Исследование полиморфизма генов системы регуляции артериального давления, транспортёра SLCO1B1 и карбоксилэстеразы 1 (CES1) у больных артериальной гипертензией, принимающих эналаприл Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Результаты

Показаны статистически значимые межрегиональные отличия в частоте носительства рисковых полиморфных вариантов CYP2D6: промежуточные метаболизаторы с генотипом *1/*10 преобладали среди жителей Самары, компаунд-гетерозиготы *4/*10 — среди красноярцев (p < 0,001). В то же время, во всех группах пациентов был выявлен только мажорный аллель А CYP2D6*3, ассоциированный с нормальной активностью фермента. По данным ТЛМ1, у компаунд-гетерозигот отмечались более высокие концентрации ВК (p = 0,02) по сравнению с носителями генотипов '*1/'*1 и *1/*10 (пациенты с генотипом *1/*4 и гомозиготы по рисковым вариантам в исследуемых выборках отсутствовали), при этом ассоциации генотипа CYP2D6 с эффективностью терапии выявлено не было (p = 0,053). Значимых межрегиональных различий в частоте носительства аллелей и генотипов ОНВ rs1045642, rs1128503 и rs2032582 гена ABCB1 не наблюдалось (p > 0,05). Носительство аллеля Т исследуемых ОНВ как в гетеро-, так и в гомозиготном состоянии, не оказывало значимого влияния на пиковую и остаточную концентрацию ВК по данным ТЛМ2 и ТЛМ1 (p > 0,05), а также не коррелировало с эффективностью терапии.

Заключение

Компаунд-гетерозиготное носительство полиморфных вариантов CYP2D6*4 (вариант акцепторного сплайс-сай-та) и *10 (миссенс-мутация P34S) способствует кумуляции ВК у пациентов с эпилепсией. Изменение экспрессии гликопротеина P не оказывает влияния на уровень ВК в плазме крови и эффективность проводимой терапии.

Литература

1. Ghodke-Puranik Y, Thorn CF, Lamba JK, et al. Valproic acid pathway: pharmacokinetics and pharmacodynamics. Pharmacogenet Genomics. 2013;23(4):236-241.

2. Пилюгина М.С. Пути метаболизма препаратов вальпроевой кислоты и карбамазепина // Вестник КБ №51. — 2010. — Т. 3. — № 10. — С. 52-55. [Pilugina MS. Metabolic pathways of valproic acid and carbamazepine. VestnikKB№51. 2010;3(10):52-55. (In Russ).]

3. Baltes S, Fedrowitz M, Tortós CL, et al. Valproic acid is not a substrate for P-glycoprotein or multidrug resistance proteins 1 and 2 in a number of in vitro and in vivo transport assays. J Pharmacol Exp Ther. 2007;320(1):331—343.

Исследование полиморфизма генов системы регуляции

артериального давления, транспортёра SLCO1B1 и карбоксилэстеразы 1 (CES1) у больных артериальной гипертензией, принимающих эналаприл

Иконникова А. Ю.1, Селяева Л. С.1, Наседкина Т. В.1, Родина Т. А.2, Мельников Е. С.2, Дмитриев А. И.2, Казаков Р. Е.2

1 - ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук (ИМБ РАН), Москва 2 - ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России (ФГБУ НЦЭСМП), Москва

Ключевые слова: артериальная гипертензия; эналаприл; ген CES1; ген SLCO1B1

Для цитирования:

Иконникова А.Ю., Селяева Л.С., Наседкина Т.В., Родина Т.А., Мельников Е.С., Дмитриев А.И., Казаков Р.Е. Исследование полиморфизма генов системы регуляции артериального давления, транспортёра SLCO1B1 и карбоксилэстеразы 1 (CES1) у больных артериальной гипертензией, принимающих эналаприл // Фармакогенетика и фармакогеномика. - 2019. - № 2. - С. 13-15. DOI: 10.24411/2588-0527-2019-10047

Введение

Препарат из класса ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) эналаприл широко используется в качестве антигипертензивного средства. Эналаприл гидролизуется до активного метаболита энаприлата при участии фермента карбоксилэстеразы 1 (CES1). Было показано, что аллельные варианты гена CES1, обусловливающие низкую ферментативную активность, могут влиять на метаболизм эналаприла и других ингибиторов АПФ [1].

Мишенью препарата является ангиотензинпревращающий фермент, участвующий в многокомпонентном каскаде системы регуляции артериального давления (АД). В ряде исследований было показано влияние полиморфизма генов этой системы на эффективность применения эналаприла и вероятность развития нежелательных лекарственных реакций (НЛР) [2]. Была обнаружена ассоциация полиморфных вариантов гена SLCO1B1, кодирующего транспортёр органических анионов OATP1B1, который участвует в выводе из печени многих лекарственных средств (в том числе эналаприла), с повышенным риском развития кашля при приёме эналаприла [3].

Таким образом, известен ряд генов, полиморфные варианты которых могут выступать информативными фармакогенетическими маркерами, связанными с эффективностью и риском развития НЛР при приёме эналаприла.

Цель

Определить распространённость аллельных вариантов генов системы регуляции АД, а также генов, участвующих в транспорте и метаболизме эналаприла у пациентов с артериальной гипертензией, принимающих эналаприл.

Материалы и методы

В исследование были включены 65 пациентов с артериальной гипертензией, которые получали анти-гипертензивную монотерапию эналаприлом. Подбор дозы эналаприла осуществлялся на основе офисного мониторинга АД. Проводилось определение фармакокинетических показателей (рассчитывали соотношение концентраций эналаприла и эналаприлата в сыворотке крови до очередного приёма эналаприла и через 4 ч после приёма препарата при его курсовом применении) [4, 5].

Определение генетических вариантов REN (rs2368564), AGT (rs699), AGTR1 (rs5186), BKR2 (rs1799722), ADRB2 (rs1042714, rs1042713), SLCO1B1 (rs4149056) осуществлялось с помощью гидрогелевого биочипа (ИМБ РАН). Инсерционно-делеционный полиморфизм гена АСЕ (rs1799752) определяли методом ПЦР с последующим электрофорезом в агарозном геле. Для анализа гена CES1 определяли число копий гена (CES1A1), псевдогена (CES1P1) и гибрида гена и псевдогена (CES1A2) с помощью количественной ПЦР в режиме реального времени. У образцов с CES1A2 определяли наличие сильного промотора с SP(+) сайтами, который приводит к повышенной транскрипционной активности. Анализ rs71647871 осуществляли методом ПЦР в реальном времени с использованием в качестве матрицы фрагмента 12,5 т.п.о., полученного с помощью ПЦР длинных фрагментов и специфичного для области от промотора до экзона 5 CES1A1. Определение rs2244613 гена CES1 осуществляли с помощью набора «ГенТест CES1» (ООО «Номотек») с использованием геномной ДНК.

Результаты

Частоты генотипов REN (rs2368564), AGT (rs699), AGTR1 (rs5186), BKR2 (rs1799722), ADRB2 (rs1042714, rs1042713), SLCO1B1 (rs4149056), АСЕ (rs1799752) представлены в табл. 1. Распределение генотипов соответствует равновесию Харди—Вайнберга.

Генотипирование CES1 было проведено для 64 образцов. Частоты диплотипов, определённые на основе анализа числа копий гена и псевдогена, приведены в табл. 2. Сильный промотор в CES1A2 выявлен в 1 образце. Результаты генотипирования по rs2244613 и rs71647871 представлены в табл. 2.

Заключение

В ходе работы нами было проведено генотипирование выборки пациентов, получавших антигипертензив-ную монотерапию эналаприлом. Полиморфные варианты генов, продукты которых участвуют в транспорте и метаболизме этого препарата, а также генов системы регуляции АД, широко распространены в популяции. В продолжение работы планируется провести сопоставление генотипов с данными об эффективности и фар-макокинетике эналаприла в исследуемой выборке, а также включить в анализ большее число полиморфных вариантов в гене CES1, которые могут оказывать влияние на его функциональную активность.

Таблица 1

Частоты генотипов генов системы регуляции АД и гена SLCO1B1

Генотип Частота X2, р Генотип Частота X2, р

ACE (rs1799752) AGTR1 (rs5186)

I/I 15 (23,08 %) 1,9455 A/C 24 (36,92 %) 2,432

D/D 13 (20 %) p = 0,163 C/C 9 (13,85 %) p = 0,119

I/D 37 (56,92 %) A/A 32 (49,23 %)

AGT (rs699) BKR2 (rs1799722)

C/C 26 (40,6 %) 0,4288 G/G 20 (30,8 %) 0,0016

T/C 28 (43,75 %) p = 0,5126 C/G 32 (49,24 %) p = 0,9682

T/T 11 (15,56 %) C/C 13 (20 %)

REN (rs2368564) ADRB2 (rs1042713)

A/A 4 (6,3 %) 1,999 A/A 11 (17,2 %) 0,0785

G/A 19 (29,7%) p = 0,2733 A/G 31 (46,9 %) p = 0,779

G/G 41 (64%) G/G 23 (35,9 %)

ADRB2 (rs1042714) SLCO1B1 (rs1213854356)

G/G 8 (10,93 %) 0,02954 T/T 47 (72,31 %) 0,228

C/G 26 (40,63 %) p = 0,5868 T/C 17 (26,15 %) p = 0,633

C/C 31 (48,44 %) C/C 1 (1,54%)

Таблица 2 Результаты генотипирования гена CES1

Анализ структурной области CES1

CESA1 CES1A2 CES1P1 Число диплотипов Частота, %

Число копий в диплотипе 2 0 2 31 48,4

2 1 1 28 43,8

2 2 0 5 7,8

rs2244613 rs71647871

CC CA AA GG GA AA

5 (7,8 %) 28 (43,8 %) 31 (48,4 %) 61 (95, 3%) 3 (4,7 %) -

Литература

1. Tarkiainen EK, Tornio A, Holmberg MT et al. Effect of carboxylesterase 1 c.428G > A single nucleotide variation on the pharmacokinetics of quinapril and enalapril. Br J Clin Pharmacol. 2015;80(5):1131-1138. DOI: 10.1111/bcp.12667

2. Mukae S, Itoh S, Aoki S, Iwata T, Nishio K, Sato R, Katagiri T. Association of polymorphisms of the renin-angiotensin system and bradykinin B2 receptor with ACE-inhibitor-related cough. J Hum Hypertens. 2002;16(12):857-863.

3. Luo JQ, He FZ, Wang ZM, et al. SLCO1B1 Variants and Angiotensin Converting Enzyme Inhibitor (Enalapril)-Induced Cough: a Pharmacogenetic Study. SciRep. 2015;5:17253. DOI: 10.1038/srep17253

4. Родина Т.А., Мельников Е.С., Белков С.А., и др. Экспресс-методика определения эналаприла и его основного метаболита эналаприлата в сыворотке крови человека методом ВЭЖХ-МС/МС // Разработка и регистрация лекарственных средств. —2016. — № 4. — С. 184—189. [Rodina T.A., Melnikov E.S., Belkov S.A., et al. Express method for determination of enalapril and enalaprilat in human serum by HPLC-MS/MS. Drug development & registration. 2016;(4):184—189. (In Russ).]

5. Журавлева М.В., Прокофьев А.Б., Дмитриев А.И., и др. Особенности фармакокинетики эналаприла у больных артериальной гипертен-зией в зависимости от скорости клубочковой фильтрации // CardioСоматика. 2019;10(3):37—41. [Zhuravleva MV, Prokofiev AB, Dmitriev AI, et al. Pharmacokinetics of enalapril in patients with arterial hypertension depending on the glomerular filtration rate. Cardiosomatics. 2019;10(3):37—41. (In Russ).] DOI: 10.26442/22217185.2019.3.190409