CC BY
69
Medical & pharmaceutical
JOU RNAL "PU LSE "
https://clinical-journal.ru
2022. Vol. 24. № 6
E-ISSN 2686-6838
RESEARCH ARTICLE УДК 615.1 Corresponding Author: Kisieva Mariana Tengizovna - candidate of pharmaceutical sciences; headofthe Department of pharmacy, North-Ossetian State Medical Academy, Vladikavkaz E-mail: mananakisieva@mail.ru
© Kisieva М.Т., Bidarova F.N., Sabeeva A.N. - 2022 ***| Accepted: 23.06.2022
Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-6-39-44
ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СОЗДАНИЮ КОМБИНИРОВАННОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ
Кисиева М.Т., Бидарова Ф.Н., Сабеева А.Н.
ФГБОУ ВО СОГМА, г. Владикавказ, Российская Федерация
Аннотация. В настоящее время поиск и создание лекарственных препаратов антиоксидантного действия обладает высокой актуальностью и практической значимостью. С этой точки зрения представляет интерес лекарственные вещества, такие как таурин и аскорбиновая кислота, дигидрокверцетин, оказывающие важное значение в регуляции антиоксидантной системы.
Предлагаемое лекарственное средство позволит корректировать оксидативные процессы, иммунное состояние организма, улучшит все метаболические процессы, устранит все свободные радикалы, которые образуются в процессе жизнедеятельности. Предлагаемая композиция (таурин, аскорбиновая кислота, дигидрокверцетин) имеет важнейшее значение в поддержании и стабилизации антиоксидантной защиты организма в профилактике и лечении различных заболеваний, в том числе, вирусных заболеваний, для которых характерно усиление свободнорадикальных процессов и при истощении естественной антиоксидантной защиты организма.
Для оценки рынка антиоксидантных лекарственных препаратов и практической значимости разработок эффективного лекарственного средства антиоксидантного действия были проведены маркетинговые исследования, которые позволили подтвердить актуальность планируемых исследований.
По результатам исследований литературных данных обоснован состав и дозировки предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия, включающего таурин, аскорбиновую кислоту, дигидрокверцитин и вспомогательные вещества в виде порошка.
Для идентификации ингредиентов разработанного лекарственного средства антиоксидантного действия предложены качественные цветные реакции, которые чувствительны и специфичны.
Количественное определение предложено проводить спектральными (таурина, дигидрокверцетина) и титриметрическим (йодатометрически) методами (аскорбиновой кислоты).
Методики количественного анализа ингредиентов валидированы (специфичны, чувствительны и линейны). По результатам проведенных экспериментальных исследований разработаны нормы качества предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия.
Ключевые слова: комбинированное лекарственное средство, антиоксидантное действие, таурин, аскорбиновая кислота, дигидрокверцетин, методики анализа, валидационные характеристики.
RESEARCH ON THE CREATION OF ANTIOXIDANT COMBINATION DRUG
KisievaM.T., Bidarova F.N., Sabeeva A.N.
North-Ossetian State Medical Academy, Vladikavkaz, Russian Federation
Abstract. Currently, the search and creation of antioxidant drugs has high relevance and practical significance. From this point of view, drugs such as taurine and ascorbic acid, dihydroquercetin are of interest, which are important in regulating the antioxidant system.
The proposed drug will allow correcting oxidative processes, the immune state of the body, improve all metabolic processes, eliminate all free radicals that are formed in the process of vital activity. The proposed composition (taurine, ascorbic acid, dihydroquercetin) is essential in maintaining and stabilizing the body's antioxidant protection in the prevention and treatment of various diseases, including viral diseases, which are characterized by an increase in free radical processes and in the depletion of the body's natural antioxidant protection.
To assess the antioxidant drug market and the practical significance of the development of an effective antioxidant drug, marketing studies have been conducted that have confirmed the relevance of the planned studies.
Based on the results of studies of the literature data, the composition and dosage of the proposed antioxidant drug, including taurine, ascorbic acid, dihydroquercitin and auxiliary substances in the form ofpowder, is justified.
To identify the ingredients of the developed antioxidant drug, qualitative color reactions are proposed that are sensitive and specific.
Quantitative determination is proposed to be carried out by spectral (taurine, dihydroquercetin) and titrimetric (iodatometric) methods (ascorbic acid).
The assay methods for the ingredients are validated (specific, sensitive and linear).
Based on the results of experimental studies, the quality standards of the proposed antioxidant drug have been developed.
Включен в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК
при Министерстве образования и науки Российской Федерации —--—
https://c1inical-journai.ru
E-ISSN 2686-6838
Key words: combined drug, antioxidant effect, taurine, ascorbic acid, dihydroquercetin, analysis methods, validation characteristics.
Введение. В последние годы все большее признание получает группа лекарственных препаратов антиоксидантного действия. Фармакологическое действие и применение лекарственных препаратов данной группы вызывают большой интерес в области исследований и создания лекарственных средств. Проблемы загрязнения окружающей среды,
несбалансированное питание, высокие
психоэмоциональные нагрузки и многое другое провоцируют образование свободных радикалов, вызывая тем самым оксидативный стресс, которая играют существенную роль в развитии многих заболеваний. Биологически активные вещества за счёт уничтожения свободных радикалов, которые образуются в процессе жизнедеятельности организма из-за вышеуказанных факторов, проявляют свою фармакологическую
антиоксидантную активность. На сегодняшний день практическую значимость приобретают
исследования по изысканию новых фармакологических средств для коррекции антиоксидантных систем, метаболических сдвигов, возникающих при патологических состояниях, в развитии которых важная роль принадлежит неблагоприятным факторам окружающей среды и стрессу, которые в свою очередь пагубно влияют на состояние организма, подавляя иммунную систему в целом.
Таурин защищает клеточные мембраны от повреждений, а также укрепляет иммунную систему стимулируя высвобождение интерлейкина-1 в макрофагах, а также повышая фагоцитарную и бактерицидную деятельность нейтрофилов [1]. Универсальными регуляторами антиоксидантной защиты и метаболических процессов являются аминокислоты, среди которых немало важное значение имеет бета-аминоэтансульфокислота (таурин) [1]. Применение таурина в последнее время получает все большее признание. Это связано с наличием у него уникального набора положительных эффектов:
мембраностабилизирующего, антиоксидантного, антиатерогенного, кардио-, радио- и гепатопротекторного. Обладает
противовоспалительным эффектом,
реализующимся за счет нейтрализации хлорноватистой кислоты с образованием таурина хлорамина. Уменьшает образование супероксида путем конъюгации с уридином tRNA в митохондриях. Генерирует АТФ путем кодирования митохондриального белка ND6. Предотвращает проницаемость митохондриальной мембраны и апоптоз. Улучшает течение митохондриальной болезни, синдрома MELAS, предоставляя субстрат для конъюгации таурина [1].
Сильнейшим антиоксидантом является аскорбиновая кислота, назначение которой - защита внутренних органов и тканей от повреждений различной этиологии, предотвращение образования злокачественных опухолей, а также способствует укреплению иммунной системы, снижает силу воспалительных процессов, помогает выводить токсины [5]. Антиоксидантное действие проявляется в борьбе со свободными радикалами, угнетении образования раковых клеток. Аскорбиновая кислота благотворно влияет на энергетические процессы, повышая выносливость, укрепляет сосуды, нормализует проницаемость их стенок, снижает риск развития атеросклероза. Концентрация аскорбиновой кислоты в организме влияет на состояние нервной системы, стрессоустойчивость. В настоящее время хорошо известно, что аскорбиновая кислота имеет противовирусные свойства, поддерживает активность лимфоцитов, повышает производство интерферона-а, модулирует цитокин, уменьшает воспаление, улучшает и восстанавливает функцию эндотелия и митохондрий, кроме того, играет важнейшую роль в реакции на стресс и показывая многообещающие результаты при профилактике и лечении больных коронавирусной инфекцией [5].
Дигидрокверцетин в настоящее время является веществом, обладающим самой высокой антиоксидантной активностью [4].
Дигидрокверцетин - уникальный природный акцептор свободных радикалов кислорода, гепатопротектор, радиопротектор, вещество, обладающее противовоспалительными,
обезболивающими, иммунокоррегирующими
свойствами [4]. За счет высоких комплексообразующих свойств он выводит из организма тяжелые металлы, в том числе радионуклиды, способствует восстановлению тонуса кровеносных сосудов, нормализации липидного спектра крови и замедляет развитие атеросклеротических бляшек.
В ходе многочисленных научных исследований было доказано, что дигидрокверцетин благотворно влияет на состояние сосудистой стенки капилляров, уменьшает вязкость крови и препятствует тромбообразованию [4]. У людей с бронхолегочными заболеваниями при пневмонии, хроническом бронхите, астме, хронической обструктивной болезни легких он способствует уменьшению частоты приступов, более быстрому исчезновению кашля, одышки, отечности бронхов, улучшению проходимости бронхов,
восстановлению легочной ткани и нормального дыхания. Дигидрокверцетин можно использовать для профилактики и лечения хронических воспалительных процессов вирусной и
https://clinical-journal.ru
E-ISSN 2686-6838
бактериальной природы, опухолевых заболеваний, аутоиммунных заболеваний [4]. Окислительный стресс является ключевым фактором развития СОУШ-19 у значительного количества пациентов. Особенно это касается тяжелых случаев, при которых проявляется легочная дисфункция, цитокиновый шторм (интенсивная воспалительная реакция) и вирусный сепсис. Сегодня активно изучаются перспективы использования
дигидрокверцетина в качестве регулятора окислительного стресса в составе комплексной терапии при COVID-19 и для профилактики возможных осложнений [4].
В настоящее время из-за всплеска вирусных заболеваний широкое применение находят препараты, обладающие антиоксидантной активностью. Их способность улучшать утилизацию организмом кислорода и снижать потребность в нем органов и тканей, суммарно повышая устойчивость организма к неблагоприятным воздействиям, блокировать активацию свободно-радикальных процессов и перекисного окисления липидов клеточных мембран, восстанавливая свободные радикалы (антиоксиданты), позволяет эффективно
использовать их в клинической практике для лечения короновирусной инфекции. Таким образом, актуальность исследований в области поиска и разработок лекарственных средств
антиоксидантного действия не вызывает сомнений.
Целью настоящих исследований. Целью исследований является создание лекарственного средства на основе естественного метаболита (таурина) антиоксидантного действия.
Для реализации поставленной цели необходимо было выполнить следующие задачи:
1. Рассмотреть литературные данные по вопросам антиоксидантных свойств, структуры, методов анализа таурина, аскорбиновой кислоты и дигидрокверцетина.
2. Провести маркетинговое исследование рынка антиоксидантных лекарственных препаратов.
3. Обосновать состав предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия.
4. Разработать методики анализа лекарственного средства предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия.
5. Провести валидационную оценку методик анализа предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия.
Материалы и методы. Объектом исследования была выбрана композиция таурина в комбинации с аскорбиновой кислотой и дигидрокверцетином, что обусловлено потенцированием антиоксидантного действия при совместном присутствии в одном лекарственном средстве.
В исследовании были использованы различные методы: контент-анализ, химический, физический, физико-химический, математический,
статистический методы.
Результаты и обсуждение. По результатам маркетинговых исследований было установлено, что в настоящее время в России зарегистрировано около 30 наименований (по МНН) лекарственных средств различных химических классов, обладающих антиоксидантным действием, из них 27 лекарственных препаратов отнесены к фармако-терапевтической группе «антиоксиданты».
В настоящее время в клинической практике нашли применение три препарата производных 3-оксипиридина - эмоксипин, мексидол и этоксидол (метилэтилпиридинола гидрохлорид (МЭП гидрохлорид), этилметилгидроксипиридина
сукцинат (ЭМГП сукцинат) и
этилметилгидроксипиридина малат (ЭМГП малат), а также производные полихинонов триметазидин и гипоксен в качестве ингибиторов
свободнорадикальных процессов.
Ассортимент данной группы лекарственных препаратов представлен следующими видами лекарственных форм: твердыми, жидкими и растворами для инъекций.
Результаты анализа рынка антиоксидантных лекарственных препаратов на фармацевтическом рынке выявили, что данная группа на рынке представлена минимальным ассортиментом, что говорит нам о необходимости исследований и разработок в данном направлении.
Кроме того, на сегодняшний день фармацевтический рынок испытывает
коллосальные потери лекарственных препаратов различных фармакологических групп зарубежных производителей, поэтому отечественные разработки имеют как никогда первостепенное значение.
По результатам анализа литературных данных был обоснован состав комбинированного антиоксидантного лекарственного средства на один порошок:
Таурин - 500 мг в сутки; Аскорбиновая кислота - 500 мг в сутки; Дигидрокверцитин - 100 мг в сутки. Вспомогательные вещества: Фруктоза (корригент) - 850мг Лимонная кислота (консервант) - 50мг
Применение: предполагается прием 1 порошка (2,0г) после разведения в 100 мл прокипяченной охлажденной воды однократно (в качестве профилактического средства) и двухкратно (при терапии). Упаковка порошков по 2,0 г №30.
Создание комбинированного лекарственного средства на основе таурина, аскорбиновой кислоты и дигидрокверцитина привлекает внимание, главным образом, своим антиоксидантным, иммуномодулирующим, противовоспалительным свойствами.
https://clinical-journal.ru
E-ISSN 2686-6838
В настоящее время актуальность и практическая значимость композиции таурина, аскорбиновой кислоты и дигидрокверцитина не вызывает сомнений. Такая комбинация позволяет потенцировать фармакологические свойства, в частности, антиоксидантное действия, что обусловлено как составом и содержанием, так и различными путями воздействия компонентов на патогенетические механизмы.
Предлагаемое лекарственное средство «Таусквер» представляет собой многокомпонентное лекарственное средство. Поэтому на первоначальном этапе исследований необходимо было изучить взаимное влияние ингредиентов (таурина, аскорбиновой кислоты и
дигидрокверцетина, и вспомогательных веществ). Для этого были взяты навески ингредиентов в количествах, равных их содержанию на разовую дозу, и растворены в 100 мл воды очищенной. Оценку взаимного влияния проводили по изменению интенсивности окраски в присутствии другого ингредиента при хранении в термостате (600С) в течение суток и аналогичными растворами, хранящимися при комнатной температуре в течение суток [3]. Компоненты лекарственного средства не оказывали влияния друг на друга.
Для качественного и количественного анализа предлагаемого лекарственного средства была поставлена задача - подобрать селективные методики анализа, установить нормы качества предлагаемого лекарственного средства.
Для идентификации таурина в предлагаемом лекарственном средстве предложены - цветная реакции с нингидрином, модифицированная методика с формалином и натрия гидроксидом [2,3].
Идентификацию аскорбиновой кислоты в предлагаемом лекарственном средстве предложены предложено проводить цветными реакциями -серебра нитрата в присутствии с азотной кислотой разведенной и и с раствором йода [2,3].
Для идентификации дигидрокверцетина в предлагаемом лекарственном средстве предложена цветная реакция с цинковой пылью в присутствии концентрированной кислоты хлористоводородной и спирта этилового [2,3].
Предложенные методики идентификации компонентов в предлагаемом лекарственном средстве позволяют установить подлинность при совместном присутствии ингредиентов в композиции. Кроме того, предлагаемые методики подлинности валидны по показателям: специфичность, чувствительность.
Для определения таурина в предлагаемом лекарственном средстве предложен
спектрофотометрический метод [6], основанный на определении оптической плотности продукта реакции таурин-нингидрин при длине волны 568 нм. Методика проста в выполнении,
высокочувствительна и точна.
В количественном анализе кислоты аскорбиновой был предложен метод йодатометрического титрования как наиболее селективной методики определения [2,3].
Для количественного определения
дигидрокверцетина предложен
спектрофотометрический метод [2,3], основанный на определении оптической плотности продукта цветной реакции при длине волны 380 нм.
Предложенные методики дают точные результаты, просты в исполнении, не требуют дорогостоящих, токсичных реагентов, обладают высокой чувствительностью, могут быть использованы для определения содержания компонента в композиции при совместном присутствии.
Проведенные исследования позволили предложить нормы качества комбинированного лекарственного средства антиоксидантного действия, которые представлены в таблице 1.
Таблица 1
Нормы качества комбинированного антиоксидантного лекарственного средства
Показатель Метод Норма
Описание Визуальный Белый порошок с желтоватым оттенком без запаха
Подлинность:
Таурин цветная реакция с нингидрином Сине-фиолетовое окрашивание
Аскорбиновая кислота цветная реакция с нитратом серебра Образование металлического налета
цветная реакция с раствором йода Обесцвечивание раствора
Дигидрокверцетин цветная реакция с цинковой пылью Сине-красное окрашивания
Количественное определение: Таурин Спектрофотометрия Не менее 25%
Аскорбиновая кислота Йодатометрия Не менее 25%
Дигидрокверцетин Спектрофотометрия Не менее 5%
https://c1inical-journai.ru
E-ISSN 2686-6838
Table 1
Combined antioxidant drug quality standards
Indicator Method Norm
Description Visual Odorless white powder with yellowish shade
Identity: Taurine Ascorbic acid Dihydroquercetin color reaction with ninhydrin color reaction with silver nitrate color reaction with iodine solution color reaction with zinc dust Blue-violet colouring Formation of metal stain Solution discoloration Blue-red colouring
Quantitative determination: Taurine Ascorbic acid Dihydroquercetin Spectrophotometry Iodatometry Spectrophotometry Not less than 25% Not less than 25% Not less than 5%
Таким образом, по результатам проведенных исследований по разработке состава и методик анализа комбинированного лекарственного средства антиоксидантного действия можно заключить:
1. На основании анализа литературных данных теоретически обоснованы состав и дозировки ингредиентов предлагаемой композиции, включающей таурина 0,5 г.: аскорбиновую кислоту 0,5г.; и 0,1г дигидрокверцитина и вспомогательные вещества 0,9 г на один порошок.
2. Подобраны оптимальные методики качественного и количественного анализа ингредиентов ЛС, позволяющие определить их при совместном присутствии.
3. Для идентификации ингредиентов в предлагаемом лекарственном средстве предложены качественные реакции: реакции с серебра нитратом в присутствии концентрированной азотной кислоты и с раствором йода (аскорбиновая кислота), реакция с гидроксидом натрия и формальдегидом (таурин), реакция с цинковой пылью в присутствии этилового спирта, концентрированной хлористоводородной кислоты (дигидрокверцитин).
4. Количественное определение таурина предложено проводить спектрофотометрическим методом. Относительная погрешность методики составляет ±1,16%
5. Количественное определение аскорбиновой кислоты предложено проводить йодатометрическим титрованием. Относительная погрешность методики составляет ±0,50%
6. Количественное определение дигидрокверцитина предложено проводить
REFERENCES
спектрофотометрическим методом. Относительная погрешность методики составляет ±0,85%
7. Методики качественного и количественного анализа компонентов предлагаемого
лекарственного средства валидированы, т.е. специфичны, чувствительны и линейны.
Выводы. Актуальность поиска и создания лекарственного средства антиоксидантного действия не вызывает сомнений. По результатам исследований литературных данных обоснован состав и дозировки предлагаемого лекарственного средства антиоксидантного действия,
По результатам проведенных
экспериментальных исследований разработаны и валидированы методики анализа.
Для идентификации ингредиентов
разработанного лекарственного средства антиоксидантного действия предложены качественные цветные реакции, которые чувствительны и специфичны.
Количественное определение предложено проводить спектральными (таурина,
дигидрокверцетина) и титриметрическим (йодатометрически) методами (аскорбиновой кислоты).
Методики количественного анализа ингредиентов валидированы (специфичны, чувствительны и линейны).
По результатам проведенных
экспериментальных исследований разработаны нормы качества предлагаемого лекарственного средства антиоксидантого действия.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
https://clinical-journal.ru
E-ISSN 2686-6838
[ 1 ]. Babayan ML, Effects and mechanism of action of taurine | [ 1 ]. as a drag/Babayan ML//Scientific Journal, MEDI.RU-2020.-l-6c.
[2]. Belikov, V.G. Pharmaceutical chemistry: a textbook: at 2 [2]. o'clock/V.G. Belikov. - 3rd ed. - M.: MEDpress-infonn, 2009. -616s.
[3]. State Pharmacopoeia of the Russian Federation of the XIV [3]. edition [Electronic Resource], Access Mode .- URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 (Accessed Date 11.02.2022)
[4]. Leontieva N.V. Dihydroquercetin - a natural antioxidant: [4]. a textbook. - St. Petersburg: Moscow State Medical University named after I.I.Mechnikov, 2016. - 27 s.
[5]. Smirnov, V.A. Vitamins and coenzymes: a textbook. Part [5]. 2 ./V.A. Smirnov, Yu.N. Klimovich. - Samara: Samra.GTU, 2008,- 91 p.
[6]. Yarygin, T.I. Development of the method for quantitative [6]. determination of taufon (taurine)/T.I. Yarygin//Vestn. RUDN: Series of Medicine. - 2010.- No. 4.- S. 522-524.
Бабаян М.Л., Эффекты и механизм действия таурина как лекарственного средства./Бабаян М.Л.// Научн.журнал, MEDI.RU-2020.-1-6c. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: учеб. пособие: в 2ч. / В.Г. Беликов. - 3-е изд. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 616с.
Государственная фармакопея РФ XIV издания [Электронный ресурс]. Режим доступа.- URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 (дата обращения 11.02.2022)
Леонтьева Н.В. Дигидрокверцетин - природный антиоксидант: учебное пособие.- СПб: СЗГМУ им.И.И.Мечникова, 2016. - 27 с.
Смирнов, В.А. Витамины и коферменты: учебное пособие. Часть 2. /В.А. Смирнов, Ю.Н. Климович.-Самара: Самра.ГТУ, 2008.- 91 с.
Ярыгина, Т.И. Разработка методики количественного определения тауфона (таурина) / Т.И. Ярыгина // Вестн. РУДН: Серия Медицина. - 2010.- № 4.- С. 522-524.
Author Contributions. Kisieva M.T. - literature review, writing a text; Bidarova F.N. - research concept and design; Sabeeva A.N. - collection and processing of materials.
Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest. Kisieva M.T. - SPIN-ID: 4088-8720; ORCID ID: 0000-0002-0960-0980 Bidarova F.N. - SPIN-ID: 2379-0265; ORCID ID: 0000-0002-6346-9872 Sabeeva A.N. - SPIN-ID: 4939-6064; ORCID ID: 0000-0002-4326-4052
For citation: Kisieva M.T., Bidarova F.N., Sabeeva A.N. RESEARCH ON THE CREATION OF ANTIOXIDANT COMBINATION DRUG. Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2022;24(6): 39-44. doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-6-39-44.
Вклад авторов. Кисиева М. Т. - обзор литературы, написание текста; Бидарова Ф.Н. - концепция и дизайн исследования; Сабеева А.Н. - сбор и обработка материалов.
Заявление о конфликте интересов. Отсутствует конфликт интересов. КисиеваМ.Т. -SPIN-код: 4088-8720; ORCIDID: 0000-0002-0960-0980 Бидарова Ф.Н. - SPIN-код: 2379-0265; ORCIDID: 0000-0002-6346-9872 Сабеева А.Н. - SPIN-код: 4939-6064; ORCIDID: 0000-0002-4326-4052
Для цитирования: Кисиева М.Т., Бидарова Ф.Н., Сабеева А.Н. ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СОЗДАНИЮ КОМБИНИРОВАННОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2022. - Т. 24. № 6. - С. 39-44. doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2022-24-6-39-44.
