CC BY
46
УДК: 611.018.74 DOI: 10.12737/ 17029
ИЗМЕНЕНИЯ АДГЕЗИВНЫХ СВОЙСТВ ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДИСТОЙ СТЕНКИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННЫМ ПАРОДОНТИТОМ ЛЕГКОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ В
ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ
В.Ю. ШИРОКОВ, О.Ю. ЖДАНОВА, Т.В. ГОВОРУНОВА
Саратовский медицинский университет «РЕАВИЗ», , ул. Верхний рынок корп. 10, г. Саратов, Россия, 410004, e-mail: sp-dantist@mail.ru
Аннотация. В статье представлены данные, характеризующие изменения концентраций провос-палительных цитокинов и растворимых форм адгезивных молекул семейства селектинов и суперсемейства иммуноглобулинов при хроническом генерализованном пародонтите легкой степени тяжести. Выполнено определение концентраций растворимых форм Р- и Е-селектинов, молекул межклеточной адгезии 1 типа (ICAM-1), адгезивных молекул сосудов первого типа (VCAM-1) и тромбоцитар-но-эндотелиальных молекул адгезии (PECAM-1)^ также интерлейкина-1-p, фактора некроза опухоли-а в сыворотке крови у клинически здоровых лиц и больных с пародонтитом легкой степени тяжести до и после лечения. Обнаружено, что при хроническом генерализованном пародонтите в сыворотке крови увеличивается концентрация sICAM-1, sVCAM-1, sP-, sE-селектинов и провоспалительных цитокинов. При этом увеличение концентрации в сыворотке крови растворимых форм селектинов выражено более значительно, чем sICAM-1 и sVCAM-1. Статистически значимых изменений сывороточной концентрации sPECAM-1 у обследованной группы пациентов не выявлено. Комплексная терапия, включающая этиологическое и патогенетическое лечение, полностью нормализует концентрацию провоспалительных цитокинов и растворимых форм изученных адгезивных молекул эндотелием при хроническом генерализованном пародонтите легкой степени тяжести. Все исследуемые показатели у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести после проведенного лечения находятся в пределах вариабельности контрольной группы.
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, адгезивные молекуля, пародонтит, микроциркуляция.
CHANGES OF VASCULAR ENDOTHELIUM ADHESIVE PROPERTIES IN PATIENTS WITH CHRONIC GENERALIZED SLIGHT PERIODONTITIS DURING THE TREATMENT
V.Y. SHIROKOV, O.Y. ZHDANOVA, T.V. GOVORUNOVA
Saratov Medical University "Reaviz", Verhnij rynok st., 10, Saratov, Russia, 410004, e-mail: sp-dantist@mail.ru
Abstract. The article presents the description of the changes in the concentrations of pro-inflammatory cytokines and soluble forms of selectins and immunoglobulin superfamily adhesion molecules in patients with chronic generalized slight periodontitis. Serum concentrations of interleukin-1-p, tumor necrosis factor-а, soluble forms of P- and E-selectins, intercellular adhesion molecule (ICAM-1), vascular adhesion molecules (VCAM-1) and platelet-endothelial adhesion molecules (PECAM-1) in healthy subjects and patients with slight periodontitis before and after treatment were assessed. It was found that the serum concentration of sICAM-1, sVCAM-1, sP-, sE- selektins and pro-inflammatory cytokines are increased in patients with chronic generalized periodontitis. The increase of serum concentration of soluble forms of selectins is expressed more significantly than sICAM-1 and sVCAM-1. There are no statistically significant changes of serum sPECAM-1 in the examined group of patients in comparison with control. Complex therapy, including etiological and pathogenetic treatment, is completely normalized the concentration of pro-inflammatory cy-tokines, and soluble forms of studied endothelial adhesion molecules in patients with chronic generalized slight periodontitis. All the studied parameters in patients with chronic generalized slight periodontitis after treatment are in the range of the control group variability.
Key words: endothelial dysfunction, adhesion molecules, periodontitis, microcirculation.
Воспалительные заболевания тканей паро-донта, в частности, хронический генерализованный пародонтит, широко распространены и представляют собой значимую медико-социальную проблему [4,5,7,8]. Развитие паро-донтита сопряжено с прогрессирующим нарушением микроциркуляции в тканях пародонта, обусловленное возникновением дисфункции эндотелия сосудов [4]. Эндотелий сосудистой стенки играет ключевую роль в регуляции микроциркуляции за счет продукции целого ряда биологически активных веществ, которые обеспечивают регуляцию сосудистого тонуса, агрегации тромбоцитов, трансэндотелиальной миграции лейкоцитов [2,3,9]. Адгезивные свойства эндотелия динамически изменяются, отражая его морфофункциональное состояние, посредством регуляции экспрессии специальных адгезивных молекул эндотелием [1,2]. Изменение экспрессии адгезивных молекул проявляется уже на самых ранних этапах эндотелиальной дисфункции [1].
Нарушения эндотелиальной функции при пародонтите имеют системный характер, поэтому в настоящее время рассматривается роль пародонтита как фактора риска кардиоваску-лярных заболеваний [4,7,8]. В этой связи выявление нарушений адгезионных свойств сосудистой стенки на начальных стадиях развития па-родонтита представляет значительный научный и практический интерес. Оценка нарушений адгезионных свойств может быть проведена путем определения концентрации в сыворотке крови растворимых форм адгезивных молекул эндотелия [1,3].
Цель исследования - изучение концентрации растворимых форм адгезивных молекул эндотелия и провоспалительных цитокинов в сыворотке крови больных хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести в динамике лечения.
Материалы и методы исследования. Основную группу обследованных составили 20 пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести. В группу пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести были включены 11 мужчин и 9 женщин. Возраст пациентов с хроническим генерализованным па-родонтитом легкой степени тяжести варьировал от 23 до 42 лет и в среднем составил 31 год.
Контрольную группу составили 20 клинически здоровых доноров добровольцев (10 мужчин и 10 женщин). Возраст клинически здоровых доноров добровольцев варьировал от 22 до 46 лет, составляя в среднем 38 лет. Протокол исследования одобрен этическим комитетом медицинского университета «Реавиз» и соответствует Хельсинкской декларации 1975 г. и ее пересмотру 1983 г.
У всех категорий лиц было проведено комплексное обследование состояния стоматологического статуса. В диагностике заболеваний паро-донта использовали классификацию, принятую на XVI Пленуме Всесоюзного общества стоматологов (1983). Оценка стоматологического статуса осуществлялась в соответствии с рекомендациями В. С. Иванова (1989). Критерием исключения больных из исследования являлась сопутствующая патология эндокринной, сердечнососудистой, пищеварительной систем органов.
Больным хроническим генерализованным пародонтитом было проведено комплексное лечение. Всем пациентам данной группы проводилась профессиональная гигиена полости рта. Проведенный контроль гигиенического состояния ротовой полости свидетельствует, что профессиональная гигиена, индивидуальный подбор зубной пасты и щетки, а также обучение пациентов основным правилам гигиены полости рта привели к статистически значимому (2=3.11; р=0.001866) уменьшению индекса гигиены до 1.2 (0.9; 1.3). В качестве этиотропно-го лечения у больных хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести использовался геля «Метрогил Дента». «Метро-гил Дента» у данной группы пациентов использовали для аппликаций на десну и введения в пародонтальные карманы на турундах. В качестве патогенетической терапии у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести использовалась гепариновая мазь (3-5 процедур).
Забор крови у пациентов и клинически здоровых доноров добровольцев производился в утренние часы, натощак, самотеком в пластиковую пробирку. Кровь для исследования забиралась из локтевой вены в количестве 10 мл. У пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом кровь забирали на 1 и 10 день лечения. Образцы крови подвергали центрифугированию с целью получения сыворотки для
исследования.
Определение концентрации sICAM-1 (soluble Intercellular adhesion molecule-1), sVCAM-1 (soluble Vascular adhesion molecule-1), sPECAM-1 (soluble Platelet-endothelial adhesion molecule-1), sP- и sE-селектинов, ИЛ-1-ß и фактора некроза опухо-ли-а (ФНО-а) проводилось при помощи имму-ноферментного анализа. Для определения концентрации растворимых форм адгезивных молекул эндотелия сосудистой стенки (sICAM-1, sVCAM-1, sPECAM-1, sP- и sE-селектинов) использовали наборы реактивов Human sICAM-1 ELISA BMS201, Human sVCAM-1 ELISA BMS232, Human sPECAM-1 ELISA BMS229, Human sP-selectin ELISA BMS219/4 и Human sE-selectin ELISA BMS205 производства Bender MedSystems GmbH (Австрия). Для оценки изменения цитокинового статуса использовали наборы реактивов фирмы «Вектор-Бест» (Россия) Интерлейкин-1-р-ИФА-БЕСТ и а-ФНО-ИФА-БЕСТ (Россия). Оптическую плотность измеряли при длине волны 450 нм с использованием анализатора Stat Fax 2100 (Awareness Technology Inc., США). Результаты рассчитывали в соответствии с прилагаемым к наборам инструкциям по калибровочным кривым, построенным на основании измерения стандартов.
Статистическую обработку полученных данных осуществляли при помощи пакета программ Statistica 6.0. Проверяли гипотезы о виде распределений (критерий Шапиро-Уилкса). Большинство полученных данных не соответствовали закону нормального распределения, поэтому для сравнения значений использовался U-критерий Манна-Уитни, на основании которого рассчитывались Z-критерий и показатель достоверности p. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05.
Результаты и их обсуждение. Определение концентрации провоспалительных цитокинов в сыворотке крови у больных с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести позволило выявить статистически значимое увеличение ФНО-а в 1.7 раза и ИЛ-1-ß в 1.8 раза по сравнению с группой клинически здоровых доноров добровольцев (табл.). Наличие повышенных концентраций провоспалительных
цитокинов таких, как ФНО-а и ИЛ-1-ß, в сыворотке крови у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести свидетельствует о системном характере воспалительного ответа, возникающего при поражении тканей пародонта. Полученные результаты согласуются с данными других авторов [6,10].
Таблица
Концентрация воспалительных цитокинов и растворимых форм адгезивных молекул эндотелия сосудистой стенки в сыворотке крови у больных с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести
Примечание: в каждом случае приведены медиана, нижний и верхний квартили (25%;75%). Z1, pi - по сравнению с группой контроля; Z2, p2 - по сравнению с группой больных до лечения
В результате проведенных исследований установлено, что при хроническом генерализованном пародонтите легкой степени тяжести происходит изменение концентрации растворимых форм адгезивных молекул эндотелия сосудистой стенки семейства селектинов и суперсемейства иммуноглобулинов. Так, у больных с хронически генерализованным пародон-титом легкой степени тяжести уровень sP-
Группа Показатели Контроль (и=20) Хронический генерализованный пародонтит легкой степени тяжести (n=20)
до лечения после лечения
ФНО-а, пг/мл 1.35(0.45;1.60) 2.35 (1.65;2.6) Z1=3.98; p1=0.000066. 1.5 (0.9; 1.8) Z1=1.37; p1=0.167725; Z2=3.17; p2=0.001481.
ИЛ-1-ß, пг/мл 6.5 (3.5;11) 12 (10;15) Z1=3.38; p1=0.000722. 7.5 (4.5;13) Z1=1.32; p1=0.185021; Z2=2.19; p2=0.028448.
sP-селектин, нг/мл 119 (91;134) 144 (128;164) Z1=3.31; p1=0.000921. 124 (101;135) Z1=0.74; p1=0.456951; Z2=3.16; p2=0.001552.
sE-селектин, нг/мл 37 (32;51) 53 (47;67) Z1=3.31; p1=0.000921. 46 (35;52) Z1=0.78; p1=0.432775; Z2=2.73; p2=0.006294.
sICAM-1,нг/мл 325 (306;349) 353 (341;373) Z1=3.16; p1=0.001552. 343 (319;358) Z1=1.51; p1=0.129823; Z2=2.13; p2=0.032602.
sVCAM-1, нг/мл 744 (647;788) 863 (734;921) Z1=2.55; p1=0.010582. 744 (659;839) Z1=0.41; p1=0.675014; Z2=2.05; p2=0.039802.
sPECAM-1, нг/мл 61 (58;68) 64 (55;69) Z1=0.17; p1=0.860431. 61 (57;66) Z1=0.41; p1=0.675014; Z2=0.27; p2=0.786775.
селектина в сыворотке крови превышал значения контрольной группы на 21%, а sE-селктина - на 43% (табл.).
У пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести выявлено статистически значимое увеличение концентрации в сыворотке крови sICAM-1 в среднем на 9% и sVCAM-1 в среднем на 16% по сравнению с группой клинически здоровых доноров добровольцев (табл.).
Повышение концентраций растворимых форм адгезивных молекул семейства селектинов и суперсемейства иммуноглобулинов у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести могут объясняться увеличением содержания провоспа-лительных цитокинов в сыворотке крови, которые являются основными регуляторами их экспрессии [1]. Различная степень нарушения экспрессии адгезивных молекул семейства селек-тинов и суперсемейства иммуноглобулинов эндотелием, вероятно, объясняются тем, что повышение экспрессии селектинов на поверхности эндотелиальных клеток происходит значительно быстрее по сравнению с молекулами суперсемейства иммуноглобулинов, но не является продолжительной. Так, известно, что мобилизация Р-селектина происходит в течение 2-х минут после стимуляции цитокинами, достигая максимуму к 10 минутам и продолжается около 3-х часов [1].
Обнаружено, что концентрация sPECAM-1 у пациентов с хронически генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести находится в пределах вариабельности группы контроля (табл.). Отсутствие динамики концентрации sPECAM-1 в сыворотке крови при хроническом генерализованном пародонтите легкой степени тяжести, вероятно, являются следствием особенности регуляции экспрессии данной молекулы. В частности, известно, что ФНО-а уменьшает экспрессию РЕСАМ-1 в области межклеточных контактов эндотелиоцитов [1,2].
Установлено, что комплексная терапия у больных с хроническим генерализованным па-родонтитом легкой степени тяжести эффективно снижает уровень провоспалительных ци-токинов в сыворотке крови, что отражает уменьшение системного воспалительного ответа. Так, уровень ФНО-а и ИЛ-1-ß у этих больных после лечения восстанавливаются полно-
стью и концентрации этих цитокинов находится в пределах вариабельности группы клинически здоровых добровольцев (табл.). При оценке эффективности комплексной терапии в коррекции нарушений адгезивных свойств эндотелия сосудистой стенки у больных хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести установлено, что под влиянием проведенного лечения происходит снижение концентрации растворимых форм адгезивных молекул как суперсемейства иммуноглобулинов, так и семейства селектинов. Представленные данные свидетельствуют что под влиянием комплексного лечения концентрации в сыворотке крови sICAM-1, sVCAM-1, sP-селектина и sE-селектина у больных с хроническим генерализованным пародонтитом легкой степени тяжести нормализуются полностью и не имеют статистически значимых различий с показателями контрольной группы (табл.). Следовательно, традиционная терапия хронического генерализованного пародонтита легкой степени тяжести полностью нормализует экспрессию адгезивных молекул эндотелием сосудистой стенки.
Выводы:
1. Развитие хронического генерализованного пародонтита сопровождается возникновением эндотелиальной дисфункции, что проявляется нарушением адгезивных свойств сосудистой стенки.
2. При легкой степени тяжести хронического генерализованного пародонтита повышается экспрессия адгезивных молекул эндотелия семейства селектинов и суперсемейства иммуноглобулинов.
3. Традиционная комплексная терапия при хроническом генерализованном пародон-тите легкой степени тяжести полностью нормализует экспрессию адгезивных молекул эндотелием.
Литература
1. Адгезивные молекулы эндотелия сосудистой стенки / Иванов А.Н., Норкин И. А., Пучиньян Д.М. [и др.] // Успехи физиологических наук. 2014. Т. 45, № 4. С. 34-49.
2. Иванов А.Н., Пучиньян Д.М., Норкин И.А. Барьерная функция эндотелия, механизмы ее регуляции и нарушения // Успехи физиологических наук. 2015. Т. 46, № 2. С. 72-96.
3. Методы диагностики эндотелиальной дис-
функции / Иванов А.Н., Гречихин А.А. , Норкин И. А., Пучиньян Д.М. [и др.] // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. 2014. Т. 13, № 4 (52). С. 4-11.
4. Роль дисфункции эндотелия сосудистой стенки в развитии нарушений микроциркуляции при воспалительных заболеваниях пародонта / Широков В.Ю., Иванов А.Н., Данилов А.С. [и др.] // Стоматология. 2014. Т. 93, № 2. С. 67-69.
5. Широков В.Ю., Иванов А.Н., Данилов А.С. Половые различия изменений функций эндотелия сосудистой стенки в динамике лечения хронического генерализованного пародонтита с использованием миллиметровых волн // Фундаментальные исследования. 2013. № 9-4. С. 756-759.
6. Serum levels of interlukine-1beta and interlu-kine-2 in chronic periodontitis / Al-Ghurabei B.H., Shaker Z.F., Fadhel R. [et al.] // Al-Mustansiriya J. Sci. 2012. V. 23, № 3. Р. 55-62.
7. Chopra R., Patil S.R., Mathur S. Comparison of cardiovascular disease risk in two main forms of periodontitis // Dent. Res. J. (Isfahan). 2012. V. 9, №1. Р. 74-79.
8. Periodontitis and the risk of cardiovascular diseases - review of epidemiological studies / Klosinska A. [et al] // Kardiol. Pol. 2010. V. 68, №8. Р. 973-976.
9. Vita J.A. Endothelial function // Circulation. 2011. V. 124, №25. Р. e906^912.
10. Zhou S.Y., Duan X.Q., Hu R., Ouyang X.Y. Effect of non-surgical periodontal therapy on serum levels of TNF-a, IL-6 and C-reactive protein in periodontitis subjects with stable coronary heart disease // Chin J Dent Res. 2013. V. 16, № 2. Р. 145-151.
References
1. Ivanov AN, Norkin IA, Puchin'yan DM, et al. Adgezivnye molekuly endoteliya sosudistoy stenki. Us-pekhi fiziologicheskikh nauk. 2014;45(4):34-49. Rus-sian.
2. Ivanov AN, Puchin'yan DM, Norkin IA. Bar'er-naya funktsiya endoteliya, mekhanizmy ee regu-lyatsii i narusheniya. Uspekhi fiziologicheskikh nauk. 2015;46(2):72-96. Russian.
3. Ivanov AN, Grechikhin AA, Norkin IA, Pu-chin'yan DMb et al. Metody diagnostiki endoteli-al'noy disfunktsii. Regionarnoe krovoobrashchenie i mikrotsir-kulyatsiya. 2014;13(4 (52)):4-11. Russian.
4. Shirokov VYu, Ivanov AN, Danilov AS, et al. Rol' disfunktsii endoteliya sosudistoy stenki v razvitii naru-sheniy mikrotsirkulyatsii pri vospa-litel'nykh zaboleva-niyakh parodonta. Stomatologiya. 2014;93(2):67-9. Russian.
5. Shirokov VYu, Ivanov AN, Danilov AS. Po-lovye razlichiya izmeneniy funktsiy endoteliya so-sudistoy stenki v dinamike lecheniya khronicheskogo generalizo-vannogo parodontita s ispol'zovaniem millimetrovykh voln. Fundamental'nye issledova-niya. 2013;9-4:756-9. Russian.
6. Al-Ghurabei BH, Shaker ZF, Fadhel R, et al. Serum levels of interlukine-1beta and interlukine-2 in chronic periodontitis. Al-Mustansiriya J. Sci. 2012;23(3):55-62.
7. Chopra R, Patil SR, Mathur S. Comparison of cardiovascular disease risk in two main forms of peri-odontitis. Dent. Res. J. (Isfahan). 2012;9(1):74-9.
8. Klosinska A, et al. Periodontitis and the risk of cardiovascular diseases - review of epidemiological studies. Kardiol. Pol. 2010;68(8):973-6.
9. Vita JA. Endothelial function. Circulation. 2011;124(25):e906-e2.
10. Zhou SY, Duan XQ, Hu R, Ouyang XY. Effect of non-surgical periodontal therapy on serum levels of TNF-a, IL-6 and C-reactive protein in periodontitis sub-jects with stable coronary heart disease. Chin J Dent Res. 2013;16(2):145-51.
УДК: 314.44 Б01: 10.12737/ 17030
ВЛИЯНИЕ ВНЕШНИХ ФАКТОРОВ НА ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ ВОЕННОСЛУЖАЩИХ
К.Г. ГУРЕВИЧ*, О.П. КАРАЖЕЛЯСКОВ**
Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, ул. Делегатская, д. 20, стр. 1, Москва, Россия, 127473 Отдельный медико-санитарный батальон ОДОН ВВ МВД России, Московская область, г. Балашиха.
Аннотация. В статье охарактеризована актуальность исследования заболеваемости военнослужащих острыми болезнями органов дыхания, изучение их факторов риска и причин. Поставлена цель - оценка воздействия внешних факторов на заболеваемость военнослужащих по призыву. Объектом исследования была заболеваемость военнослужащих внутренних войск МВД РФ с 2012 по 2014 г. в соответствии с изменением погодных условий. Проведена оценка проживания военнослужащих в 62 казармах. В результате проведенных исследований оценивается с помощью факторного анализа установлена большая значимость температурного фактора на острые заболевания и на «отсроченную за-
