Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке" №10, 2006 г. (Т. 8)
ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ САПОНИНОВ СИНЮХИ ГОЛУБОЙ МЕТОДОМ УФ - СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ Мальцева А.А., Брежнева Т.А., Сливкин А.И., Мироненко Н.В.
Воронежский Государственный Университет, кафедра фармацевтической химии и фармацевтической технологии, г. Воронеж
Одним из разрешенных к применению в РФ растений с высоким содержанием сапонинов (от 10 до 30 %, по мнению различных авторов) является синюха голубая, лекарственное сырьё которой, "Rhizomata cum radicibus Polemonii" разрешено к применению и включено в ГФ XI в качестве отхаркивающего средства. Несмотря на выявленное позже у препаратов синюхи седативное, ранозаживляющее, кровоостанавливающее, противовоспалительное, антибактериальное, адаптогенное и противоопухолевое действие, растение это в настоящее время незаслуженно забыто, а лекарственное растительное сырье синюхи невозможно приобрести ни в одной аптеке. В качестве одной из возможных причин можно назвать отсутствием методики стандартизации лекарственного растительного сырья и препаратов синюхи по действующим веществам.
Основными действующими веществами синюхи считаются тритерпеновые сапонины, агликоном которых, по данным одних исследований, является олеаноловая кислота, по данным других - кроме производных олеаноловой кислоты, синюха содержит также сапонины, агликонами которых являются высокогидроксилированные тритерпеновые спирты: лонгиспиогенол, барригенол AR1, Rl-барригенол, камеллиагенин Е.
Тритерпеновые сапонины являются объектом, достаточно сложным для анализа. Немногочисленные методики их количественного определения в растительном сырье и фитопрепаратах, в том числе и фармакопейные, основаны на свойствах их агликонов.
В настоящей работе была исследована возможность определения сапонинов синюхи спектрофотометрическим методом, используя полосы поглощения продуктов их взаимодействия с концентрированной серной кислотой. В основу методики положено общее свойство пентациклических тритерпеноидов - давать полосы поглощения в УФ и видимой части спектра после нагревания с концентрированной серной кислотой.
Сапонины предварительно выделяли из навески высушенного растительного сырья синюхи, отвечающего требованиям ГФ XI, методом циркуляционного экстрагирования 70% этанолом с последующей очисткой сменой растворителя.
Полученный раствор, содержащий сапонины, нагревали далее в течение 3 часов на кипящей водяной бане с концентрированной серной кислотой в соотношении 1: 2. Оптимальное время нагрева и соотношение раствор -кислота подбирали экспериментально. Оптическую плотность полученного раствора измеряли на спектрофотометре СФ - 46 в кюветах с 1=1 см относительно обработанной в тех же условиях смеси вода - серная кислота, взятых в таком же соотношении. В качестве вещества - стандарта (РСО) использовали агликон сапонинов - олеаноловую кислоту, содержащий 95% основного вещества.
Было установлено, что спектры поглощения продуктов реакции сапонинов и олеаноловой кислоты с кислотой серной имеют общий максимум при 400 ± 2 нм, который мог быть использован как аналитический. Была получена градуировочная зависимость для количественного определения сапонинов синюхи в пересчете на олеаноловую кислоту методом УФ - спектрофотометрии и рассчитаны метрологические характеристики методики. Относительное стандартное отклонение составило 0.08.
С применением предложенной методики было определено содержание сапонинов в лекарственном растительном сырье синюхи. Содержание сапонинов в пересчете на олеаноловую кислоту, в анализируемой партии сырья составило 5,2%.
Учитывая, что в сырье могут содержаться сапонины с различным числом сахарных остатков, а при получении сапонинсодержащих фитопрепаратов часть моносахаридов может отщепляться, т. е. молекулярная масса их не будет постоянной, определение содержания сапонинов в пересчете на агликон даст наиболее объективную оценку количественного содержания этих веществ в анализируемых объектах.
Материалы VII Международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке»
Стр. [486]