CC BY
19
Курский научно-практический вестник "Человек и его здоровье". - 2020. - № 1 УДК 543.42.062:615.07 Б01: 10.21626^^^2020-1/11
ИССЛЕДОВАНИЯ В ОБЛАСТИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА НОВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА «МЕТРОКЛОТРИМАЗОЛЬ», ПРИГОТОВЛЕННОГО НА ТИТАНСОДЕРЖАЩЕЙ ОСНОВЕ
© Кобелева Т.А., Сичко А.И., Замараева А.И., Бессонова Н.С.
Тюменский государственный медицинский университет (ТГМУ)
Россия, 625023, Тюменская область, г. Тюмень, ул. Одесская, д. 54
В медицинской практике актуальным становится вопрос применения новых отечественных лекарственных препаратов, создание которых предусматривает разработку нормативной документации по их анализу.
Цель: разработать способ количественного определения метронидазола и клотримазола в мягкой лекарственной форме на титансодержащей основе с применением спектрофотометрического метода.
Материалы и методы. Для анализа использовали субстанции, этанольные растворы метронидазола и клотримазола, мазь под условным наименованием «Метроклотримазоль», содержащую по 1,0% препаратов в геле «Тизоль». Для осуществления исследований применяли спектрофотометрию в ультрафиолетовой области, используя прибор марки СФ-2000.
Результаты. В ходе изучения спектров поглощения и проведения статистической обработки результатов анализа, установлено, что спектрофотометрическое определение клотримазола и метронидазола можно проводить при длинах волн 260 нм и 312 нм, с относительной погрешностью ±1,88% и ±1,57%, соответственно. В результате исследования мягкой лекарственной формы установлено, что содержание метронидазола, найденное по методу Фирордта и по упрощенной системе уравнений, находится в пределе 0,1028-0,1107 г, клотримазола - 0,0973-0,1117 г, что соответствует допустимым нормам.
Заключение. Проведенные исследования позволили разработать и предложить способ количественного определения клотримазола и метронидазола в мази «Метроклотримазоль» спектрофотометрическим методом, позволяющий устанавливать содержание препаратов в лекарственной форме в пределах допустимых нормативных отклонений.
Ключевые слова: метронидазол; клотримазол; тизоль; спектрофотометрия; количественный анализ.
Кобелева Татьяна Алексеевна - д-р фарм. наук, профессор, зав. кафедрой химии, ТГМУ, г. Тюмень. ORCID iD: 0000-00031004-8721. E-mail: [email protected] (автор, ответственный за переписку)
Сичко Алик Иванович - д-р фарм. наук, профессор, профессор кафедры химии, ТГМУ, г. Тюмень. ORCID iD: 0000-00022200-7807. E-mail: [email protected]
Замараева Анна Игоревна - аспирант кафедры химии, ТГМУ, г. Тюмень. ORCID iD: 0000-0002-8527-2966. E-mail: [email protected]
Бессонова Наталья Сергеевна - канд. биол. наук, доцент кафедры химии, ТГМУ, г. Тюмень. ORCID iD: 0000-0002-50140736. E-mail: [email protected]
Несмотря на значительное развитие промышленной фармации и рост номенклатуры готовых лекарственных средств, наблюдается тенденция увеличения потребности в экстемпо-ральных мазях [1, 7]. Нами предложена мягкая лекарственная форма «Метроклотримазоль», изготовленная на основе перспективного геля «Тизоль». Мазь может найти применение в дерматологии и гинекологии как комбинированное противомикробное, противопротозойное и противогрибковое средство [6]. Гелевая структура тизоля будет обеспечивать пролонгированную трансдермальную доставку клотримазола и метронидазола в патологический очаг, а также оказывать противовоспалительное, анальгети-ческое, антисептическое и противозудное действие [3, 5]. При создании новых препаратов необходимо разрабатывать нормативно-техническую документацию, позволяющую оценивать качество их приготовления.
Цель исследования: разработать способ количественного определения метронидазола и клотримазола в мягкой лекарственной форме на титансодержащей основе с применением спек-трофотометрического метода.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом исследования является мягкая лекарственная форма «Метроклотримазоль», содержащая по 1,0% метронидазола и клотримазола в геле «Тизоль», смесь 1,0% этанольных растворов препаратов. В работе применяли достаточно востребованную в фармацевтическом анализе спектрофотометрию в ультрафиолетовой области, используя прибор марки СФ-2000 [2, 4].
При количественном определении фармакологически активных соединений в искусственной лекарственной форме (0,1 г метронидазола,
Таблица 1
Table 1
Результаты спектрофотометрического анализа клотримазола и метронидазола в искусственной смеси Results of spectrophotometric analysis of Clotrimazole and Metronidazole in an artificial mixture
№ Найдено Found Метрологические характеристики Metrological characteristics
Клотримазол Clotrimazole Метронидазол Metronidazole
С, моль/л С, mol/l W, % С, моль/л С, mol/l W, %
1 4.70-10"5 101.27 9.57-10"5 102.40 Клотримазол Clotrimazole ю = 100.30%. S = 2.258 = 0.798. £а = 1.89 А = ± 1.88% А = 100.30 ± 1.89% Метронидазол Metronidazole ю = 100.51%. S = 1.882 Sra = 0.665. £а = 1.58 А = ± 1.57% А = 100.51 ± 1.58%
2 4.55-10"5 98.04 9.23-10"5 98.76
3 4.59-10"5 98.90 5.52-10"5 101.86
4 4.76-10"5 102.56 9.57-10"5 102.40
5 4.78-10"5 102.99 9.57-10"5 102.40
6 4.55-10"5 98.04 9.23-10"5 98.76
7 4.55-10"5 98.04 9.23-10"5 98.76
8 4.76-10"5 102.56 9.23-10"5 98.76
0,1 г клотримазола, этанола до 10,0 мл) поступали следующим образом: в мерную колбу вместимостью 50 мл вносили 1 мл этанольного раствора модельной смеси и этанолом доводили объем жидкости в колбе до метки. К 2 мл полученного раствора добавляли этанол до общего объема 25 мл и измеряли оптическую плотность смеси при длинах волн 260 нм и 312 нм с помощью спектрофотометра в кювете с толщиной рабочего слоя 1 см по отношению к этиловому спирту. Для определения погрешности анализа лекарственных препаратов провели восемь параллельных определений и полученные результаты статистически обработали (таблица 1).
На основании проведенных исследований количественное определение препаратов в мази предложено проводить следующим образом: навеску лекарственной формы около 0,1 г (точная масса) переносят в стеклянный химический стаканчик, добавляют 25 мл 95% раствора этанола и смесь перемешивают до получения дисперсной системы. После растворения лекарственных препаратов полученную смесь фильтруют через бумажный складчатый фильтр. Далее, к 4 мл фильтрата прибавляют этанол до общего объема 10 мл и измеряют оптическую плотность приготовленного раствора при длинах волн 260 нм и 312 нм по отношению к раствору сравнения (этанольная вытяжка геля «Ти-золь», полученная аналогичным способом). Содержание лекарственных препаратов в граммах рассчитывают по формуле:
QT
(преп) • М(преп) • У(общ) • V2
m
(преп)
> • V • P
-, где:
1000 • а(мази) • ^
С(преп) - концентрация лекарственного препарата, найденная по методу Фирордта или упрощенной системе уравнений, моль/л; У(общ) -объем этанола, в котором растворена навеска мази (25 мл); а(мази) - навеска лекарственной формы, г; VI ,У2 - фактор разбавления (4 мл и 10 мл соответственно); Р - масса лекарственной формы (10 г).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Для разработки способа количественного определения двух соединений в лекарственной форме с гелем «Тизоль» изучили спектры поглощения этанольных растворов метронидазола и клотримазола в УФ-области. Установлено, что оба лекарственных препарата поглощают свет в пределе длин волн 215-360 нм (рис. 1).
Спектры поглощения двух соединений перекрываются, поэтому каждое из них в смеси количественно определять, применив основной закон светопоглощения, невозможно.
Для аналитических целей нами использован метод К. Фирордта, по которому необходимо знать молярные коэффициенты светопоглоще-ния при максимумах и минимумах в пределах определенных концентраций. В этом случае-оптическая плотность смеси двух компонентов
(1, 2) при двух длинах волн (А.1, А.2) выражается уравнениями:
А(Х0 = £1(А1) ■ С! ■ 1 + 82(А1) ■ С2 ■ 1 А(^) = £1^2) ■ С1 ■ 1 + £2(^2) ■ С 2 ■ 1, где: С1 и С2 - концентрации компонентов, моль/л; £1(А1), £1(А2), £2(А1), £2(А2) - молярные коэффициенты светопоглощения при длинах волн А1и А.2.
После решения системы уравнений и приняв, что 1 = 1 см, концентрацию С1 и С2 рассчитывают по уравнениям:
82(а2) ■ а(а1) - е2сх!) ■ а(а2)
с =
с, =
■ £2 (^2) - б1Ф2) -£2(^1) ei(xi) ■ a(à2) - £i(à2) ■ a(ài)
£1(^1) ■ £2(^2) - £1(^2) -£2(^1) Точность определения концентраций повышается с увеличением разности £1(А1)/£2(А1)-
3 -
2 -
1 -
£1(^2)-£2(^2) или £2(^2)/£1(^2)-£2(^1)-£1(^1). Поэтому для нахождения оптимальных длин волн при количественном определении исследуемых лекарственных препаратов в смеси спектрофото-метрическим методом строили кривую зависимости £(мет)-£(клот) от длины волны (рис. 2), экстремальные точки на которой соответствуют аналитическим длинам волн и А.2. Минимум наблюдается при длине волны 260 нм, что соответствует второму максимуму светопоглощения клотримазола. На кривой резко выражен максимум в области 312 нм, который совпадает с максимальным поглощением метронидазола. Полученные результаты позволили выбрать для анализа за оптимальные длины волн 260 нм и 312 нм.
нм
"1-1-1-1-1-1-1 I I-1-1-1-Г
215 235 255 275 295 315 335 355
Рис. 1. Спектры поглощения метронидазола (1) и клотримазола (2) в этаноле.
Примечание: 1 - концентрация метронидазола 1,0-104 моль/л; 2 - концентрация клотримазола 3,0-10 4 моль/л.
Fig. 1. Absorption spectra of Metronidazole (1) and Clotrimazole (2) in ethanol.
Note: 1 - the concentration of Metronidazole is 1.0-10 mol/l; 2 - the concentration of Clotrimazole is 3.0-10 mol/l.
10 -|
8 -
6 -
4 -
2
е(мет) - е(клот) • 103
I-1-1—I—■—г
-A,
нм
245 255 265 275 285 295 305 315 325
Рис. 2. Зависимость е(мет)-е(клот) от длины волны (концентрация раствора метронидазола
1,0-10 4 моль/л, клотримазола - 3,0-10 4 моль/л).
Fig. 2. Dependence of e(met)-£(clot) on the wavelength (concentration of Metronidazole solution 1.0-10 4 mol/l, Clotrimazole 3.0-10 mol/l).
-4
0
nm
0
nm
Обозначив концентрацию клотримазола через Сь молярные коэффициенты светопоглоще-ния £1(260), £1(312), а метронидазола - С2, £2(260), £2(312), систему уравнений выражали:
А(260) = £1(260) ■ С1 + £2(260) ■ С2 А(312) = £1(312) ■ С1 + £2(312) ■ С2 На основании решения системы представленных уравнений, подставляя значения молярных коэффициентов поглощения (таблица 2), концентрацию клотримазола и метрони-дазола рассчитывали по формулам:
е2(312) ■ а(260) - е2(260) ■ а(312)
с =
с, =
81(260) ■ е2(312) - е1(312) ■ е2(260) е1(260) ■ а(312) - е1(312) ■ а(260)
е1(260) ■ е2(312) - е1(312) ■ £2(260) На искусственной смеси, с точной концентрацией ингредиентов согласно прописи, проведена апробация по анализу метронидазола и клотримазола при совместном присутствии. Как показали экспериментальные данные, этаноль-ные растворы клотримазола с концентрацией меньше 3,010 4 моль/л практически не поглощают свет при длине волны 312 нм. Это дает осно-
вание применить видоизмененный (упрощенный) метод Фирордта и количественно определять метронидазол в присутствии клотримазо-ла. Анализ двухкомпонентной смеси упрощается, система уравнений при £1(312) = 0 выражается в следующем виде:
А(260) = £1(260) ■ С1 + £2(260) ■ С2 и А(312) = £2(312) ■ С2.
После решения данной системы уравнений молярную концентрацию клотримазола (С1) и метронидазола (С2) предложено рассчитывать по формулам:
а(260) - е2(260) ■ с2 а(312)
с =
Со =
е1(260) 2 е2(312)
Результаты параллельных опытов количественного определения лекарственных веществ в модельной смеси приведены в таблице 3.
Установлено, что масса клотримазола (т1), найденная по методу Фирордта и упрощенной системе уравнений, находится в пределе 0,0888-0,1140 г, метронидазола (т2) -0,0920-0,1089 г, что соответствует допустимым отклонениям в массе отдельных доз,
Молярные коэффициенты поглощения метронидазола и клотримазола Molar absorption coefficients of Metronidazole and Clotrimazole
Таблица 2
Table 2
Лекарственный препарат Drug С, моль/л С, mol/l А(260 нм) А(260 nm) £(260 нм) е(260 nm) А(312 нм) А(312 nm) £(312 нм) £(312 nm)
Клотримазол Clotrimazole -4 3.0-10 4 0.318 1060.33 0.015 50
Метронидазол Metronidazole -4 1.0-10 4 0.163 1630 0.813 8130
Результаты анализа лекарственных веществ в модельной Results of drug analysis in the model mixture
смеси
Таблица 3
Table 3
А(260) А(312) Сь моль/л Cj, mol/l С2, моль/л С2, mol/l m1s г m1, g m2, г m2, g
Метод Фирордта Fierordt method
0.21 0.80 4.72-10-5 9.81-10-5 0.1017 0.1049
0.22 0.82 5.29-10-5 10.05-10-5 0.1140 0.1075
0.19 0.72 4.25-10-5 8.83-10-5 0.0938 0.0945
0.22 0.83 5.10-10-5 10.18-10-5 0.1099 0.1089
Упрощенный метод Фирордта The simplified Fierordt method
0.20 0.78 4.12-10-5 9.59-10-5 0.0888 0.1026
0.20 0.72 5.24-10-5 8.86-10-5 0.1129 0.0948
0.19 0.70 4.70-10-5 8.60-10-5 0.1013 0.0920
0.19 0.72 4.30-10-5 8.86-10-5 0.0927 0.0948
Таблица 4
Table 4
Результаты анализа лекарственных веществ в мази Results of drug analysis in ointments
Взято Taken Найдено Found Допустимые нормы Acceptable standards
m (мази), г m (ointments), g m (тизоля), г m (tizol), g С1, моль/л Cj, mol/l С 2, моль/л С2, mol/l m1, г g m2, г m2, g г g ± %
Метод Фирордта Fierordt method
0.1021 0.1023 4.72-10"5 9.81-10"5 0.0996 0.1028 0.085-0.115 15.0
0.1021 0.1023 5.29-10"5 10.05-10"5 0.1117 0.1055
0.1021 0.1023 5.10-10"5 10.18-10"5 0.1077 0.1067
0.1021 0.1023 4.72-10"5 10.43-10"5 0.0996 0.1093
Упрощенный метод Фирордта The simplified Fierordt method
0.1034 0.1023 4.67-10"5 10.46-10"5 0.0973 0.1082 0.085-0.115 15.0
0.1034 0.1023 5.43-10"5 10.58-10"5 0.1132 0.1095
0.1034 0.1023 5.24-10"5 10.70-10"5 0.1092 0.1107
0.1034 0.1023 4.87-10"5 10.33-10"5 0.1015 0.1067
представленным в приказе МЗ РФ от 26.10.2015 г. № 751н «Об утверждении правил изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность».
Проведенные исследования позволили разработать и предложить способ количественного определения клотримазола и метронидазола в мази «Метроклотримазоль» спектрофотометри-ческим методом. Согласно полученным результатам (таблица 4) установлено, что масса кло-тримазола, найденная по методу Фирордта и по упрощенной системе уравнений, находится в пределе - 0,0973-0,1117 г, метронидазола -0,1028-0,1107 г. Это соответствует допустимым отклонениям в граммах и процентах, предусмотренных нормативной документацией по фармацевтическому анализу мягких лекарственных форм.
Совокупность проведенных исследований позволяет сделать следующие выводы:
1. Изучены оптимальные условия проведения спектрофотометрического анализа. Установлено, что для количественного определения клотримазола и метронидазола рационально использовать длины волн 260 нм и 312 нм.
2. Разработан способ количественного спек-трофотометрического определения метронида-зола и клотримазола в мягкой лекарственной форме на титансодержащей основе, позволяющий устанавливать содержание препаратов
в мази в пределах допустимых нормативных отклонений.
3. Предлагаемый способ анализа метронидазола и клотримазола в мягкой лекарственной форме «Метроклотримазоль» может быть рекомендован для включения в нормативную документацию по установлению качества изготовления мази.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
ИСТОЧНИКИ ФИНАНСИРОВАНИЯ
Авторы заявляют об отсутствии финансирования.
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
1. Аюпова Г.В., Лукманова К.А., Федотова А.А., Катаев В.А., Валеева Л.А. Разработка состава и технологии ранозаживляющего биопрепарата в виде геля. Медицинский вестник Башкортостана. 2016;11(5):87-90 [Ayupova G.V., Lukmanova K.A., Fedotova A.A., Kataev V.A., Valeeva L.A. Development of composition and technology of wound-healing biological product in a gel form. Bashkortostan Medical Journal. 2016;11(5-65):87-90 (in Russ.)]
2. Беликов В.Г. Анализ лекарственных веществ фотометрическими методами. Опыт работы отечественных специалистов. Российский химический журнал. 2002;46(4):52-56 [Belikov V.G. Analysis of medicinal substances by photometric methods. Experience of domestic specialists. Russian journal of general chemistry. 2002;46(4):52-56 (in Russ.)]
ment of osmotic and transcutanic activity of new medicinal forms "Metamiosol" and "Penylbutazol". Medical science and education in the Urals. 2018; 19(3-95):56-62. (in Russ.)]
6. Кравченко Е.Н., Куклина Л.В., Набока М.В., Охлопков В.А. Вагинальные инфекции у беременных: возможности коррекции вагинальным гелем. Доктор.Ру. 2017;(7(136)):15-20 [Kravchen-ko E.N., Okhlopkov V.A., Naboka M.V., Kuklina L.V. Vaginal infections in pregnant women: treatment options with vaginal gel. Doktor.Ru. 2017;(7(136)):15-20. (in Russ.)]
7. Сабиржан Р.Р., Егорова С.Н. Аптечное изготовление лекарственных форм для лечебно-профилактических учреждений: изучение современной номенклатуры. Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. 2012;10-2(129):31-35 [Sabirzhan R.R., Egorova S.N. Pharmacy production of dosage forms for medical and preventive institutions: study of modern nomenclature. Belgorod State University Scientific Bulletin. Medicine. Pharmacy. 2012;10-2(129):31-35. (in Russ.)]
Поступила в редакцию 25.02.2020 Подписана в печать 23.03.2020
Для цитирования: Кобелева Т.А., Сичко А.И., Замараева А.И., Бессонова Н.С. Исследования в области спектрофотометри-ческого анализа нового лекарственного препарата «Метроклотримазоль», приготовленного на титансодержащей основе. Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2020;(1):89-95. БОТ: 10.21626/уе8Ш1к/2020-1/11.
RESEARCH IN THE FIELD OF SPECTROPHOTOMETRIC ANALYSIS OF A NEW TITANIFEROUS DRUG "METROCLOTRIMAZOLE"
© Kobeleva T.A., Sichko A.I., Zamaraeva A.I., Bessonova N.S.
Tyumen State Medical University (TSMU)
54, Odesskaya St., Tyumen, Tyumen region, 625023, Russian Federation
In medical practice, the issue of the use of new domestic medicines becomes relevant, and the production of these medicines involves the development of regulatory documentation for their analysis.
Objective: to develop the method of quantitative determination of Metronidazole and Clotrimazole in a soft medicinal form on titaniferous basis with the use of spectrophotometry method.
Materials and methods. For analysis, we used substances, ethanol solutions of Metronidazole and Clotrimazole, an ointment under the conventional name Metroclotrimazole containing 1.0% of the preparations in Tizol gel. To carry out the research, spectrophotometry in the ultraviolet region was used with a SF-2000 device.
Results. Studying the absorption spectra and performing the statistical processing of the analysis results, it was found that spectrophotometric determination of Clotrimazole and Metronidazole can be carried out at wavelengths of 260 nm and 312 nm, with a relative error of ± 1.88% and ± 1.57%, respectively. As a result of the study of the soft dosage form, it was found that the content of Metronidazole, found by the Fierordt method and the simplified system of equations, is in the range of 0.1028-0.1107 g, Clotrimazole - 0.0973-0.1117 g, which corresponds to acceptable standards.
Conclusion. The studies conducted allowed us to develop and propose a method for the quantitative determination of Clotrimazole and Metronidazole in the ointment "Metroclotrimazole" spectrophotometrically, which enables to set the content of the drugs in the dosage form within the allowable regulatory deviations.
Keywords: Metronidazole; Clotrimazole; Tizol; spectrophotometry; quantitative analysis.
Kobeleva Tatyana A. - Doctor of Pharmacy, Professor, Head of Department of Chemistry, TSMU, Tyumen, Russian Federation. ORCID iD: 0000-0003-1004-8721. E-mail: [email protected] (correspondence author)
Sichko Alik I. - Doctor of Pharmacy, Professor, Professor of Department of Chemistry, TSMU, Tyumen, Russian Federation. ORCID iD: 0000-0002-2200-7807. E-mail: [email protected]
3. Дьячкова Л.В. Изучение структурно-механических свойств мазевых основ. Вестник фармации. 2012;3(57):23-28 [Dyachkova L.V. Study of structural and mechanical properties of ointment bases. Vestnik farmatsii. 2012;3(57):23-28 (in Russ.)]
4. Евстафьева Т.Г., Бессонова Н.С., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Применение спектрофотометрии в анализе нового лекарственного препарата «Ме-татетразоль». Журнал научных статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2018;20(12):55-59 [Evstafieva T.G., Bessonova N.S., Kobeleva T.A., Sichko A.I. The use of spectrophotometry in the analysis of the new drug "Metatetrazol". The journal of scientific articles «Health and education millennium» 2018;20(12):55-59 (in Russ.)]
5. Евстафьева Т.Г., Бачева Н.Н., Бессонова Н.С., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Применение спектрофо-тометрического анализа для установления осмотической и транскутанной активности новых лекарственных форм «Метамиозоль» и «Фенилбу-тазоль». Медицинская наука и образование Урала. 2018;19(3-95):56-62 [Evstafieva T.G., Bacheva N.N., Bessonova N.S., Kobeleva T.A., Sichko A.I. Application of spectrophotometric analysis for the settle-
Zamaraeva Anna I. - Post-Graduate Student of Department of Chemistry, TSMU, Tyumen, Russian Federation. ORCID iD: 00000002-8527-2966. E-mail: [email protected]
Bessonova Natalya S. - PhD in Biology, Associate Professor of Department of Chemistry, TSMU, Tyumen, Russian Federation. ORCID iD: 0000-0002-5014-0736. E-mail: [email protected]
CONFLICT OF INTEREST SOURCE OF FINANCING
The authors declare the absence of obvious and potential The authors state that there is no funding for the study.
conflicts of interest related to the publication of this article.
Received 25.02.2020 Accepted 23.03.2020
For citation: Kobeleva T.A., Sichko A.I., Zamaraeva A.I., Bessonova N.S. Research in the field of spectrophotometric analysis of a new titaniferous drug "Metroclotrimazole". Kursk Scientific and Practical Bulletin "Man and His Health". 2020;(1):89—95. DOI: 10.21626/vestnik/2020-1/11.
