CC BY
98
4. Chomyszyn-Gajewska M. Evaluation of chosen salivary periodontal dis ease markers // Przegl-Lek. 2010. Vol. 67, № 3. P. 213-216.
5. Rooban T, Rao A., Joshua E, Ranganathan K. Prevalence of oral damages of a mucous membrane in alcohol misusers in Chennai, southern India // Indian Dent. J. Res. 2009. Vol. 20, № 1. P. 41-46.
КИРТАЕВА АНАСТАСИЯ ВЛАДИСЛАВОВНА - ассистент кафедры ортопедической стоматологии и ортодонтии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (iveti0106@mail.ru).
KIRTAEVA ANASTASIYA - assistant of Orthopedic Dentistry and Orthodontics Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
ЯКОВЛЕВА ЛЮБОВЬ МАКСИМОВНА - доктор биологических наук, доцент кафедры патофизиологии, патологической анатомии с клинической патологической анатомией и судебной медицины, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (28Lubov@mail.ru).
YAKOVLEVA LUBOV - doctor of biological sciences, associate professor of Chair of the Pathophysiology, Pathological Anatomy with Clinical Pathological Anatomy and Forensic Medicine, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 547.923+591.147.5]:615.256
ББК Е 60*669.34*725.136.1.+Е60*696.311*725.382.1
Р.И. КЛЯШЕВА, В.Е. СЕРГЕЕВА, Е.А. КЛОЧКОВА
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОСТАТИЛЕНА НА СОДЕРЖАНИЕ ОБЩЕГО ХОЛЕСТЕРОЛА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И СЕРОТОНИНА В СЕМЕННИКАХ
Ключевые слова: простатилен, общий холестерол, структуры семенников, серотонин.
При введении подопытным крысам-самцам простатилена (экстракта простаты) в дозе по 0,02 мг в 1,0 мл в течение трех недель (через один день) было достоверно установлено уменьшение общего холестерола в сыворотке крови (Р < 0,05) по сравнению с его содержанием у них до введения препарата и у интактных животных. В семенниках у подопытных животных в сперматогенном эпителии (СЭ), гландулоцитах (ГЛЦ) и ин-терстиции (ИНС) обнаружено достоверное увеличение серотонина (Р < 0,01).
R. KLJASHEVA, V. SERGEEVA, E. KLOCHKOVA INVESTIGATION INFLUENCE OF PROSTATILEN ON THE CONTENT OF TOTAL CHOLESTEROL IN SERUM AND SEROTONIN RAT TESTIS
Key words: prostatilen, total cholesterol, structures in testis, serotonin.
Prostatilen (the extract of animals’ prostate) at the dose of 0,02 mg into 1,0 ml during 3 weeks (in a day) was injected to experimental group of rat-males. The decrease of total cholesterol in serum (Р < 0,05) was truly determined in comparison with the serum content before injection and with intact animals. Increase serotonine (P < 0,01) was found in testis of the experimental group in seminiferous epithelium, glandulocyte and interstitium.
Лекарственные препараты из экстрактов простаты животных близки по своему составу к природному состоянию и применяются в настоящее время в медицинской практике [1, 8, 10]. В таких сложных по химическому составу экстрактах при их применении главное значение в биохимических и физиологических процессах имеют содержащиеся в них половые гормоны - андрогены - и сопутствующие белки.
Известно, что действие мужских половых андрогенных гормонов и аналогов стероидной природы осуществляется по липофильному пути. Биохимический эффект происходит через образование гормон-рецепторного комплекса в ядрах клеток-мишеней [12], что приводит к активированию определенных генов в хроматине и последующим биохимическим [3, 4], физиологическим, гистологическим, гистохимическим изменениям в тканях и органах организма.
А внутримышечное введение «чистого» тестостерона приводит к изменению содержания серотонина в лимфоидных органах, влияя на клеточный и гуморальный иммунитет организма [9].
Целью исследования явилось изучение содержания общего холестеро-ла в сыворотке крови и серотонина, содержащегося в тучных клетках в разных структурах семенников при введении простатилена «Цитомед».
Материалы и методы исследования. Поставленная задача была реализована следующим образом. Эксперимент выполнен на двадцати белых половозрелых крысах-самцах массой 180+20 г. Животных содержали в стандартных условиях, они получали типовой рацион питания. Все процедуры в работе осуществляли согласно нормам и правилам обращения с лабораторными животными (приказ МЗ РФ от 19.06.2003 г. № 267).
Подопытным животным (10) внутримышечно в течение трех недель (через один день) вводили по 1,0 мл разведенного в 0,9%-ном растворе хлорида натрия (0,02 мг) простатилена «Цитомед». Лекарственная форма: лиофилизат для приготовления раствора, содержащий активное вещество простаты экстракт - 5,0 мг, вспомогательное вещество глицин - 25 мг. Содержание общего холестерола в негимолизированной сыворотке крови определяли энзиматическим колориметрическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе «Random Access А-25» фирмы «BioSystems S.A.», Испания, 2009 г.
Известно, что при гидролизе эфиров холестерола холестеролэстеразой образуется свободный холестерол. Образовавшийся и имеющийся в пробе холестерол окисляется кислородом воздуха под действием холестеролокси-дазы с образованием перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски при длине волны 500 (490-540) нм прямо пропорциональна концентрации общего холестерола в пробе.
Известно, что серотонин (5-гидрокситриптамин) может превращаться в гормон мелатонин, который регулирует суточные и сезонные изменения метаболизма организма и участвует в регуляции репродуктивной функции и синтезируется в тучных клетках [11].
В семенниках исследовали сперматогенный эпителий, гландулоциты и ин-терстиций на содержание серотонина по методу Фалька - Хилларпа в модификации Е.М. Крохиной [2]. Инкубацию высушенных срезов проводили в парах параформальдегида 60%-ной влажности при температуре 80°С в течение 1 ч. Флуофоры, образующиеся в данных условиях, имеют максимумы свечения для серотонина при длине волны 480 нм (светофильтр 8), затем применяли спектро-флуориметрический анализ для количественного определения содержания серотонина на люминесцентной фотометрической насадке ФМЭЛ-1А с выходным напряжением 900 В. Замер интенсивности свечения серотонина производился в условных единицах флуоресценции (у. е.) по шкале регистрирующего прибора усилителя У-5. Интенсивность люминесценции пропорциональна концентрации содержания серотонина в разных структурах семенников.
Окраска гематоксилин-эозином применялась для общегистологической характеристики структур семенников.
Оценка достоверности изменений по биогенным аминам определена непараметрическим критерием Вилькоксона - Манна - Уитни, а биохимических параметров с помощью критерия Стьюдента (Р < 0,05).
Результаты исследования и их обсуждение. У интактных крыс (10) и подопытных животных (10) до введения простатилена содержание общего холестерола в сыворотке крови равнялось 1,64+0,1 ммоль/л. После введения
простатилена наблюдалось уменьшение общего холестерола в сыворотке крови до 1,30+0,1 ммоль/л (уменьшение в 1,3 раза).
Следует отметить, что в ходе эксперимента при введении простатилена нами обнаружены незначительное увеличение массы тела животных и уменьшение массы семенников ~ 15% по сравнению с аналогичными показателями у ин-тактных животных.
Паренхима семенников гистологически подразделяется на две части: эндокринную и сперматогенную. Последняя представлена системой канальцев: в одних - образуются сперматозоиды, а другие служат для их выведения. Эндокринная же часть представлена клетками Лейдига (гландулоцитами), в которых вырабатывается основная доля мужских половых гормонов [7].
В таблице нами представлены данные по содержанию серотонина в разных структурах семенников.
Содержание серотонина в разных структурах семенников у контрольных и подопытных групп крыс-самцов, усл. ед.
Структуры семенников Контрольная группа (п = 10) Опытная группа -введение простатилена (п = 10)
Сперматогенный эпителий Гландулоциты (эндокринные клетки) Микроокружение гландулоцитов 0,58 ± 0,18 0,45 ± 0,06 0,46 ± 0,06 0,76 ± 0,02 0,75 ± 0,02* 0,86 ± 0,03*
Примечание: п - количество животных; * - Р < 0,01 - достоверно по непараметрическому критерию Вилькоксона - Манна - Уитни.
При введении простатилена крысам-самцам нами были обнаружены следующие изменения в семенниках у подопытных групп животных люминесцентно-гистохимическими методами исследования. Свечение во всех люми-несцирующих структурах: сперматогенном эпителии, гландулоцитах, интер-стиции - значительно отличалось от такового у крыс интактной группы. Спек-трофлуориметрические исследования показали, что в структурах семенников при введении простатилена происходит перераспределение биогенных аминов. Повышаются интенсивность люминесценции и содержание серотонина в сперматогенном эпителии (с 0,58+0,18 до 0,76+0,02 у.е.); в гландулоцитах (с 0,45+0,06 до 0,75+0,02 у.е.). В интерстиции между извитыми канальцами семенников (т.е. в микроокружении гландулоцитов) также наблюдается достоверное повышение серотонина (от 0,46+0,06 до 0,86+0,03 у.е.) по сравнению с аналогичным показателем в интактной группе животных. Исходя из полученных нами экспериментальных данных и анализа научной литературы считаем, что в механизме действия простатилена на структуры семенников определенную роль играет серотонин.
Ранее нами было установлено, что при введении простатилена животным в сыворотке крови происходит изменение в липидном обмене организма, а именно: уменьшение триацилглицеридов, а также гистологические изменения в семенниках (в сперматогенном эпителии, гландулоцитах и интерстиции), о чем свидетельствует увеличение содержания катехоламинов [5].
Схема биохимических и гистологических событий при введении простатилена крысам-самцам
Простатилен ^ мышцы ^ кровью печенье образующиеся метаболиты ^ изменение в липидном обмене (уменьшение общего холестерола в сыворотке крови) ^ увеличение содержания серотонина в разных структурах семенников, что связано с изменением биоаминного статуса
Выводы. Полученные нами результаты по изучению влияния простати-лена на уменьшение содержания общего холестерола в сыворотке крови (биохимические методы) и увеличение серотонина в различных структурах семенников (гистохимические методы) позволяют судить о тесной взаимосвязи состояния липидного обмена и биоаминного статуса животного.
Литература
1. Аль-Шукри С.Х., Горбачев А.Г., Боровец С.Ю. Эффективность простатилена при остром цистите (экспериментально-клиническое исследование) // Нефрология. 2009. Т. 13, № 2. C. 92-95.
2. Артемьева И.Л., Сергеева В.Е. Морфофункциональная характеристика структур тимуса при экспериментальной тестэктомии. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2012. 96 с.
3. Кляшева Н.В. Метилирование ДНК в механизме действия анаболических стероидов на скелетную мышцу и семенники // Проблемы репродукции. 2003. № 2. С. 15-18.
4. Кляшева Н.В., Степанова Н.В., Кляшева Р.И. Влияние андрогенов на метилирование ДНК из разных органов крыс // Проблемы репродукции. 2001. № 4. С. 25-26.
5. Кляшева Р.И., Сергеева В.Е., Клочкова Е.А. Влияние простатилена на содержание триа-цилглицеридов в сыворотке крови и катехоламинов в семенниках крыс // Актуальные направления научных исследований XXI века: Теория и практика: сб. науч. тр. по материалам междунар. заочной науч.-практ. конф. 2013. № 3. С. 45-50.
6. Молекулярная биология клетки / Б. Албертс, Д. Брей, Дж. Льюис и др. М.: Мир, 1994. Т. 2. С. 93-253.
7. Репродуктивная эндокринология: в 2 т. / пер с англ. под ред. С.С.К. Йена, Р.Б. Джаффе. М.: Медицина, 1998. 429 с.
8. Рязанцев В.В. Современный взгляд на проблему хронического урогенитального простатита: этиопатогенез, клиника: обзор литературы // Вестник постдипломного медицинского образования. 2007. № 3/4. С. 48-52.
9. Сарилова И.Л., Сергеева В.Е., Смородченко А.Т. Эффект тестэктомии на структуры ви-лочковой железы, экспрессирующие главный комплекс гистосовместимости II класса // Бюл. эксп. биол. мед. 2008. Т. 146, № 1. С. 103-106.
10. Сельков С.А., Петленко С.В., Селькова М.С. Применение препарата простатилен в комплексной терапии хронического простатита, ассоциированного с половыми и репродуктивными нарушениями // Андрология и генитальная хирургия. 2012. № 3. С. 93-96.
11. Симоненков А.П., Клюжев В.М. Синдром серотониновой недостаточности. М.: БИНОМ, 2013. 96 с.
12. Сингер М., Берг П. Гены и геномы: в 2 т. М.: Мир, 1998. 391 с.
13. Fijak M., Meinhardt A. The testis in immune privilege // Immunol. Rev. 2006. Vol. 213. Р. 66-81.
КЛЯШЕВА РАИСА ИВАНОВНА - доктор биологических наук, профессор кафедры фармакологии, клинической фармакологии и биохимии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (kaf-biology@yandex.ru).
KLYASHEVA RAISA - doctor of biological sciences, professor of Pharmacology, Clinical Pharmacology and B^^emis^ Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
СЕРГЕЕВА ВАЛЕНТИНА ЕФРЕМОВНА - доктор биологических наук, профессор кафедры медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (valentina-sergeeva@yandex.ru).
SERGEEVA VALENTINA - doctor of biological sciences, professor of Medical Biology Char with the Microbiology and Virology Course, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
КЛОЧКОВА ЕВГЕНИЯ АЛЕКСЕЕВНА - ассистент кафедры фармакологии, клинической фармакологии и биохимии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (kaf-biology@yandex.ru).
KLOCHKOVA EVGENIJA - assistant of Pharmacology, Clinical Pharmacology and B^hei^st^ Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
