияние на изменения концентрации провоспалительных цитокинов, растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови. Это, в первую очередь, касается селектинов, т.е. тех адгезивных молекул, лектинподобный домен которых обеспечивает адгезию лейкоцитов к эндотелиальным клеткам, которые характеризуют процессы воспаления. Так, в группе с огнестрельными ранениями шеи выявлены более раннее, начиная с первых послеоперационных суток, увеличение этих показателей, и более позднее, по сравнению с группой с колото-резаными ранениями, восстановление этих показателей.
Выводы: 1. Изменения растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови при ранениях шеи зависят от характера ранения, наиболее выражены при огнестрельных ранениях.
2. При огнестрельных ранениях шеи увеличение растворимых форм адгезивных молекул эндотелия в сыворотке крови происходит с первых послеоперационных суток, а восстановление на восемнадцатые послеоперационные сутки.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Коровкина Е.Н. Ранения шеи // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. - 2014. - № 11. - С. 92-94.
2 Абакумов М.М., Цамалаидзе Л.Н., Воскресенский О.В., Джаграев К.Р. Ранения шеи, груди и живота огнестрельным травматическим оружием // Хирургия. - 2010. - № 11. - С. 16-22.
3 Масляков В.В., Барсуков В.Г., Усков А.В. Результаты оказания медицинской помощи гражданскому населению с огнестрельными ранениями шеи в условиях локального военного конфликта // Медицина в Кузбассе.
- 2016. - № 4. - С. 24-30.
4 Осадчий А.А., Михайлов А.П., Данилов A.M. и др. Хирургическая тактика при сочетанных ранениях шеи и груди в условиях многопрофильного стационара // Вестник Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования. - 2011. - № 2. - С. 20-25.
5 Трунин Е.М., Смирнов В.Ю., Шабонов А.А. Рациональная тактика лечения ранений шеи в условиях многопрофильной клинической больницы скорой медицинской помощи // Скорая медицинская помощь. - 2006. -№ 4. - С. 59-64.
6 Иванов И.А., Норкин Д.М., Пучиньян В.Ю. и др. Адгезивные молекулы эндотелия сосудистой стенки // Успехи физиологических наук. - 2014. - Т. 45. - № 4. - С. 34-49.
7 Супильников А.А., Юхимец С.Н. Прикладные аспекты применения математико-статистических методов моделирования в медицине // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: реабилитация, врач и здоровье.
- 2012. - № 2 (6). - С. 18-22.
Рукопись получена: 17 декабря 2017 г. Принята к публикации: 22 декабря 2017 г.