Научная статья на тему 'Исследование свойств золотосодержащего нанокомпозита на основе гиалуроновой кислоты в экспериментах in vitro'

Исследование свойств золотосодержащего нанокомпозита на основе гиалуроновой кислоты в экспериментах in vitro Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

CC BY
61
23
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биотехнологиям в медицине , автор научной работы — Исаева Е.В., Бекетов Е.Е., Корякин С.Н., Трошина М.В., Ульяненко С.Е.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Исследование свойств золотосодержащего нанокомпозита на основе гиалуроновой кислоты в экспериментах in vitro»

44

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

и воспроизводимостью. Относительная ошибка определения не превышает 2,0 %.

Заключение. Разработан новый вариант методики количественного определения основного действующего вещества в ЛФ Ормустина для включения в проект фармакопейной статьи предприятия.

Е.В. Исаева, Е.Е. Бекетов, С.Н. Корякин, М.В. Трошина, С.Е. Ульяненко

ИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ ЗОЛОТОСОДЕРЖАЩЕГО НАНОКОМПОЗИТА НА ОСНОВЕ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VITRO

МРНЦим. А.Ф. Цыба - филиал ФГБУНМИРЦ Минздрава России, Обнинск

Введение. Исследования, направленные на развитие фотон-захватной терапии, интенсивно проводятся в последние годы. Это касается синтеза новых соединений для проявления фотон-захватных реакций, определения цитотоксичности предлагаемых веществ, проведения радиобиологического тестирования на клеточных культурах.

Цель исследования — определение цитотоксичности золотосодержащего соединения на основе гиалуроновой кислоты и меланина и подбор оптимальных концентраций золота для экспериментальной фотон-захватной терапии в исследованиях in vitro.

Материалы и методы. Цитотоксичность нанокомпози-та с содержанием золота 20,8 ± 0,2 %, предоставленного компанией «Мартинекс» (Москва), оценивали по торможению пролиферативной активности клеток мышиной меланомы В16. Исследуемые концентрации золота — 50, 100, 200, 400 и 800 мкг на 1 мл питательной среды. Также клетки меланомы В16, культивируемые с добавлением на-нокомпозита в концентрациях 50 и 100 мкг золота на 1 мл среды и в его отсутствие, подвергали рентгеновскому облучению (4 Гр). Облучение проводили на установке для радиационной обработки крови «СОУК». Источники излучения — 2 рентгеновские трубки, установленные в излучателях РАП 220—5, напряжение на аноде — 180 кВ. Мощность дозы облучения — 1,3 Гр/мин. После облучения определяли клоногенную активность клеток.

Результаты. Установлено, что добавление золотосодержащего соединения в питательную среду оказывает влияние на пролиферацию клеток меланомы В16. Дозы золота 50 и 100 мкг/мл среды не вызывают выраженного торможения пролиферативной активности: число делений клеток в контроле и в опытных группах находятся в пределах 3,4—3,8. В диапазоне концентраций золота 200 и 400 мкг/мл среды проявлялись цитостатические свойства изучаемого нанокомпозита. С увеличением концентрации золота до 800 мкг/мл среды отмечено почти полное подавление пролиферации клеток — цитотоксические свойства. Облучение клеток меланомы В16 в дозе 4 Гр вызывает их частичную гибель (выживаемость почти в 4 раза ниже, чем в не-облученном контроле). Добавление золота в питательную среду за 24 ч до облучения в концентрации 50 мкг/мл среды не влияет на этот показатель. Введение золота в среду в концентрации 100 мкг/мл среды приводит практически к полному подавлению жизнеспособности клеток: выживаемость составила 5 % от группы необлученного контроля

и была в 5 раз ниже, чем в случае облучения без присутствия золота в питательной среде или при его концентрации 50 мкг/мл среды.

Заключение. Результаты исследования на клетках меланомы В16 мышей позволили установить концентрацию золота, не обладающую цитотоксическим действием и в то же время позволяющую существенно повысить канцерогенную эффективность рентгеновского облучения без увеличения физической дозы.

Исследования проведены при финансовой поддержке РФФИ (проект № 14-44-03084).

А. В. Калугин1, Д. В. Новиков1, Н.Р. Хилал1,

К.А. Шахова2, Н.Н. Гурина1, Е.Ю. Конторщикова3,

М.Е. Мамаева4, В. В. Новиков1

ЭКСПРЕССИЯ МАТРИЧНЫХ РИБОНУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ TRAG3 И HAGE В ОПУХОЛЕВЫХ ОЧАГАХ ПРИ РАКЕ ЭНДОМЕТРИЯ

1ФГАОУ ВО «ННГУ им. Н.И. Лобачевского», Нижний Новгород

2ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород 3ГБУЗ НО «НОКБ им. Н.А. Семашко», Нижний Новгород 4ФБУЗ ПОМЦФМБА России, Нижний Новгород

Введение. В России заболеваемость злокачественными новообразованиями женской репродуктивной системы ежегодно увеличивается. Рак эндометрия (РЭ) занимает 1-е место среди всех новообразований женской половой системы. В настоящее время существует потребность в простых и доступных методах ранней диагностики и оценки эффективности терапии онкологических заболеваний. Для разработки таких методов могут быть использованы тесты на экспрессию раково-тестикулярных (cancer-testis, CT) генов. Экс-прессируются СТ-гены в иммунопривилегированных тканях и стволовых клетках опухолей.

Цель исследования — изучение особенностей экспрессии матричных рибонуклеиновых кислот (мРНК) TRAG3 и HAGE в опухолевых очагах при РЭ.

Материалы и методы. Периферическую кровь 5 клинически здоровых доноров и опухолевые очаги 22 больных РЭ тестировали на экспрессию мРНК TRAG3 и HAGE с помощью метода полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Результаты ОТ-ПЦР оценивали методом электрофореза в агарозном геле с бромистым этидием.

Результаты. В образцах периферической крови здоровых доноров мРНК СТ-генов не выявлено. Суммарная частота обнаружения мРНК TRAG3 и HAGE в опухолевых очагах больных РЭ составила 64 % (14 из 22 образцов). В 13 (59 %) образцах опухолей была обнаружена мРНК TRAG3, в 8 (36 %) — мРНК HAGE. В 7 образцах опухолей была выявлена мРНК 1 СТ-гена, в 7 образцах — мРНК TRAG3 и HAGE одновременно. При опухолевом росте в пределах эндометрия мРНК TRAG3 была обнаружена в 1 из 6 образцов, мРНК HAGE — не обнаружена. При инфильтратив-ном росте опухоли до половины толщины миометрия мРНК TRAG3 и HAGE были выявлены в 5 из 8 образцов. При опухолевом росте в половину толщины миометрия и более мРНК TRAG3 детектировалась в 7 из 8 образцов, мРНК HAGE — в 3 из 8 образцов. Следует отметить,

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.