CC BY
37
ИЗБИРАТЕЛЬНЫЙ МЕХАНИЗМ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ЦИКЛОФЕРОНА
Мамыкова О.И.
ФГБНУ «ВНИИ фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина» (olga.mamykova@yandex.ru)
Введение. Выбор иммуноактивных средств для коррекции нарушений иммунного состояния, вызванного применением необходимой дозы антигельминтного препарата, основан на избирательном механизме иммунобиологического действия [1, 2]. Исследование имммутропной активности средств комбинированной терапии, скрининг препаратов и доз с избирательным механизмом действия проводится для получения иммунологически и терапевтически целесообразных комбинаций препаратов. Это позволяет использовать феномен качественных изменений основных и побочных эффектов лекарственных препаратов при совместном применении. Известно, что иммуноактивные препараты проявляют свои основные эффекты либо при нормальном уровне иммунного ответа, либо в условиях иммунодепрессии факторов иммунитета. Для прогноза возможных осложнений оценка иммунобиологической активности препаратов предполагает изучение иммунотропных эффектов в условиях иммуносупрессии, как клеточного, так и гуморального иммунитета. Настоящие исследования имели целью изучение механизма иммунобиологического действия индуктора продукции интерферона - циклоферона в различных дозах и при различных состояниях иммунной системы организма.
Материалы и методы. Эксперименты выполнены на самцах мышей линии CBA*C57BL/6 массой 18-20 г. В работе применяли иммуномодулятор циклоферон - низкомолекулярный индуктор а и у-интерферонов. Активно действующее вещество меглумина акридонацетат. Препарат вводили внутримышечно в различных дозах.
Иммуномодулирующие свойства циклоферона изучены на моделях иммунодефицитного состояния медикаментозного происхождения. В работе применяли азатиоприн, иммунодепрессант реакций замедленной гиперчувствительности, и циклофосфан - цитостатик, действие которого направлено на подавление гуморального иммунитета.
Иммунобиологические эффекты циклоферона, возможную зависимость эффектов от дозы изучали с помощью тестирования клеточного и гуморального иммунитета в реакциях гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) [4] и прямой реакции гемагглютинации (РГА) [5].
Результаты эксперимента обрабатывали методом вариационной статистики с использованием компьютерной программы STUDENT 200.
Результаты и обсуждение. О состоянии клеточного иммунитета при введении циклоферона судили по способности организма мышей к индукции замедленной гиперчувствительности (рГЗТ). Фармакологические средства или биологически
активные вещества, вызывающие сдвиг индекса реакции ГЗТ, оказывают влияние на клеточный иммунитет.
Изучение иммунотропных эффектов циклоферона при курсовом введении в возрастающих дозах животным с нормальным уровнем иммунного ответа не выявило влияние препарата на реакции клеточного иммунитета. Испытуемый препарат применяли ежедневно в течение нескольких суток с интервалом на третий день в трех дозах (условно: доза № 1, № 2 и № 3). Введение циклоферона не вызывало сдвига индекса реакции ГЗТ. Средние значения индексов реакции при формировании замедленной гиперчувствительности у мышей, получивших циклоферон в дозах № 1 и № 3, отличались от контроля, соответственно, на 4,17 и 0,04%. Наиболее активная доза циклоферона (№ 2) вызывала статистически недостоверное усиление интенсивности клеточной реакции на 12,08%. Таким образом, клетки эффекторы замедленной гиперчувствительности у мышей с нормальным уровнем иммунного ответа толерантны к действию циклоферона.
Результаты изучения действия циклоферона на клеточную реакцию при формировании замедленной гиперчувствительности в условиях медикаментозной иммунодепрессии клеточного иммунитета, вызванной азатиоприном, представлены в таблице 1. Введение иммунодепрессанта реакций замедленной гиперчувствительности - азатиоприна вызывало подавление клеточной реакции на 38,8%. Эффект подавления клеточного иммунитета статистически достоверен (р<0,05). Курсовое назначение циклоферона мышам с медикаментозной иммунодепрессией обеспечивало восстановление клеточной реакции замедленной гиперчувствительности, ингибированной азатиоприном. Циклоферон в дозе № 2 был наиболее активен. Индекс реакции ГЗТ превышал таковой при назначении иммунодепрессанта на 68,8%. Разница с соответствующим показателем контрольной группы составила 3,27%. Циклоферон в дозе № 3 обеспечивал восстановление клеточной реакции на 41,4%. Индекс реакции ГЗТ был ниже показателя контроля на 13,4%.
Таблица 1
Изменение клеточной реакции гиперчувствительности замедленного типа при введении циклоферона мышам с иммунодепрессией клеточного иммунитета
Группа обследованных Препарат Доза мг/кг Индекс рГЗТ, %
I азатиоприн циклоферон №2 13,44±2,76
II азатиоприн циклоферон №3 11,26±2,13
III азатиоприн 7,96±0,97 (р<0,05)
контроль - - 13,02±1,96
Циклоферон в испытанных дозах обладал иммуномодулирующей активностью в условиях иммунодепрессии клеточного иммунитета, восстанавливая функциональную активность клеток-эффекторов замедленной
гиперчувствительности. Отмечена обратная зависимость эффекта модуляции иммунного ответа клеточного типа от дозы препарата.
Титр гемагглютининов в сыворотке крови мышей, иммунизированных тимусзависимым антигеном, отражает состояние гуморального иммунитета, а также функциональную активность и взаимодействие основных клеток иммунной системы, включая главные этапы иммунного ответа - фагоцитоз, презентацию антигена, активизацию, пролиферацию, созревание плазматических клеток и синтез специфических антител [3]. По данным РГА с сыворотками крови животных с нормально функционирующей иммунной системой, гуморальный иммунный ответ толерантен к действию циклоферона в испытанных дозах. На модели иммунодефицитного состояния показано, что курсовое назначение циклоферона и дозах № 2 и № 3 не устраняло подавление антителопродукции, индуцированное цитостатиком. Титр гемагглютининов статистически значимо отличался от контрольных значений, соответственно, на 46,3 и 72,13%. Индексы действия составили 0,54 и 0,28 (табл.2). Циклоферон, в испытанных дозах, и кратности введения не оказывает влияния на реакции гуморального типа, и не обладает модулирующим действием на активность антигенспецифических Т-супрессорных клеток, формирующих клоны антителопродуцентов.
Таблица 2
Интенсивность антителообразования при введении циклоферона мышам с нормальным уровнем иммунного ответа и иммунодепрессией гуморального иммунитета
Группа обследованных Препарат Доза 1о§1/2титра антител Индекс действия
I циклофосфан 2,11±0,60* 0,31
II циклоферон №2 7,1±0,40 1,05
III циклофосфан циклоферон №2 3,63±1,0* 0,54
IV циклоферон № 3 6,77±1,07 1,00
V циклофосфан циклоферон № 3 1,88±0,97* 0,28
контроль - - 6,7±0,51 -
* достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы
При нормальном уровне иммунного ответа иммунокомпетентные клетки, обеспечивающие развитие реакций клеточного типа, толерантны к действию циклоферона. Клетки иммунной системы, обеспечивающие развитие реакций гуморального типа, не зависимо от их функциональной активности на момент фармакологического вмешательства, толерантны к действию циклоферона. Иммунотропная активность циклоферона проявляется в условиях депрессии клеточного иммунитета, и определяется модуляцией функциональной активности
250
клеток-эффекторов замедленной гиперчувствительности. Избирательный механизм иммуномодулирующего действия циклоферона может обусловить практическое применение препарата в комбинированной терапии гельминтозов.
Литература: 1.Мамыкова О.И.//Доклады РАСХН.-2008.-№ 3,- С. 52-55. 2.Мамыкова О.И.//С6. мат. докл. науч. конф «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».-М.-2016.-Вып. 17.-С. 231-234. З.Петров Р.В., Чередеев А.Н.//Успехи современной биологии.-1974.-Т. 77, вып. 1,- С. 90-105. 4.Kitamura K.//J.Immunol. Methods.-1980.-V. 39.-Р. 277-283. 5.Sever J.L.//J. Immunol.-1962.-V. 88,N l.-P. 398-413.
Selective mode of immunomodulatory action of cycloferon. Mamykova O.I. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants.
Summary. One has established that immunotropic activity of cycloferon is displayed in conditions of cellular immunity depression and is determined by modulation of the functional activity of effector cells of delayed hypersensitivity. The selective mechanism of immunomodulatory action of cycloferon can provide its practical application in combination therapy ofhelminthoses.
