CC BY
106
28.Koroch A.R., Juliana H.R. Bioactivity of essential oils and their components // Flavours and Fragrances. 2005. P.87-115.
29.Song H.-S., Ukeda H., Sawamura M. Antioxidative activities of Citrus peel essential oils and their components against linoleic aoxidation // Food Sci. Technol. Res. 2001. V. 7. № 1. P. 50-56.
30.Demirci B., Kosar M., Demirci F., Dinc M., Baser K.H.C. Antimicrobial and antioxidant activities of the essential oil of Chaerophyllum libanoticum Boiss. Et Kotschy // Food Chemistry. 2007. V. 105. P. 15121517.
31.Guliyev V.B., Gul M., Yildirim A. Hippophae rhamnoides L.: chromatographic methods to determine chemical composition, use in traditional medicine and pharmacological effects // J. Chromatography. B. 2004. V. 812. P. 291-307.
32.Chrubasik E., Roufogalis B.D., Wagner H., Chrubasik S.A. A comprehensive review on nettle effect and efficacy profiles, Part I: herba urticae // Phytomedicine. 2007. V. 14. P. 423-435.
33.Manikandan S., Devi R.S. Antioxidant property of a-azarone against noise-stress-induced changes in different regions of rat brain // Pharmacological research. 2005. V. 52. P. 467-474.
34.Acuna U.M., Atha D.E., Ma J., Nee M.E., Kennelly. J. Antioxidant capacities of ten edible North American plants // Phytother. Res. 2002. V. 16. P. 63-65.
Лубсандоржиева Пунцык-Нима Базыровна, кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО рАн (ИОЭБ СО РАН), г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6.
Намзалов Бимба-Цырен Батомункуевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой ботаники Бурятского государственного университета, г. Улан-Удэ, ул. Смолина, 24 а.
Lubsandorzhieva Puntsik-Nima Bazyrovna, candidate of pharmaceutical sciences, senior researcher, laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6.
Namzalov Bimba-Tsyren Batomunkuevich, doctor of biological sciences, professor, head of the department of botany, Buryat State University, Ulan-Ude, Smolina str., 24 a.
УДК 582.912.4:543 © В.М. Мирович, Г.М. Федосеева, И.М. Кривошеев,
Т.А. Коненкина, В.А. Маняк
ИССЛЕДОВАНИЕ СОСТАВА ТЕРПЕНОИДОВ НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ СПИРЕИ ИВОЛИСТНОЙ (SPIRAEA SALICIFOLIA L.) МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ
Изучен состав терпеноидов листьев и цветков спиреи иволистной методом хромато-масс-спектрометрии. Было идентифицировано 9 соединений: 6 компонентов эфирного масла, 2-производные абиетиновой кислоты и глицирризиновая кислота.
Ключевые слова: спирея иволистная, терпеноиды, хромато-масс-спектрометрия.
V.M. Mirovich, G. M. Fedoseeva, I.M. Krivosheev, T.A. Konenkina, V.A. Manyak THE STUDY OF TERPENOIDS OF SPIRAEA SALICIFOLIA L. OVERGROUND ORGANS BY THE CHROMATO-MASS SPECTROSCOPIC METHOD
The composition of terpenoids of Spiraea salicifolia L. leaves and flowers has been studied by chromato-mass spectroscopy and 9 compounds have been identified: 6 ^mponents of essential oil,2-derivatives of abietinoic acid and glycyrrhizanoic acid.
Keywords: Spiraea salicifolia L, terpenoids, chromato-mass spectroscopy.
Род спирея (Spiraea L.) семейства розоцветных (Rosaceae L.) включает около 100 видов. В СНГ этот род представлен 22 видами. Спирея иволистная (Spiraea salicifolia L.) встречается в Европейской части России, в Западной и Восточной Сибири. Это кустарник 1-2 м высотой, с широколанцетовидными, к основанию суженными в короткий черешок листьями, по краю неравномерно пиловиднозубчатые, с сильно выдающимися жилками, цветки с розовыми венчиками, собраны в густые метел-
ки. S. salicifolia предпочитает влажные луга, встречается по берегам рек, а также в сырых лесах [7].
В растениях рода спирея обнаружены разнообразные группы биологически активных веществ. Органические кислоты - яблочную лимонную, янтарную, аскорбиновую - содержит S. Wangouttei Zbl.
В S. salicifolia, S. Wangouttei Zbl., S. hypericifolia найдены флавоноиды, производные кверцетина (гипе-розид, дипентозид кверцетина, рутин), апигенина, лютеолина. Из фенолкарбоновых кислот для растений рода спирея характерно содержание кофейной и хлорогеновой кислоты [2]. Корейскими учеными в S. salicifolia были найдены коричная кислота, пара-гидроксикоричная кислота, пара-метоксикоричная кислота, 1-О-коумароил-В-глюкопиранозид, кверцетин-3-О-(б'-О-а-Ь-арабинопиранозил)-В-0-галактопиранозид [8].
Дитерпеновые алкалоиды содержатся в видах S. japonica L., S. fritschiana var. parvifolia [9]. Монотерпены содержит S. cantoniensis Lourt., в S. prunifolia Siebold et Zucc. обнаружен монотерпен пруно-зид А. Тритерпеноиды выделены из S. formosana Hayata, S. prunifolia Siebold et Zucc. [10]. Вдовенко-Мартыновой Н.Н. с соавт. определено количественное содержание суммы терпеноидов в S. Wangouttei Zbl. спектрофотометрическим методом на основе реакции с ванилином и серной кислотой в пересчете на урсоловую кислоту. Содержание суммы терпеноидов составило б,30±0,24% [1]. Производные ситостерина были обнаружены в S. prunifolia Siebold et Zucc. [10].
Фармакологические исследования показали, что виды спиреи обладают противовоспалительным, противоязвенным, диуретическим, антиоксидантным действиями. Дитерпеновые алкалоиды (атизи-новые алкалоиды - спирамины, спиразины) проявляют антиаритмическую активность [3, 9]. Группой исследователей (Jiyoung Lee с соавт.) из вида S. thunbergii Sieb. был выделен S-O-тулипалин B, представляющий собой бутиролактон, обладающий антимикробным действием в отношении Escherichia coli [11].
Целью нашего исследования является изучение терпеноидных соединений листьев и цветков спиреи иволистной.
Материал и методы исследования
Объектом исследования служили листья и цветки спиреи иволистной, собранные в окрестностях с. Ново-Грудинино Иркутской обл. Заготовку сырья проводили в период массового цветения во второй половине июля в 2010 г. Сырье сушили воздушно-теневым способом.
Для проведения анализа получали извлечения по следующей методике: 5 г сырья экстрагировали в 50 мл ацетона при нагревании на водяной бане в течение 30 минут. Из части извлечения цветков отбирали аликвоту объемом 100 мкл, растворитель удаляли в вакууме при комнатной температуре. Сухой остаток подвергали силилированию [5, б].
Методика силилирования. Для проведения реакции был выбран реагент SILYL-991(BSTFA-TMCS (99:1) производства фирмы MACHEREY-NAGEL, поскольку он характеризуется широким спектром взаимодействия с различными функциональными группами химических соединений. Сухой остаток растворяли в пиридине и силилировали в течение 20 мин при температуре 100 0С в специальном реакторе.
Компонентный состав извлечений из листьев (А), цветков (В) и силилированной пробы цветков (С) S. salicifolia определяли на газовом хроматографе Agilent Technologies ^890^ с квадрупольным масс-спектрометром (MSD 5973) в качестве детектора. В испаритель хроматографа вводили 1 мкл исследуемого образца и проводили анализ при следующих условиях: температура испарителя - 280 0С, капиллярная колонка - HP - 5MS с неподвижной фазой (диметилполисилоксан с 5% фенильных групп), газ-носитель - гелий (1 мл/мин), температура термостата колонки в режиме программирования - с 50 0С (1 мин) до 300 0С (10 мин), 25 0С/мин. Детектирование осуществлялось в режиме сканирования ионов 40-800 mjz, при напряжении на филаменте - 70 EV, токе эмиссии - 34,б цЛ, напряжение на ионном ускорителе - +28,3 B, напряжение на электронном умножителе - 1 57б B.
Идентификацию соединений в образцах проводили путем сравнения масс-спектров разделенных компонентов смеси с масс-спектрами, содержащимися в компьютерной библиотеке NIST 02, и расчетным путем.
Результаты и их обсуждение
В таблице 1 в порядке увеличения времени удерживания приведены идентифицированные вещества. Обнаруженные соединения можно разделить на 4 группы: 1) монотерпены; 2) сесквитерпены; 3) дитерпены; 4) тритерпены. Всего было идентифицировано 9 соединений.
Таблица 1
Компонентный состав терпеноидов 8. 8аПс1£оНа
№ п/п Соединение Проба Время удерживания, мин Формула Органы растения
1 Фарнезан С 13,92 С15Н30 Цветки
2 Б-вербенон В 21,30 С10Н14О Цветки
3 (Е)-оцименон А 21,37 С10Н14О Листья
4 Глицирризиновая кислота С 52,93 С42Н62016 Цветки
5 Гексагидрофарнезил ацетон В 55,87 С18Н360 Цветки
6 Изопулегол А 59,53 С10Н18О Листья
7 Дегидроабиетиновая кисло-та А С 77,62 79,74 С20Н28О2 Листья Цветки
8 Метиловый эфир дегидроа-биетиновой кислоты А 86,74 С21Н30О2 Листья
9 Е-лонгипинан А 91,23 С15Н26 Листья
Примечание: А - извлечение из листьев; В - извлечение из цветков; С - извлечение из цветков (силилиро-ванная проба)
Из монотерпенов в листьях найдены (Е)-оцименон, изопулегол, в цветках обнаружен Б-вербенон (табл. 2). Два соединения отнесены к сесквитерпенам: цветки накапливают фарнезан и гексагидро-фарнезил ацетон, а листья - лонгипинан. Эти соединения являются компонентами эфирного масла.
При микроскопическом исследовании надземных органов 8. заНийэИа не было выявлено выделительных органов, продуцирующих эфирное масло, таких как железки, железистые волоски, вместилища, канальца. Компоненты эфирного масла - монотерпены и сесквитерпены в 8. БаИиГоИа образуются в паренхимных клетках и растворены в клеточном соке, что подтверждается реакцией с суданом III.
Таблица 2
Структура моно- и сескивитерпенов 8. БаНиГоИа
№ п/п Соединение Структура
1 Фарнезан А
2 Б-вербенон (2-пинен-4-он) О
3 (Е)-оцименон [(Е)-тагетенон] ^ к
Гексагидрофарнезил ацетон
Изопулегол
(н-9-ментен-3-ол)
OH
/"Ч
Лонгипинан
4
5
б
Дитерпеноиды представлены дегидроабиетиновой кислотой, которая содержится в листьях и цветках S. salicifolia, листья, кроме того, накапливают метиловый эфир дегидроабиетиновой кислоты. Из тритерпеновых соединений в цветках была идентифицирована глицирризиновая кислота.
Компоненты эфирных масел, производные абиетиновой кислоты, глицирризиновая кислота обладают противовоспалительным действием. Терпеноиды, содержащиеся в надземных органах S. salicifolia, вносят свой вклад в развитие противовоспалительного действия этого растения [3].
Выводы. Таким образом, в ходе исследования надземных органов спиреи иволистной (Spiraea salicifolia L.) методом хромато-масс-спектрометрии было идентифицировано 9 терпеноидных соединений, относящихся к моно- и сесквитерпенам (компонентам эфирных масел), дитерпенам (производные абиетиновой кислоты), тритерпенам (глицирризиновая кислота).
Литература
1. Вдовенко-Мартынова Н.Н., Степанюк С.Н. Фитохимическое исследование листьев спиреи Вангутта (Spiraea Wangouttei Zbl.), произрастающей в регионе Кавказских Минеральных Вод // Сборник научных трудов / под ред. М.В. Гаврилина. Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2005. Вып. 60. С. 1921.
2. Карпова Е.А., Полякова Т.А. Содержание фенольных соединений и потенциал биологической активности сибирских дальневосточных видов рода Spiraea L. (Rosaceae Juss.) // Растительный мир Азиатской России. 2009. № 2 (4). С. 79-88.
3. Кривошеев И.М., Мирович В.М., Цыренжапов А.В. Спирея иволистная (Spiraea salicifolia L.) - источник биологически активных веществ противовоспалительного и антиоксидантного действия // Актуальные вопросы охраны здоровья населения регионов Сибири. Красноярск, 2011. С. 120-122.
4. Мазепина Л.С., Джурко Ю.А., Фурса Н.С. Анализ листьев грушанки круглолистной, зимо-любки зонтичной и толокнянки обыкновенной методом хромато-масс-спектрометрии // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигорск, 2010. Вып. 65. С. 85-87.
5. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Hydrangeaceae-Haloragaceae. СПб., 1991. С. 101.
6. Тюнникова Н.В., Шаварда А.Л. Хромато-масс-спектрометрический компонентный анализ экстрактов из листьев двух видов рода Galeopsis (Lamiaceae) с предварительным получением триме-
тилсилильных производных // Растительные ресурсы. 2005. Т. 41, вып. 4. С. 61-67.
7. Флора Сибири. Rosaceae / под ред. А.В. Положий, Л.И. Малышева. Новосибирск, 1988. 199 с.
8. Ahn B. T., Oh K. J., Park S. K., Chung S. G., Cho E. H., Kim J. G., Ro J. S., Lee K. S. Phenolic compounds from leaves Spiraea salicifolia // Saengyak Hakhoechi. 1996. V. 27, № 3. P. 178-183.
9. Fan L.-M., He H.-P., Shen Y.-M., Hao X.-J. Two new diterpenoid alkaloids from Spiraea japonica L. f. var. fortunei (Planchon) Rehd. // Jornal of Integrative Plant Biology. 2005. V. 47, № 1. P. 120-123.
10. Jun C.S., Yoo M.J., Lee W.Y., Choi H.G., Jeon B.H., Jang S.I., Kim Y.-J., Chung H.T., Kim Y.S., Chai K.-Y. The inhibitori effect of prunoside A acyl derivatives on NO production in RAW 264.7 cell // Bulletin of Korean Chemical Society. 2004. V. 25, № 10. P. 1555-1558.
11. Lee Jiy., Lee Jong., Lim Jih., Sim Sang., Park Deok. Antibacterial effects of S-(-)-tulipalin B isolated from Spiraea thunbergii Sieb. on Escherichia coli, major food borne pathogenic microorganism // Journal of Medicinal Plants Research. 2008. V. 2(3). P. 59-65.
Мирович Вера Михайловна, доктор фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармакогнозии и ботаники Иркутского государственного медицинского университета. 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1. Тел. 8(3952) 24-34-47; e-mail: [email protected].
Федосеева Галина Михайловна, доктор фармацевтических наук, заведующий кафедрой фармакогнозии и ботаники Иркутского государственного медицинского университета. 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1. Тел. 8(3952) 24-34-47.
Кривошеев Игорь Михайлович, аспирант кафедры фармакогнозии и ботаники Иркутского государственного медицинского университета. 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1. Тел. 8(3952) 24-34-47.
Коненкина Татьяна Александровна, сотрудник института физиологии и биохимии растений СО РАН. 664054, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 132. Тел. 8(3952) 42-58-92; e-mail: [email protected].
Маняк Виктор Андреевич, доктор фармацевтических наук, профессор кафедры технологии лекарственных форм Иркутского государственного медицинского университета. 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, тел. 8 (3952) 24-34-47.
Mirovich Vera Mikhailovna, doctor of pharmaceutical sciences, senior lecturer, department of pharmacognosy and botany, Irkutsk State Medical University. 664003, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya str., 1. tel. 8(3952) 24-34-47; e-mail: [email protected].
Fedoseeva Galina Mikhailovna, doctor of pharmaceutical sciences, professor, head of the department of pharmacognosy and botany, Irkutsk State Medical University. 664003. Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya str., 1. tel. 8(3952) 24-34-47.
Krivosheev Igor Mikhailovich , postgraduate student, department of pharmacognosy and botany, Irkutsk State Medical University. 664003, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya str., 1. tel. 8(3952) 24-34-47.
Konenkina Tatyana Aleksandrovna, research fellow, Institute of Physiology and Biochemistry of Plants, SB RAS, 664054, Irkutsk (Russia). tel. 8(3952) 42-58-92; e-mail: [email protected].
Manyak Victor Andreevich, doctor of pharmaceutical sciences, professor, department of technology of medicinal forms, Irkutsk State Medical University. 664003, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya str.,1, tel. 8 (3952)24-34-47.
